益肾糖泰颗粒对糖尿病大鼠肾脏病变的影响
作者：王海松 谢春光
单位：成都中医药大学，四川 成都 610075
关键词：益肾糖泰颗粒；糖尿病肾病；血糖；糖基化血红蛋白；肾重；体重；肾功能；肾小球形态变化
成都中医药大学学报000125 摘 要： 目的：探索纯中药制剂益肾糖泰颗粒对糖尿病肾病(DN)的治疗机理。方法：观察治疗1周、13周、26周时益肾糖颗粒对糖尿病肾病大鼠模型的血糖、糖基化血红蛋白、肾重/体重、肾功及肾小球形态变化等。结果：益肾糖泰颗粒能有效改善实验性DN大鼠异常升高的血糖、HbA1c水平，能有效控制糖尿病肾脏的肥大，明显改善实验性DN大鼠肾脏功能的异常，光镜、电镜和计算机图像分析证实益肾糖泰颗粒能明显改善肾小球组织形态的异常。结论：益肾糖泰颗粒是治疗DN的有效纯中药制剂。
中图分类号： R255.4；R587.2 文献标识码：A 文章编号：1004-0668(2000)01-0049-03
, 百拇医药
Effect of Yi-sheng-tang-tai Granula
to the Nephritic Pathological Changes of the Diabetic Rats
WANG Hai-song, XIE Chun-guang(王海松，等)
Chengdu University of TCM (Chengdu, 610075,China)
ABSTRACT：The effect of Yi-sheng-tang-tai granula to the nephritic pathological changes of the diabetic rats were observed.The results showed that Yi-sheng-tang-tai, which has the effects of vigorating Qi, nourishing blood and Yin, promoting blood circulation, and dispelling pathogenic dampness and phlegm, can decrease the level of sugar in blood for model rats caused diabetic by Alloxan, improv significantly the abnormal blood kinetics of diabetic rats,decrease the level of leaked albumin in urine, β2m in blood and urine,improved the nephritic function and it has a good effect to delay the main diabetic nephritic morphologic changes showen by pathological microscope, electronic microscope and computer graphic analysis. It was suggested that Yi-sheng-tang-tai is a kind of effectual preparation for prevention and cure diabetics.
, 百拇医药
KEY WORDS：Diabetic nephropathy; Yi-sheng-tang-tai; experimental research
糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)属祖国医学消渴病继发水肿、尿浊等病证的范畴〔1,2〕，是糖尿病临床较为严重的心脑肾三大合并症之一，患病率高，大多数都最终发展为肾功能衰竭〔3〕而导致死亡。目前，西医对DN的治疗疗效不尽满意。祖国医学在治疗该病方面积累了丰富的经验，我校糖尿病课题组根据对DN的常见临床表现、病因病机的调查统计结果，认为糖尿病肾病属本虚标实证，其基本病机为“气阴两虚，瘀血水湿停滞”，故选用具有“益气养阴、活血化瘀、利湿化浊”的药物，研制成纯中药制剂益肾糖泰颗粒，用于DN的临床治疗，取得较好疗效。为了探索其治疗机理，我们对其进行了动物实验观察，现将结果报告如下。
1 材料
, 百拇医药
1.1 动物
健康SD大鼠160只，雌雄各半，45～60日龄，体重140～160 g，由四川省抗生素工业研究所动物中心提供。
1.2 试剂与药品
(1) 益肾糖颗粒：成都军区中药研究所制备提供。批号：980101。(2) 糖适平片(Glurenorm)：北京第六制药厂生产，规格 30 mg/片，批号：980101。(3) 卡托普利片(Captopril)：广州白云山制药总厂生产，规格25 mg/片，批号：9709041。(4)四氧嘧啶(Alloxan)：SIGMA公司产品，批号：971215。(5)葡萄糖(Glucose)：分析纯，成都化学试剂厂，批号，970905。(6)放免试剂盒：β2m、Alb、IgG，由中国原子能科学院同位素研究所提供。
1.3 主要仪器
, 百拇医药
(1) One touch II血糖仪：美国强生集团理康公司出品。(2)LD4-2水平离心机：北京医用离心机厂。(3)DF-110型电子天平：上海第二天平仪器厂。(4)751-GW分光光度计：惠普上海分析仪器有限公司。(5)SN-695自动r计数器：上海核福光电仪器有限公司。(6)WB-A微血量RBC比积仪：成都电子仪器厂。(7)奔腾MMX多媒体微机：MIAS2000型图像分析系统。(8)JEM-100SX电镜：日本电子公司。
2 方法
2.1 造模方法
大鼠驯化喂养1周，造模前禁食12 h，按120 mg/kg，腹腔隔日两次注射2.5% Alloxan生理盐水溶液，5天后尾静脉采血，血糖值16.7mmol/L～25mmol/L者入选本实验。
2.2 分组方法
, 百拇医药
合格入选的糖尿病(DM)大鼠按血糖值高低，性别不同，随机分为糖尿病组(DM)、益肾糖泰低剂量组(YL)、益肾糖泰中剂量组(YM)、益肾糖泰高剂量组(YH)和糖适平+卡托普利组(G+C)5 组，另设正常对照组(N)，每组15只。
2.3 给药方法
YL、YM和YH各组，实验全程分别以益肾糖泰药液成人剂量等量(0.25mg/kg.BW)、5倍(1.25mg/kg.BW)、10倍(2.5mg/kg.BW)灌胃，每日1次，共26周。每2周称体重调整药量。 G+C组实验全程以临床成人剂量5倍之Glurenorm(2.5mg/kg.BW)和Captopril(6.25mg/kg.BW)混悬液灌胃，每日1次，共26周。每2周称体重调整药量。 DM和N组实验全程以生理盐水(10 mL/kg.BW)灌胃，每日1次，共26周。每2周称体重调整药量。
以上各组大鼠实验期间均予高脂肪、高蛋白特制饲料(四川省抗菌素研究所动物中心提供，其中蛋白质含量为39.06%，脂肪为9.32%)，自由摄食、饮水，雌雄分笼饲养，死亡大鼠予以剔除。26周实验结束，留取标本，处死动物。
, 百拇医药
2.4 测试方法
(1)血糖(BG)测定：用one touchII血糖仪测定，实验开始、中期、结束各1次。(2)糖基化血红蛋白(HbA1c)：微柱法，实验结束时，股动脉取血2 mL，EDTA抗凝送检。(3)肾脏影响：肾重/体重比值，实验结束时大鼠称重，取血后断头处死，立即摘取右肾称重，计算比值。(4)肾脏功能：实验结束时代谢笼收集24 h尿液送检，放射免疫法(RIA)测β2m、Alb、IgG含量；取血2 mL，测血清BUN、Scr含量。(5)肾小球形态变化：大鼠处死后立即摘取右肾称重后，剥去包膜，肾门纵切，10%甲醛溶液固定，包埋、切片,HE、PAS、PASM染色，光镜下观察肾小球基底膜增厚、系膜增生等特征性肾小球硬化表现。供电镜检查的标本，经用戊二醛和饿酸液双重固定，经递增用醋酸铀和枸椽酸铅双重染色，在电镜下观察肾脏组织的损伤程度以及各种特殊物质的出现。(6)计算机图像分析：每张病理切片上选测12个肾小球，按顺序从皮质部、髓质部各选6个。12个肾小球中，所测结果除去最大值、最小值，余者以平均数为该片数值。具体操作：在与微机专用摄像接口相接的专用显微镜上选好待测切片视野，启动MIAS图像分析系统，捕获图像，以鼠标沿肾小球毛细血管丛描画出整个肾小球，进行图像编辑，转化为灰度图，行图像分割、二值化，区域测量后进行彩色图像分割，以鼠标点出肾小球内系膜PAS着色区，经计算机自动处理后，计算所描画肾小球截面积、PAS着色区/肾小球截面积比率。
, 百拇医药
2.5统计方法
各项指标均以均数±标准差(
±s)表示，行方差分析，F检验及S检验。
3 结果与分析
3.1 益肾糖泰对实验大鼠血糖及糖基化血红蛋白(HbA1c)的影响
结果见表1和表2。
表1 不同病程大鼠血糖比较(±s，mmol/L) 组 别
n
第1周
, 百拇医药
第13周
第26周
N
正常对照组
13
5.2±0.6
5.6±0.7
5.4±0.6
DM
糖尿病组
9
21.1±3.8△△
20.0±1.7△△
, 百拇医药
19.4±2.9△△
YL
益肾糖泰低剂量组
10
21.0±3.4△△
18.8±2.1△△*▲▲
18.1±1.7△△
YM
益肾糖泰中剂量组
9
21.1±3.4△△
, 百拇医药
16.2±1.1△△**▲▲
15.3±0.8△△**▲▲
YH
益肾糖泰高剂量组
11
21.6±3.1△△
15.1±0.6△△**▲▲
11.1±0.7△△**▲
G+C
, http://www.100md.com 糖适率+卡托普利组
10
21.4±2.9△△
9.7±0.9△△**
9.5±0.7△△**
与N组比较, P<0.05，, P<0.01；与DM组比较*, P<0.05, **, P<0.01；与G+C组比较，▲P<0.05；▲▲P<0.01。死亡大鼠系灌胃不当、病程较长所致。
3.2 益肾糖泰对实验大鼠肾脏的影响 结果见表3～表5。表2 各组大鼠HbA1c比较(±s，%) 组 别
, http://www.100md.com
n
HbA1C
N
13
3.78±0.35
DM
9
7.89±0.72△△
YL
10
7.81±0.71△△
YM
, 百拇医药
9
6.93±0.84△△▲▲
YH
11
6.15±2.18△△**▲
G+C
10
4.84±1.15△**
与N组比较, P<0.05，, P<0.01；与DM组比较*, P<0.01;与DM组比较,**P<0.01；与G+C组比较，▲ P<0.05，▲▲P<0.01。表5 各组大鼠平均肾小球截面积、PAS
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着色区/肾小球截面积比较(±s，%) 组别
n
平均肾小球截面积(μm3)
PAS着色区/肾小截面积(%)
N
13
5572.41±887.22
9.27±1.86
DM
9
8740.28±726.14△△
, 百拇医药
33.56±2.44△△
YL
10
8004.69±7.3.44△△*▲▲
24.81±2.06△△**▲▲
YM
9
7016.48±622.24△△**
17.74±1.99△△**▲▲
, 百拇医药
YH
11
5990.27±576.49**▲
10.66±1.72**▲
G+C
10
6801.51±632.52△△**
12.89±1.84△△**▲▲
与N组比较, P<0.01；与DM组比较，*P<0.05；**P<0.01；与G+C组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01。表3 各组大鼠体重、肾重、肾重/体重比值比较(±s) 组 别
, http://www.100md.com
n
体重(g)
肾重(g)
肾重/体重(g/g×10-3)
N
13
451±2.8
1.18±0.26
2.56±0.47
DM
9
235±12.1△△
, 百拇医药
1.67±0.40△△
7.11±1.01△△
YL
10
262±9.7△△**
1.55±0.39△
6.74±0.96△△
YM
9
386±7.1△△**
, http://www.100md.com
13.8
与N组比较，P<0.05；P<0.01；与N组比较，▲P<0.05；▲▲P<0.01。表4 各组大鼠肾功能比较(±s) 组 别
n
BuN
(mmol/L)
Scr
(mmol/L)
β2-MG
(mmol/L)
Alb
, 百拇医药
(mmol/L)
IgG
(mmol/L)
N
10
6.1±1.1
89.2±4.2
0.16±0.01
2.25±0.28
0
DM
9
23.8±4.1△△
, http://www.100md.com
156.7±15.8△△
2.24±0.07△△
4.81±1.16△△
4.76±0.34△△
YL
10
20.6±3.8△△*▲▲
145.2±12.8△△*
2.11±0.04△△**▲▲
, 百拇医药
3.97±0.84△△*
1.18±0.17*
YM
9
15.7±3.2△△**▲▲
108.6±9.7△△**
0.98±0.05△△**▲▲
3.01±0.75**
0
, 百拇医药
YH
11
8.8±1.3△**▲
91.1±5.4**▲▲
0.17±0.02**▲
2.53±0.69**
0
G+C
10
11.7±1.6△△**
, 百拇医药
103.4±6.1△△
0.21±0.02△**
2.47±0.64**
0
与N组比较,△△ P<0.05；与DM组比较*,*P<0.05；**P<0.01；与G+C组比较，▲P<0.05；▲▲P<0.01。
3.3 光镜下观察结果
DN组有结节性或(和)弥慢性肾小球硬化表现，即肾小球系膜区弥散性增宽，PAS阳性物质增多，肾小球基底膜增厚。治疗组只有轻度系膜增生，基底膜增厚不明显，其中YH组仅有轻微病变。提示YH防治DN病理改变优于YL、YM及G+C组。
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3.4 电镜观察结果
DM组肾小球系膜细胞轻度增生，系膜基质一重度增生，基底膜呈节段性增厚，部分足突融合，系膜基质中少量云雾状电子致密物沉淀。G+C组肾小球内可见少量基底膜呈节段性增厚，并可见云雾状电子致密物沉淀，系膜基质轻度增生，可见其中有云雾状电子致密物沉积。中药治疗组肾小球内可见少量基底膜呈节段性增厚，其中可见少量云雾状电子致密物沉积。足突基本正常，系膜细胞及基质未见明显增生。提示益肾糖泰可防治DN的病理改变，疗效优于西药对照组。
4 讨论
4.1 现代医学对DN的发病机理已进行了广泛研究，越来越多的临床和实验研究证明，DN的发病是一个多因素综合作用的复杂过程，其发病机理可能与多元醇旁路激活及肾小球的结构成分改变等因素有关，遗传因素、高血压、长期慢性高血糖等也在一定程度上影响着DN的发生发展。对DN的治疗，现代医学在早期多采用严格控制血糖、降压、给予低蛋白饮食等治疗方法，晚期由于出现尿毒症或肾功能衰竭，又可能采取透析疗法或肾移植等。但其总的治疗效果多不满意。目前临床在预防和治疗DN方面应用较多的药物有糖适平和卡托普利等。
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4.2 祖国医学在治疗DN方面有一定优势。我们认为，糖尿病肾病的病位在肾。其发病是因为消渴病日久，久病及肾，久病必虚，阴虚、气虚、气阴两虚而致瘀血湿浊内生，由于瘀血湿浊内停又能加重肾脏功能的损害，本虚与标实相互作用，交互为患而发为本病。故其病机特点是因虚致实，本虚标实，而其虚实的中心环节是气阴两虚为本，瘀血湿浊内停为标。据此，我们拟定了以黄芪、太子参、淫羊藿、枸杞、当归、红花、猪苓、防己等为主要药物的益肾糖泰方，经前期临床验证，取得了良好疗效。
4.3 本实验结果证明，益肾糖泰能有效改善实验性DN大鼠异常升高的血糖、HbA1c水平，但力量弱于西医降糖药(P<0.05)。实验还证实，益肾糖泰能明显改善实验性DN大鼠肾脏功能异常。在改善Alb方面，YM和YH 组与G+C 组相当(P>0.05)；在改善β2m、BUN、Scr方面，YM 组与G+C 组相当(P>0.05)，而YH组则优于此2 组(P<0.05)；在改善肾重/体重比方面，YH组明显优于YM组及G+C组(P<0.01)。病理光镜、电镜和计算机图像分析证实益肾糖泰能明显改善肾小球组织形态异常。此外，益肾糖泰能有效控制糖尿病肾脏的肥大，提示益肾糖泰对糖尿病肾病的发生有一定的预防作用。
, 百拇医药
作者简介：王海松，女，1964年5月生；医学硕士，助理研究员；研究方向：内分泌系统疾病的中西医结合实验研究。
参考文献
1，陈贵廷等.实用中西医结合诊断治疗学.北京：中国医药科技出版社，1991.669
2，何绍奇.现代中医内科学.北京：中国医药出版社，1991.257
3，Grenfell A,Watkins PJ. Clinical diabetic nephropathy: natural history and complications. Clin Endocrinal Metab，1986，15:783
4，Seyer HK.Renal hypertrophy in experimental diabetes mell itus. Kindney Int,1983，23：643
(收稿日期：1999-11-02), http://www.100md.com
单位：成都中医药大学，四川 成都 610075
关键词：益肾糖泰颗粒；糖尿病肾病；血糖；糖基化血红蛋白；肾重；体重；肾功能；肾小球形态变化
成都中医药大学学报000125 摘 要： 目的：探索纯中药制剂益肾糖泰颗粒对糖尿病肾病(DN)的治疗机理。方法：观察治疗1周、13周、26周时益肾糖颗粒对糖尿病肾病大鼠模型的血糖、糖基化血红蛋白、肾重/体重、肾功及肾小球形态变化等。结果：益肾糖泰颗粒能有效改善实验性DN大鼠异常升高的血糖、HbA1c水平，能有效控制糖尿病肾脏的肥大，明显改善实验性DN大鼠肾脏功能的异常，光镜、电镜和计算机图像分析证实益肾糖泰颗粒能明显改善肾小球组织形态的异常。结论：益肾糖泰颗粒是治疗DN的有效纯中药制剂。
中图分类号： R255.4；R587.2 文献标识码：A 文章编号：1004-0668(2000)01-0049-03
, 百拇医药
Effect of Yi-sheng-tang-tai Granula
to the Nephritic Pathological Changes of the Diabetic Rats
WANG Hai-song, XIE Chun-guang(王海松，等)
Chengdu University of TCM (Chengdu, 610075,China)
ABSTRACT：The effect of Yi-sheng-tang-tai granula to the nephritic pathological changes of the diabetic rats were observed.The results showed that Yi-sheng-tang-tai, which has the effects of vigorating Qi, nourishing blood and Yin, promoting blood circulation, and dispelling pathogenic dampness and phlegm, can decrease the level of sugar in blood for model rats caused diabetic by Alloxan, improv significantly the abnormal blood kinetics of diabetic rats,decrease the level of leaked albumin in urine, β2m in blood and urine,improved the nephritic function and it has a good effect to delay the main diabetic nephritic morphologic changes showen by pathological microscope, electronic microscope and computer graphic analysis. It was suggested that Yi-sheng-tang-tai is a kind of effectual preparation for prevention and cure diabetics.
, 百拇医药
KEY WORDS：Diabetic nephropathy; Yi-sheng-tang-tai; experimental research
糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)属祖国医学消渴病继发水肿、尿浊等病证的范畴〔1,2〕，是糖尿病临床较为严重的心脑肾三大合并症之一，患病率高，大多数都最终发展为肾功能衰竭〔3〕而导致死亡。目前，西医对DN的治疗疗效不尽满意。祖国医学在治疗该病方面积累了丰富的经验，我校糖尿病课题组根据对DN的常见临床表现、病因病机的调查统计结果，认为糖尿病肾病属本虚标实证，其基本病机为“气阴两虚，瘀血水湿停滞”，故选用具有“益气养阴、活血化瘀、利湿化浊”的药物，研制成纯中药制剂益肾糖泰颗粒，用于DN的临床治疗，取得较好疗效。为了探索其治疗机理，我们对其进行了动物实验观察，现将结果报告如下。
1 材料
, 百拇医药
1.1 动物
健康SD大鼠160只，雌雄各半，45～60日龄，体重140～160 g，由四川省抗生素工业研究所动物中心提供。
1.2 试剂与药品
(1) 益肾糖颗粒：成都军区中药研究所制备提供。批号：980101。(2) 糖适平片(Glurenorm)：北京第六制药厂生产，规格 30 mg/片，批号：980101。(3) 卡托普利片(Captopril)：广州白云山制药总厂生产，规格25 mg/片，批号：9709041。(4)四氧嘧啶(Alloxan)：SIGMA公司产品，批号：971215。(5)葡萄糖(Glucose)：分析纯，成都化学试剂厂，批号，970905。(6)放免试剂盒：β2m、Alb、IgG，由中国原子能科学院同位素研究所提供。
1.3 主要仪器
, 百拇医药
(1) One touch II血糖仪：美国强生集团理康公司出品。(2)LD4-2水平离心机：北京医用离心机厂。(3)DF-110型电子天平：上海第二天平仪器厂。(4)751-GW分光光度计：惠普上海分析仪器有限公司。(5)SN-695自动r计数器：上海核福光电仪器有限公司。(6)WB-A微血量RBC比积仪：成都电子仪器厂。(7)奔腾MMX多媒体微机：MIAS2000型图像分析系统。(8)JEM-100SX电镜：日本电子公司。
2 方法
2.1 造模方法
大鼠驯化喂养1周，造模前禁食12 h，按120 mg/kg，腹腔隔日两次注射2.5% Alloxan生理盐水溶液，5天后尾静脉采血，血糖值16.7mmol/L～25mmol/L者入选本实验。
2.2 分组方法
, 百拇医药
合格入选的糖尿病(DM)大鼠按血糖值高低，性别不同，随机分为糖尿病组(DM)、益肾糖泰低剂量组(YL)、益肾糖泰中剂量组(YM)、益肾糖泰高剂量组(YH)和糖适平+卡托普利组(G+C)5 组，另设正常对照组(N)，每组15只。
2.3 给药方法
YL、YM和YH各组，实验全程分别以益肾糖泰药液成人剂量等量(0.25mg/kg.BW)、5倍(1.25mg/kg.BW)、10倍(2.5mg/kg.BW)灌胃，每日1次，共26周。每2周称体重调整药量。 G+C组实验全程以临床成人剂量5倍之Glurenorm(2.5mg/kg.BW)和Captopril(6.25mg/kg.BW)混悬液灌胃，每日1次，共26周。每2周称体重调整药量。 DM和N组实验全程以生理盐水(10 mL/kg.BW)灌胃，每日1次，共26周。每2周称体重调整药量。
以上各组大鼠实验期间均予高脂肪、高蛋白特制饲料(四川省抗菌素研究所动物中心提供，其中蛋白质含量为39.06%，脂肪为9.32%)，自由摄食、饮水，雌雄分笼饲养，死亡大鼠予以剔除。26周实验结束，留取标本，处死动物。
, 百拇医药
2.4 测试方法
(1)血糖(BG)测定：用one touchII血糖仪测定，实验开始、中期、结束各1次。(2)糖基化血红蛋白(HbA1c)：微柱法，实验结束时，股动脉取血2 mL，EDTA抗凝送检。(3)肾脏影响：肾重/体重比值，实验结束时大鼠称重，取血后断头处死，立即摘取右肾称重，计算比值。(4)肾脏功能：实验结束时代谢笼收集24 h尿液送检，放射免疫法(RIA)测β2m、Alb、IgG含量；取血2 mL，测血清BUN、Scr含量。(5)肾小球形态变化：大鼠处死后立即摘取右肾称重后，剥去包膜，肾门纵切，10%甲醛溶液固定，包埋、切片,HE、PAS、PASM染色，光镜下观察肾小球基底膜增厚、系膜增生等特征性肾小球硬化表现。供电镜检查的标本，经用戊二醛和饿酸液双重固定，经递增用醋酸铀和枸椽酸铅双重染色，在电镜下观察肾脏组织的损伤程度以及各种特殊物质的出现。(6)计算机图像分析：每张病理切片上选测12个肾小球，按顺序从皮质部、髓质部各选6个。12个肾小球中，所测结果除去最大值、最小值，余者以平均数为该片数值。具体操作：在与微机专用摄像接口相接的专用显微镜上选好待测切片视野，启动MIAS图像分析系统，捕获图像，以鼠标沿肾小球毛细血管丛描画出整个肾小球，进行图像编辑，转化为灰度图，行图像分割、二值化，区域测量后进行彩色图像分割，以鼠标点出肾小球内系膜PAS着色区，经计算机自动处理后，计算所描画肾小球截面积、PAS着色区/肾小球截面积比率。
, 百拇医药
2.5统计方法
各项指标均以均数±标准差(
±s)表示，行方差分析，F检验及S检验。3 结果与分析
3.1 益肾糖泰对实验大鼠血糖及糖基化血红蛋白(HbA1c)的影响
结果见表1和表2。
表1 不同病程大鼠血糖比较(
±s，mmol/L) 组 别n
第1周
, 百拇医药
第13周
第26周
N
正常对照组
13
5.2±0.6
5.6±0.7
5.4±0.6
DM
糖尿病组
9
21.1±3.8△△
20.0±1.7△△
, 百拇医药
19.4±2.9△△
YL
益肾糖泰低剂量组
10
21.0±3.4△△
18.8±2.1△△*▲▲
18.1±1.7△△
YM
益肾糖泰中剂量组
9
21.1±3.4△△
, 百拇医药
16.2±1.1△△**▲▲
15.3±0.8△△**▲▲
YH
益肾糖泰高剂量组
11
21.6±3.1△△
15.1±0.6△△**▲▲
11.1±0.7△△**▲
G+C
, http://www.100md.com 糖适率+卡托普利组
10
21.4±2.9△△
9.7±0.9△△**
9.5±0.7△△**
与N组比较, P<0.05，, P<0.01；与DM组比较*, P<0.05, **, P<0.01；与G+C组比较，▲P<0.05；▲▲P<0.01。死亡大鼠系灌胃不当、病程较长所致。
3.2 益肾糖泰对实验大鼠肾脏的影响 结果见表3～表5。表2 各组大鼠HbA1c比较(
±s，%) 组 别, http://www.100md.com
n
HbA1C
N
13
3.78±0.35
DM
9
7.89±0.72△△
YL
10
7.81±0.71△△
YM
, 百拇医药
9
6.93±0.84△△▲▲
YH
11
6.15±2.18△△**▲
G+C
10
4.84±1.15△**
与N组比较, P<0.05，, P<0.01；与DM组比较*, P<0.01;与DM组比较,**P<0.01；与G+C组比较，▲ P<0.05，▲▲P<0.01。表5 各组大鼠平均肾小球截面积、PAS
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着色区/肾小球截面积比较(
±s，%) 组别n
平均肾小球截面积(μm3)
PAS着色区/肾小截面积(%)
N
13
5572.41±887.22
9.27±1.86
DM
9
8740.28±726.14△△
, 百拇医药
33.56±2.44△△
YL
10
8004.69±7.3.44△△*▲▲
24.81±2.06△△**▲▲
YM
9
7016.48±622.24△△**
17.74±1.99△△**▲▲
, 百拇医药
YH
11
5990.27±576.49**▲
10.66±1.72**▲
G+C
10
6801.51±632.52△△**
12.89±1.84△△**▲▲
与N组比较, P<0.01；与DM组比较，*P<0.05；**P<0.01；与G+C组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01。表3 各组大鼠体重、肾重、肾重/体重比值比较(
±s) 组 别, http://www.100md.com
n
体重(g)
肾重(g)
肾重/体重(g/g×10-3)
N
13
451±2.8
1.18±0.26
2.56±0.47
DM
9
235±12.1△△
, 百拇医药
1.67±0.40△△
7.11±1.01△△
YL
10
262±9.7△△**
1.55±0.39△
6.74±0.96△△
YM
9
386±7.1△△**
, http://www.100md.com
13.8
与N组比较，P<0.05；P<0.01；与N组比较，▲P<0.05；▲▲P<0.01。表4 各组大鼠肾功能比较(
±s) 组 别n
BuN
(mmol/L)
Scr
(mmol/L)
β2-MG
(mmol/L)
Alb
, 百拇医药
(mmol/L)
IgG
(mmol/L)
N
10
6.1±1.1
89.2±4.2
0.16±0.01
2.25±0.28
0
DM
9
23.8±4.1△△
, http://www.100md.com
156.7±15.8△△
2.24±0.07△△
4.81±1.16△△
4.76±0.34△△
YL
10
20.6±3.8△△*▲▲
145.2±12.8△△*
2.11±0.04△△**▲▲
, 百拇医药
3.97±0.84△△*
1.18±0.17*
YM
9
15.7±3.2△△**▲▲
108.6±9.7△△**
0.98±0.05△△**▲▲
3.01±0.75**
0
, 百拇医药
YH
11
8.8±1.3△**▲
91.1±5.4**▲▲
0.17±0.02**▲
2.53±0.69**
0
G+C
10
11.7±1.6△△**
, 百拇医药
103.4±6.1△△
0.21±0.02△**
2.47±0.64**
0
与N组比较,△△ P<0.05；与DM组比较*,*P<0.05；**P<0.01；与G+C组比较，▲P<0.05；▲▲P<0.01。
3.3 光镜下观察结果
DN组有结节性或(和)弥慢性肾小球硬化表现，即肾小球系膜区弥散性增宽，PAS阳性物质增多，肾小球基底膜增厚。治疗组只有轻度系膜增生，基底膜增厚不明显，其中YH组仅有轻微病变。提示YH防治DN病理改变优于YL、YM及G+C组。
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3.4 电镜观察结果
DM组肾小球系膜细胞轻度增生，系膜基质一重度增生，基底膜呈节段性增厚，部分足突融合，系膜基质中少量云雾状电子致密物沉淀。G+C组肾小球内可见少量基底膜呈节段性增厚，并可见云雾状电子致密物沉淀，系膜基质轻度增生，可见其中有云雾状电子致密物沉积。中药治疗组肾小球内可见少量基底膜呈节段性增厚，其中可见少量云雾状电子致密物沉积。足突基本正常，系膜细胞及基质未见明显增生。提示益肾糖泰可防治DN的病理改变，疗效优于西药对照组。
4 讨论
4.1 现代医学对DN的发病机理已进行了广泛研究，越来越多的临床和实验研究证明，DN的发病是一个多因素综合作用的复杂过程，其发病机理可能与多元醇旁路激活及肾小球的结构成分改变等因素有关，遗传因素、高血压、长期慢性高血糖等也在一定程度上影响着DN的发生发展。对DN的治疗，现代医学在早期多采用严格控制血糖、降压、给予低蛋白饮食等治疗方法，晚期由于出现尿毒症或肾功能衰竭，又可能采取透析疗法或肾移植等。但其总的治疗效果多不满意。目前临床在预防和治疗DN方面应用较多的药物有糖适平和卡托普利等。
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4.2 祖国医学在治疗DN方面有一定优势。我们认为，糖尿病肾病的病位在肾。其发病是因为消渴病日久，久病及肾，久病必虚，阴虚、气虚、气阴两虚而致瘀血湿浊内生，由于瘀血湿浊内停又能加重肾脏功能的损害，本虚与标实相互作用，交互为患而发为本病。故其病机特点是因虚致实，本虚标实，而其虚实的中心环节是气阴两虚为本，瘀血湿浊内停为标。据此，我们拟定了以黄芪、太子参、淫羊藿、枸杞、当归、红花、猪苓、防己等为主要药物的益肾糖泰方，经前期临床验证，取得了良好疗效。
4.3 本实验结果证明，益肾糖泰能有效改善实验性DN大鼠异常升高的血糖、HbA1c水平，但力量弱于西医降糖药(P<0.05)。实验还证实，益肾糖泰能明显改善实验性DN大鼠肾脏功能异常。在改善Alb方面，YM和YH 组与G+C 组相当(P>0.05)；在改善β2m、BUN、Scr方面，YM 组与G+C 组相当(P>0.05)，而YH组则优于此2 组(P<0.05)；在改善肾重/体重比方面，YH组明显优于YM组及G+C组(P<0.01)。病理光镜、电镜和计算机图像分析证实益肾糖泰能明显改善肾小球组织形态异常。此外，益肾糖泰能有效控制糖尿病肾脏的肥大，提示益肾糖泰对糖尿病肾病的发生有一定的预防作用。
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作者简介：王海松，女，1964年5月生；医学硕士，助理研究员；研究方向：内分泌系统疾病的中西医结合实验研究。
参考文献
1，陈贵廷等.实用中西医结合诊断治疗学.北京：中国医药科技出版社，1991.669
2，何绍奇.现代中医内科学.北京：中国医药出版社，1991.257
3，Grenfell A,Watkins PJ. Clinical diabetic nephropathy: natural history and complications. Clin Endocrinal Metab，1986，15:783
4，Seyer HK.Renal hypertrophy in experimental diabetes mell itus. Kindney Int,1983，23：643
(收稿日期：1999-11-02), http://www.100md.com