Fas抗原表达与慢性乙型肝炎关系的评价
作者：邵凤珍 赵桂鸣 高蓬 陈文治 张迈仑
单位：
关键词：
中华传染病杂志980314 本研究应用免疫组化方法检测一组慢性乙型肝炎肝组织中Fas抗原表达状况并评价其与乙型肝炎病毒(HBV)感染及肝损害程度的关系。
材料与方法
一、研究对象
45例慢性乙型肝炎患者均为本院1996年住院患者。病程均在6月以上，乙肝病毒标志物(HBsAg、HBeAg、HBV DNA)阳性，肝功能异常。每例均做肝穿刺活检。经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋后制成5μm连续切片，常规HE染色做病理诊断。按国际“94方案”Scheuer病理分类(G/S)法[1](G代表炎症活动度分级；S代表纤维化程度分期)。免疫组化检测肝组织中病毒标志(HBcAg)及细胞凋亡因子(Fas抗原)。
, 百拇医药
二、方法
(一) HE染色病理诊断 按Scheuer分类法，由天津市心血管病研究所协助检测。
(二) HBcAg免疫组化 药盒购自美国Zymed公司。天津市心血管病研究所协助检测。
(三) 兔抗-Fas(N18)多克隆抗体应用免疫组化S-P法，药盒购自美国Zymed Lad公司。以已知阳性片作对照，根据染色强度及分布将Fas阳性程度分为+～。+仅少数阳性细胞，较多阳性细胞，多分布于汇管区小叶内，碎屑状坏死区；阳性细胞呈弥散分布于汇管区小叶内及周边碎屑状坏死区。北京佑安医院病理科协助检测。
(四) 血清HBV DNA检测 采用PCR方法，药盒购自美国Biotrronics, Corporation公司。本院科研室做定性检测。HBsAg、HBeAg应用ELISA方法测吸光度比值(P/N)，药盒购自北京生物制品研究所，本院科研室检测。
, 百拇医药
结 果
各类慢性乙型肝炎肝组织中Fas抗原表达，主要位于肝细胞胞浆，少部分在胆管上皮细胞浆内表达。阳性细胞分布于汇管区小叶内，大多数阳性细胞位于汇管区小叶内及周边碎屑状坏死区，呈弥散分布。少数阳性细胞临近碎屑状坏死区胆管上皮也呈阳性反应。
一、Fas抗原表达和HBV感染的关系
在可检出HBcAg阳性组中，Fas抗原检出阳性率明显高于HBcAg阴性组，经统计学处理前者明显高于后者，P<0.01(见表1)。
二、Fas抗原阳性与肝损害的关系
病理诊断按Scheuer慢性肝炎分类(表2)。本组45例各类慢性乙型肝炎肝组织中Fas抗原的检出率与肝
表1 肝组织中Fas抗原表达与
, 百拇医药
病毒标志物的关系 项 目
Fas+(%)
Fas-
总计
HBcAg(+)
23(76.7)
7
30
HBcAg(-)
5(33.3)
10
15
总计
, 百拇医药
28
17
45
χ2=7.99 P<0.01
损害程度比较(见表3)，肝损害程度重者Fas检出率高于肝损害轻者，Fas抗原阳性率占百分比依次为G4>G3>G2>G1;S4>S3>S1>S2。提示Fas抗原表达与肝损害的关系密切。表2 Scheuer 慢性肝炎病理分类
炎症活动度分级
纤维化程度
分级
汇管区周围
小叶内
, 百拇医药
分期
纤维程度
G0
无或轻度炎症
无炎症
S0
无
S1
无或汇管区扩大纤维化
G1
汇管区炎症(CPH)
炎症但无坏死
S2
, 百拇医药
汇管区周围纤维化或纤维间隔形成结构
G2
轻度碎屑状坏死
点灶状坏死或嗜酸小体
S3
纤维代伴小叶结构紊乱
G3
中度碎屑状坏死
重度灶状坏死
(distortion)无肝硬化
(中型CAH)
损伤包括桥接坏死
, 百拇医药
S4
可能的或肯定的肝硬化
G4
重度碎屑状坏死
(重型CAH)
多小叶坏死
讨 论
许多研究发现，在肝病的病理切片上常可见到凋亡的肝细胞，提示在肝病发病时，肝细胞坏死和肝细胞凋亡同时存在。且Fas系统是介导凋亡的重要途径[2]，本研究对45例慢性乙型肝炎患者肝组织中检测Fas抗原表达状况，阳性率为62%，较文献报道[3]稍低，可能主要与本组病例大多数肝组织病变较轻有关，本组慢性乙型肝炎Fas抗原检出率随着炎症活
, 百拇医药
表3 肝组织中Fas抗原表达与肝损害的关系 炎症活动度(G)
n
Fas抗原+(%)
纤维化程度(s)
n
Fas抗原+(%)
+
++
+++
小计
+
++
, 百拇医药 +++
小计
G1
12
3(25)
1(8)
1(8)
5(41)
S1
17
4(23)
3(18)
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单位：
关键词：
中华传染病杂志980314 本研究应用免疫组化方法检测一组慢性乙型肝炎肝组织中Fas抗原表达状况并评价其与乙型肝炎病毒(HBV)感染及肝损害程度的关系。
材料与方法
一、研究对象
45例慢性乙型肝炎患者均为本院1996年住院患者。病程均在6月以上，乙肝病毒标志物(HBsAg、HBeAg、HBV DNA)阳性，肝功能异常。每例均做肝穿刺活检。经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋后制成5μm连续切片，常规HE染色做病理诊断。按国际“94方案”Scheuer病理分类(G/S)法[1](G代表炎症活动度分级；S代表纤维化程度分期)。免疫组化检测肝组织中病毒标志(HBcAg)及细胞凋亡因子(Fas抗原)。
, 百拇医药
二、方法
(一) HE染色病理诊断 按Scheuer分类法，由天津市心血管病研究所协助检测。
(二) HBcAg免疫组化 药盒购自美国Zymed公司。天津市心血管病研究所协助检测。
(三) 兔抗-Fas(N18)多克隆抗体应用免疫组化S-P法，药盒购自美国Zymed Lad公司。以已知阳性片作对照，根据染色强度及分布将Fas阳性程度分为+～。+仅少数阳性细胞，较多阳性细胞，多分布于汇管区小叶内，碎屑状坏死区；阳性细胞呈弥散分布于汇管区小叶内及周边碎屑状坏死区。北京佑安医院病理科协助检测。
(四) 血清HBV DNA检测 采用PCR方法，药盒购自美国Biotrronics, Corporation公司。本院科研室做定性检测。HBsAg、HBeAg应用ELISA方法测吸光度比值(P/N)，药盒购自北京生物制品研究所，本院科研室检测。
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结 果
各类慢性乙型肝炎肝组织中Fas抗原表达，主要位于肝细胞胞浆，少部分在胆管上皮细胞浆内表达。阳性细胞分布于汇管区小叶内，大多数阳性细胞位于汇管区小叶内及周边碎屑状坏死区，呈弥散分布。少数阳性细胞临近碎屑状坏死区胆管上皮也呈阳性反应。
一、Fas抗原表达和HBV感染的关系
在可检出HBcAg阳性组中，Fas抗原检出阳性率明显高于HBcAg阴性组，经统计学处理前者明显高于后者，P<0.01(见表1)。
二、Fas抗原阳性与肝损害的关系
病理诊断按Scheuer慢性肝炎分类(表2)。本组45例各类慢性乙型肝炎肝组织中Fas抗原的检出率与肝
表1 肝组织中Fas抗原表达与
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病毒标志物的关系 项 目
Fas+(%)
Fas-
总计
HBcAg(+)
23(76.7)
7
30
HBcAg(-)
5(33.3)
10
15
总计
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28
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χ2=7.99 P<0.01
损害程度比较(见表3)，肝损害程度重者Fas检出率高于肝损害轻者，Fas抗原阳性率占百分比依次为G4>G3>G2>G1;S4>S3>S1>S2。提示Fas抗原表达与肝损害的关系密切。表2 Scheuer 慢性肝炎病理分类
炎症活动度分级
纤维化程度
分级
汇管区周围
小叶内
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分期
纤维程度
G0
无或轻度炎症
无炎症
S0
无
S1
无或汇管区扩大纤维化
G1
汇管区炎症(CPH)
炎症但无坏死
S2
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汇管区周围纤维化或纤维间隔形成结构
G2
轻度碎屑状坏死
点灶状坏死或嗜酸小体
S3
纤维代伴小叶结构紊乱
G3
中度碎屑状坏死
重度灶状坏死
(distortion)无肝硬化
(中型CAH)
损伤包括桥接坏死
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S4
可能的或肯定的肝硬化
G4
重度碎屑状坏死
(重型CAH)
多小叶坏死
讨 论
许多研究发现，在肝病的病理切片上常可见到凋亡的肝细胞，提示在肝病发病时，肝细胞坏死和肝细胞凋亡同时存在。且Fas系统是介导凋亡的重要途径[2]，本研究对45例慢性乙型肝炎患者肝组织中检测Fas抗原表达状况，阳性率为62%，较文献报道[3]稍低，可能主要与本组病例大多数肝组织病变较轻有关，本组慢性乙型肝炎Fas抗原检出率随着炎症活
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表3 肝组织中Fas抗原表达与肝损害的关系 炎症活动度(G)
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