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编号:10279290
麻醉大鼠肠淋巴循环的研究
http://www.100md.com 《微循环学杂志》 2000年第1期
     作者:刘艳凯 牛春雨 赵自刚 张静

    单位:刘艳凯(张家口医学院病理生理教研室, 邮政编码 张家口075000);牛春雨(张家口医学院病理生理教研室, 邮政编码 张家口075000);赵自刚(张家口医学院病理生理教研室, 邮政编码 张家口075000);张静(张家口医学院病理生理教研室, 邮政编码 张家口075000)

    关键词:淋巴;口径;收缩;流量;大鼠

    微循环学杂志000105

    目的: 探讨肠淋巴循环的研究方法、 参数及正常值, 为淋巴学研究提供参考。 方法: 通过微循环显微电视技术, 对75只大鼠进行肠系膜淋巴微循环研究, 同时采用肠淋巴管插管方法对60只大鼠实施肠淋巴管插管, 测定大鼠肠淋巴流量、 淋巴蛋白输出量和肠淋巴管压力。 结果: 麻醉大鼠肠系膜淋巴管静态口径为103.89±7.18 μm, 自主收缩频率为6.01±0.22次/min, 淋巴管收缩分数(Index Ⅰ)为0.56±0.03, 总收缩活性指数(Index Ⅱ)为1.77±0.09, 肠淋巴流量为10.74±0.49 μl/min, 肠淋巴管压力为1.85±0.17 kPa。 结论: 肠系膜淋巴管口径、 收缩性参数及淋巴流量的测定, 可用于淋巴循环的研究。
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    Study on Intestinal Lymph Circulation in Anesthetized Rats

    Liu Yankai, Niu Chunyu, Zhao Zigang

    (Zhangjiakou Medical College, Zhangjiakou 075000)

    Objective: To discuss the research method, parameters and their normal values about the intestinal lymph circulation and so as to provide some references for the research of lymphology. Method: A study of mesenteric lymph microcirculation was done in 75 rats by a microscope video-recorder technique, and the same time, a cannula of intestinal lymph duct was also done in 60 rats for the determination of intestinal lymph flow, lymph protein output and lymph pressure. Results: In anesthetized rats, the diameters of the first grade arteriole and venule was 22.77±0.68 μm and 31.79±0.92 μm and these of the second grade was 15.75±0.49 μm and 22.84±0.88 μm, separately. The still diameter of mesenteric lymph vessel was 103.89±7.18 μm, the contracted frequency was 6.01±0.22 time*min-1; Index Ⅰ was 0.56±0.03, Index Ⅱ was 1.77±0.09, L.D-Index was 3.70±0.18. The intestinal lymph flow, lymph protein output and lymph pressure was respectively 10.74±0.49 μl/min, 386.09±18.71 μg/min and 1.85±0.17 kPa. Conclusion: The diameter of mesenteric lymph vessel, contracted parameters and intestinal lymph flow could use in the reseach of intestinal lymph circulation.
, 百拇医药
    Key words: Lymph; Diameter; Constraction; Flow; Rat

    淋巴系统是循环系统的重要组成部分, 目前的研究内容主要集中在淋巴管收缩活性的变化、 淋巴液生成、 转运机制及其影响因素等方面, 常用方法有活体微循环观察和淋巴流量测定 。 为了更好地了解淋巴循环系统的功能, 探讨疾病发生的淋巴机制, 本文对麻醉大鼠肠 系膜微循环、 肠淋巴流量和肠淋巴管压力进行了研究。

    1 材料与方法

    1.1动物与分组

    Wistar雄性大鼠135只, 体重250~300 g, 由中国医学科学院实验动物研究中心提供。 实 验分三组: 肠系膜淋巴微循环观察组(75只)、 淋巴流量观察组(30只)和淋巴管压力观察组 (30只)。 大鼠用1%戊巴比妥钠肌注全麻, 肝素全身抗凝后做颈总动脉插管。
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    1.2 肠系膜淋巴微循环观察

    剑突下腹正中偏左0.5 cm处做长约2.5 cm的纵切口, 打开腹腔, 拉出肠管, 将 肠系膜固定于微循环观察窗内, 以K-H液对肠系膜以0.05 ml/min的速度37 ℃恒温灌 流。 光纤冷光源垂直照明, 通过微循环显微镜将图像放大380倍, 经摄像机传到监视器上 , 并与录像机相连, 进行同步录像。 颈总动脉插管与压力换能器相连, 连续记录血压。

    1.3 肠淋巴流量、 肠淋巴管压力的测定

    剑突下腹正中偏右0.5 cm处做长约2.5 cm的纵切口, 打开腹腔, 暴露肠系膜根部 , 找到与肠系膜上动脉相伴行的肠淋巴管, 按Bollman报道的方法[1]进行肠淋巴 管插管, 将30只大鼠引流肠淋巴液, 经计滴器在记录仪上连续记录淋巴液的滴数, 精确 测量一滴淋巴液的容量, 计算单位时间内肠淋巴流量, 并用Folin-酚法[2]测定 淋巴蛋白含量, 计算肠淋巴蛋白输出量; 另30只大鼠肠淋巴管插管后, 与压力换能器相 连, 通过记录仪连续记录30 min肠淋巴管压力的变化。
, 百拇医药
    1.4 观察指标

    待实验稳定30 min后, 观察肠系膜微血管口径、 微淋巴管口径及收缩频率; 按Goto报道 的方法[3]计算淋巴管收缩性指数:

    Index Ⅰ=(b2-c2)/b2,Index Ⅱ=(b2-c2)a2/b2,L.D-Index=(b-c)100 a/d2

    (a为自主收缩频率, b为最大舒张口径, c为最大收缩口径, d为静态口径)

    测定肠淋巴流量蛋白输出量及肠淋巴管压力, 连续观察30 min。

    1.5 统计方法
, 百拇医药
    文中结果以±s表示, t检验进行统计学处理。

    2 结 果

    在实验观察30 min内, 大鼠血压维持在正常生理范围内, 平均为17.07±1.58 kP a, 观察期比较无明显差异(P>0.05)。

    2.1 大鼠肠系膜微血管口径及A/V比值观察

    共观察72只大鼠, 微血管口径在30 min观察时间内无明显差异(P>0.05)。 一级微 动脉平均口径和微静脉口径分别为22.76±0.68 μm和31.79±0.92 μm, 结果见表1。 二级微动脉平均口径和微静脉口径分别为15.75±0.49 μm和22.8 4±0.88 μm, 结果见表2。

    2.2 大鼠肠系膜淋巴管口径观察
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    在观察期内, 大鼠肠系膜淋巴管呈自主节律性收缩, 淋巴管口径无明显差异(P>0.0 5)。 淋巴管平均静态口径、 最大收缩口径和最大舒张口径分别为103.89±7.18 μm、 82.76±6.21 μm和131.76±7.39 μm, 结果见表3。表 1 75只大鼠肠系膜一级微血管口 径及A/V比值的变化(μm, ±s) 时间(min)

    A1

    V1

    A1/V1

    0

    22.78±0.96

    31.61±1.35
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    0.73±0.24

    10

    22.83±0.92

    32.07±1.07

    0.72±0.21

    20

    22.74±1.02

    31.80±1.23

    0.72±0.18

    30

    22.70±0.83

    31.69±1.19
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    0.73±0.28

    表 2 75只大鼠肠系膜二级微血管口 径及A/V比值的变化(μm, ±s) 时间(min)

    A2

    V2

    A2/V2

    0

    15.69±0.81

    22.74±1.14

    0.69±0.18
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    10

    15.87±0.79

    22.93±0.98

    0.71±0.22

    20

    15.73±0.67

    22.86±1.27

    0.69±0.11

    30

    15.78±0.83

    22.83±1.08

    0.70±0.17
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    表 3 75只大鼠肠系膜淋巴管口径的变 化(μm, ±s) 时间(min)

    静态口径

    最大收缩口径

    最大舒 张口径

    0

    104.84±8.91

    83.52±8.86

    134.49±10.61

    10

    102.16±10.69
, 百拇医药
    82.18±7.35

    129.58±11.93

    20

    105.24±9.45

    82.73±8.66

    130.23±9.91

    30

    103.35±7.92

    82.61±9.03

    132.74±10.07

    2.3 大鼠肠系膜淋巴管收缩性参数

, 百拇医药     实验动物在观察期内淋巴管收缩性指数、 收缩频率无明显差异(P>0.05), 各参数 的平均值Index Ⅰ为0.56±0.03, Index Ⅱ为1.77±0.09, L.D-Index 为3.70±0.18, 自主收缩频率(F)6.01±0.22次/min。 结果见表4。

    表 4 75只大鼠肠系膜淋巴管收缩性参 数的变化(±s) 时间(min)

    Index Ⅰ

    Index Ⅱ

    L.D -Index

    F(time/min)

    0

, http://www.100md.com     0.56±0.08

    1.68±0.13

    3.72±0.52

    6.05±0.77

    10

    0.57±0.05

    1.72±0.11

    3.69±0.61

    6.17±0.94

    20

    0.56±0.04

    1.65±0.21
, 百拇医药
    3.73±0.37

    5.93±0.63

    30

    0.55±0.07

    1.64±0.18

    3.65±0.43

    5.88±0.69

    2.4 大肠肠淋巴流量、 蛋白输出量和肠淋巴管压力测定

    肠淋巴流量: 10.74±0.49 μl/min; 蛋白输出量: 386.09±18.71 μ g/min; 肠淋巴管压力: 1.85±0.17 kPa。 观察期内比较无明显差异(P>0 .05), 结果见表5。
, 百拇医药
    表 5 大鼠肠淋巴流量、 蛋白输出量 和淋巴管压力的变化(n=30, ±s) 时间(min)

    肠淋巴流量

    (μl/min)

    蛋白 输出量

    (μg/min)

    肠淋巴管压力

    (kPa)

    0

    10.85±0.64

    386.92±19.86
, 百拇医药
    1.86±0.18

    10

    10.67±0.87

    384.24±17.93

    1.84±0.24

    20

    10.74±0.48

    388.37±18.89

    1.87±0.26

    30

    10.72±0.59

    384.83±21.14
, 百拇医药
    1.85±0.19

    3 讨 论

    大肠肠系膜微循环由微动脉、 毛细血管网、 微静脉和与之相伴行的微淋巴管共同组成。 微动脉逐渐分枝变细, 其口径大小直接影响组织器官的血流灌注。 研究表明[4,5] , 微动脉口径大小对微循环灌流有明显调节作用, 其中小微动脉是通过代谢性机制来实 现这种作用的。 微静脉口径大小反映组织血液回流情况, 当微静脉淤张、 A/V比值异常时 , 可引起机体微循环灌流障碍, 组织细胞出现不同程度缺血、 缺氧, 最终导致疾病发生 。 因此, 观察微血管口径的动态变化, 可了解疾病的发生、 发展及转归过程。

    淋巴循环系统是组织液回流的重要途径。 正常人在安静情况下, 大约每小时有120 ml淋巴 液回流入血液循环, 淋巴液的回流对机体正常活动的维持和内环境恒定具有重要意义。 研 究表明, 正常时肠淋巴回流量占肠吸收量的20%~40%[6], 其回流正常与否, 主 要取决于肠系膜微淋巴管的功能。 研究发现, 肠系膜淋巴管呈自主节律性收缩, 管腔内 有瓣膜, 淋巴液以摆动方式向前流动, 瓣膜的存在有效阻碍了淋巴液的逆流。 肠系膜淋 巴管收集肠壁及肠道淋巴液, 可回吸收蛋白质, 运输脂肪, 清除组织中的细菌、 红细胞 及其它微粒等。 通过对肠系膜淋巴管口径、 收缩频率和收缩性指数的研究, 可了解肠淋 巴循环功能。 Index Ⅰ为收缩分数, 反映微淋巴管的收缩功能, 其增高提示肠系膜淋巴 管收缩幅度加大, 每次转运的淋巴液增多, 当Index Ⅰ降低时, 淋巴管收缩功能障碍, 淋巴液转运减少, 不利于淋巴液的正常回流。 Index Ⅱ为总收缩活性指数, 反映单位时 间内淋巴管的收缩功能, 而L.D-Index是肠系膜淋巴管动力学指数, 可用于评价单位时间 内不同口径淋巴管的收缩功能, 反映淋巴转运情况。 可见通过对肠系膜淋巴管口径和收缩 性的研究, 可了解肠淋巴循环的功能。
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    肠淋巴流量、 淋巴蛋白输出量和肠淋巴管压力的变化可直接反映肠淋巴回流和回吸收蛋白 质的功能, 其调节受淋巴管和淋巴结本身功能的影响。 当淋巴流量减少后, 将导致组织 液及大分子物质的回流障碍, 使机体自稳态破坏, 影响机体的正常生理活动。 观察表明 , 在30 min实验期内肠淋巴管压力未随时间延长而升高, 推断潴留淋巴液可能从其它一些淋巴分流枝如肝淋巴管回流, 从而未对实验结果造成影响。

    总之, 研究生理、 病理生理状况下肠系膜淋巴微循环、 肠淋巴流量及肠淋巴管压力的变 化, 可帮助我们了解某些疾病发生、 发展中的淋巴机制, 为临床防治疾病提供理论依据 。

    

    国家自然科学基金资助项目(39370297)

    本文作者简介:刘艳凯(1965~), 男, 汉族, 副教授, 硕士
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    参考文献

    1,Bollman JL, Cain JC, Crindlay JH. Technique for the collection of lymp h form the liver, small intestine, or thoracic duct of the rat. J Lab Clin Med, 1948, 33:1 349~1 351.

    2,蔡武城, 袁厚积. 生物物质常用化学分析法.北京: 科学出版社, 1982. 93~ 95.

    3,Goto Y, Kato T. On the quantitative expression of mesenterial micro-l ymphatic dynamics in the rat influenced by endotoxin. In: Tsuchiya M. eds. Micro circulation an Up-date. Vol l. Amsterdam Elsevier, 1987. 571~572.
, 百拇医药
    4,Berne RM. The microcirculation and lymphatics. In: Unknown. ed. Cardio vascular physiology. 7th ed. St Louis: Mosby, 1997. 151~154.

    5,Chilian WM. Endothelia regulation of coronary microvascular tone under physiological and pathophysiological conditions. Eur Heart J, 1993, 14(Suppl 1) :S55~S59.

    6,Lee JS. Lymph flow during fluid absorption form rat jejunum. Am J Phys iol, 1981, 240:312.

    本文1999-08-30收到, 1999-11-19修回, 2000-01-10接受, 百拇医药