高血压病患者血浆一氧化氮浓度变化及其意义
作者：叶季鲜 黄静 李红梅 赵连友
单位：叶季鲜(解放军第323医院，陕西 西安 710054)；黄静(解放军第323医院，陕西 西安 710054)；李红梅(解放军第323医院，陕西 西安 710054)；赵连友(第四军医大学唐都医院心内科)
关键词：高血压；一氧化氮；浓度；Ca2+拮抗剂
西北国防医学杂志000310 摘要：目的：探讨高血压病患者血浆一氧化氮(NO)浓度变化及其意义。方法：重氮化反应法测定血浆标本亚硝酸盐含量表示NO浓度。结果：①高血压病患者血浆NO浓度明显低于正常人；②高血压病患者血浆NO浓度与平均动脉压呈显著负相关而与病程及分期无关；③Ca2+拮抗剂佩尔地平有效降血压治疗后，高血压病患者血浆NO浓度较治疗前明显升高。结论：血浆NO浓度降低可能是高血压发病的重要原因之一，其降低程度与血压增高程度直接相关；Ca2+拮抗剂佩尔地平有效降血压同时部分地提高了高血压病患者的血浆NO浓度。
, 百拇医药
中图分类号：R 544.1 文献标识码：A 文章编号：1007-8622(2000)03-0190-02
Change of nitric oxide concentration in plasma of essential hypertension and its significance
YE Ji-xian,HUANG Jing,LI Hong-mei,et al.
(Department of Cardiology,The 323th Hospital,PLA,710054)
Abstract:Objective:To study the change of nitric oxide(NO) concentration in plasma of essential hypertension(EH)patients and its significance.Methods:NO concentration in plasma was expressed with the subnitrate level that was measured by diazotization method.Results:(1)NO concentration in EH plasma was significantly lower than that in normal controls;(2)There was a negative relationship between NO concentration in plasma and the mean artery pressure of EH,but no relationship between NO concentration in plasma and the disease term or the disease phase of EH;(3)NO concentration in EH plasma after effective treatment with perdipine,a ca2+-blocker,was significantly higher than that before treatment.Conclusion:The decreased NO concentration in plasma might be an important cause in EH pathogenesis;while Ca2+-blocker(perdipine) effectively decreased blood pressure,NO concentration in plasma is also partly increased.
, 百拇医药
Key words:Hypertension； Nitric oxide； Concen tration； Ca2+-blockex
近年来，随着内皮衍生舒张因子(EDRF)就是一氧化氮(NO)的证实，NO在高血压发病中的作用引起了国内外学者的高度重视。NO是一种作用很强的舒血管物质，能降低全身平均动脉压，控制全身各种血管的静息张力。目前实验研究表明：自发性高血压大鼠(SHR)内皮细胞释放NO减少[1]；NO生成抑制剂能升高健康人的血压[2]，推测高血压病患者可能存在NO生成缺陷。本文通过测定高血压病患者和健康人血浆NO浓度探讨血浆NO浓度与高血压发病的关系。
1 材料与方法
1.1 研究对象：确诊的原发性高血压(WHO/ISH，1993年标准，按血压水平分度，按靶器官损害分期)患者，原服用降压药物者停药2周，统一检查血、尿常规、肾功、心电图、X线胸片、心脏超声、眼底；服用长效Ca2+拮抗剂(佩尔地平)降压治疗12周，治疗前、后分别测血压、采血标本。29例单用佩尔地平一种降压药物达理想降压水平，其中男20例，女9例；平均年龄57.2±6.4岁，轻度14例，中重度15例；Ⅰ期9例，Ⅱ期13例，Ⅲ期7例。健康体检者对照组36例，男25例，女11例；平均年龄58.1±6.9岁。对照组与高血压病患者组男、女性别比率及平均年龄均无显著性差异(P>0.05)
, 百拇医药
1.2 血压测量和血标本采集、处理：受试者晨起空腹静坐15 min，坐位，立式水银柱血压计测肱动脉血压3次，取均值。测血压后肘静脉抽血，置配有EDTA-Na2和抑肽酶试管中，分离出血浆。
1.3 血浆NO测定：取血浆0.1 ml加0.6 ml 0.15%硫酸锌，加双蒸水0.4 ml，混匀，再加0.1 ml的4%氢氧化钠混匀，冰上孵育1 h，12 000 r.min-1离心2 min，取上清0.6 ml，加0.4 ml双蒸水及0.1 ml的3%磺胺，冰上孵育15 min，再加0.1 ml的6 mmol.L-1萘乙烯二胺盐酸盐，室温放置1 h，545 nm比色，读OD值；同时做亚硝酸盐标准曲线，求出血浆亚硝酸盐含量表示NO浓度，单位μmol.L-1。
1.4 统计学处理：实验结果以均数±标准差(
±s)表示，两组均数间比较采用t检验(成对资料样本采用配对t检验)，多组均数间比较采用F检验。
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2 结果
2.1 高血压病患者与正常人血浆NO浓度比较：高血压病患者血浆NO浓度明显低于正常人(表1)。
表1 高血压病患者与正常人血浆NO浓度比较(±s) 分组
n
NO浓度
正常人
36
21.67±2.59
高血压病患者
29
, http://www.100md.com
14.87±2.85*
注：*P<0.01与正常人比较
2.2 高血压病患者血浆NO浓度变化：①按血压水平分度，中重度高血压病患者血浆NO浓度明显低于轻度高血压病患者(表2)；②按靶器官损害分期，Ⅱ、Ⅲ期高血压病患者血浆NO浓度稍低于Ⅰ期高血压病患者，但各期之间无显著性差异(表3)；③高血压病患者血浆NO浓度与其平均主动脉压之间呈直线负相关(r＝-0.566，P<0.01)；④高血压病患者血浆NO浓度与其病程长短(年)无线性相关(r＝-0.169，P>0.05)。
表2 高血压病患者不同血压水平血浆NO浓度比较(±s) 分度
n
, http://www.100md.com NO浓度
轻度
14
16.53±2.35
中重度
15
13.32±2.40*
注：*P<0.01与轻度比较表3 高血压病患者不同分期血浆NO浓度比较(±s) 分期
n
NO浓度
Ⅰ期
, 百拇医药
9
15.96±3.21
Ⅱ期
13
14.12±2.86
Ⅲ期
7
14.84±2.18
注：F＝1.12 P>0.05
2.3 高血压病患者降压治疗前后血浆NO浓度的变化：高血压病患者经佩尔地平有效降压治疗后血浆NO浓度明显高于治疗前(17.79±2.56 vs 14.87±2.85，n＝29 td＝6.152 P<0.01)。
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3 讨论
目前认为，高血压发病是诸多因素共同作用的结果，其中体内存在的血管活性物质可能参与高血压发病。NO是血管内皮细胞释放的具有多种功能的细胞内信息分子，是调节血管基础张力、维持血压稳定的生理性血压缓冲剂。动物实验研究表明：NO释放减少，周围血管阻力增加可能与高血压发生发展有关[1]；促进NO的合成和释放可能防治高血压[3，4]。本研究观察到临床高血压病患者血浆NO浓度明显低于正常人，中重度高血压病患者低于轻度患者，且随着高血压病患者血压水平的增高，其血浆NO浓度降低愈显著，提示血浆NO浓度的变化可能直接影响到血压变化，其浓度的降低可能是高血压病患者发病的一个直接原因。血浆NO浓度的降低可能一方面使血管对内皮依赖的舒血管物质反应下降，血管舒张不良；另一方面使血管对加压物质反应性增强，外周阻力增加，而导致高血压的发生发展。目前认为，高血压病患者血浆NO浓度降低原发的可能性较大[5]，本研究观察到高血压病患者血浆NO浓度与平均动脉压呈负相关，而与高血压病程长短及有无靶器官损害无关，支持此观点。
, 百拇医药
研究表明，有些药物如L-Arg以及ACEI降血压作用与NO生成有关[6]。本研究显示，Ca2+拮抗剂佩尔地平有效降血压，亦提高了高血压病患者血浆NO浓度。Ca2+拮抗剂是通过阻滞Ca2+的细胞内流，降低细胞内游离Ca2+浓度，舒张血管平滑肌，从而达到降血压作用的。而细胞内Ca2+负荷的降低，可以减少超氧负离子的生成，从而可能延缓NO的灭活，提高NO浓度。另外，有效降血压，可能改善血管内皮细胞功能，而使之增加NO的分泌。本研究虽不能肯定Ca2+拮抗剂降血压作用直接与NO有关，但至少提示：Ca2+拮抗剂的降压作用还可能间接、部分地与其增高血浆NO浓度有关。
作者简介：叶季鲜(1967—)，男，硕士，主治医师
参考文献：
, http://www.100md.com
[1]Fujii K,Tomiaga M,Ohmori S,et al.Decreased endothium-dependent hyperplarization to acetylcholine in smooth muscle of the mensentric artery of spontaneously hypertensive rats[J].Circ Res,1992,70:660.
[2]Stamler JS,Loh E,Roddy MA,et al.Nitric Oxide regulates basal systemic and pulmonary vascular resistance in healthy human[J].Circulation,1994,89:2035.
[3]Toda N,Kitamura Y,Okamura T.Neural mechanism of hyper-tension by nitric oxide synthase inhibitor in dogs[J].Hypertension,1993,21:3-6.
, http://www.100md.com
[4]Persson PB,Bauman JE,Ehmke H,et al.Phasic and 24h blood pressure control by endothelium-derived relaxing factor in conscious dogs[J].Am J Physiol,1992,262(5pt2)：H1395.
[5]Higashi Y,Oshima T,Ozono R,et al.Effects of L-arginine infusion on renal hemodynamics in patients with wild essential hypertension[J].Hypertension,1995,25(pt2)：898.
[6]Cachofeiro V,Sakakibara T,Nasitrtti AK.Nitric oxide,anti-hypertensive effect of captopril and ramoprilat in hypertension[J].Hypertension,1992,19:138.
收稿日期：1999-07-02, 百拇医药
单位：叶季鲜(解放军第323医院，陕西 西安 710054)；黄静(解放军第323医院，陕西 西安 710054)；李红梅(解放军第323医院，陕西 西安 710054)；赵连友(第四军医大学唐都医院心内科)
关键词：高血压；一氧化氮；浓度；Ca2+拮抗剂
西北国防医学杂志000310 摘要：目的：探讨高血压病患者血浆一氧化氮(NO)浓度变化及其意义。方法：重氮化反应法测定血浆标本亚硝酸盐含量表示NO浓度。结果：①高血压病患者血浆NO浓度明显低于正常人；②高血压病患者血浆NO浓度与平均动脉压呈显著负相关而与病程及分期无关；③Ca2+拮抗剂佩尔地平有效降血压治疗后，高血压病患者血浆NO浓度较治疗前明显升高。结论：血浆NO浓度降低可能是高血压发病的重要原因之一，其降低程度与血压增高程度直接相关；Ca2+拮抗剂佩尔地平有效降血压同时部分地提高了高血压病患者的血浆NO浓度。
, 百拇医药
中图分类号：R 544.1 文献标识码：A 文章编号：1007-8622(2000)03-0190-02
Change of nitric oxide concentration in plasma of essential hypertension and its significance
YE Ji-xian,HUANG Jing,LI Hong-mei,et al.
(Department of Cardiology,The 323th Hospital,PLA,710054)
Abstract:Objective:To study the change of nitric oxide(NO) concentration in plasma of essential hypertension(EH)patients and its significance.Methods:NO concentration in plasma was expressed with the subnitrate level that was measured by diazotization method.Results:(1)NO concentration in EH plasma was significantly lower than that in normal controls;(2)There was a negative relationship between NO concentration in plasma and the mean artery pressure of EH,but no relationship between NO concentration in plasma and the disease term or the disease phase of EH;(3)NO concentration in EH plasma after effective treatment with perdipine,a ca2+-blocker,was significantly higher than that before treatment.Conclusion:The decreased NO concentration in plasma might be an important cause in EH pathogenesis;while Ca2+-blocker(perdipine) effectively decreased blood pressure,NO concentration in plasma is also partly increased.
, 百拇医药
Key words:Hypertension； Nitric oxide； Concen tration； Ca2+-blockex
近年来，随着内皮衍生舒张因子(EDRF)就是一氧化氮(NO)的证实，NO在高血压发病中的作用引起了国内外学者的高度重视。NO是一种作用很强的舒血管物质，能降低全身平均动脉压，控制全身各种血管的静息张力。目前实验研究表明：自发性高血压大鼠(SHR)内皮细胞释放NO减少[1]；NO生成抑制剂能升高健康人的血压[2]，推测高血压病患者可能存在NO生成缺陷。本文通过测定高血压病患者和健康人血浆NO浓度探讨血浆NO浓度与高血压发病的关系。
1 材料与方法
1.1 研究对象：确诊的原发性高血压(WHO/ISH，1993年标准，按血压水平分度，按靶器官损害分期)患者，原服用降压药物者停药2周，统一检查血、尿常规、肾功、心电图、X线胸片、心脏超声、眼底；服用长效Ca2+拮抗剂(佩尔地平)降压治疗12周，治疗前、后分别测血压、采血标本。29例单用佩尔地平一种降压药物达理想降压水平，其中男20例，女9例；平均年龄57.2±6.4岁，轻度14例，中重度15例；Ⅰ期9例，Ⅱ期13例，Ⅲ期7例。健康体检者对照组36例，男25例，女11例；平均年龄58.1±6.9岁。对照组与高血压病患者组男、女性别比率及平均年龄均无显著性差异(P>0.05)
, 百拇医药
1.2 血压测量和血标本采集、处理：受试者晨起空腹静坐15 min，坐位，立式水银柱血压计测肱动脉血压3次，取均值。测血压后肘静脉抽血，置配有EDTA-Na2和抑肽酶试管中，分离出血浆。
1.3 血浆NO测定：取血浆0.1 ml加0.6 ml 0.15%硫酸锌，加双蒸水0.4 ml，混匀，再加0.1 ml的4%氢氧化钠混匀，冰上孵育1 h，12 000 r.min-1离心2 min，取上清0.6 ml，加0.4 ml双蒸水及0.1 ml的3%磺胺，冰上孵育15 min，再加0.1 ml的6 mmol.L-1萘乙烯二胺盐酸盐，室温放置1 h，545 nm比色，读OD值；同时做亚硝酸盐标准曲线，求出血浆亚硝酸盐含量表示NO浓度，单位μmol.L-1。
1.4 统计学处理：实验结果以均数±标准差(
±s)表示，两组均数间比较采用t检验(成对资料样本采用配对t检验)，多组均数间比较采用F检验。, 百拇医药
2 结果
2.1 高血压病患者与正常人血浆NO浓度比较：高血压病患者血浆NO浓度明显低于正常人(表1)。
表1 高血压病患者与正常人血浆NO浓度比较(
±s) 分组n
NO浓度
正常人
36
21.67±2.59
高血压病患者
29
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14.87±2.85*
注：*P<0.01与正常人比较
2.2 高血压病患者血浆NO浓度变化：①按血压水平分度，中重度高血压病患者血浆NO浓度明显低于轻度高血压病患者(表2)；②按靶器官损害分期，Ⅱ、Ⅲ期高血压病患者血浆NO浓度稍低于Ⅰ期高血压病患者，但各期之间无显著性差异(表3)；③高血压病患者血浆NO浓度与其平均主动脉压之间呈直线负相关(r＝-0.566，P<0.01)；④高血压病患者血浆NO浓度与其病程长短(年)无线性相关(r＝-0.169，P>0.05)。
表2 高血压病患者不同血压水平血浆NO浓度比较(
±s) 分度n
, http://www.100md.com NO浓度
轻度
14
16.53±2.35
中重度
15
13.32±2.40*
注：*P<0.01与轻度比较表3 高血压病患者不同分期血浆NO浓度比较(
±s) 分期n
NO浓度
Ⅰ期
, 百拇医药
9
15.96±3.21
Ⅱ期
13
14.12±2.86
Ⅲ期
7
14.84±2.18
注：F＝1.12 P>0.05
2.3 高血压病患者降压治疗前后血浆NO浓度的变化：高血压病患者经佩尔地平有效降压治疗后血浆NO浓度明显高于治疗前(17.79±2.56 vs 14.87±2.85，n＝29 td＝6.152 P<0.01)。
, http://www.100md.com
3 讨论
目前认为，高血压发病是诸多因素共同作用的结果，其中体内存在的血管活性物质可能参与高血压发病。NO是血管内皮细胞释放的具有多种功能的细胞内信息分子，是调节血管基础张力、维持血压稳定的生理性血压缓冲剂。动物实验研究表明：NO释放减少，周围血管阻力增加可能与高血压发生发展有关[1]；促进NO的合成和释放可能防治高血压[3，4]。本研究观察到临床高血压病患者血浆NO浓度明显低于正常人，中重度高血压病患者低于轻度患者，且随着高血压病患者血压水平的增高，其血浆NO浓度降低愈显著，提示血浆NO浓度的变化可能直接影响到血压变化，其浓度的降低可能是高血压病患者发病的一个直接原因。血浆NO浓度的降低可能一方面使血管对内皮依赖的舒血管物质反应下降，血管舒张不良；另一方面使血管对加压物质反应性增强，外周阻力增加，而导致高血压的发生发展。目前认为，高血压病患者血浆NO浓度降低原发的可能性较大[5]，本研究观察到高血压病患者血浆NO浓度与平均动脉压呈负相关，而与高血压病程长短及有无靶器官损害无关，支持此观点。
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研究表明，有些药物如L-Arg以及ACEI降血压作用与NO生成有关[6]。本研究显示，Ca2+拮抗剂佩尔地平有效降血压，亦提高了高血压病患者血浆NO浓度。Ca2+拮抗剂是通过阻滞Ca2+的细胞内流，降低细胞内游离Ca2+浓度，舒张血管平滑肌，从而达到降血压作用的。而细胞内Ca2+负荷的降低，可以减少超氧负离子的生成，从而可能延缓NO的灭活，提高NO浓度。另外，有效降血压，可能改善血管内皮细胞功能，而使之增加NO的分泌。本研究虽不能肯定Ca2+拮抗剂降血压作用直接与NO有关，但至少提示：Ca2+拮抗剂的降压作用还可能间接、部分地与其增高血浆NO浓度有关。
作者简介：叶季鲜(1967—)，男，硕士，主治医师
参考文献：
, http://www.100md.com
[1]Fujii K,Tomiaga M,Ohmori S,et al.Decreased endothium-dependent hyperplarization to acetylcholine in smooth muscle of the mensentric artery of spontaneously hypertensive rats[J].Circ Res,1992,70:660.
[2]Stamler JS,Loh E,Roddy MA,et al.Nitric Oxide regulates basal systemic and pulmonary vascular resistance in healthy human[J].Circulation,1994,89:2035.
[3]Toda N,Kitamura Y,Okamura T.Neural mechanism of hyper-tension by nitric oxide synthase inhibitor in dogs[J].Hypertension,1993,21:3-6.
, http://www.100md.com
[4]Persson PB,Bauman JE,Ehmke H,et al.Phasic and 24h blood pressure control by endothelium-derived relaxing factor in conscious dogs[J].Am J Physiol,1992,262(5pt2)：H1395.
[5]Higashi Y,Oshima T,Ozono R,et al.Effects of L-arginine infusion on renal hemodynamics in patients with wild essential hypertension[J].Hypertension,1995,25(pt2)：898.
[6]Cachofeiro V,Sakakibara T,Nasitrtti AK.Nitric oxide,anti-hypertensive effect of captopril and ramoprilat in hypertension[J].Hypertension,1992,19:138.
收稿日期：1999-07-02, 百拇医药