造血干细胞移植后骨髓造血重建中血细胞形态学变化
作者：蔡应木 郑庆棠
单位：汕头大学医学院第一附属医院，广东515041
关键词：造血干细胞；造血重建；细胞形态学
临床检验杂志990334 摘要 为了解造血干细胞移植后骨髓造血重建中血细胞形态学变化规律，以利病情观察及制订治疗方案。对6例采用不含全身照射(TBI)以马法兰、阿糖胞苷、环磷酰胺(MAC)作预处理方案进行造血干细胞移植患者术后每天行血常规检查，每周行骨髓细胞学检查，并进行分析。发现造血干细胞移植后1～2周骨髓极度受抑，第3周骨髓出现恢复征象，5～6周骨髓造血恢复正常。红系恢复中最先出现中、晚幼红细胞，粒系以原粒、早幼粒先出现巨核系统最慢恢复。周围血片1周内很难找到有核细胞，2周内以淋巴细胞为主，3～4周粒细胞渐多至正常。血小板恢复最慢。提示：①不含TBI以MAC作预处理方案达到足够强度。②预处理后1～2周骨髓极度受抑、周围血中粒细胞极少，是发生感染的危险阶段。③巨核系统恢复最慢，预防出血措施应持续至3～5周。
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造血干细胞移植是治疗血液系统恶性肿瘤的有效方法。我院于1994年11月至1997年2月对6例白血病患者施行造血干细胞移植术，我们观察了造血干细胞移植后血液、骨髓血细胞形态学变化。现报告如下：
1 资料及方法
1.1 一般资料 自体骨髓移植术3例，自体周围血干细胞移植术2例，异体周围血干细胞移植术1例。其中男5例，女1例，年龄19～42岁。急性粒细胞性白血病(M2a)4例，急性淋巴细胞性白血病1例，慢性粒细胞性白血病1例。所有患者临床确诊后经常规化疗达到完全缓解，巩固维持缓解6～12个月后行干细胞移植术。
1.2 方法
1.2.1 预处理 选用不含全身照射(TBI)预处理的MAC方案。
1.2.2 造血干细胞采集与回输。
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1.2.2.1 自体骨髓移植者骨髓采集与回输 按常规采集骨髓1 000～1 200 ml,含有粒细胞1.0×108/kg以上，台盼蓝拒染率>92%。置冰箱保存56～62小时后回输。
1.2.2.2 外周血干细胞采集与回输 应用百特CS 3000血细胞分离仪，分离外周血干细胞，含单个核细胞，CFU-GM>5.0×104/kg。
1.3 骨髓、外周血象动态观察 造血干细胞移植后每周行骨髓穿刺检查，观察骨髓增生度，粒、红、巨核各系细胞生长情况及形态学特征。每天抽静脉血EDTA.K2抗凝，在SEAC H12及COULTER JTIR血细胞分析仪上检测血常规18项参数，并涂片观察周围血细胞形态变化。
2 结果
2.1 骨髓细胞学动态变化 预处理后，第1～2周所有患者骨髓均受到毁灭性损伤，呈极度抑制，增生极度低下。此时骨髓很难找到有核细胞，多数病例仅见少量非造血细胞。例5、例6在第一周各找到一个形态较模糊的颗粒型巨核细胞，第二周巨核细胞反而找不到。从第三周开始骨髓出现恢复征象，表现为骨髓找到多少不一的造血灶，但非造血细胞仍占多数。第4周造血灶易见，以晚幼红细胞为主，有核红细胞可见类巨幼样变及花瓣形核。粒系最先出现是原始粒细胞及早幼粒细胞，随后各阶段粒细胞相继出现，粒细胞可见不同程度退行性变。第3～4周开始出现巨核细胞，巨核细胞达7个以上平均为4.5周，第5～6周骨髓造血恢复正常。3例在骨髓恢复阶段出现嗜酸性粒细胞增多，从中幼至分叶核嗜酸性粒细胞均明显超过正常，比例最高达34%，持续8～14个月不等，未经特殊处理而自行消失。
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2.2 外周血细胞变化
2.2.1 周围血细胞计数变化 见表1。
表1 ABTM后造血细胞恢复情况 序号
骨 髓 象(周)
血 象(天)
达增生
活 跃
出现造
血 岛
红系
>20%
粒系
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出现
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*ANC中性粒细胞绝对计数 WBC、ANC、Plt单位均为×109/L2.2.2 周围血细胞形态变化 预处理之前各例白细胞形态及分类大致正常。预处理开始数天，血片可见大量破碎细胞，很难找到完整有核细胞，2周内血细胞分类以成熟淋巴细胞为主。3～4周成熟粒细胞逐渐增多直至完全恢复正常。3例恢复期出现嗜酸性粒细胞增多。持续时间与骨髓一致。血小板在一周内较难找到，呈散在分布，第2～3周血小板易见且体积较大，5周后始见血小板成族呈堆分布。
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3 讨论
3.1 造血干细胞移植术包括自体骨髓移植，异基因骨髓移植，自体外周血干细胞移植，异基因外周血干细胞移植。是目前公认的治疗血液系统恶性肿瘤的有效方法。其原理是先采集足够量的造血干细胞(自体或异体骨髓或外周血)，再用超剂量的化疗(或加放疗)进行预处理，最大限度杀灭体内肿瘤细胞，使骨髓细胞龛腾空，利于造血干细胞植入。此时骨髓正常造血组织也受到毁灭性杀伤作用。再将体外造血干细胞通过静脉回输给移植患者，这样便可挽救超剂量化疗、放疗对造血系统的损伤。很明显，从预处理至输入造血干细胞植活并重建造血功能期间，骨髓象、血象发生了极大的变化，且有一段全血细胞极度减少期即骨髓空虚期。观察骨髓、血象变化有助于认识造血重建规律，有利于减少并发症提高成功率。本组资料显示，造血干细胞移植后二周内，病人骨髓极度受抑，周围血白细胞降至零、血小板极少，显示此时病人处于易感染、出血的危险期，应加强支持治疗如成份输血、抗生素应用。巨核系统恢复最慢，防止出血措施应持续至3～5周。
, 百拇医药 3.2 预处理方案是影响造血干细胞移植的主要因素。本组骨髓象及血象改变提示，我们所采用的MAC方案达到了足够的强度，所有病例均致骨髓极度抑制，周围血白细胞达零期。骨髓粒、红、巨核三系造血重建以红系最早，粒系次之，巨核细胞系统恢复最慢。例5、例6在第一周发现颗粒型巨核细胞，但见该细胞结构较模糊，且第二周巨核细胞反而消失，考虑为残存巨核细胞。巨核细胞真正恢复出现在3～4周，第5周才转为正常。粒系、红系恢复期细胞形态出现类似病态造血改变，如有核红细胞类巨幼样变化及花瓣形核，粒系出现不同程度的退行性变。周围血在预处理后数天见大量破碎细胞，显示化疗药物对正常细胞的毒性作用。恢复期周围血细胞形态无特殊改变。恢复期出现的血小板体积较大，可能与骨髓造血重建恢复，产生较幼稚血小板体积较大有关。
3.3 3例在恢复期出现骨髓、周围血嗜酸性粒细胞增多，未经特殊处理自行消失，三患者均未发现有过敏性疾病、寄生虫、皮肤病等常见嗜酸性粒细胞增多的原因，其嗜酸性粒细胞增多的确切原因尚不清楚，有待进一步研究。
参考文献
[1]邱录贵，严文伟，韩明哲，等.30例急性白血病自体骨髓移植后造血功能重建的影响因素.中华血液学杂志，1994，15(10)：505
[2]杨波，贾红芳，马瑞林，等.自体骨髓移植后造血重建.山西医药杂志，1994，23(2)：72
(1998-09-07收稿，1999-02-16修回), http://www.100md.com
单位：汕头大学医学院第一附属医院，广东515041
关键词：造血干细胞；造血重建；细胞形态学
临床检验杂志990334 摘要 为了解造血干细胞移植后骨髓造血重建中血细胞形态学变化规律，以利病情观察及制订治疗方案。对6例采用不含全身照射(TBI)以马法兰、阿糖胞苷、环磷酰胺(MAC)作预处理方案进行造血干细胞移植患者术后每天行血常规检查，每周行骨髓细胞学检查，并进行分析。发现造血干细胞移植后1～2周骨髓极度受抑，第3周骨髓出现恢复征象，5～6周骨髓造血恢复正常。红系恢复中最先出现中、晚幼红细胞，粒系以原粒、早幼粒先出现巨核系统最慢恢复。周围血片1周内很难找到有核细胞，2周内以淋巴细胞为主，3～4周粒细胞渐多至正常。血小板恢复最慢。提示：①不含TBI以MAC作预处理方案达到足够强度。②预处理后1～2周骨髓极度受抑、周围血中粒细胞极少，是发生感染的危险阶段。③巨核系统恢复最慢，预防出血措施应持续至3～5周。
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造血干细胞移植是治疗血液系统恶性肿瘤的有效方法。我院于1994年11月至1997年2月对6例白血病患者施行造血干细胞移植术，我们观察了造血干细胞移植后血液、骨髓血细胞形态学变化。现报告如下：
1 资料及方法
1.1 一般资料 自体骨髓移植术3例，自体周围血干细胞移植术2例，异体周围血干细胞移植术1例。其中男5例，女1例，年龄19～42岁。急性粒细胞性白血病(M2a)4例，急性淋巴细胞性白血病1例，慢性粒细胞性白血病1例。所有患者临床确诊后经常规化疗达到完全缓解，巩固维持缓解6～12个月后行干细胞移植术。
1.2 方法
1.2.1 预处理 选用不含全身照射(TBI)预处理的MAC方案。
1.2.2 造血干细胞采集与回输。
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1.2.2.1 自体骨髓移植者骨髓采集与回输 按常规采集骨髓1 000～1 200 ml,含有粒细胞1.0×108/kg以上，台盼蓝拒染率>92%。置冰箱保存56～62小时后回输。
1.2.2.2 外周血干细胞采集与回输 应用百特CS 3000血细胞分离仪，分离外周血干细胞，含单个核细胞，CFU-GM>5.0×104/kg。
1.3 骨髓、外周血象动态观察 造血干细胞移植后每周行骨髓穿刺检查，观察骨髓增生度，粒、红、巨核各系细胞生长情况及形态学特征。每天抽静脉血EDTA.K2抗凝，在SEAC H12及COULTER JTIR血细胞分析仪上检测血常规18项参数，并涂片观察周围血细胞形态变化。
2 结果
2.1 骨髓细胞学动态变化 预处理后，第1～2周所有患者骨髓均受到毁灭性损伤，呈极度抑制，增生极度低下。此时骨髓很难找到有核细胞，多数病例仅见少量非造血细胞。例5、例6在第一周各找到一个形态较模糊的颗粒型巨核细胞，第二周巨核细胞反而找不到。从第三周开始骨髓出现恢复征象，表现为骨髓找到多少不一的造血灶，但非造血细胞仍占多数。第4周造血灶易见，以晚幼红细胞为主，有核红细胞可见类巨幼样变及花瓣形核。粒系最先出现是原始粒细胞及早幼粒细胞，随后各阶段粒细胞相继出现，粒细胞可见不同程度退行性变。第3～4周开始出现巨核细胞，巨核细胞达7个以上平均为4.5周，第5～6周骨髓造血恢复正常。3例在骨髓恢复阶段出现嗜酸性粒细胞增多，从中幼至分叶核嗜酸性粒细胞均明显超过正常，比例最高达34%，持续8～14个月不等，未经特殊处理而自行消失。
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2.2 外周血细胞变化
2.2.1 周围血细胞计数变化 见表1。
表1 ABTM后造血细胞恢复情况 序号
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*ANC中性粒细胞绝对计数 WBC、ANC、Plt单位均为×109/L2.2.2 周围血细胞形态变化 预处理之前各例白细胞形态及分类大致正常。预处理开始数天，血片可见大量破碎细胞，很难找到完整有核细胞，2周内血细胞分类以成熟淋巴细胞为主。3～4周成熟粒细胞逐渐增多直至完全恢复正常。3例恢复期出现嗜酸性粒细胞增多。持续时间与骨髓一致。血小板在一周内较难找到，呈散在分布，第2～3周血小板易见且体积较大，5周后始见血小板成族呈堆分布。
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3 讨论
3.1 造血干细胞移植术包括自体骨髓移植，异基因骨髓移植，自体外周血干细胞移植，异基因外周血干细胞移植。是目前公认的治疗血液系统恶性肿瘤的有效方法。其原理是先采集足够量的造血干细胞(自体或异体骨髓或外周血)，再用超剂量的化疗(或加放疗)进行预处理，最大限度杀灭体内肿瘤细胞，使骨髓细胞龛腾空，利于造血干细胞植入。此时骨髓正常造血组织也受到毁灭性杀伤作用。再将体外造血干细胞通过静脉回输给移植患者，这样便可挽救超剂量化疗、放疗对造血系统的损伤。很明显，从预处理至输入造血干细胞植活并重建造血功能期间，骨髓象、血象发生了极大的变化，且有一段全血细胞极度减少期即骨髓空虚期。观察骨髓、血象变化有助于认识造血重建规律，有利于减少并发症提高成功率。本组资料显示，造血干细胞移植后二周内，病人骨髓极度受抑，周围血白细胞降至零、血小板极少，显示此时病人处于易感染、出血的危险期，应加强支持治疗如成份输血、抗生素应用。巨核系统恢复最慢，防止出血措施应持续至3～5周。
, 百拇医药 3.2 预处理方案是影响造血干细胞移植的主要因素。本组骨髓象及血象改变提示，我们所采用的MAC方案达到了足够的强度，所有病例均致骨髓极度抑制，周围血白细胞达零期。骨髓粒、红、巨核三系造血重建以红系最早，粒系次之，巨核细胞系统恢复最慢。例5、例6在第一周发现颗粒型巨核细胞，但见该细胞结构较模糊，且第二周巨核细胞反而消失，考虑为残存巨核细胞。巨核细胞真正恢复出现在3～4周，第5周才转为正常。粒系、红系恢复期细胞形态出现类似病态造血改变，如有核红细胞类巨幼样变化及花瓣形核，粒系出现不同程度的退行性变。周围血在预处理后数天见大量破碎细胞，显示化疗药物对正常细胞的毒性作用。恢复期周围血细胞形态无特殊改变。恢复期出现的血小板体积较大，可能与骨髓造血重建恢复，产生较幼稚血小板体积较大有关。
3.3 3例在恢复期出现骨髓、周围血嗜酸性粒细胞增多，未经特殊处理自行消失，三患者均未发现有过敏性疾病、寄生虫、皮肤病等常见嗜酸性粒细胞增多的原因，其嗜酸性粒细胞增多的确切原因尚不清楚，有待进一步研究。
参考文献
[1]邱录贵，严文伟，韩明哲，等.30例急性白血病自体骨髓移植后造血功能重建的影响因素.中华血液学杂志，1994，15(10)：505
[2]杨波，贾红芳，马瑞林，等.自体骨髓移植后造血重建.山西医药杂志，1994，23(2)：72
(1998-09-07收稿，1999-02-16修回), http://www.100md.com