马钱子碱对小鼠淋巴细胞功能的影响*
作者：赵红卫 翁世艾 朱燕娜 李月华 张 艳 戈士文
单位：赵红卫 现在河南省人民医院药剂科，郑州 450003；翁世艾 朱燕娜 (河南医科大学药理学教研室, 郑州 450052)；李月华 张 艳 戈士文 河南省医学科学研究所药理室, 郑州 450052
关键词：马钱子碱；镇痛剂；淋巴细胞增殖；白细胞介素-2；环磷酰胺
中国药理学通报990421
摘要 目的 观察镇痛剂量的马钱子碱(Bru)对小鼠淋巴细胞功能的影响。方法 测定绵羊红细胞(SRBC)致敏小鼠血清溶血素及脾抗体分泌细胞(AFC)水平,二硝基氯苯(DNCB)所致小鼠迟发性超敏反应(DTH),以及丝裂原诱导小鼠脾淋巴细胞增殖和产生IL-2能力。结果 Bru(10及20mg.kg-1，ip显著增强小鼠对DNCB的特异性细胞免疫反应,但5,10及20mg.kg-1不影响对SRBC的特异性体液免疫反应。对环磷酰胺(Cyc)降低的上述反应，3个剂量的Bru均有显著恢复作用(P<0.05～0.01)。Bru 10 mg.kg-1 ip增强Con A及LPS诱导的脾淋巴细胞增殖(P<0.05),对Cyc所降低的脾淋巴细胞尤其T细胞增殖反应,Bru 5～20mg.kg-1范围内均使其恢复(P<0.05～0.01)。 Bru 0.1～100 mg*L-1在体外对丝裂原诱导小鼠脾淋巴细胞产生IL-2能力无明显影响。结论 镇痛有效剂量的Bru对小鼠淋巴细胞具有功能依赖性的免疫调节作用。
, 百拇医药
中国图书分类号 R 284.1； R 392.12； R 971.1
文献标识码 A 文章编号 1001-1978(1999)04-0354 -03
Effects of brucine on murine lymphocyte functions
ZHAO Hong-Wei, WENG Shi-Ai, ZHU Yan-Na
(Dept of Pharmacology, Henan Medical University;
LI Yue-Hua, ZHANG Yan, GE Shi-Wen
Dept of Pharmacology, Henan Institute of Medical Sciences, Zhengzhou 450052)
, 百拇医药
ABSTRACT AIM To study the effects of brucine (Bru) administrated with analgesic do 1sage on murine lymphocyte functions. METHODS The specific humoral immunity against sheep red blood cells (SRBC) and cellular immunity to 2,4-dinitrochlorobenzen (DNCB), on mitogen-induced differentiation and IL-2 production of the splenocytes of normal or cyclophosphamide (Cyc) induced immunodefeciency model mice were tested. RESULTS Bru(10，20mg.kg-1,ip) increased significantly the delayed type hypersensitivity (DTH) reaction to DNCB. With 5, 10 or 20mg.kg-1, Bru had no effect on the murine hemolysin and antibody forming cells (AFC) levels against SRBC, but had a significant restoration of these reactions decreased by Cyc (P<0.05～0.01). Bru with 10mg.kg-1 enhanced the Con A and LPS-induced splenocyte differentiation(P<0.05). In addition, Bru with 5, 10, and 20mg.kg-1 had a restoration on T and B lymphocyte differentiation decreased by Cyc (P<0.05～0.01). With 0.1mg.L-1～100mg.L-1, Bru in vitro had no significant effect on IL-2 production of mitogen-induced murine splenocytes (P>0.05).CONCLUSSION Bru with analgesic dosage shows function-dependent immunoregulation effect.
, http://www.100md.com
KEY WORDS brucine; analgesics; lymphocyte prolifferation; interleukin-2; cyclophosphamide
近来发现，临床常用的几类镇痛剂对机体免疫功能尤其细胞免疫功能多有抑制,而细胞免疫功能低下恰又是恶性肿瘤病人的主要特征,因此对肿瘤病人如何镇痛已成医学上的一大难题[1]。马钱子碱(brucine,Bru)是中药马钱子(Strychnos nux-vomica L)的主要成分之一,朱燕娜[2]及张国华等[3,4]的一系列研究发现,Bru在安全剂量范围内有明显镇痛作用,扭体法镇痛作用为哌替啶的1/6.4～1/2.4,热板法与哌替啶均以40 mg.kg-1 ip时，100 min内镇痛作用接近，镇痛持续时间远超过哌替啶，本身无依赖性。有报道复方马钱子汤有浓度依赖性的免疫调节作用[5]，马钱子水煎液低浓度促进人淋巴细胞有丝分裂而高浓度抑制之[6],Bru对小鼠非特异免疫功能有一定调节作用[7]。本文研究镇痛剂量的Bru对小鼠淋巴细胞功能的影响,以期为Bru的开发应用提供更全面的依据,并为研究疼痛与免疫调节间的关系作一有益的探索。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 动物与试剂 Brucine为Serva 公司产,临用前配成硫酸盐溶液。环磷酰胺(cyclophosphamide,Cys)为上海第十二制药厂出品，临用前以生理盐水稀释。PRMI1640培养基，刀豆球蛋白A(con-canavalin A,Con A)及脂多糖(lipopoly saccharide,LPS) 均为Sigma化学公司出品。MTT[3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium)]为瑞士Fluka公司出品。重组人白细胞介素2(recombined human interleukin-2,rhIL-2)为中国军事医学科学院生物制剂发展中心产。 2-巯基乙醇为上海试剂四厂出品。α-甲基甘露糖甙(α-Methyl-D-mannoside,α-MM)为上海试剂二厂出品。小牛血清(new-born bovine serum, NBS)为杭州四季青生物工程材料研究所产。Hanks液与常规配方基本相同,其中含10% NBS(灭活)且去除酚红,用等摩尔浓度的葡萄糖代之,以消除其在λ=413 nm处吸收带,调pH至7.2～7.4。绵羊红细胞(sheep red blood cells，SRBC)及豚鼠由河南省医学实验动物中心提供。Balb/c小鼠,体重(20±2) g,♂♀兼用,由河南省医学实验动物中心提供,♀为未产及无孕,常规饲料喂养,饮水不限。
, 百拇医药
1.2 马钱子碱对抗体生成的影响 按文献[8,9]报道方法进行。于721分光光度计λ=413 nm处测光密度值(A413)作为反映脾抗体形成细胞(antibody forming cells, AFC)及溶血素水平的指标。
1.3 马钱子碱对二硝基氯苯引发的迟发型超敏反应的影响 按文献[8,9]报道方法进行。以耳肿度(右耳重-左耳重)作为反映DTH的指标。同时剖取脾及胸腺称重计算脾指数及胸腺指数。
1.4 马钱子碱对Con A及LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 按文献[8,9]报道方法进行。于酶联免疫检测仪λ=570 nm及λ=630 nm处测光密度值，以A570-630作为反映淋巴细胞增殖程度的指标。
, http://www.100md.com 1.5 马钱子碱对小鼠脾细胞体外产生IL-2能力的影响 按文献报道的活化鼠脾细胞增殖法[8]及MTT比色法[10]进行。以各孔光密度值作为反映IL-2活性的指标,rhIL-2作为阳性对照。
1.6 统计学处理 所有数据用
±s表示,两组间均数比较用Student t检验处理。
2 结果
2.1 马钱子碱对抗体生成的影响 Bru 5,10及20mg.kg-1,ip对正常小鼠AFC水平及溶血素水平无明显影响(资料未显示),对Cyc所致小鼠AFC及溶血素水平的降低, Bru在上述3个剂量皆有明显回升作用(P<0.01)，但不能使其恢复至正常水平(表1)。
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Tab 1 Effect of brucine on serum hemolysin and splenic
antibody forming cells level in SRBC sensitized
mice treated with cyclophosphamide(±s,n=10) Drug/mg*kg-1
Hemolysin/A413
AFC/A413
Saline×5
0.774±0.022
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0.696±0.069
Cyc 100×1 (d3)
0.394±0.036**
0.076±0.049**
Cyc 100×1+Bru 5×5
0.456±0.027**##
0.249±0.015**##
Cyc 100×1+Bru 10×5
0.524±0.046**##
, http://www.100md.com
0.264±0.027**##
Cyc 100×1+Bru 20×5
0.490±0.044**##
0.250±0.035**##
**P<0.01， compared with control,##P<0.01， compared with Cyc. Bru: brucine; SRBC: sheep red blood cells; AFC: antibody forming cells; Cyc:cyclophosphamide
2.2 马钱子碱对二硝基氯苯引发的迟发型超敏反应的影响 Bru 5,10及20mg.kg-1增强正常鼠DTH且有较明显的量效关系，对Cyc造成的DTH降低有显著恢复作用(表2)。Bru对正常鼠脾指数及胸腺指数无明显影响,也不能使DTH中被Cyc降低的脾指数及胸腺指数恢复正常(资料未显示)。
, 百拇医药
Tab 2 Effect of brucine on DNCB-induced delayed type hypersensi-
tivity in normal and cyclophosphamide treated mice(±s ,n=10) Drug/mg*kg-1
DTH/mg
Saline×5
0.8 ±0.4
Bru 5×5
1.1±0.9
Bru 10×5
, 百拇医药
1.8±0.8**
Bru 20×5
2.5±0.6**
Cyc 100×1 (d3)
0.3±0.1**
Cyc 100×1+Bru 5×5
0.7±0.3##
Cyc 100×1+Bru 10×5
0.8±0.3##
Cyc 100×1+Bru 20×5
, http://www.100md.com
0.6±0.2##
**P<0.01， compared with control, ##P<0.01， compared with Cyc. DNCB: 2,4-dinitrochlorobenzen; Bru: brcine; DTH: delayed type hypersensitivity, CyC: cyclophosphamide
2.3 马钱子碱腹腔注射对Con A及LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 Cyc于d3ip给Balb/c小鼠时，对Con A诱导的 T淋巴细胞及LPS诱导的 B淋巴细胞增殖均起抑制作用, Bru对正常的 T、B淋巴细胞增殖无明显影响, 仅10mg.kg-1时促进之; 而对Cyc降低的脾淋巴细胞增殖尤其T淋巴细胞增殖, Bru 5, 10, 20mg.kg-1，ip均可使之恢复正常(表3)。
, 百拇医药
Tab 3 Effect of brucine on Con A- or LPS-induced
splenocyte proliferation in normal and
cyclophosphamide treated mice(±s,n=10) Drug/mg.kg-1
Con A/A570-630
LPS/A570-630
Saline×5
0.38±0.12
, 百拇医药
0.35±0.07
Bru 5×5
0.39±0.09
0.37±0.11
Bru 10×5
0.52±0.08**
0.46±0.05**
Bru 20×5
0.40±0.10
0.33±0.09
Cyc 100×1 (d3)
, http://www.100md.com
0.27±0.10*
0.23±0.12*
Cyc 100×1+Bru 5×5
0.38±0.12#
0.35±0.09#
Cyc 100×1+Bru 10×5
0.36±0.09#
0.29±0.07
Cyc 100×1+Bru 20×5
0.36±0.09#
, 百拇医药
0.31±0.09
*P<0.05，**P<0.01, compared with control,#P<0.05, compared with Cyc2.4 马钱子碱对小鼠脾细胞体外产生IL-2能力的影响 Bru在体外于0.1mg.L-1～100mg.L-1对小鼠脾细胞产生IL-2无明显影响。
3 讨论
药物对小鼠不同的免疫反应影响可能也不同，本实验发现Bru对小鼠抗体形成、DTH反应与淋巴细胞增殖反应的影响有所差别。总的说来Bru对正常小鼠上述免疫功能无明显影响，但对Cyc所致小鼠淋巴细胞增殖及其功能的改变均有恢复作用, 且作用与剂量有一定关系，表明Bru对小鼠淋巴细胞功能有剂量和功能依赖性的调节作用。
, 百拇医药
从本文及文献[7]结果看, Bru在体外用药的效果不及体内。在体外除对T淋巴细胞增殖有促进作用外, 对B淋巴细胞增殖, 腹腔巨噬细胞功能, IL-1及IL-2等均无明显影响, 提示其免疫调节作用除部分通过T淋巴细胞外, 大部分可能需通过神经或体液因素起作用。据报道[3,4]Bru的镇痛作用系通过中枢M胆碱能系统而与阿片受体无关, 这也许是为什么Bru不象其他镇痛剂那样抑制免疫功能的原因之一, 至于其免疫调节作用是否也通过中枢 M胆碱能系统, 有待进一步研究。
*Project in part supported by Education Commission of Henan Province, No 95470018
*河南省教委资助项目，No 95470018
作者简介：赵红卫，男，32岁，药理学博士；
, 百拇医药
翁世艾，女，65岁，教授
参考文献
1 徐江平. 几个高效镇痛剂慢性给药对小鼠免疫功能的影响. 中国实验临床免疫学杂志, 1993; 5(3):1～5
2 朱燕娜, 鲍梦周, 曹永舒et al. 马钱子碱和士的宁镇痛作用的初步探讨. 河南医科大学学报, 1989;24(4):288～92
3 张国华, 朱燕娜, 鲍梦周et al. 马钱子碱耐受性及身体依赖性的初步探讨. 河南医科大学学报, 1993; 28(1):10～2
4 张国华, 朱燕娜, 鲍梦周et al. 马钱子碱镇痛作用及机理探讨. 中药药理与临床, 1992;8(特辑):45～7
5 代 龙, 朱 荃, 叶定江. 复方马钱子汤免疫药理学研究. 山东中医学院学报, 1992;16(5):41～4
, http://www.100md.com
6 周其善, 陈力冰, 卢 炎. 中草药免疫药理学研究的概况. 生理科学, 1987;7(3):165～9
7 Zhao HW, Li YH, Zhu YN et al. Effect of brucine on mouce nonspecific immune responses. Acta Pharmacol Sin, 1997;18(5):468～70
8 徐叔云,卞如濂, 陈 修主编. 药理实验方法学，第2版, 北京: 人民卫生出版社, 1991:1220～48
9 李月华, 刘 健, 刘 菁et al. 粉叶地锦对小鼠免疫功能影响的实验研究. 河南医科大学学报, 1992;27(4):335～7
10 周道洪, 沈元珊, 赵曼瑞. 测定淋巴细胞转化和鼠白细胞介素-2活性的新方法——MTT比色法. 中国免疫学杂志, 1986;2(1):39～44
1998-11-27收稿，1999-02-03修回, 百拇医药
单位：赵红卫 现在河南省人民医院药剂科，郑州 450003；翁世艾 朱燕娜 (河南医科大学药理学教研室, 郑州 450052)；李月华 张 艳 戈士文 河南省医学科学研究所药理室, 郑州 450052
关键词：马钱子碱；镇痛剂；淋巴细胞增殖；白细胞介素-2；环磷酰胺
中国药理学通报990421
摘要 目的 观察镇痛剂量的马钱子碱(Bru)对小鼠淋巴细胞功能的影响。方法 测定绵羊红细胞(SRBC)致敏小鼠血清溶血素及脾抗体分泌细胞(AFC)水平,二硝基氯苯(DNCB)所致小鼠迟发性超敏反应(DTH),以及丝裂原诱导小鼠脾淋巴细胞增殖和产生IL-2能力。结果 Bru(10及20mg.kg-1，ip显著增强小鼠对DNCB的特异性细胞免疫反应,但5,10及20mg.kg-1不影响对SRBC的特异性体液免疫反应。对环磷酰胺(Cyc)降低的上述反应，3个剂量的Bru均有显著恢复作用(P<0.05～0.01)。Bru 10 mg.kg-1 ip增强Con A及LPS诱导的脾淋巴细胞增殖(P<0.05),对Cyc所降低的脾淋巴细胞尤其T细胞增殖反应,Bru 5～20mg.kg-1范围内均使其恢复(P<0.05～0.01)。 Bru 0.1～100 mg*L-1在体外对丝裂原诱导小鼠脾淋巴细胞产生IL-2能力无明显影响。结论 镇痛有效剂量的Bru对小鼠淋巴细胞具有功能依赖性的免疫调节作用。
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中国图书分类号 R 284.1； R 392.12； R 971.1
文献标识码 A 文章编号 1001-1978(1999)04-0354 -03
Effects of brucine on murine lymphocyte functions
ZHAO Hong-Wei, WENG Shi-Ai, ZHU Yan-Na
(Dept of Pharmacology, Henan Medical University;
LI Yue-Hua, ZHANG Yan, GE Shi-Wen
Dept of Pharmacology, Henan Institute of Medical Sciences, Zhengzhou 450052)
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ABSTRACT AIM To study the effects of brucine (Bru) administrated with analgesic do 1sage on murine lymphocyte functions. METHODS The specific humoral immunity against sheep red blood cells (SRBC) and cellular immunity to 2,4-dinitrochlorobenzen (DNCB), on mitogen-induced differentiation and IL-2 production of the splenocytes of normal or cyclophosphamide (Cyc) induced immunodefeciency model mice were tested. RESULTS Bru(10，20mg.kg-1,ip) increased significantly the delayed type hypersensitivity (DTH) reaction to DNCB. With 5, 10 or 20mg.kg-1, Bru had no effect on the murine hemolysin and antibody forming cells (AFC) levels against SRBC, but had a significant restoration of these reactions decreased by Cyc (P<0.05～0.01). Bru with 10mg.kg-1 enhanced the Con A and LPS-induced splenocyte differentiation(P<0.05). In addition, Bru with 5, 10, and 20mg.kg-1 had a restoration on T and B lymphocyte differentiation decreased by Cyc (P<0.05～0.01). With 0.1mg.L-1～100mg.L-1, Bru in vitro had no significant effect on IL-2 production of mitogen-induced murine splenocytes (P>0.05).CONCLUSSION Bru with analgesic dosage shows function-dependent immunoregulation effect.
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KEY WORDS brucine; analgesics; lymphocyte prolifferation; interleukin-2; cyclophosphamide
近来发现，临床常用的几类镇痛剂对机体免疫功能尤其细胞免疫功能多有抑制,而细胞免疫功能低下恰又是恶性肿瘤病人的主要特征,因此对肿瘤病人如何镇痛已成医学上的一大难题[1]。马钱子碱(brucine,Bru)是中药马钱子(Strychnos nux-vomica L)的主要成分之一,朱燕娜[2]及张国华等[3,4]的一系列研究发现,Bru在安全剂量范围内有明显镇痛作用,扭体法镇痛作用为哌替啶的1/6.4～1/2.4,热板法与哌替啶均以40 mg.kg-1 ip时，100 min内镇痛作用接近，镇痛持续时间远超过哌替啶，本身无依赖性。有报道复方马钱子汤有浓度依赖性的免疫调节作用[5]，马钱子水煎液低浓度促进人淋巴细胞有丝分裂而高浓度抑制之[6],Bru对小鼠非特异免疫功能有一定调节作用[7]。本文研究镇痛剂量的Bru对小鼠淋巴细胞功能的影响,以期为Bru的开发应用提供更全面的依据,并为研究疼痛与免疫调节间的关系作一有益的探索。
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1 材料与方法
1.1 动物与试剂 Brucine为Serva 公司产,临用前配成硫酸盐溶液。环磷酰胺(cyclophosphamide,Cys)为上海第十二制药厂出品，临用前以生理盐水稀释。PRMI1640培养基，刀豆球蛋白A(con-canavalin A,Con A)及脂多糖(lipopoly saccharide,LPS) 均为Sigma化学公司出品。MTT[3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium)]为瑞士Fluka公司出品。重组人白细胞介素2(recombined human interleukin-2,rhIL-2)为中国军事医学科学院生物制剂发展中心产。 2-巯基乙醇为上海试剂四厂出品。α-甲基甘露糖甙(α-Methyl-D-mannoside,α-MM)为上海试剂二厂出品。小牛血清(new-born bovine serum, NBS)为杭州四季青生物工程材料研究所产。Hanks液与常规配方基本相同,其中含10% NBS(灭活)且去除酚红,用等摩尔浓度的葡萄糖代之,以消除其在λ=413 nm处吸收带,调pH至7.2～7.4。绵羊红细胞(sheep red blood cells，SRBC)及豚鼠由河南省医学实验动物中心提供。Balb/c小鼠,体重(20±2) g,♂♀兼用,由河南省医学实验动物中心提供,♀为未产及无孕,常规饲料喂养,饮水不限。
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1.2 马钱子碱对抗体生成的影响 按文献[8,9]报道方法进行。于721分光光度计λ=413 nm处测光密度值(A413)作为反映脾抗体形成细胞(antibody forming cells, AFC)及溶血素水平的指标。
1.3 马钱子碱对二硝基氯苯引发的迟发型超敏反应的影响 按文献[8,9]报道方法进行。以耳肿度(右耳重-左耳重)作为反映DTH的指标。同时剖取脾及胸腺称重计算脾指数及胸腺指数。
1.4 马钱子碱对Con A及LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 按文献[8,9]报道方法进行。于酶联免疫检测仪λ=570 nm及λ=630 nm处测光密度值，以A570-630作为反映淋巴细胞增殖程度的指标。
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1.6 统计学处理 所有数据用
±s表示,两组间均数比较用Student t检验处理。2 结果
2.1 马钱子碱对抗体生成的影响 Bru 5,10及20mg.kg-1,ip对正常小鼠AFC水平及溶血素水平无明显影响(资料未显示),对Cyc所致小鼠AFC及溶血素水平的降低, Bru在上述3个剂量皆有明显回升作用(P<0.01)，但不能使其恢复至正常水平(表1)。
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Tab 1 Effect of brucine on serum hemolysin and splenic
antibody forming cells level in SRBC sensitized
mice treated with cyclophosphamide(
±s,n=10) Drug/mg*kg-1Hemolysin/A413
AFC/A413
Saline×5
0.774±0.022
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0.696±0.069
Cyc 100×1 (d3)
0.394±0.036**
0.076±0.049**
Cyc 100×1+Bru 5×5
0.456±0.027**##
0.249±0.015**##
Cyc 100×1+Bru 10×5
0.524±0.046**##
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0.264±0.027**##
Cyc 100×1+Bru 20×5
0.490±0.044**##
0.250±0.035**##
**P<0.01， compared with control,##P<0.01， compared with Cyc. Bru: brucine; SRBC: sheep red blood cells; AFC: antibody forming cells; Cyc:cyclophosphamide
2.2 马钱子碱对二硝基氯苯引发的迟发型超敏反应的影响 Bru 5,10及20mg.kg-1增强正常鼠DTH且有较明显的量效关系，对Cyc造成的DTH降低有显著恢复作用(表2)。Bru对正常鼠脾指数及胸腺指数无明显影响,也不能使DTH中被Cyc降低的脾指数及胸腺指数恢复正常(资料未显示)。
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Tab 2 Effect of brucine on DNCB-induced delayed type hypersensi-
tivity in normal and cyclophosphamide treated mice(
±s ,n=10) Drug/mg*kg-1DTH/mg
Saline×5
0.8 ±0.4
Bru 5×5
1.1±0.9
Bru 10×5
, 百拇医药
1.8±0.8**
Bru 20×5
2.5±0.6**
Cyc 100×1 (d3)
0.3±0.1**
Cyc 100×1+Bru 5×5
0.7±0.3##
Cyc 100×1+Bru 10×5
0.8±0.3##
Cyc 100×1+Bru 20×5
, http://www.100md.com
0.6±0.2##
**P<0.01， compared with control, ##P<0.01， compared with Cyc. DNCB: 2,4-dinitrochlorobenzen; Bru: brcine; DTH: delayed type hypersensitivity, CyC: cyclophosphamide
2.3 马钱子碱腹腔注射对Con A及LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 Cyc于d3ip给Balb/c小鼠时，对Con A诱导的 T淋巴细胞及LPS诱导的 B淋巴细胞增殖均起抑制作用, Bru对正常的 T、B淋巴细胞增殖无明显影响, 仅10mg.kg-1时促进之; 而对Cyc降低的脾淋巴细胞增殖尤其T淋巴细胞增殖, Bru 5, 10, 20mg.kg-1，ip均可使之恢复正常(表3)。
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Tab 3 Effect of brucine on Con A- or LPS-induced
splenocyte proliferation in normal and
cyclophosphamide treated mice(
±s,n=10) Drug/mg.kg-1Con A/A570-630
LPS/A570-630
Saline×5
0.38±0.12
, 百拇医药
0.35±0.07
Bru 5×5
0.39±0.09
0.37±0.11
Bru 10×5
0.52±0.08**
0.46±0.05**
Bru 20×5
0.40±0.10
0.33±0.09
Cyc 100×1 (d3)
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0.27±0.10*
0.23±0.12*
Cyc 100×1+Bru 5×5
0.38±0.12#
0.35±0.09#
Cyc 100×1+Bru 10×5
0.36±0.09#
0.29±0.07
Cyc 100×1+Bru 20×5
0.36±0.09#
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0.31±0.09
*P<0.05，**P<0.01, compared with control,#P<0.05, compared with Cyc2.4 马钱子碱对小鼠脾细胞体外产生IL-2能力的影响 Bru在体外于0.1mg.L-1～100mg.L-1对小鼠脾细胞产生IL-2无明显影响。
3 讨论
药物对小鼠不同的免疫反应影响可能也不同，本实验发现Bru对小鼠抗体形成、DTH反应与淋巴细胞增殖反应的影响有所差别。总的说来Bru对正常小鼠上述免疫功能无明显影响，但对Cyc所致小鼠淋巴细胞增殖及其功能的改变均有恢复作用, 且作用与剂量有一定关系，表明Bru对小鼠淋巴细胞功能有剂量和功能依赖性的调节作用。
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从本文及文献[7]结果看, Bru在体外用药的效果不及体内。在体外除对T淋巴细胞增殖有促进作用外, 对B淋巴细胞增殖, 腹腔巨噬细胞功能, IL-1及IL-2等均无明显影响, 提示其免疫调节作用除部分通过T淋巴细胞外, 大部分可能需通过神经或体液因素起作用。据报道[3,4]Bru的镇痛作用系通过中枢M胆碱能系统而与阿片受体无关, 这也许是为什么Bru不象其他镇痛剂那样抑制免疫功能的原因之一, 至于其免疫调节作用是否也通过中枢 M胆碱能系统, 有待进一步研究。
*Project in part supported by Education Commission of Henan Province, No 95470018
*河南省教委资助项目，No 95470018
作者简介：赵红卫，男，32岁，药理学博士；
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翁世艾，女，65岁，教授
参考文献
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1998-11-27收稿，1999-02-03修回, 百拇医药