系统性红斑狼疮患者临床免疫指标分析
作者：邓安梅 仲人前 张玲珍 屠小卿 孔宪涛
单位：200003 上海第二军医大学长征医院全军临 床免疫中心
关键词：
中华皮肤科杂志980526 系统性红斑狼疮(SLE)是常见的多系统损害自身免疫性结缔组织病，其病因 和发病机理尚未完全阐明，可能与免疫系统调节功能紊乱有关。我们采用流式细胞技术和酶 联检测技术，分析SLE患者细胞免疫和体液免疫功能，并探讨临床免疫指标在发病机理中的意义。
一、临床资料
研究对象：按美国风湿病学会1982年制定的SLE诊断标准确诊的SLE患者40例，平均年龄38岁 ，均为女性。正常对照组40例，取自健康献血员，均为女性，平均年龄32岁。
二、实验方法
, http://www.100md.com
(一)细胞免疫指标测定：于反应管中加入FITC标记的抗CD2、CD3、CD4、CD8、CD16、CD19、 CD45RA和CD29抗体，再加入 全血100μl，于漩涡振荡器上混匀，室温下孵育20分钟，在Immu no-Proper仪上进行红细胞处理，标本在8小时内上流式细胞仪检测完毕。每一标本设阴性 对照。
(二)体液免疫指标测定：取血后6小时内留取血清分装冻存于-20℃备用，血清避免反复冻融 。冻干马抗人IgG、IgA、IgM、C3、C4血清复溶后用40g/L PEG6000稀释液按标定效价稀释， 放置30分钟后用0.45μm滤膜抽滤，滤过液备用，生理盐水(用0.45μm滤膜抽滤)、未冻干 的定值标准血清和患者血清用酶联检测仪经免疫比浊法测C3、C4，散射速率比 浊法测 IgG、IgA、IgM[1]。
(三)统计学方法：实验数据以
±s表示，采用t检验进行统计分析。
, 百拇医药
三、结果
(一)SLE患者与对照组相比，SLE患者CD2+、CD8+、CD19+、CD29+、CD16+(NK)、C D44+细胞及血清中IgG、IgA均显 著增加(P<0.01)，CD3+、CD4+、C D45RA+和T细胞表面TCR含量及血清C3、C4均明显降低(P<0.01)，CD4 +/CD8+倒置(P<0.01)。SLE患者血清IgG、IgA、IgM显著增高( P<0.01)，而C3、C4下降(P<0.01)。见表1和表2。
表1 SLE患者免疫细胞表面标志分析(单位：%) 表面标志
例数
, 百拇医药
CD2 +
CD3+
CD4+
CD8+
CD4+/CD8+
正常人
40
77.46±6.27
65.86±4.60
37.53±4.91
28.01 ±3.13
, 百拇医药
1.25±0.41
SLE
40
87.31±5.42
59.22±5.57
26.22±3.75
36.88± 4.23
0.72±0.25
t值
-
7.517
5.813
, 百拇医药
11.578
8.447
6.979
P值
-
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
表面标志
例数
CD16+ (NK)
, 百拇医药
TCR
CD19+
CD44+
CD45RA+
CD29+
正常人
40
5.31±1.32
70.14±5.23
12.20±2.51
34 .93±3.04
, 百拇医药
45.43±5.21
31.31±3.64
SLE
40
8.25±1.45
27.52±3.34
19.71±2.24
58.55±4 .52
24.32±4.26
45.42±4.71
t值
-
, 百拇医药
9.483
43.437
14.119
27.424
19.838
13.397
P值
-
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
, http://www.100md.com
<0. 01
表2 SLE患者体液免疫指标分析 指标
例数
IgG(g/L)
IgM(mg/L)
IgA(mg/L)
C3(mg/L)
C4(mg/L)
正常人
40
13.27±3.28
1180±430
, 百拇医药
1450±270
1470±230
6 50±210
SLE
40
24.93±4.09
2220±560
2780±410
930±310
290 ±90
t值
-
, 百拇医药 14.066
9.316
17.134
12.770
9.965
P值
-
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
(二)ANA(+)组(18例)与ANA(-)组(22例)比较表明，ANA(+)组体液免疫状态较为亢进(P<0.05)，细胞免疫状态无显著性差异(P>0.05)。
, http://www.100md.com
(三)3例活动期SLE患者经临床治疗后，症状、体征好转，其临床免疫指标如CD4+、CD8+ 、IgG也趋向正常(P>0.05)。
四、讨论
本研究结果表明，SLE患者 外周血淋巴细胞CD2的水平较正常人明显升高(P<0.01)，与张泽松[2]等报道的自身免疫病患者T细胞CD2 mRNA水平明显增高一致。CD3 是成熟T淋巴细胞标志，它与T细胞抗原受体TCR特异性结合形成TCR/CD3复合物，在识别特异 性抗原和信号传递中起关键作用。本文结果显示，CD3和TCR在SLE患者中明显低于正常(P<0.01)。可能是由于患者体内T细胞功能失衡，正常成熟的T细胞消耗过多而 未能及时补偿所致。
CD4和CD8是成熟T细胞亚群的标志，分别与MHCⅡ类和Ⅰ类抗原结合，不仅可增强T淋巴细胞 与抗原递呈细胞或靶细胞结合的程度，而且与刺激信号的传递有关。有人认为SLE患者CD4 +/CD8+细胞比例失调，主要是由于CD4+细胞增多或CD8+细胞减少造成[ 3]，并因此认为是由于CD8+(Ts)细胞减少和功能缺陷引起免疫功能亢进， 从而导致自身免疫损伤。而本文结果表明SLE患者外周血CD8+细胞增多，而CD4+/CD8+ 细胞比值反而显著降低，甚至倒置。可能的解释是CD8+细胞数目虽然增多，但其功能发生 改变导致免疫失衡。
, http://www.100md.com
CD45RA+和CD29+可将CD4+T细胞分为不同的亚群，CD45RA+为抑制诱导T细胞，主要 功能是诱导T8+细胞发挥抑制功能，而CD29+是辅助诱导T细胞，主要功能是辅助B细胞产 生抗体[4，5]。CD45RA+是人幼稚T细胞标志，本文结果表明 ，SLE患者CD45RA+减少(P<0.01)，CD29+T细胞增多(P<0.01)，可能与T8+细胞抑制亚群减少、辅助细胞与抑制细胞比例失调有关。本文 还发现，SLE患者IgG、IgA、IgM均增高(P<0.01)，而C3、C4降低(P<0.01)，反映了SLE患者有体液免疫亢进，又有非特异性免疫功能紊乱，C3 、C4的降低可能是由于消耗太多所致。
ANA(+)组与ANA(-)组比较表明，ANA(+)组体液免疫状态较为亢进(P<0.05 )，细胞免疫状态无显著差异(P>0.05)。3例活动期SLE患者经临床治疗后 ，症状体征好转，其临床免疫指标也趋向正常。 参考文献 1 金伯泉. 白细胞分化抗原. 见: 金伯泉主编. 细胞和分子免疫学 . 第1版. 西安: 世界图书出版社, 1995.1-32.
, 百拇医药
2 张泽松, 许成素, 刘士廉, 等. 自身免疫性疾病患者T细胞表面抗原CD2、CD4和CD 8 mRNA的表达. 中国免疫学杂志, 1995,11∶303-306.
3 徐文玉. SLE免疫调节功能紊乱的机理——T细胞亚群失衡和抗淋巴细胞抗体的作 用. 上海免疫学杂志, 1992,12∶253-256.
4 Morimoto C, Letvin NL, Boyb AW, et al. The isolation and characterizati on of th e human helper inducer T cell subset. J Immunol, 1985,134∶3762-3770.
5 Morimoto C, Letvin NL, Distaso JA, et al. The isolation and charateriza tion of the human suppressor inducer T cell subset. J Immunol, 1985,134∶1508-1515., 百拇医药
单位：200003 上海第二军医大学长征医院全军临 床免疫中心
关键词：
中华皮肤科杂志980526 系统性红斑狼疮(SLE)是常见的多系统损害自身免疫性结缔组织病，其病因 和发病机理尚未完全阐明，可能与免疫系统调节功能紊乱有关。我们采用流式细胞技术和酶 联检测技术，分析SLE患者细胞免疫和体液免疫功能，并探讨临床免疫指标在发病机理中的意义。
一、临床资料
研究对象：按美国风湿病学会1982年制定的SLE诊断标准确诊的SLE患者40例，平均年龄38岁 ，均为女性。正常对照组40例，取自健康献血员，均为女性，平均年龄32岁。
二、实验方法
, http://www.100md.com
(一)细胞免疫指标测定：于反应管中加入FITC标记的抗CD2、CD3、CD4、CD8、CD16、CD19、 CD45RA和CD29抗体，再加入 全血100μl，于漩涡振荡器上混匀，室温下孵育20分钟，在Immu no-Proper仪上进行红细胞处理，标本在8小时内上流式细胞仪检测完毕。每一标本设阴性 对照。
(二)体液免疫指标测定：取血后6小时内留取血清分装冻存于-20℃备用，血清避免反复冻融 。冻干马抗人IgG、IgA、IgM、C3、C4血清复溶后用40g/L PEG6000稀释液按标定效价稀释， 放置30分钟后用0.45μm滤膜抽滤，滤过液备用，生理盐水(用0.45μm滤膜抽滤)、未冻干 的定值标准血清和患者血清用酶联检测仪经免疫比浊法测C3、C4，散射速率比 浊法测 IgG、IgA、IgM[1]。
(三)统计学方法：实验数据以
±s表示，采用t检验进行统计分析。, 百拇医药
三、结果
(一)SLE患者与对照组相比，SLE患者CD2+、CD8+、CD19+、CD29+、CD16+(NK)、C D44+细胞及血清中IgG、IgA均显 著增加(P<0.01)，CD3+、CD4+、C D45RA+和T细胞表面TCR含量及血清C3、C4均明显降低(P<0.01)，CD4 +/CD8+倒置(P<0.01)。SLE患者血清IgG、IgA、IgM显著增高( P<0.01)，而C3、C4下降(P<0.01)。见表1和表2。
表1 SLE患者免疫细胞表面标志分析(单位：%) 表面标志
例数
, 百拇医药
CD2 +
CD3+
CD4+
CD8+
CD4+/CD8+
正常人
40
77.46±6.27
65.86±4.60
37.53±4.91
28.01 ±3.13
, 百拇医药
1.25±0.41
SLE
40
87.31±5.42
59.22±5.57
26.22±3.75
36.88± 4.23
0.72±0.25
t值
-
7.517
5.813
, 百拇医药
11.578
8.447
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P值
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<0.01
<0.01
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表面标志
例数
CD16+ (NK)
, 百拇医药
TCR
CD19+
CD44+
CD45RA+
CD29+
正常人
40
5.31±1.32
70.14±5.23
12.20±2.51
34 .93±3.04
, 百拇医药
45.43±5.21
31.31±3.64
SLE
40
8.25±1.45
27.52±3.34
19.71±2.24
58.55±4 .52
24.32±4.26
45.42±4.71
t值
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9.483
43.437
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19.838
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P值
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, http://www.100md.com
<0. 01
表2 SLE患者体液免疫指标分析 指标
例数
IgG(g/L)
IgM(mg/L)
IgA(mg/L)
C3(mg/L)
C4(mg/L)
正常人
40
13.27±3.28
1180±430
, 百拇医药
1450±270
1470±230
6 50±210
SLE
40
24.93±4.09
2220±560
2780±410
930±310
290 ±90
t值
-
, 百拇医药 14.066
9.316
17.134
12.770
9.965
P值
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(二)ANA(+)组(18例)与ANA(-)组(22例)比较表明，ANA(+)组体液免疫状态较为亢进(P<0.05)，细胞免疫状态无显著性差异(P>0.05)。
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(三)3例活动期SLE患者经临床治疗后，症状、体征好转，其临床免疫指标如CD4+、CD8+ 、IgG也趋向正常(P>0.05)。
四、讨论
本研究结果表明，SLE患者 外周血淋巴细胞CD2的水平较正常人明显升高(P<0.01)，与张泽松[2]等报道的自身免疫病患者T细胞CD2 mRNA水平明显增高一致。CD3 是成熟T淋巴细胞标志，它与T细胞抗原受体TCR特异性结合形成TCR/CD3复合物，在识别特异 性抗原和信号传递中起关键作用。本文结果显示，CD3和TCR在SLE患者中明显低于正常(P<0.01)。可能是由于患者体内T细胞功能失衡，正常成熟的T细胞消耗过多而 未能及时补偿所致。
CD4和CD8是成熟T细胞亚群的标志，分别与MHCⅡ类和Ⅰ类抗原结合，不仅可增强T淋巴细胞 与抗原递呈细胞或靶细胞结合的程度，而且与刺激信号的传递有关。有人认为SLE患者CD4 +/CD8+细胞比例失调，主要是由于CD4+细胞增多或CD8+细胞减少造成[ 3]，并因此认为是由于CD8+(Ts)细胞减少和功能缺陷引起免疫功能亢进， 从而导致自身免疫损伤。而本文结果表明SLE患者外周血CD8+细胞增多，而CD4+/CD8+ 细胞比值反而显著降低，甚至倒置。可能的解释是CD8+细胞数目虽然增多，但其功能发生 改变导致免疫失衡。
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CD45RA+和CD29+可将CD4+T细胞分为不同的亚群，CD45RA+为抑制诱导T细胞，主要 功能是诱导T8+细胞发挥抑制功能，而CD29+是辅助诱导T细胞，主要功能是辅助B细胞产 生抗体[4，5]。CD45RA+是人幼稚T细胞标志，本文结果表明 ，SLE患者CD45RA+减少(P<0.01)，CD29+T细胞增多(P<0.01)，可能与T8+细胞抑制亚群减少、辅助细胞与抑制细胞比例失调有关。本文 还发现，SLE患者IgG、IgA、IgM均增高(P<0.01)，而C3、C4降低(P<0.01)，反映了SLE患者有体液免疫亢进，又有非特异性免疫功能紊乱，C3 、C4的降低可能是由于消耗太多所致。
ANA(+)组与ANA(-)组比较表明，ANA(+)组体液免疫状态较为亢进(P<0.05 )，细胞免疫状态无显著差异(P>0.05)。3例活动期SLE患者经临床治疗后 ，症状体征好转，其临床免疫指标也趋向正常。 参考文献 1 金伯泉. 白细胞分化抗原. 见: 金伯泉主编. 细胞和分子免疫学 . 第1版. 西安: 世界图书出版社, 1995.1-32.
, 百拇医药
2 张泽松, 许成素, 刘士廉, 等. 自身免疫性疾病患者T细胞表面抗原CD2、CD4和CD 8 mRNA的表达. 中国免疫学杂志, 1995,11∶303-306.
3 徐文玉. SLE免疫调节功能紊乱的机理——T细胞亚群失衡和抗淋巴细胞抗体的作 用. 上海免疫学杂志, 1992,12∶253-256.
4 Morimoto C, Letvin NL, Boyb AW, et al. The isolation and characterizati on of th e human helper inducer T cell subset. J Immunol, 1985,134∶3762-3770.
5 Morimoto C, Letvin NL, Distaso JA, et al. The isolation and charateriza tion of the human suppressor inducer T cell subset. J Immunol, 1985,134∶1508-1515., 百拇医药