交沙霉素效价测定方法的改进
作者：赵长敏 崔春英 陈 杰
单位：南省药品检验所 郑州 450003
关键词：
交沙霉素属于大环内酯类抗生素
交沙霉素属于大环内酯类抗生素，依照卫生部药品标准[1](以下简称部标法)测定效价发现，菌层生长稀薄，抑菌圈边缘欠清晰，呈微锯齿状，且双圈明显，用游标卡尺或抑菌圈测量仪测量会引起较大误差。本文对部标法作了改进，在培养基制备时添加一定比例的葡萄糖，克服了上述不良情况。实验表明，改进后的方法可行，对含量测定结果无影响。
1 仪器与试药
ZY-300A抑菌圈电脑测量仪(北京先驱高新技术开发公司)；无水葡萄糖、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾均为分析纯；培养基Ⅰ号pH7.8～8.0(批号960409，中国药品生物制品检定所)；枯草芽孢杆菌[CMCC(B)]；交沙霉素标准品(效价1000u/mg，由广东省药品检验所提供)；交沙霉素片，规格200mg，批号980224、970604分别由A、B两厂提供)。
, 百拇医药
2 实验
2.1 改进后的方法 培养基用Ⅰ号pH7.8～8.0每1000ml中加2～3g葡萄糖，其余操作同部标法。
2.2 标准曲线的绘制 将交沙霉素标准品制成每1ml中含交沙霉素1000 u的溶液，再用磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0)稀释成6.29、8.05、10.31、13.19、16.88、21.61、27.66、35.41u/ml的溶液，中心浓度为15u/ml，照标准曲线法[2]进行测定。改进法回归直线方程：Y=0.1417X+1.2010，r=0.9991。
3 结果与讨论
3.1 培养基中加入无水葡萄糖的量对抑菌圈的影响，见表1。
由表1可以看出，每1000ml培养基中加2～3g葡萄糖时，抑菌圈边缘清晰，菌层生长适中，无菌膜，无双圈，便于测量。
, http://www.100md.com
表1 无水葡萄糖的量对抑菌圈的影响
培养基中无水葡萄糖的量
g.1000ml-1
抑菌圈
清晰
菌膜
双圈
0
不清
无
有
1
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较清
无
无
2
清
无
无
3
清
无
无
5
清
有
, 百拇医药
无
3.2 由上可知，交沙霉素在5～40u/ml浓度范围内对数剂量与抑菌圈直径呈直线关系，表明改进的方法可行，符合微生物效价测定的基本原理。
3.3 用两法分别测定样品交沙霉素片的含量，结果见表2。表2 样品测定结果
批号
改进法
部标法
含量/%
可信限率/%
含量/%
可信限率/%
980224
, 百拇医药
96.4
3.45
93.9
4.62
95.0
3.82
96.0
6.34
95.9
4.56
94.7
5.00
970604
, http://www.100md.com
102.2
3.82
101.5
6.24
100.5
4.21
103.8
3.92
101.8
3.59
100.7
4.35
注：每批每次10个双碟的统计结果
, 百拇医药
经t检验，两法所测交沙霉素片的含量差异虽无显著意义(P>0.05)，但改进法可信限率较低，表明误差较小。
3.4 同时将改进法与Ⅱ号培养基(pH7.8～8.0)、Ⅱ号培养基(pH7.8～8.0)含0.3%葡萄糖进行比较，结果发现，Ⅱ号培养基(pH7.8～8.0)抑菌圈边缘模糊，但无双圈，Ⅱ号培养基(pH7.8～8.0)含0.3%葡萄糖抑菌圈边缘整齐，但略有双圈。
参考文献
1 卫生部药品标准.WS-144(X-107)-90
2 张治锬.抗生素药品检验.北京：人民出版社，1987：35, 百拇医药
单位：南省药品检验所 郑州 450003
关键词：
交沙霉素属于大环内酯类抗生素
交沙霉素属于大环内酯类抗生素，依照卫生部药品标准[1](以下简称部标法)测定效价发现，菌层生长稀薄，抑菌圈边缘欠清晰，呈微锯齿状，且双圈明显，用游标卡尺或抑菌圈测量仪测量会引起较大误差。本文对部标法作了改进，在培养基制备时添加一定比例的葡萄糖，克服了上述不良情况。实验表明，改进后的方法可行，对含量测定结果无影响。
1 仪器与试药
ZY-300A抑菌圈电脑测量仪(北京先驱高新技术开发公司)；无水葡萄糖、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾均为分析纯；培养基Ⅰ号pH7.8～8.0(批号960409，中国药品生物制品检定所)；枯草芽孢杆菌[CMCC(B)]；交沙霉素标准品(效价1000u/mg，由广东省药品检验所提供)；交沙霉素片，规格200mg，批号980224、970604分别由A、B两厂提供)。
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2 实验
2.1 改进后的方法 培养基用Ⅰ号pH7.8～8.0每1000ml中加2～3g葡萄糖，其余操作同部标法。
2.2 标准曲线的绘制 将交沙霉素标准品制成每1ml中含交沙霉素1000 u的溶液，再用磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0)稀释成6.29、8.05、10.31、13.19、16.88、21.61、27.66、35.41u/ml的溶液，中心浓度为15u/ml，照标准曲线法[2]进行测定。改进法回归直线方程：Y=0.1417X+1.2010，r=0.9991。
3 结果与讨论
3.1 培养基中加入无水葡萄糖的量对抑菌圈的影响，见表1。
由表1可以看出，每1000ml培养基中加2～3g葡萄糖时，抑菌圈边缘清晰，菌层生长适中，无菌膜，无双圈，便于测量。
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表1 无水葡萄糖的量对抑菌圈的影响
培养基中无水葡萄糖的量
g.1000ml-1
抑菌圈
清晰
菌膜
双圈
0
不清
无
有
1
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较清
无
无
2
清
无
无
3
清
无
无
5
清
有
, 百拇医药
无
3.2 由上可知，交沙霉素在5～40u/ml浓度范围内对数剂量与抑菌圈直径呈直线关系，表明改进的方法可行，符合微生物效价测定的基本原理。
3.3 用两法分别测定样品交沙霉素片的含量，结果见表2。表2 样品测定结果
批号
改进法
部标法
含量/%
可信限率/%
含量/%
可信限率/%
980224
, 百拇医药
96.4
3.45
93.9
4.62
95.0
3.82
96.0
6.34
95.9
4.56
94.7
5.00
970604
, http://www.100md.com
102.2
3.82
101.5
6.24
100.5
4.21
103.8
3.92
101.8
3.59
100.7
4.35
注：每批每次10个双碟的统计结果
, 百拇医药
经t检验，两法所测交沙霉素片的含量差异虽无显著意义(P>0.05)，但改进法可信限率较低，表明误差较小。
3.4 同时将改进法与Ⅱ号培养基(pH7.8～8.0)、Ⅱ号培养基(pH7.8～8.0)含0.3%葡萄糖进行比较，结果发现，Ⅱ号培养基(pH7.8～8.0)抑菌圈边缘模糊，但无双圈，Ⅱ号培养基(pH7.8～8.0)含0.3%葡萄糖抑菌圈边缘整齐，但略有双圈。
参考文献
1 卫生部药品标准.WS-144(X-107)-90
2 张治锬.抗生素药品检验.北京：人民出版社，1987：35, 百拇医药