乙型肝炎的抗病毒治疗
作者：焦建中
单位：解放军第一医院，兰州 730030
关键词：病毒性肝炎；乙型肝炎；干扰素；核苷类似物；基因治疗
西北国防医学杂志990304 中图分类号：R 512.6 文献标识码：A 文章编号：1007-8622(1999)03-0167-02
在我国乙型肝炎是引起慢性肝炎、肝硬化及肝癌的主要因素。乙型肝炎的发病机理复杂，但病毒复制是肝损伤的启动因素，因此，乙型肝炎的抗病毒治疗仍是迫切需要解决的问题。近年来，核酸类似物的研究进展较快，不久可能将有新的突破。此外，抗乙肝病毒的基因治疗、反义核酸、核酶及DNA疫苗等研究也获得了可喜的进展。
1 干扰素(IFN-α)
仍为治疗乙型肝炎的主要药物之一。目前，IFN仍是国内外抗肝炎病毒治疗中最有希望的药物。用于抗肝炎病毒的主要为IFN-α，有天然和基因重组两种，临床上使用的重组干扰素可分为α 1b，α2b，α2a等。最近还有CIFn(组合干扰素)。所有IFN均需通过和靶细胞受体结合，启动IFN反应基因成分(ISRE)，产生抗病毒蛋白(AVP)及多种免疫调节因子[1]。AVP有3种：①蛋白激酶使35 KD多肽发生磷酸化，经磷酸化失活而抑制病毒合成；②2′-5′寡腺苷酸合成酶(2′-5′A)能在双股RNA作用下使ATP聚合成2′-5′A，激活细胞内核酸酶F，使mRNA降解，阻断病毒蛋白合成；③磷酸二酯酶能降解2′-5′A，还能去除tRNA的PCPCPA末端，抑制病毒的翻译。IFN对乙型肝炎HBeAg及HBV-DNA的阴转率约40%，停药后随访5～10年，HBeAg及HBV-DNA阴转率可增至60%～70%，治疗后有应答者(HBeAg及HBV-DNA阴转)预后较好[2]，可以减少肝硬化及肝细胞癌的发病率。IFN的作用只限于复制型HBV-DNA，并不能清除细胞核内的复制模板cccDNA，也难以清除已与宿主DNA整合的病毒基因。因此，寻找新的有效抗病毒药物仍是当务之急。
, http://www.100md.com
2 核酸类似物
抗HBV的研究近年来有较大的进展。对HBV逆转录酶有抑制作用的药物拉咪呋啶(Lamivudine)已进入Ⅲ期试验，100 mg/d，6个月后，血清HBV-DNA阴转率达90%，但HBeAg阴转率仅为29%。停药后易复发，约14%的患者治疗过程中可产生HBV-DNA突变，形成耐药毒株。对耐药毒株采用法苷洛伟(Famiciclovir,FCV)治疗有效。FCV已进入Ⅱ期试验，125～500 mg/d，分3次口服4个月，约70%的血清HBV-DNA水平显著下降。联合用药可提高疗效。80年代曾用FIAU，由于其神经肌肉毒性和线粒体功能障碍，已停止使用，近年改为左旋-氟甲脲嘧啶(L-FMAU)进入Ⅱ期试验，对HBV-DNA多聚酶有明显抑制作用，停药后大部分可获持续疗效，无线粒体毒性，为有应用前景的药物。
3 乙型肝炎的基因治疗及DNA免疫治疗
为近年来的研究热点，包括反义核酸、核酶、肽核酶、腺病毒载体HBsAg的基因治疗及HBV-DNA免疫，在HBV转基因小鼠内可以消除免疫耐受，清除病毒，获得了令人鼓舞的结果。
, 百拇医药
3.1 基因疗法是将基因导入人体特定的肝细胞，使肝细胞向血液中分泌大量含有治疗作用的蛋白类物质。治疗方法有：①病毒介导：病毒介导基因需构建一个重组病毒颗粒，通过该病毒颗粒将新基因转移到细胞，通过插入基因来改变受感染细胞特性，以达治疗目的；②DNA介导：DNA介导基因转移需要将DNA直接导入细胞内。目前，反义核酸技术、核酶(Ribozyme)已日益受到重视。反义核酸技术其方法是研制出能与病毒基因的某一DNA片段互补结合的反义寡核苷酸(asON)，利用asON与病毒DNA互补结合的作用，达到抗病毒治疗目的。目前已用于调控基因表达的研究。Ribozyme是一类具有催化活性的RNA分子，能序列特异地与靶RNA结合，从而破坏RNA的生物功能以达治疗目的。Weizsacker等构建了针对HBV的核酶表达质粒，用一条DNA模板转录出3个Ribozyme的串状分子，证明可切割靶分子的不同位点，同时也有利于抗变异病毒株感染[3]。目前，对治疗病毒肝炎的策略是靶转译水平的。如能将反义核酸技术与Ribozyme结合，将增加抗病毒的疗效。
, 百拇医药
3.2 乙肝“治疗性疫苗”(Therapeutic Vaccine)的研究。治疗性疫苗主要用于慢性感染患者或无症状携带者，其组成成分、应用指征、作用机制、疗效考核及可能发生的副作用与预防性疫苗不同。近年来治疗性疫苗的各种研究技术主要有：①单纯乙肝疫苗；②重组活病毒型疫苗；③合成肽型疫苗；④重组抗原型疫苗；⑤裸DNA疫苗；⑥免疫复合物型疫苗。其中裸DNA疫苗实验结果提示，有可能发展为可供治疗乙肝用的治疗型疫苗。Davis与Whalen已在小鼠中证明用含编码HBsAg及Pre-S基因并有真核细胞启动子的重组质粒DNA免疫，可诱生抗-HBs及CTL[4]。Celis等报道抗-HBs可增强HBsAg对特异性T辅助细胞与T杀伤细胞(CTL)的激活作用并可增强抗-HBs的产生[5]。国内已有利用组建抗原-抗体复合物为治疗性疫苗的报道[6]，目前已申请临床研究。
总之，对乙肝的治疗目前仍是一个难题。重组IFN-α在世界30多个国家被认可，广泛用于治疗乙肝。抗病毒药物特别是核酸类似物及酶抑制剂的研究还有待进一步深入。今后抗肝炎病毒的治疗仍以联合治疗为方向，新的带有根本性阻断病毒基因表达与复制的基因治疗，在未来可望取得突破性进展。
, 百拇医药
作者简介：焦建中(1954-)，女，副主任医师
参考文献：
[1]Domanski P， Cdamonici OR.The type l interferon receptor,the long and short of it[J].Cytokine ＆ Growth factor reviews,1996,7:143～151.
[2]Niedera C,Heinfges T,Lange S,et al.Long-term follow-up of HBeAg-positive patients treated with interferon alfa for chronic hepatitis B[J].NEJM,1996,334:1422～1427.
[3]Weizsacker F,Blum H,Wands JR.Cleavage of hepatitis B virus RNA by three vibozyme transcribed from a single DNA template[J].Biochem Biophys Res,1995,214:36-37.
, 百拇医药
[4]Davis HL,Schirmbeck R,Reimann J,et al.DNA-mediated immunization in mice induces a potent MHC class I-restricted cytotoxic T lymphocyte response to the hepatitis B envelope protein[J].Human Gene Therapy,1995,6:1447-1448.
[5]Celis E,Chang TS.HBsAg-serum protein complexes stimulate immune T lymphocytes more efficiently than do pure HBsAg[J].Hepatology,1984,6:1116-1117.
[6]Wen YM,Guo SQ,Zhang W,et al,Enhanced immunogenecity in mice with hepatitis B vaccine complexed to human hepatitis B immunoglobulin[J].Chinese Medical Journal,1994,107:741-742.
收稿日期：1998-12-29, 百拇医药
单位：解放军第一医院，兰州 730030
关键词：病毒性肝炎；乙型肝炎；干扰素；核苷类似物；基因治疗
西北国防医学杂志990304 中图分类号：R 512.6 文献标识码：A 文章编号：1007-8622(1999)03-0167-02
在我国乙型肝炎是引起慢性肝炎、肝硬化及肝癌的主要因素。乙型肝炎的发病机理复杂，但病毒复制是肝损伤的启动因素，因此，乙型肝炎的抗病毒治疗仍是迫切需要解决的问题。近年来，核酸类似物的研究进展较快，不久可能将有新的突破。此外，抗乙肝病毒的基因治疗、反义核酸、核酶及DNA疫苗等研究也获得了可喜的进展。
1 干扰素(IFN-α)
仍为治疗乙型肝炎的主要药物之一。目前，IFN仍是国内外抗肝炎病毒治疗中最有希望的药物。用于抗肝炎病毒的主要为IFN-α，有天然和基因重组两种，临床上使用的重组干扰素可分为α 1b，α2b，α2a等。最近还有CIFn(组合干扰素)。所有IFN均需通过和靶细胞受体结合，启动IFN反应基因成分(ISRE)，产生抗病毒蛋白(AVP)及多种免疫调节因子[1]。AVP有3种：①蛋白激酶使35 KD多肽发生磷酸化，经磷酸化失活而抑制病毒合成；②2′-5′寡腺苷酸合成酶(2′-5′A)能在双股RNA作用下使ATP聚合成2′-5′A，激活细胞内核酸酶F，使mRNA降解，阻断病毒蛋白合成；③磷酸二酯酶能降解2′-5′A，还能去除tRNA的PCPCPA末端，抑制病毒的翻译。IFN对乙型肝炎HBeAg及HBV-DNA的阴转率约40%，停药后随访5～10年，HBeAg及HBV-DNA阴转率可增至60%～70%，治疗后有应答者(HBeAg及HBV-DNA阴转)预后较好[2]，可以减少肝硬化及肝细胞癌的发病率。IFN的作用只限于复制型HBV-DNA，并不能清除细胞核内的复制模板cccDNA，也难以清除已与宿主DNA整合的病毒基因。因此，寻找新的有效抗病毒药物仍是当务之急。
, http://www.100md.com
2 核酸类似物
抗HBV的研究近年来有较大的进展。对HBV逆转录酶有抑制作用的药物拉咪呋啶(Lamivudine)已进入Ⅲ期试验，100 mg/d，6个月后，血清HBV-DNA阴转率达90%，但HBeAg阴转率仅为29%。停药后易复发，约14%的患者治疗过程中可产生HBV-DNA突变，形成耐药毒株。对耐药毒株采用法苷洛伟(Famiciclovir,FCV)治疗有效。FCV已进入Ⅱ期试验，125～500 mg/d，分3次口服4个月，约70%的血清HBV-DNA水平显著下降。联合用药可提高疗效。80年代曾用FIAU，由于其神经肌肉毒性和线粒体功能障碍，已停止使用，近年改为左旋-氟甲脲嘧啶(L-FMAU)进入Ⅱ期试验，对HBV-DNA多聚酶有明显抑制作用，停药后大部分可获持续疗效，无线粒体毒性，为有应用前景的药物。
3 乙型肝炎的基因治疗及DNA免疫治疗
为近年来的研究热点，包括反义核酸、核酶、肽核酶、腺病毒载体HBsAg的基因治疗及HBV-DNA免疫，在HBV转基因小鼠内可以消除免疫耐受，清除病毒，获得了令人鼓舞的结果。
, 百拇医药
3.1 基因疗法是将基因导入人体特定的肝细胞，使肝细胞向血液中分泌大量含有治疗作用的蛋白类物质。治疗方法有：①病毒介导：病毒介导基因需构建一个重组病毒颗粒，通过该病毒颗粒将新基因转移到细胞，通过插入基因来改变受感染细胞特性，以达治疗目的；②DNA介导：DNA介导基因转移需要将DNA直接导入细胞内。目前，反义核酸技术、核酶(Ribozyme)已日益受到重视。反义核酸技术其方法是研制出能与病毒基因的某一DNA片段互补结合的反义寡核苷酸(asON)，利用asON与病毒DNA互补结合的作用，达到抗病毒治疗目的。目前已用于调控基因表达的研究。Ribozyme是一类具有催化活性的RNA分子，能序列特异地与靶RNA结合，从而破坏RNA的生物功能以达治疗目的。Weizsacker等构建了针对HBV的核酶表达质粒，用一条DNA模板转录出3个Ribozyme的串状分子，证明可切割靶分子的不同位点，同时也有利于抗变异病毒株感染[3]。目前，对治疗病毒肝炎的策略是靶转译水平的。如能将反义核酸技术与Ribozyme结合，将增加抗病毒的疗效。
, 百拇医药
3.2 乙肝“治疗性疫苗”(Therapeutic Vaccine)的研究。治疗性疫苗主要用于慢性感染患者或无症状携带者，其组成成分、应用指征、作用机制、疗效考核及可能发生的副作用与预防性疫苗不同。近年来治疗性疫苗的各种研究技术主要有：①单纯乙肝疫苗；②重组活病毒型疫苗；③合成肽型疫苗；④重组抗原型疫苗；⑤裸DNA疫苗；⑥免疫复合物型疫苗。其中裸DNA疫苗实验结果提示，有可能发展为可供治疗乙肝用的治疗型疫苗。Davis与Whalen已在小鼠中证明用含编码HBsAg及Pre-S基因并有真核细胞启动子的重组质粒DNA免疫，可诱生抗-HBs及CTL[4]。Celis等报道抗-HBs可增强HBsAg对特异性T辅助细胞与T杀伤细胞(CTL)的激活作用并可增强抗-HBs的产生[5]。国内已有利用组建抗原-抗体复合物为治疗性疫苗的报道[6]，目前已申请临床研究。
总之，对乙肝的治疗目前仍是一个难题。重组IFN-α在世界30多个国家被认可，广泛用于治疗乙肝。抗病毒药物特别是核酸类似物及酶抑制剂的研究还有待进一步深入。今后抗肝炎病毒的治疗仍以联合治疗为方向，新的带有根本性阻断病毒基因表达与复制的基因治疗，在未来可望取得突破性进展。
, 百拇医药
作者简介：焦建中(1954-)，女，副主任医师
参考文献：
[1]Domanski P， Cdamonici OR.The type l interferon receptor,the long and short of it[J].Cytokine ＆ Growth factor reviews,1996,7:143～151.
[2]Niedera C,Heinfges T,Lange S,et al.Long-term follow-up of HBeAg-positive patients treated with interferon alfa for chronic hepatitis B[J].NEJM,1996,334:1422～1427.
[3]Weizsacker F,Blum H,Wands JR.Cleavage of hepatitis B virus RNA by three vibozyme transcribed from a single DNA template[J].Biochem Biophys Res,1995,214:36-37.
, 百拇医药
[4]Davis HL,Schirmbeck R,Reimann J,et al.DNA-mediated immunization in mice induces a potent MHC class I-restricted cytotoxic T lymphocyte response to the hepatitis B envelope protein[J].Human Gene Therapy,1995,6:1447-1448.
[5]Celis E,Chang TS.HBsAg-serum protein complexes stimulate immune T lymphocytes more efficiently than do pure HBsAg[J].Hepatology,1984,6:1116-1117.
[6]Wen YM,Guo SQ,Zhang W,et al,Enhanced immunogenecity in mice with hepatitis B vaccine complexed to human hepatitis B immunoglobulin[J].Chinese Medical Journal,1994,107:741-742.
收稿日期：1998-12-29, 百拇医药