银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测
作者：张开明 尹兴平 杨小英 周敏
单位：030009 山西省太原市中心医院
关键词：
中华皮肤科杂志980223.htm
近年研究发现细胞间粘附分子(ICAM-1)在银屑病发病中有一定作用[1～4]，为此，我们采用ELISA法对34例银屑病患者血清可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平进行了测定，并对部分患者外周血单一核细胞(PBMC)ICAM-1表达进行了研究，现将结果报道如下。
一、病例和方法
(一)检测对象：取自1996年9月至1997年3月我科门诊及住院的银屑病患者，共34例，其中男22例，女12例；年龄14～52岁，平均36岁；病程6天至24年；其中进行期寻常型银屑病16例，静止期寻常型银屑病15例，红皮病型银屑病2例，脓疱型银屑病1例。皮损程度计算按照PASI积分法[5]，病例选择3周内(红皮病型除外)未系统或大面积外用过皮质类固醇激素、免疫抑制剂及维胺脂类等药物的患者。正常对照组33例，为门诊体检筛选出的正常人(24例)及科内健康工作者(9例)，性别及年龄尽量与检测患者相同或相近。
, 百拇医药
(二)试剂：sICAM-1试剂盒为Medgenix公司产品，APAAP试剂盒为军事医学科学院基础所产品，鼠抗人ICAM-1单克隆抗体为Zymed公司产品，购自北京中山试剂公司。
(三)方法：
1.血清sICAM-1测定：抽静脉血2ml，分离血清，置于-40℃备用待测，所有患者及对照组均是同步测定，采用双抗体夹心ELISA法，将标准品、血清样品及空白(生理盐水)加入96孔酶板中，每孔25μl，均为复孔，每孔再加入75μl辣根过氧化物酶标记的单抗，20℃振荡 孵育2小时，弃去孔内液体，每孔加入洗涤液400μl，重复洗涤3次，之后每孔加入显色液200μl，20℃振荡 孵育30分钟，最后每孔加入50μl 1.8N H2SO4终止反应，置芬兰Labsysterms酶标仪450nm及650nm(双波长法)处测各孔吸光度(A值)，绘制标准曲线，从中求得sICAM-1含量(单位：ng/ml)。
, 百拇医药
2.PBMC ICAM-1染色：患者组为15例，对照组16例，抽静脉血后密度梯度离心，常规分离PBMC，离心涂片机涂片，采用APAAP法，最后于显微镜下计数300个有核细胞，然后统计出每百个有核细胞阳性细胞数(PBMC ICAM-1+%)。
3.统计学处理：采用SPSS软件包进行t检验及相关分析。
二、结果
1.银屑病患者血清sICAM-1水平及PBMC ICAM-1+%结果见附表。进行期血清sICAM-1水平(258.7±153.6ng/ml)
附表 银屑病患者血清sICAM-1水平
及PBMC ICAM-1+%结果 组别
, http://www.100md.com
sICAM-1
PBMC ICAM-1+%
例数
±s(ng/ml)
例数±s(%)
银屑病组
34
232.2±66.2
15
20.0±7.4
对 照 组
, 百拇医药
33
185.0±42.1
16
12.0±3.9
t值
-
2.56
-
1.72
P值
-
<0.01
-
, 百拇医药
<0.05
与静止期(178.5±32.7ng/ml)比较，t=2.63，P<0.01，两组间有显著性差异，静止期与对照组比较无显著性差异(P>0.05)，2例红皮病型和1例脓疱型银屑病患者血清sICAM-1水平分别为387.6、364.5及428.3ng/ml。 2.血清sICAM-1水平与PASI的关系经相关分析，r=0.56，P<0.01，两者之间有显著的正相关关系。
三、讨论
ICAM-1是一种单链糖蛋白，与白细胞表面的LFA-1和Mac-1互为配体，主要分布于成纤维细胞、上皮样细胞及血管内皮细胞表面[1～3]，其主要作用是介导多种细胞间的相互粘附，在炎症和免疫反应中有一定的作用[1]，sICAM-1是细胞膜表面的ICAM-1“脱落”进入血清而形成的，正常人血清中sICAM-1水平约100～200ng/ml。Griffiths等[4]报道银屑病患者血清sICAM-1增高，我们测定的结果显示34例银屑病患者血清sICAM-1水平与对照组比较明显增高(P<0.01)，患者组PBMC ICAM-1+%与对照组比较明显增高。由于sICAM-1的主要生物学作用是与细胞膜ICAM-1竞争性结合白细胞膜表面的相应配体[1，2]，而血管内皮细胞表面可表达ICAM-1[1～4]，所以我们推测银屑病患者血清中增高的sICAM-1可能通过血管内皮ICAM-1竞争性地结合白细胞膜上的LFA-1和Mac-1，从而对中性粒细胞与内皮细胞粘连以及通过血管壁具有抑制作用。推测sICAM-1在银屑病进行期可能具有一定的保护作用，即抑制白细胞与血管内皮细胞粘附。
, http://www.100md.com
参 考 文 献
1 冯信忠. 细胞粘附分子与皮肤病理. 国外医学皮肤性病学分册, 1997,23∶109-111.
2 Veale D, Rogers S, Fitzgerald O. Immunolocalization of adhesion molecules in psoriatic arthritis, psoriatic and normal skin. Br J Dermatol, 1995,132∶32-38.
3 Griffiths CEM. Boffa MJ. Gallatin WM, et al. Elevated levels of circulating intercellular adhesion molecule-3(cICAM-3) in psoriasis. Acta Derm, Venereol(Stockh), 1996,76∶2-5.
, http://www.100md.com
4 Griffiths CEM, Boffa MJ, Gallatin WM, et al. Circulating ICAM-1, ICAM-3 and TNF-receptor in psoriasis——Correlation with disease severity. Br J Dermatol, 1995,133(Suppl 45)∶17.
5 Frolriksson T, Petterson U. Severe psoriasis-oral therapy with a new retinoid. Dermatologica, 1997,157∶238.
(收稿：1997-05-04 修回：1997-08-27), http://www.100md.com
单位：030009 山西省太原市中心医院
关键词：
中华皮肤科杂志980223.htm
近年研究发现细胞间粘附分子(ICAM-1)在银屑病发病中有一定作用[1～4]，为此，我们采用ELISA法对34例银屑病患者血清可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平进行了测定，并对部分患者外周血单一核细胞(PBMC)ICAM-1表达进行了研究，现将结果报道如下。
一、病例和方法
(一)检测对象：取自1996年9月至1997年3月我科门诊及住院的银屑病患者，共34例，其中男22例，女12例；年龄14～52岁，平均36岁；病程6天至24年；其中进行期寻常型银屑病16例，静止期寻常型银屑病15例，红皮病型银屑病2例，脓疱型银屑病1例。皮损程度计算按照PASI积分法[5]，病例选择3周内(红皮病型除外)未系统或大面积外用过皮质类固醇激素、免疫抑制剂及维胺脂类等药物的患者。正常对照组33例，为门诊体检筛选出的正常人(24例)及科内健康工作者(9例)，性别及年龄尽量与检测患者相同或相近。
, 百拇医药
(二)试剂：sICAM-1试剂盒为Medgenix公司产品，APAAP试剂盒为军事医学科学院基础所产品，鼠抗人ICAM-1单克隆抗体为Zymed公司产品，购自北京中山试剂公司。
(三)方法：
1.血清sICAM-1测定：抽静脉血2ml，分离血清，置于-40℃备用待测，所有患者及对照组均是同步测定，采用双抗体夹心ELISA法，将标准品、血清样品及空白(生理盐水)加入96孔酶板中，每孔25μl，均为复孔，每孔再加入75μl辣根过氧化物酶标记的单抗，20℃振荡 孵育2小时，弃去孔内液体，每孔加入洗涤液400μl，重复洗涤3次，之后每孔加入显色液200μl，20℃振荡 孵育30分钟，最后每孔加入50μl 1.8N H2SO4终止反应，置芬兰Labsysterms酶标仪450nm及650nm(双波长法)处测各孔吸光度(A值)，绘制标准曲线，从中求得sICAM-1含量(单位：ng/ml)。
, 百拇医药
2.PBMC ICAM-1染色：患者组为15例，对照组16例，抽静脉血后密度梯度离心，常规分离PBMC，离心涂片机涂片，采用APAAP法，最后于显微镜下计数300个有核细胞，然后统计出每百个有核细胞阳性细胞数(PBMC ICAM-1+%)。
3.统计学处理：采用SPSS软件包进行t检验及相关分析。
二、结果
1.银屑病患者血清sICAM-1水平及PBMC ICAM-1+%结果见附表。进行期血清sICAM-1水平(258.7±153.6ng/ml)
附表 银屑病患者血清sICAM-1水平
及PBMC ICAM-1+%结果 组别
, http://www.100md.com
sICAM-1
PBMC ICAM-1+%
例数
±s(ng/ml)例数
±s(%)银屑病组
34
232.2±66.2
15
20.0±7.4
对 照 组
, 百拇医药
33
185.0±42.1
16
12.0±3.9
t值
-
2.56
-
1.72
P值
-
<0.01
-
, 百拇医药
<0.05
与静止期(178.5±32.7ng/ml)比较，t=2.63，P<0.01，两组间有显著性差异，静止期与对照组比较无显著性差异(P>0.05)，2例红皮病型和1例脓疱型银屑病患者血清sICAM-1水平分别为387.6、364.5及428.3ng/ml。 2.血清sICAM-1水平与PASI的关系经相关分析，r=0.56，P<0.01，两者之间有显著的正相关关系。
三、讨论
ICAM-1是一种单链糖蛋白，与白细胞表面的LFA-1和Mac-1互为配体，主要分布于成纤维细胞、上皮样细胞及血管内皮细胞表面[1～3]，其主要作用是介导多种细胞间的相互粘附，在炎症和免疫反应中有一定的作用[1]，sICAM-1是细胞膜表面的ICAM-1“脱落”进入血清而形成的，正常人血清中sICAM-1水平约100～200ng/ml。Griffiths等[4]报道银屑病患者血清sICAM-1增高，我们测定的结果显示34例银屑病患者血清sICAM-1水平与对照组比较明显增高(P<0.01)，患者组PBMC ICAM-1+%与对照组比较明显增高。由于sICAM-1的主要生物学作用是与细胞膜ICAM-1竞争性结合白细胞膜表面的相应配体[1，2]，而血管内皮细胞表面可表达ICAM-1[1～4]，所以我们推测银屑病患者血清中增高的sICAM-1可能通过血管内皮ICAM-1竞争性地结合白细胞膜上的LFA-1和Mac-1，从而对中性粒细胞与内皮细胞粘连以及通过血管壁具有抑制作用。推测sICAM-1在银屑病进行期可能具有一定的保护作用，即抑制白细胞与血管内皮细胞粘附。
, http://www.100md.com
参 考 文 献
1 冯信忠. 细胞粘附分子与皮肤病理. 国外医学皮肤性病学分册, 1997,23∶109-111.
2 Veale D, Rogers S, Fitzgerald O. Immunolocalization of adhesion molecules in psoriatic arthritis, psoriatic and normal skin. Br J Dermatol, 1995,132∶32-38.
3 Griffiths CEM. Boffa MJ. Gallatin WM, et al. Elevated levels of circulating intercellular adhesion molecule-3(cICAM-3) in psoriasis. Acta Derm, Venereol(Stockh), 1996,76∶2-5.
, http://www.100md.com
4 Griffiths CEM, Boffa MJ, Gallatin WM, et al. Circulating ICAM-1, ICAM-3 and TNF-receptor in psoriasis——Correlation with disease severity. Br J Dermatol, 1995,133(Suppl 45)∶17.
5 Frolriksson T, Petterson U. Severe psoriasis-oral therapy with a new retinoid. Dermatologica, 1997,157∶238.
(收稿：1997-05-04 修回：1997-08-27), http://www.100md.com