辣椒辣素的提取与纯化方法研究
作者：李绪文 关志忱 朱迅 闫江红
单位：李绪文(基础医学院药学院分析化学教研室 吉林 长春130021)；关志忱(第一临床学院泌尿外科)；朱迅(基础医学院免疫教研室)；闫江红(吉林省中医中药研究院临床医院)
关键词：辣椒辣素；提取与纯化；层析
白求恩医科大学学报000209 〔提 要〕 目的：寻找辣椒辣素的有效提取、分离及纯化方法。方法：利用丙酮温浸提取法，回收溶剂后硅胶G柱层析进行分离、纯化。利用TLC检识和熔点测定验证纯度后称重计算产率。结果：产率可达0.038%。结论：本实验方法可有效地进行辣椒辣素的提取和纯化。
〔中图分类号〕 R284.2 〔文献标识码〕 A
〔文章编号〕 0253-3707(2000)02-0137-02
, 百拇医药
辣椒辣素(Capsaicin)是茄科植物辣椒(Capsicum annuum)中的主要成分之一，其药用研究较多〔1，2〕。辣椒辣素的化学成分是一种未饱和的酰胺衍生物，熔点低且易挥发。已报道的辣椒辣素的提取方法较多〔5，6〕，鉴于辣椒辣素极性较小且易溶于丙酮的特点，而且辣椒中的色素多分离较困难，本实验择出较为理想的辣椒辣素提取和纯化的方法，旨在提高辣椒辣素的提取产率。
1 材料与方法
1.1 仪 器 小型水浴箱(北京产)；ZFO-81型旋转蒸发仪(上海产)；X4-81174显微熔点测定仪(北京产)；ZF-1型三用紫外分析仪(上海产)；TG328-B型分析天平(上海产)及层析用玻璃柱(8 cm×100 cm和5 cm×60 cm)。
1.2 试 剂 丙酮、氯仿、甲醇、乙酸乙酯、石油醚(30～60℃沸程)均为分析纯(北京化工试剂厂产)；硅胶G为(青岛产)化学纯；辣椒辣素标准品(美国SIGMA化学公司生产)。
, 百拇医药
1.3 提取方法 将干辣椒(市售，川产，品种待定)粉碎，置烘箱内45℃烘干4 h后，称取样品重为355 g，加入丙酮于45℃水浴温浸1 h。将丙酮溶液趁热滤过中速滤纸，密封。重复上述过程2次。将3次提取得到的丙酮溶液合并，回收丙酮得总提取物的浸膏。
1.4 分离与纯化方法 将1.3中得到的浸膏以氯仿∶甲醇=50∶1混合溶液50 ml在45℃水浴条件下搅拌溶解、过滤，母液保留备用。再以30 ml上述混合溶液水浴45℃条件下搅拌溶解、过滤，进行2次。将3次母液合并，在45℃水浴中减压浓缩后进行层析分离。柱层析需进行5次，各次的条件如下：柱长100 cm，直径8 cm，湿法装柱，吸附剂高度50 cm，洗脱剂CHCl3∶MeOH=50∶1。TLC检识以相同展开剂，与标准品对照，Rf=0.51。显色剂为钼酸铵浓硫酸溶液，斑点为黄色，紫外分析仪下示黄色荧光。此法分得的辣椒辣素合并浓缩后按下述方法进行2次柱层析，层析条件为：柱长60 cm，直径5 cm，湿法装柱，吸附剂高度40 cm，洗脱剂为CH3COOC2H5∶CH3COCH3=100∶1。TLC检识以相同的展开剂，显色剂同上，Rf=0.65。再将上述层析分得的辣椒辣素合并浓缩后，进行第5次柱层析，采用干法上样和装柱，条件同第一次柱层析。
, 百拇医药
1.5 纯度检验 将上述分得的辣椒辣素在45℃减压下蒸去溶剂后，以石油醚(30～60℃沸程)溶解后，置于平底锥形瓶内重结晶。几次重结晶的成分分别以1.4中的两种展开剂TLC检识。合并各瓶内合格晶体，减压抽真空干燥1 h后，称重计算产率。再以TLC法和熔点测试法检验纯度。
2 结 果
2.1 纯度检测 展开剂TLC结果分别在Rf=0.51和Rf=0.65处有一个黄色斑点，在紫外分析仪下也只有一个黄色荧光斑点。熔点实验熔程为64～66℃，与标准品混合溶点实验，熔点不下降，说明单体纯度合格。
2.2 产 率 辣椒辣素晶体重为134.9 mg，产率0.038%。
3 讨 论
TLC检识只有一个斑点，熔程2℃说明提得的辣椒辣素纯度合格(约在95%以上)，0.038%也是较高的产率，这表明本实验方法可以作为辣椒辣素的提取和纯化的方法。
, 百拇医药
辣椒辣素是不饱和酰胺类化合物，其结构式为：
属于热不稳定物质，在较高温度下易挥发，因此在烘干、温浸及溶剂回收等操作中必须使温度控制在45℃以下进行。又由于辣椒辣素在水中有一定溶解度〔6〕，所以实验中各种器皿均须洗净后烘干。
对于不同品种的原料辣椒，产率会因主成分辣椒辣素的含量不同而出现差异。
〔作者简介〕 李绪文(1966-)，男，吉林省长春市人，讲师，医学硕士，主要从事天然药物化学研究。
〔参考文献〕
〔1〕关志忱.辣椒辣素在膀胱颈不全梗阻及不稳定膀胱中的作用〔J〕.中华泌尿外科杂志，1999，20(1)：50～51.
, 百拇医药
〔2〕关志忱，朱 迅.Application of capsaicin on urinary bladder〔J〕.白求恩医科大学学报，1998，24(6)：59～60.
〔3〕Domofric PD,Walrer F,Hunt V,et al.Treatment of painful diabetic neicropathy with topic capical capsaicin〔J〕.Arch Intern Med,1991,151:2225～2227.
〔4〕Watson CPN,Evans RJ,Watt VR.Post-herpetic neuralgia and tepical capsaicin〔J〕.Pain,1998,33:333～335.
〔5〕Neil L,Rounsavill M,Harold Combs,et al.A high yield method for the extraction and purification of capsaicin〔J〕.J Agric Food Chem,1977,25(6):1419～1420.
〔6〕王中秋，歧 琳.辣椒辣素提取方法筛选〔J〕.西北药学杂志，1996，11(2)：65～66.
〔7〕施飞群.中药辣椒中辣椒辣素和辣椒红素的提取〔J〕.中草药，1994，25(5)：276～277.
〔收稿日期〕 1999-11-09, http://www.100md.com
单位：李绪文(基础医学院药学院分析化学教研室 吉林 长春130021)；关志忱(第一临床学院泌尿外科)；朱迅(基础医学院免疫教研室)；闫江红(吉林省中医中药研究院临床医院)
关键词：辣椒辣素；提取与纯化；层析
白求恩医科大学学报000209 〔提 要〕 目的：寻找辣椒辣素的有效提取、分离及纯化方法。方法：利用丙酮温浸提取法，回收溶剂后硅胶G柱层析进行分离、纯化。利用TLC检识和熔点测定验证纯度后称重计算产率。结果：产率可达0.038%。结论：本实验方法可有效地进行辣椒辣素的提取和纯化。
〔中图分类号〕 R284.2 〔文献标识码〕 A
〔文章编号〕 0253-3707(2000)02-0137-02
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辣椒辣素(Capsaicin)是茄科植物辣椒(Capsicum annuum)中的主要成分之一，其药用研究较多〔1，2〕。辣椒辣素的化学成分是一种未饱和的酰胺衍生物，熔点低且易挥发。已报道的辣椒辣素的提取方法较多〔5，6〕，鉴于辣椒辣素极性较小且易溶于丙酮的特点，而且辣椒中的色素多分离较困难，本实验择出较为理想的辣椒辣素提取和纯化的方法，旨在提高辣椒辣素的提取产率。
1 材料与方法
1.1 仪 器 小型水浴箱(北京产)；ZFO-81型旋转蒸发仪(上海产)；X4-81174显微熔点测定仪(北京产)；ZF-1型三用紫外分析仪(上海产)；TG328-B型分析天平(上海产)及层析用玻璃柱(8 cm×100 cm和5 cm×60 cm)。
1.2 试 剂 丙酮、氯仿、甲醇、乙酸乙酯、石油醚(30～60℃沸程)均为分析纯(北京化工试剂厂产)；硅胶G为(青岛产)化学纯；辣椒辣素标准品(美国SIGMA化学公司生产)。
, 百拇医药
1.3 提取方法 将干辣椒(市售，川产，品种待定)粉碎，置烘箱内45℃烘干4 h后，称取样品重为355 g，加入丙酮于45℃水浴温浸1 h。将丙酮溶液趁热滤过中速滤纸，密封。重复上述过程2次。将3次提取得到的丙酮溶液合并，回收丙酮得总提取物的浸膏。
1.4 分离与纯化方法 将1.3中得到的浸膏以氯仿∶甲醇=50∶1混合溶液50 ml在45℃水浴条件下搅拌溶解、过滤，母液保留备用。再以30 ml上述混合溶液水浴45℃条件下搅拌溶解、过滤，进行2次。将3次母液合并，在45℃水浴中减压浓缩后进行层析分离。柱层析需进行5次，各次的条件如下：柱长100 cm，直径8 cm，湿法装柱，吸附剂高度50 cm，洗脱剂CHCl3∶MeOH=50∶1。TLC检识以相同展开剂，与标准品对照，Rf=0.51。显色剂为钼酸铵浓硫酸溶液，斑点为黄色，紫外分析仪下示黄色荧光。此法分得的辣椒辣素合并浓缩后按下述方法进行2次柱层析，层析条件为：柱长60 cm，直径5 cm，湿法装柱，吸附剂高度40 cm，洗脱剂为CH3COOC2H5∶CH3COCH3=100∶1。TLC检识以相同的展开剂，显色剂同上，Rf=0.65。再将上述层析分得的辣椒辣素合并浓缩后，进行第5次柱层析，采用干法上样和装柱，条件同第一次柱层析。
, 百拇医药
1.5 纯度检验 将上述分得的辣椒辣素在45℃减压下蒸去溶剂后，以石油醚(30～60℃沸程)溶解后，置于平底锥形瓶内重结晶。几次重结晶的成分分别以1.4中的两种展开剂TLC检识。合并各瓶内合格晶体，减压抽真空干燥1 h后，称重计算产率。再以TLC法和熔点测试法检验纯度。
2 结 果
2.1 纯度检测 展开剂TLC结果分别在Rf=0.51和Rf=0.65处有一个黄色斑点，在紫外分析仪下也只有一个黄色荧光斑点。熔点实验熔程为64～66℃，与标准品混合溶点实验，熔点不下降，说明单体纯度合格。
2.2 产 率 辣椒辣素晶体重为134.9 mg，产率0.038%。
3 讨 论
TLC检识只有一个斑点，熔程2℃说明提得的辣椒辣素纯度合格(约在95%以上)，0.038%也是较高的产率，这表明本实验方法可以作为辣椒辣素的提取和纯化的方法。
, 百拇医药
辣椒辣素是不饱和酰胺类化合物，其结构式为：
属于热不稳定物质，在较高温度下易挥发，因此在烘干、温浸及溶剂回收等操作中必须使温度控制在45℃以下进行。又由于辣椒辣素在水中有一定溶解度〔6〕，所以实验中各种器皿均须洗净后烘干。
对于不同品种的原料辣椒，产率会因主成分辣椒辣素的含量不同而出现差异。
〔作者简介〕 李绪文(1966-)，男，吉林省长春市人，讲师，医学硕士，主要从事天然药物化学研究。
〔参考文献〕
〔1〕关志忱.辣椒辣素在膀胱颈不全梗阻及不稳定膀胱中的作用〔J〕.中华泌尿外科杂志，1999，20(1)：50～51.
, 百拇医药
〔2〕关志忱，朱 迅.Application of capsaicin on urinary bladder〔J〕.白求恩医科大学学报，1998，24(6)：59～60.
〔3〕Domofric PD,Walrer F,Hunt V,et al.Treatment of painful diabetic neicropathy with topic capical capsaicin〔J〕.Arch Intern Med,1991,151:2225～2227.
〔4〕Watson CPN,Evans RJ,Watt VR.Post-herpetic neuralgia and tepical capsaicin〔J〕.Pain,1998,33:333～335.
〔5〕Neil L,Rounsavill M,Harold Combs,et al.A high yield method for the extraction and purification of capsaicin〔J〕.J Agric Food Chem,1977,25(6):1419～1420.
〔6〕王中秋，歧 琳.辣椒辣素提取方法筛选〔J〕.西北药学杂志，1996，11(2)：65～66.
〔7〕施飞群.中药辣椒中辣椒辣素和辣椒红素的提取〔J〕.中草药，1994，25(5)：276～277.
〔收稿日期〕 1999-11-09, http://www.100md.com