组织标本采取、处理的正确方法
作者：王银萍 冯丽华
单位：王银萍(第一临床学院 病理科 吉林 长春130021)；冯丽华(第一临床学院 妇产科)
关键词：组织标本；采取；处理；方法
白求恩医科大学学报000220
〔中图分类号〕 R446.8
〔文献标识码〕 B
〔文章编号〕 0253-3707(2000)02-0160-02
近年来从国外引进许多先进的实验室检测技术和诊断方法，但是临床病理诊断仍然是最重要的“定性诊断”方法，是临床制定治疗措施和判断预后的重要依据。由于医学的发展使临床医生和病理医生有时对某些问题的理解有很大的差别，从而影响了对患者的治疗，甚至产生不良结果，也可因标本的采取部位和处理不当，直接影响病理医生做出准确的诊断。
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1 标本的固定
正确的病理诊断需要有高质量的切片，正确的标本固定是制成高质量切片的第一步。如果组织自溶、结构破坏、细胞变形，就无法诊断，而且这是无法补救的一步。
常用的固定液有10%福尔马林，80%酒精、丙酮、戊二醛、醋酸。10%福尔马林的渗透组织能力为1 mm/h，所以一般标本均需固定数小时，较大标本(直径大于6 cm)沿最大径切开后应固定24 h，腔状器官剪开后铺平(粘膜面向上)，在大的容器内固定，表面覆以侵有固定液的湿纱布或湿棉花。小组织(直径小于2 cm)装在小瓶内固定以防丢失，囊性标本勿剖开以防上皮脱落。盛标本的容器口径应大于标本的直径。固定液的体积应10倍于标本的体积。
较大标本的固定方法：消化道沿系膜和胃大弯剖开；肺沿支气管树的冠状面剖开；子宫应从前面剖开宫腔固定内膜，以最大径剖开子宫的肿物；从外缘向肾门方向剖开肾脏；肝脾可沿最长径平行切开；眼球应开窗固定，在巩膜处剪开一小口，使固定液流入眼球内。
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10%福尔马林配制：市销36%福尔马林1份加9份蒸馏水。用于分子生物学和免疫组化研究的标本应用中性福尔马林固定。
2 关于快速冰冻问题
2.1 快速冰冻的用途 决定病变的性质；确定切除肿瘤边缘是否有残留的癌组织；辨认组织；确定有无淋巴结转移。
2.2 快速冰冻有下列局限性 ①切片质量差，准确性可达97%〔1〕。②不适用于骨、脂肪和淋巴结非转移性病变的诊断。前两者因为组织坚硬和难以冷冻不能切片。淋巴瘤在石蜡切片上诊断都很困难。③疑难病变和变界性病变在石蜡切片上都很难诊断，需借助于免疫组化和电镜来诊断，因此要延缓诊断。
2.3 临床医生在送检标本时注意事项 ①组织忌放在生理盐水、福尔马林或水中，应该用干纱布包裹组织，尤其脑组织，否则在制片中形成冰晶使切片上有大量空泡和网状结构无法诊断。②尽可能提供全面的临床资料，尤其是肿瘤的确切部位。如脑肿瘤位于髓内还是髓外，病理诊断大不相同。③认真填写手术所见。因为临床医生手术所见实际上就是病理医生的大体检查。需要描写的内容有：病灶的大小、形状、质地、颜色、有无包膜、包膜是否完整，与周围组织是否粘连，是否有出血、坏死、渗出、钙化、囊性变等。④手术送检组织尽可能取靠近病变中心的组织。例如，临床疑为乳腺癌送检冰冻时，病变中心可能是典型的癌，而周围的组织可能是导管上皮高度伴不典型增生。有些器官或组织的肿物尽可能将肿物全部切除送检。
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2.4 病理医生延迟冰冻诊断报告的原则 一些疑难病例当缺乏足够的组织学改变依据时；病理诊断与临床诊断有原则性分歧时；病理医生们存在原则性分歧时；发现有特殊疑点时，应与临床医生讨论，待石蜡切片再做出诊断。
3 临床活检中常见的特殊问题
3.1 内分泌系统肿瘤〔2〕 该系统肿瘤的共同特点是生物学行为和形态学表现不相一致。形态学上表现为良性而生物学上常常表现为恶性，因此腺瘤和腺癌鉴别较难。确定良恶性主要根据侵犯行为和转移，因此临床医生在送检该系统肿瘤时一定要带包膜及包膜外周边组织和附近肿大的淋巴结。
3.2 淋巴结淋巴瘤活检 淋巴瘤常引起一组淋巴结肿大，肿大的淋巴结大小不一，其形态学改变也不一样，从而病理诊断结果显然也不一样。如有大、中、小三个肿大的淋巴结，当最大的淋巴结的形态学表现为典型的淋巴瘤时，中等大小的淋巴结就可能是可疑淋巴瘤，而最小的淋巴结则为反应性增生。
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3.3 息肉癌变 消化道息肉常有癌变，息肉癌变常发生在表面和基底部。基底部癌变对于判断病变的范围和浸润深度有极其重要的意义。如果怀疑息肉有癌变，应切取完整息肉作检查。
3.4 轻度、中度和重度不典型增生 病变伴有轻度不典型增生，要求病人在半年之内必需再复查；中度不典型增生，要求病人在3个月内复查；重度不典型增生，要求病人立即复查或按原位癌处理。如果临床高度怀疑癌而病理报告为不典型增生，应再取病理标本或密切注意随访。
3.5 子宫内膜活检 宫内膜的形态反映了女性激素水平的改变，它受许多因素的影响，各种因素引起的内膜改变是不一样的，因此送检时应注明患者是处于青春期、哺乳期或妊娠期，是否服用避孕药或其它性激素药物。阴道不规则流血是子宫内膜送检的最常见原因，引起流血的因素很多，子宫内膜增生过长是最常见的因素之一，它分为四型：即单纯性、腺囊性、腺瘤性和不典型增生过长，前二者为良性病变，腺瘤性为交界性病变，后者为癌前病变或按原位癌处理。诊断此病时，年龄是重要指标，同一形态改变对青年未育患者的诊断标准可以适当放宽，而对绝经后的患者就要严肃对待。资料完整的申请单对病理诊断十分重要。
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3.6 乳腺癌雌孕激素受体(ER、PR)和癌基因C-erbB-2(P185)的检测 该检测对指导化疗具有重要意义。三者均为阳性的患者对激素类抗癌药物无效，病人愈后差，ER、PR阳性而癌基因阴性的患者对激素类抗癌药物疗效甚好。
3.7 如何采取科研标本 科研人员采取标本应扇形切取病变区域，这样即可以取到病变的中心、交界处病变和正常组织，又利于病理诊断。
4 病理诊断报告的基本形式和组成部分〔3〕
4.1 病理报告有4类基本形式 ①完全肯定的诊断：凡能用肉眼或镜下辨认出器官、组织，且病变性质明确给予肯定诊断。诊断格式为：器官(组织)名称加疾病名。如病变性质明确但无从辨认器官组织者，根据临床提供的资料，将取材部位用括弧写明。如(宫颈)鳞状细胞癌。②不能完全肯定的诊断：所见病变不够典型、不明显或无特异性时用之，此类诊断可信度略有差异，仅供临床参考，必要时再检。诊断格式为：病变符合……，考虑为……，可能为……，不排除……等。如(腹膜后)恶性肿瘤可能为平滑肌肉瘤。③描述性诊断：所见病变无特异性，不能给以简明的疾病名称诊断时，可用对其病变的描述作为诊断。如(胃吻合口)炎性肉芽组织。④阴性诊断：因送检组织过小或固定不良组织自溶，未见病理变化时用之。
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4.2 病理诊断报告的组成部分 ①主要部分：是病理报告的主要内容，不可缺少，它可以独立存在。②辅助部分：为完全表达病变的类型、恶性肿瘤的分化程度和侵犯程度以及伴随病变需要在主要诊断上附加一些辅助部分以补充不足。
〔作者简介〕 王银萍(1962-)，女，吉林省长春市人，副主任医师，医学博士，主要从事癌症的生物学研究。
〔参考文献〕
〔1〕陈东真.手术中病理诊断〔M〕.北京：人民军医出版社，1994.1～8.
〔2〕谭郁彬.内分泌肿瘤的病理诊断问题〔J〕.诊断病理学杂志，1995，2(1)：44～45.
〔3〕李维华.怎样书写病理诊断报告〔J〕.诊断病理学杂志，1995，2(1)：60～61.
〔收稿日期〕 1999-06-11, http://www.100md.com
单位：王银萍(第一临床学院 病理科 吉林 长春130021)；冯丽华(第一临床学院 妇产科)
关键词：组织标本；采取；处理；方法
白求恩医科大学学报000220
〔中图分类号〕 R446.8
〔文献标识码〕 B
〔文章编号〕 0253-3707(2000)02-0160-02
近年来从国外引进许多先进的实验室检测技术和诊断方法，但是临床病理诊断仍然是最重要的“定性诊断”方法，是临床制定治疗措施和判断预后的重要依据。由于医学的发展使临床医生和病理医生有时对某些问题的理解有很大的差别，从而影响了对患者的治疗，甚至产生不良结果，也可因标本的采取部位和处理不当，直接影响病理医生做出准确的诊断。
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1 标本的固定
正确的病理诊断需要有高质量的切片，正确的标本固定是制成高质量切片的第一步。如果组织自溶、结构破坏、细胞变形，就无法诊断，而且这是无法补救的一步。
常用的固定液有10%福尔马林，80%酒精、丙酮、戊二醛、醋酸。10%福尔马林的渗透组织能力为1 mm/h，所以一般标本均需固定数小时，较大标本(直径大于6 cm)沿最大径切开后应固定24 h，腔状器官剪开后铺平(粘膜面向上)，在大的容器内固定，表面覆以侵有固定液的湿纱布或湿棉花。小组织(直径小于2 cm)装在小瓶内固定以防丢失，囊性标本勿剖开以防上皮脱落。盛标本的容器口径应大于标本的直径。固定液的体积应10倍于标本的体积。
较大标本的固定方法：消化道沿系膜和胃大弯剖开；肺沿支气管树的冠状面剖开；子宫应从前面剖开宫腔固定内膜，以最大径剖开子宫的肿物；从外缘向肾门方向剖开肾脏；肝脾可沿最长径平行切开；眼球应开窗固定，在巩膜处剪开一小口，使固定液流入眼球内。
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10%福尔马林配制：市销36%福尔马林1份加9份蒸馏水。用于分子生物学和免疫组化研究的标本应用中性福尔马林固定。
2 关于快速冰冻问题
2.1 快速冰冻的用途 决定病变的性质；确定切除肿瘤边缘是否有残留的癌组织；辨认组织；确定有无淋巴结转移。
2.2 快速冰冻有下列局限性 ①切片质量差，准确性可达97%〔1〕。②不适用于骨、脂肪和淋巴结非转移性病变的诊断。前两者因为组织坚硬和难以冷冻不能切片。淋巴瘤在石蜡切片上诊断都很困难。③疑难病变和变界性病变在石蜡切片上都很难诊断，需借助于免疫组化和电镜来诊断，因此要延缓诊断。
2.3 临床医生在送检标本时注意事项 ①组织忌放在生理盐水、福尔马林或水中，应该用干纱布包裹组织，尤其脑组织，否则在制片中形成冰晶使切片上有大量空泡和网状结构无法诊断。②尽可能提供全面的临床资料，尤其是肿瘤的确切部位。如脑肿瘤位于髓内还是髓外，病理诊断大不相同。③认真填写手术所见。因为临床医生手术所见实际上就是病理医生的大体检查。需要描写的内容有：病灶的大小、形状、质地、颜色、有无包膜、包膜是否完整，与周围组织是否粘连，是否有出血、坏死、渗出、钙化、囊性变等。④手术送检组织尽可能取靠近病变中心的组织。例如，临床疑为乳腺癌送检冰冻时，病变中心可能是典型的癌，而周围的组织可能是导管上皮高度伴不典型增生。有些器官或组织的肿物尽可能将肿物全部切除送检。
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2.4 病理医生延迟冰冻诊断报告的原则 一些疑难病例当缺乏足够的组织学改变依据时；病理诊断与临床诊断有原则性分歧时；病理医生们存在原则性分歧时；发现有特殊疑点时，应与临床医生讨论，待石蜡切片再做出诊断。
3 临床活检中常见的特殊问题
3.1 内分泌系统肿瘤〔2〕 该系统肿瘤的共同特点是生物学行为和形态学表现不相一致。形态学上表现为良性而生物学上常常表现为恶性，因此腺瘤和腺癌鉴别较难。确定良恶性主要根据侵犯行为和转移，因此临床医生在送检该系统肿瘤时一定要带包膜及包膜外周边组织和附近肿大的淋巴结。
3.2 淋巴结淋巴瘤活检 淋巴瘤常引起一组淋巴结肿大，肿大的淋巴结大小不一，其形态学改变也不一样，从而病理诊断结果显然也不一样。如有大、中、小三个肿大的淋巴结，当最大的淋巴结的形态学表现为典型的淋巴瘤时，中等大小的淋巴结就可能是可疑淋巴瘤，而最小的淋巴结则为反应性增生。
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3.3 息肉癌变 消化道息肉常有癌变，息肉癌变常发生在表面和基底部。基底部癌变对于判断病变的范围和浸润深度有极其重要的意义。如果怀疑息肉有癌变，应切取完整息肉作检查。
3.4 轻度、中度和重度不典型增生 病变伴有轻度不典型增生，要求病人在半年之内必需再复查；中度不典型增生，要求病人在3个月内复查；重度不典型增生，要求病人立即复查或按原位癌处理。如果临床高度怀疑癌而病理报告为不典型增生，应再取病理标本或密切注意随访。
3.5 子宫内膜活检 宫内膜的形态反映了女性激素水平的改变，它受许多因素的影响，各种因素引起的内膜改变是不一样的，因此送检时应注明患者是处于青春期、哺乳期或妊娠期，是否服用避孕药或其它性激素药物。阴道不规则流血是子宫内膜送检的最常见原因，引起流血的因素很多，子宫内膜增生过长是最常见的因素之一，它分为四型：即单纯性、腺囊性、腺瘤性和不典型增生过长，前二者为良性病变，腺瘤性为交界性病变，后者为癌前病变或按原位癌处理。诊断此病时，年龄是重要指标，同一形态改变对青年未育患者的诊断标准可以适当放宽，而对绝经后的患者就要严肃对待。资料完整的申请单对病理诊断十分重要。
, 百拇医药
3.6 乳腺癌雌孕激素受体(ER、PR)和癌基因C-erbB-2(P185)的检测 该检测对指导化疗具有重要意义。三者均为阳性的患者对激素类抗癌药物无效，病人愈后差，ER、PR阳性而癌基因阴性的患者对激素类抗癌药物疗效甚好。
3.7 如何采取科研标本 科研人员采取标本应扇形切取病变区域，这样即可以取到病变的中心、交界处病变和正常组织，又利于病理诊断。
4 病理诊断报告的基本形式和组成部分〔3〕
4.1 病理报告有4类基本形式 ①完全肯定的诊断：凡能用肉眼或镜下辨认出器官、组织，且病变性质明确给予肯定诊断。诊断格式为：器官(组织)名称加疾病名。如病变性质明确但无从辨认器官组织者，根据临床提供的资料，将取材部位用括弧写明。如(宫颈)鳞状细胞癌。②不能完全肯定的诊断：所见病变不够典型、不明显或无特异性时用之，此类诊断可信度略有差异，仅供临床参考，必要时再检。诊断格式为：病变符合……，考虑为……，可能为……，不排除……等。如(腹膜后)恶性肿瘤可能为平滑肌肉瘤。③描述性诊断：所见病变无特异性，不能给以简明的疾病名称诊断时，可用对其病变的描述作为诊断。如(胃吻合口)炎性肉芽组织。④阴性诊断：因送检组织过小或固定不良组织自溶，未见病理变化时用之。
, http://www.100md.com
4.2 病理诊断报告的组成部分 ①主要部分：是病理报告的主要内容，不可缺少，它可以独立存在。②辅助部分：为完全表达病变的类型、恶性肿瘤的分化程度和侵犯程度以及伴随病变需要在主要诊断上附加一些辅助部分以补充不足。
〔作者简介〕 王银萍(1962-)，女，吉林省长春市人，副主任医师，医学博士，主要从事癌症的生物学研究。
〔参考文献〕
〔1〕陈东真.手术中病理诊断〔M〕.北京：人民军医出版社，1994.1～8.
〔2〕谭郁彬.内分泌肿瘤的病理诊断问题〔J〕.诊断病理学杂志，1995，2(1)：44～45.
〔3〕李维华.怎样书写病理诊断报告〔J〕.诊断病理学杂志，1995，2(1)：60～61.
〔收稿日期〕 1999-06-11, http://www.100md.com