血管紧张素Ⅱ对犬手术伤口愈合的影响
作者：赵佐庆 朱文侠
单位：赵佐庆(第四军医大学唐都医院实验外科,陕西 西安 710038)；朱文侠(延安医学院局解手术学教研室)
关键词：血管紧张素Ⅱ；伤口愈合；放射免疫法
第四军医大学学报000649 摘要:目的 研究AgⅡ对犬腹部手术伤口愈合的影响和作用. 方法 采用单纯腹部切口、小肠切除吻合术，AgⅡ和ACEI注射及9 g.L-1生理盐水治疗动物模型，以放射免疫法对AgⅡ浓度及其对伤口愈合的影响和作用进行观察. 结果 所有手术和注射AgⅡ后动物的AgⅡ浓度均有升高. 而犬小肠切除吻合术者最为显著. AgⅡ注射后,血浆AgⅡ浓度明显升高,伤口均得不到良好愈合. ACEI注射和9 g.L-1生理盐水治疗可以缓解上述改变和影响. 结论 常规腹部手术可以升高AgⅡ浓度并对伤口愈合产生不利影响. 实验结果还显示9 g.L-1生理盐水治疗也可减轻血管学紧张素浓度升高和对伤口愈合的影响.
, http://www.100md.com
中图号:R619.5 文献标识码:A
文章编号：1000-2790(2000)06-S0122-03
Angiotensin acts on the wound healing of abdominal operation
ZHAO Zuo-Qing
(Department of Experimental Surgery, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical University,Xi'an 710038,China)
ZHU Wen-Xia
(Department of Regional Anatomy and Operative Surgery,Yan’an Medical College)
, 百拇医药
Abstract:AIM To study the effect of angiotensin on the wound healing of the abdominal operation. METHODS The concentration of angiotensin of the animal modes of simple abdominal incision, resection and anastomosis of small bowel, administration of exogenous angiotensin Ⅱ(AgⅡ) and angiotensin converting enzyme inhibitors (ACEI) and treatment with 9 g.L-1 NaCl were investigated by means of radioimmunoassay. RESULTS The concentration of angiotensin of the most operated animal increased obviously especially for the resection and anastomosis of small bowel. After administration of AgⅡ,the wound healing of the animal with hight concentration of angiotensin were unfavourable. but that can be mitgated with intravenous injection of ACE inhibitors and 9 g.L-1 NaCl treatment. CONCLUSION General abdominal operation increased the concentration of angiotensin of the animal, which in turn, exerts its obstructive action on the wound healing. experiment also showed that 9 g.L-1 NaCl treatment can relived the changes of angiotensin concentration and the effect on the wound healing.
, http://www.100md.com
Keyword:angiotensin; wound healing; radioimmunoassay
0 引言
在创伤和失血条件下，血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ，AgⅡ)分泌增加，产生一系列生理应激反应，但同时也能造成微血管循环障碍等病理生理改变. 近期研究表明，血管紧张素能使血管、心脏等器官组织的缺血再灌注及创伤炎症区域内的Ca2+超载，自由基释放和炎症侵润等，起损害和不利作用[1，2]. 在常规外科手术中，常常出现不明原因之伤口愈合不好，其是否与血管紧张素有关还不甚清楚. 本研究以犬剖腹术、小肠切除吻合术、AgⅡ和血管紧张素转换酶抑制剂(Angiotensin Coverting Enzyme Inhibitors, ACEI)注射模型，观察动物手术后AgⅡ浓度的变化及其对伤口愈合的影响.
1 材料和方法
, 百拇医药
1.1 动物模型 健康杂种犬42只，共分为5组，除AgⅡ组和ACEI组各为6只外，其余平均分为3组(各10只)，分别为剖腹组、小肠切除吻合术组及生理盐水治疗组. 各组动物雌雄各半，体质量12～25 kg. ACEI注射组于术前经隐静脉注射卡托普利(常州制药厂生产粉剂，以生理盐水溶解)，用量为2 mg.kg-1，其后1次/d，共连续注射3 d. 所有动物以速眠新im麻醉，按常规经右侧腹直肌切口开腹. 剖腹组和AgⅡ注射组打开腹腔后立即关腹. AgⅡ组自手术开始每日经隐静脉注射AgⅡ醋酸盐，2 mg.kg-1连续3 d(AgⅡ,Sigma公司产品). 其余3组均于空肠起始部10 cm处开始切除小肠10 cm，继端对端内翻缝合小肠，依次关腹. 生理盐水治疗组在小肠切除吻合后经静脉输入9 g.L-1生理盐水400 mL，此后同量输液连续3 d，其余各组动物均无任何治疗.
1.2 标准采集、处理和检测 所有动物术前0.5 h，术后0.5,6,12,24及48 h静脉采血5 mL. 每一标本加酶抑制剂，摇匀冷却离心1000 r.min-1 5 min，分离血浆，加10 mL调节剂，测定管置37℃水浴保温1 h后入冰箱保持温度4℃，向非特异性管中加200 μL缓冲液，除非特异性管每管加入100 μL相应标本品及100 μL 125I抗血清(北方免疫试剂研究所提供)，4℃冰箱16～24 h. 各管中加入1000 μL分离剂，摇匀后室温15 min，3000～3500 r.min-1离心10～15 min，吸去上清液，测定沉淀物中的放射性计数、计算、做图，求出活性.
, 百拇医药
1.3 动物伤口愈合情况观察 手术后8 d内连续观察腹壁伤口愈合情况，术后8 d后处死动物，解剖小肠吻合口，观察愈合情况. 腹壁切口无裂开、红肿和化脓、愈合平整为愈合良好，否则为愈合差. 小肠伤口无红肿、渗出和瘘口为愈合好，否则为愈合差.
统计学处理：检测数据以平均数标准差(
±s)表示，用方差，t检验进行统计学处理. 伤合愈合情况用χ2检验分析.
2 结果
2.1 术后AgⅡ浓度的改变 所有手术后动物AgⅡ较术前均有升高(P<0.05)，术后2 d均保持较高水平，AgⅡ注射组和小肠切除吻合术组较剖腹组和生理盐水治疗组升高更为显著而ACEI注射组明显低于肠切除组(P<0.05,Tab 1).
表 1 犬手术前后血浆AgⅡ的改变
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Tab 1 The changes of the concentration of angiotensin in plasma in canine pre-postoperation(±s,pg.mL-1) Group
n
Before operation
After operation
0.5 h
6 h
12 h
24 h
, http://www.100md.com
48 h
A
10
0.68±0.03
0.81±0.05a
0.78±0.04a
0.72±0.03a
0.83± 0.15a
0.77±0.04a
B
6
, http://www.100md.com
0.74±0.05
0.95±0.06
2.20±0.04d
3.50±0.03d
3.47± 0.05d
3.75±0.04d
C
10
0.70±0.03
0.78±0.04a
0.08±0.05a
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0.92±0.04a
0.80±50.05a
0.80±0.05a
D
10
0.72±0.03
0.91±0.05bc
1.15±0.08bc
1.70±0.13bc
2.10± 0.05bc
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1.99±0.10bc
E
6
0.81±0.04
0.93±0.06
0.97±0.03e
1.30±0.05e
0.98±50.05e
0.89±0.09e
aP<0.05，bP<0.01 vs before operation,cP<0.01 vs after operation groups,dP<0.01 vs abdominal incision group,eP<0.01 vs groups of resection and anastomosis of small bowel,A:Abdominal incision,B:AgⅡ,C:Treatment,D:Resection of small bowel, E:ACEI.2.2 肠吻合口和腹壁切口的愈合情况 在剖腹组多数动物伤口能一期愈合，少数动物伤口出现感染. 在AgⅡ注射组伤口愈合率明显差于剖腹组. 在小肠切除吻合术组，除少数动物肠吻合口和腹壁伤口愈合较好外，大部分动物伤口愈合较差. 而在ACEI注射组和生理盐水治疗组动物伤口愈合明显好于小肠切除吻合术组(P<0.05,Tab 2).
, 百拇医药
表2 犬术后伤口愈合
Tab 2 The wound bealing of canine postoperation Group
n
Wound healing(%)
Small bewel
Abdominal wal
A
10
8(80)c
B
6
, 百拇医药
2(20)
C
10
8(80)b
5(50)b
D
10
3(30)
1(10)
E
6
5(83)a
, http://www.100md.com
5(83)a
aP<0.05,bP<0.05 vs D,cP<0.01 vs B. The groups were same as Tab 1.3 讨论
一般认为，机体遭爱严重创伤和失血后，通过神经体液等多种因素的反射和反馈作用，血管紧张素分泌增多，其中主要是AgⅡ使小动脉和小静脉平滑肌收缩，以增加回心血量，代偿性升高血压，调整机体内环境. 但上述机体的应激反应造成的微动脉、微静脉和毛细血管前括约肌痉挛收缩，常使重要脏器和组织血液灌流减少，甚至功能衰竭等病理生理改变. 有的研究结果表明，AgⅡ对缺血再灌注之组织和器官有损害作用[1，2]. 机体创伤失血后，虽然AgⅡ缩血管作用经一定时间消失了，但损伤作用仍在进行. 本实验中发现常规腹部手术中虽无大的出血和严重创伤，但在术后数天内血管紧张素明显升高，且以AgⅡ更为显著，其变化规律与失血性休克或颅脑损伤后的儿茶酚胺类改变相似[3]，这可能与AgⅡ促使交感神经末稍释放儿茶酚胺有关.
, 百拇医药
单纯剖腹术与小肠切除吻合术和AgⅡ注射后相比，后两者AgⅡ升高更为显著，大多数动物伤口得不到良好愈合，这可能与创伤程度、内脏损伤及其引起的内脏神经反射等引起的血管紧张素升高有关. 有人发现，通过抑制AgⅡ的产生，降低组织耗氧量，减少有血管舒张功能的缓激肽降解并有抗氧化、抑制血小板在血管内凝集及保护血管内皮细胞免受自由基的损伤等作用[4-6]. 本实验中的ACEI注射后血管紧张素升高受到明显的抑制，伤口愈合得以改善，均可以说明，AgⅡ通过各种作用对伤口愈合产生不利影响.
为了预防AgⅡ升高及其病理改变，有人给术后动物输入高渗盐水并发现有明显效果. 其理论依据是：高渗盐水能恢复AgⅡ和心钠素平衡，有利于解除微血管痉挛，同时Na+刺激致密斑，抑制肾素分泌[7]. 本实验以生理盐水输入对降低AgⅡ浓度，提高伤口愈合率是有效的. 其作用可能是通过提高血循环量，减少神经反射等因素所致.
作者简介:赵佐庆(1954-),男(汉族),山东省新泰市人. 硕士，副教授. Tel.(029)3577469
, 百拇医药
参考文献
[1] Dzau VJ. Cardial renin-angiotensin system (Molecular and funetional aspects)[J]. Am J Med, 1988; 84(Supp1 3A):22-27.
[2] Juggs J et al. Cardioprotection by angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitors[J]. Can J Cardiol, 1993; 9(5):336-352.
[3] 张剑宁. 大鼠脑损伤后血浆儿茶酚胺改变及其对血液流变学的影响[J]. 中华实验外科杂志, 1995；12(4)：223-224.
[4] Zughaib ME. Effect of angiotensin-converting enzyme inhibtors on myocardial ischemia/reperfusion injury an overview[J]. Basic Res Cardiol, 1993; 88 (Suppl):155-167.
, 百拇医药
[5] Uhger T, Gohlke P. Converting enzyme inbibitors in cardiovascular therapy: Current status and future Potential[J]. Cardiovasc Res, 1994; 28(2):146-158.
[6] Vanhoutt PM. Endothelium-dependent effects of converting enzyme inhibitors[J]. J Cardiovase Pharmacol, 1993; 22(Suppl):510-516.
[7] 刘 岩，杨春明. 高渗盐水治疗犬严重失血性休克时血浆中血管紧张素Ⅱ/心钠素的变化[J]. 中华实验外科杂志, 1994；11(5)：275-276.
收稿日期:2000-01-18
修回日期:2000-04-07, http://www.100md.com
单位：赵佐庆(第四军医大学唐都医院实验外科,陕西 西安 710038)；朱文侠(延安医学院局解手术学教研室)
关键词：血管紧张素Ⅱ；伤口愈合；放射免疫法
第四军医大学学报000649 摘要:目的 研究AgⅡ对犬腹部手术伤口愈合的影响和作用. 方法 采用单纯腹部切口、小肠切除吻合术，AgⅡ和ACEI注射及9 g.L-1生理盐水治疗动物模型，以放射免疫法对AgⅡ浓度及其对伤口愈合的影响和作用进行观察. 结果 所有手术和注射AgⅡ后动物的AgⅡ浓度均有升高. 而犬小肠切除吻合术者最为显著. AgⅡ注射后,血浆AgⅡ浓度明显升高,伤口均得不到良好愈合. ACEI注射和9 g.L-1生理盐水治疗可以缓解上述改变和影响. 结论 常规腹部手术可以升高AgⅡ浓度并对伤口愈合产生不利影响. 实验结果还显示9 g.L-1生理盐水治疗也可减轻血管学紧张素浓度升高和对伤口愈合的影响.
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中图号:R619.5 文献标识码:A
文章编号：1000-2790(2000)06-S0122-03
Angiotensin acts on the wound healing of abdominal operation
ZHAO Zuo-Qing
(Department of Experimental Surgery, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical University,Xi'an 710038,China)
ZHU Wen-Xia
(Department of Regional Anatomy and Operative Surgery,Yan’an Medical College)
, 百拇医药
Abstract:AIM To study the effect of angiotensin on the wound healing of the abdominal operation. METHODS The concentration of angiotensin of the animal modes of simple abdominal incision, resection and anastomosis of small bowel, administration of exogenous angiotensin Ⅱ(AgⅡ) and angiotensin converting enzyme inhibitors (ACEI) and treatment with 9 g.L-1 NaCl were investigated by means of radioimmunoassay. RESULTS The concentration of angiotensin of the most operated animal increased obviously especially for the resection and anastomosis of small bowel. After administration of AgⅡ,the wound healing of the animal with hight concentration of angiotensin were unfavourable. but that can be mitgated with intravenous injection of ACE inhibitors and 9 g.L-1 NaCl treatment. CONCLUSION General abdominal operation increased the concentration of angiotensin of the animal, which in turn, exerts its obstructive action on the wound healing. experiment also showed that 9 g.L-1 NaCl treatment can relived the changes of angiotensin concentration and the effect on the wound healing.
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Keyword:angiotensin; wound healing; radioimmunoassay
0 引言
在创伤和失血条件下，血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ，AgⅡ)分泌增加，产生一系列生理应激反应，但同时也能造成微血管循环障碍等病理生理改变. 近期研究表明，血管紧张素能使血管、心脏等器官组织的缺血再灌注及创伤炎症区域内的Ca2+超载，自由基释放和炎症侵润等，起损害和不利作用[1，2]. 在常规外科手术中，常常出现不明原因之伤口愈合不好，其是否与血管紧张素有关还不甚清楚. 本研究以犬剖腹术、小肠切除吻合术、AgⅡ和血管紧张素转换酶抑制剂(Angiotensin Coverting Enzyme Inhibitors, ACEI)注射模型，观察动物手术后AgⅡ浓度的变化及其对伤口愈合的影响.
1 材料和方法
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1.1 动物模型 健康杂种犬42只，共分为5组，除AgⅡ组和ACEI组各为6只外，其余平均分为3组(各10只)，分别为剖腹组、小肠切除吻合术组及生理盐水治疗组. 各组动物雌雄各半，体质量12～25 kg. ACEI注射组于术前经隐静脉注射卡托普利(常州制药厂生产粉剂，以生理盐水溶解)，用量为2 mg.kg-1，其后1次/d，共连续注射3 d. 所有动物以速眠新im麻醉，按常规经右侧腹直肌切口开腹. 剖腹组和AgⅡ注射组打开腹腔后立即关腹. AgⅡ组自手术开始每日经隐静脉注射AgⅡ醋酸盐，2 mg.kg-1连续3 d(AgⅡ,Sigma公司产品). 其余3组均于空肠起始部10 cm处开始切除小肠10 cm，继端对端内翻缝合小肠，依次关腹. 生理盐水治疗组在小肠切除吻合后经静脉输入9 g.L-1生理盐水400 mL，此后同量输液连续3 d，其余各组动物均无任何治疗.
1.2 标准采集、处理和检测 所有动物术前0.5 h，术后0.5,6,12,24及48 h静脉采血5 mL. 每一标本加酶抑制剂，摇匀冷却离心1000 r.min-1 5 min，分离血浆，加10 mL调节剂，测定管置37℃水浴保温1 h后入冰箱保持温度4℃，向非特异性管中加200 μL缓冲液，除非特异性管每管加入100 μL相应标本品及100 μL 125I抗血清(北方免疫试剂研究所提供)，4℃冰箱16～24 h. 各管中加入1000 μL分离剂，摇匀后室温15 min，3000～3500 r.min-1离心10～15 min，吸去上清液，测定沉淀物中的放射性计数、计算、做图，求出活性.
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1.3 动物伤口愈合情况观察 手术后8 d内连续观察腹壁伤口愈合情况，术后8 d后处死动物，解剖小肠吻合口，观察愈合情况. 腹壁切口无裂开、红肿和化脓、愈合平整为愈合良好，否则为愈合差. 小肠伤口无红肿、渗出和瘘口为愈合好，否则为愈合差.
统计学处理：检测数据以平均数标准差(
±s)表示，用方差，t检验进行统计学处理. 伤合愈合情况用χ2检验分析.2 结果
2.1 术后AgⅡ浓度的改变 所有手术后动物AgⅡ较术前均有升高(P<0.05)，术后2 d均保持较高水平，AgⅡ注射组和小肠切除吻合术组较剖腹组和生理盐水治疗组升高更为显著而ACEI注射组明显低于肠切除组(P<0.05,Tab 1).
表 1 犬手术前后血浆AgⅡ的改变
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Tab 1 The changes of the concentration of angiotensin in plasma in canine pre-postoperation(
±s,pg.mL-1) Groupn
Before operation
After operation
0.5 h
6 h
12 h
24 h
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48 h
A
10
0.68±0.03
0.81±0.05a
0.78±0.04a
0.72±0.03a
0.83± 0.15a
0.77±0.04a
B
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0.74±0.05
0.95±0.06
2.20±0.04d
3.50±0.03d
3.47± 0.05d
3.75±0.04d
C
10
0.70±0.03
0.78±0.04a
0.08±0.05a
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0.92±0.04a
0.80±50.05a
0.80±0.05a
D
10
0.72±0.03
0.91±0.05bc
1.15±0.08bc
1.70±0.13bc
2.10± 0.05bc
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1.99±0.10bc
E
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0.81±0.04
0.93±0.06
0.97±0.03e
1.30±0.05e
0.98±50.05e
0.89±0.09e
aP<0.05，bP<0.01 vs before operation,cP<0.01 vs after operation groups,dP<0.01 vs abdominal incision group,eP<0.01 vs groups of resection and anastomosis of small bowel,A:Abdominal incision,B:AgⅡ,C:Treatment,D:Resection of small bowel, E:ACEI.2.2 肠吻合口和腹壁切口的愈合情况 在剖腹组多数动物伤口能一期愈合，少数动物伤口出现感染. 在AgⅡ注射组伤口愈合率明显差于剖腹组. 在小肠切除吻合术组，除少数动物肠吻合口和腹壁伤口愈合较好外，大部分动物伤口愈合较差. 而在ACEI注射组和生理盐水治疗组动物伤口愈合明显好于小肠切除吻合术组(P<0.05,Tab 2).
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表2 犬术后伤口愈合
Tab 2 The wound bealing of canine postoperation Group
n
Wound healing(%)
Small bewel
Abdominal wal
A
10
8(80)c
B
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2(20)
C
10
8(80)b
5(50)b
D
10
3(30)
1(10)
E
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aP<0.05,bP<0.05 vs D,cP<0.01 vs B. The groups were same as Tab 1.3 讨论
一般认为，机体遭爱严重创伤和失血后，通过神经体液等多种因素的反射和反馈作用，血管紧张素分泌增多，其中主要是AgⅡ使小动脉和小静脉平滑肌收缩，以增加回心血量，代偿性升高血压，调整机体内环境. 但上述机体的应激反应造成的微动脉、微静脉和毛细血管前括约肌痉挛收缩，常使重要脏器和组织血液灌流减少，甚至功能衰竭等病理生理改变. 有的研究结果表明，AgⅡ对缺血再灌注之组织和器官有损害作用[1，2]. 机体创伤失血后，虽然AgⅡ缩血管作用经一定时间消失了，但损伤作用仍在进行. 本实验中发现常规腹部手术中虽无大的出血和严重创伤，但在术后数天内血管紧张素明显升高，且以AgⅡ更为显著，其变化规律与失血性休克或颅脑损伤后的儿茶酚胺类改变相似[3]，这可能与AgⅡ促使交感神经末稍释放儿茶酚胺有关.
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单纯剖腹术与小肠切除吻合术和AgⅡ注射后相比，后两者AgⅡ升高更为显著，大多数动物伤口得不到良好愈合，这可能与创伤程度、内脏损伤及其引起的内脏神经反射等引起的血管紧张素升高有关. 有人发现，通过抑制AgⅡ的产生，降低组织耗氧量，减少有血管舒张功能的缓激肽降解并有抗氧化、抑制血小板在血管内凝集及保护血管内皮细胞免受自由基的损伤等作用[4-6]. 本实验中的ACEI注射后血管紧张素升高受到明显的抑制，伤口愈合得以改善，均可以说明，AgⅡ通过各种作用对伤口愈合产生不利影响.
为了预防AgⅡ升高及其病理改变，有人给术后动物输入高渗盐水并发现有明显效果. 其理论依据是：高渗盐水能恢复AgⅡ和心钠素平衡，有利于解除微血管痉挛，同时Na+刺激致密斑，抑制肾素分泌[7]. 本实验以生理盐水输入对降低AgⅡ浓度，提高伤口愈合率是有效的. 其作用可能是通过提高血循环量，减少神经反射等因素所致.
作者简介:赵佐庆(1954-),男(汉族),山东省新泰市人. 硕士，副教授. Tel.(029)3577469
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参考文献
[1] Dzau VJ. Cardial renin-angiotensin system (Molecular and funetional aspects)[J]. Am J Med, 1988; 84(Supp1 3A):22-27.
[2] Juggs J et al. Cardioprotection by angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitors[J]. Can J Cardiol, 1993; 9(5):336-352.
[3] 张剑宁. 大鼠脑损伤后血浆儿茶酚胺改变及其对血液流变学的影响[J]. 中华实验外科杂志, 1995；12(4)：223-224.
[4] Zughaib ME. Effect of angiotensin-converting enzyme inhibtors on myocardial ischemia/reperfusion injury an overview[J]. Basic Res Cardiol, 1993; 88 (Suppl):155-167.
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[5] Uhger T, Gohlke P. Converting enzyme inbibitors in cardiovascular therapy: Current status and future Potential[J]. Cardiovasc Res, 1994; 28(2):146-158.
[6] Vanhoutt PM. Endothelium-dependent effects of converting enzyme inhibitors[J]. J Cardiovase Pharmacol, 1993; 22(Suppl):510-516.
[7] 刘 岩，杨春明. 高渗盐水治疗犬严重失血性休克时血浆中血管紧张素Ⅱ/心钠素的变化[J]. 中华实验外科杂志, 1994；11(5)：275-276.
收稿日期:2000-01-18
修回日期:2000-04-07, http://www.100md.com