当归补血汤的镇痛作用
作者：尹艳艳 王宇翎 江勤 张三军 明亮
单位：安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032
关键词：当归补血汤；药理学；镇痛；小鼠
安徽医科大学学报报000511
摘要 目的 研究当归补血汤的镇痛作用。 方法 采用小鼠扭体法、小鼠热水缩尾法、小鼠热板法及小鼠福尔马林实验。 结果 当归补血汤(2、4 g.kg-1*d-1， 3 d,ig)可明显抑制小鼠扭体反应，抑制小鼠福尔马林实验Ⅱ相反应， 明显延长小鼠热水缩尾和热板舔足反应潜伏期。结论 当归补血汤具有镇痛作用。
中图分类号 R289.5 文献标识码 A
文章编号 1000-1492(2000)05-0355-02
, http://www.100md.com
当归补血汤为历代名方，以当归、黄芪为主要成分，具有多种药理作用，对肾病综合征 、慢性肾炎、心肌损伤、肝脏损伤等有防治作用〔1，2〕,当归、黄芪为临床上常用的名贵中药，具有补血补气、免疫调节等作用，近年来研究表明黄芪还具有抗衰老、护肝等作用〔3〕。本实验研究了当归补血汤的镇痛作用，期望为拓宽其临床用途提供理论依据。
1 材料
1.1 实验动物 昆明种小鼠,20 g±2 g,热板法用♀小鼠,其他实验♂♀各半。由安徽医科大学实验动物中心(皖医实动准第01号)提供。
1.2 药品 当归补血汤：本室自制( 每克浸膏含生药当归8.025 g、生药黄芪1.605 g)，批号991013。吲哚美辛(IM)：安徽医科大学临床药理研究所赠送，用时以羟甲基纤维素钠配成混悬液。福尔马林：AR级，上海溶剂厂提供，批号940508。冰醋酸(acetic acid)：AR级，蚌埠化学试剂厂产品，批号920610。
, http://www.100md.com
1.3 仪器 电子分析天平，上海天平仪器厂产品。超级恒温水浴(GS-501型)，重庆实验设备厂生产。电热恒温水浴锅，上海医疗器械二厂产品。
2 方法
2.1 实验分组和给药方式 小鼠随机分为5组：对照组(蒸馏水)、阳性对照组(IM)、当归补血汤组(1、2、4 g.kg-1*d-1)，每组10只。连续灌胃3天，第3天灌胃后1 h开始实验。
2.2 小鼠扭体法(acetic acid writhing test)〔4〕 实验小鼠ip 0.1 mol*L-1冰醋酸10 ml*kg-1致扭体，记录15 min内扭体次数。
2.3 小鼠福尔马林实验(formalin test)〔5〕 实验小鼠右足底皮下注射(implanter injection)1.67 mol*L-1福尔马林10 μl后，立即置于20 cm 玻璃缸中，记录累计舔足时间(licking time, LT)为疼痛指标，在0～5 min及15～35 min两个时间段记录，分别代表Ⅰ相和Ⅱ相疼痛指标。
, http://www.100md.com
2.4 小鼠热水缩尾法(tail-immersion test,TIT)〔4〕 将实验小鼠尾浸入48℃恒温水浴5 cm,记录缩尾潜伏期(tail-curl latency,TCL)为痛阈指标,给药前测两次(间隔5 min),以其均值作为基础痛阈,剔除过敏或迟钝动物(TCL<5s或>30s者)。
2.5 小鼠热板法(hot plate)〔4〕 将♀小鼠置于55℃±0.5℃的金属板上,以小鼠舔后足为疼痛反应信号,以疼痛反应潜伏期为痛阈指标,给药前测两次(间隔5 min),以其均值作为基础痛阈,剔除过敏(<5 s)或迟钝动物(>30 s)。
2.6 统计学处理 各组实验数据均以
±s表示，组间比较采用t检验。
3 结果
, 百拇医药
3.1 当归补血汤对小鼠扭体反应的影响 表1结果表明，当归补血汤(1、2、4 g.kg-1)均可抑制小鼠扭体反应。
表1 当归补血汤对小鼠扭体反应的抑制作用(±s,n=10)
组别
剂量(g.kg-1)
15 min扭体次数
对照
-
31.8±10.0
, http://www.100md.com IM
0.002
14.2±3.6**
当归补血汤
1
25.8±4.7
2
15.3±4.0**
4
14.6±3.5**
与对照组比较：**P<0.01
, http://www.100md.com 3.2 当归补血汤对小鼠福尔马林实验的影响 表2结果显示，3种剂量的当归补血汤均可显著抑制Ⅱ相反应，而对Ⅰ相反应无明显作用。
表2 当归补血汤对小鼠福尔马林实验的抑制作用(±s,n=10)
组别
剂量(g.kg-1)
Ⅰ相反应(s)
Ⅱ相反应(s)
对照
-
34.3±12.7
, http://www.100md.com
116.0±14.6
IM
0.002
30.8±9.8
61.4±8.8**
当归补血汤
1
38.3±10.2
94.1±21.9
2
32.7±10.8
82.2±21.2*
, 百拇医药
4
37.7±13.5
58.2±17.3**
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.01
3.3 当归补血汤对小鼠热水缩尾法的影响 图1结果表明-1)可延长小鼠缩尾潜伏期。给药后1h时镇痛作用最强。
图1 当归补血汤对小鼠热水缩尾法的影响(±s,n=10)
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.01
, http://www.100md.com
3.4 当归补血汤对小鼠热板法的影响 表3结果显示，当归补血汤(2、4 g.kg-1)可明显延长小鼠热板舔足反应潜伏期。
4 讨论
伤害性刺激通过复杂的生理、心理反射过程引起疼痛。目前常用的致痛方法有物理性和化学性刺激法，本研究采用4种物理性和化学性刺激法，观察了当归补血汤的镇痛作用。实验结果表明其能明显抑制小鼠扭体反应，抑制小鼠福尔马林实验Ⅱ相反应，延长小鼠热水缩尾和热板舔足反应潜伏期，提示此药有一定的镇痛作用。福尔马林致痛模型是目前公认的一种较好的研究药物镇痛作用的模型〔5〕，其特点是疼痛分为两个时相，Ⅰ相是由于直接刺激外周神经末梢所致，Ⅱ相则主要为炎症介质的产生、释放引起。本研究实验结果表明当归补血汤可明显抑制Ⅱ相反应，但对Ⅰ相反应无明显作用，从而提示此药对由炎症介质产生释放而引起的继发炎性疼痛有一定的镇痛作用，其镇痛机制有待进一步研究。
, 百拇医药
表3 当归补血汤对小鼠热板舔足
反应潜伏期的影响(x±s,n=10)
组别
剂量(g.kg-1)
舔足反应潜伏期(s)
给药前
给药后1 h
对照
-
22.5±3.4
20.5±4.1
, 百拇医药 IM
0.002
17.6±2.5
31.0±5.3**
当归补血汤
1
19.4±2.6
22.1±7.0
2
21.6±2.3
24.5±1.3*
4
, 百拇医药
20.2±3.2
28.1±4.1**
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.01
The analgesic effect of angelic enrich blood soup
Yin Yanyan， Wang Yuling， Jiang Qin et al
(Dept of Pharmacology ,Anhui Medical University, Hefei 230032)
Abstract Objective To study the analgesic effect of angelic enrich blood soup(AEBS). Methods The analgesic effects were studied by the writhing, tail-immersion test , formalin test , and hot plate tests in mice. Results AEBS(2, 4 g.kg-1*d-1, 3 d,ig) could significantly decrease the freqency of writhings, and licking time(Ⅱ) of formalin test; AEBS could also delay the latent period of hot plate and tail-curl latency. Conclusion AEBS has analgesic effect.
, 百拇医药
MeSH duangui buxue decoction/pharmacol;analgesia; mice
作者简介：尹艳艳，女，26岁，助教；明亮，女，52岁，教授
参考文献
1，丁炜,例惊子,邹万忠.黄芪当归合剂对肾病综合征鼠肾转化因子β1的影响.中华肾脏病杂志,1998;14(4)：229～232
2，庄学煊, 李长潮，陈少如. 当归注射液对大鼠心肌缺血再灌注时心律失常的保护作用. 中西医结合杂志,1991;11(6):360～361
3，阴健,郭力弓主编.中药现代研究与临床应用. 第1版，北京：学苑出版社,1993:592～602
4，赵明敏. 镇痛药物实验法. 见：徐叔云，卞如濂，陈修主编. 药理实验方法学.第2版， 北京：人民卫生出版社，1991：695～701
5，Hunskaar S, Hole K. The formalin test in mice, dissociation between inflammatory and non inflammatory pain. Pain, 1987;30(1):103～114
2000-03-17收稿
2000-04-03修回, 百拇医药
单位：安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032
关键词：当归补血汤；药理学；镇痛；小鼠
安徽医科大学学报报000511
摘要 目的 研究当归补血汤的镇痛作用。 方法 采用小鼠扭体法、小鼠热水缩尾法、小鼠热板法及小鼠福尔马林实验。 结果 当归补血汤(2、4 g.kg-1*d-1， 3 d,ig)可明显抑制小鼠扭体反应，抑制小鼠福尔马林实验Ⅱ相反应， 明显延长小鼠热水缩尾和热板舔足反应潜伏期。结论 当归补血汤具有镇痛作用。
中图分类号 R289.5 文献标识码 A
文章编号 1000-1492(2000)05-0355-02
, http://www.100md.com
当归补血汤为历代名方，以当归、黄芪为主要成分，具有多种药理作用，对肾病综合征 、慢性肾炎、心肌损伤、肝脏损伤等有防治作用〔1，2〕,当归、黄芪为临床上常用的名贵中药，具有补血补气、免疫调节等作用，近年来研究表明黄芪还具有抗衰老、护肝等作用〔3〕。本实验研究了当归补血汤的镇痛作用，期望为拓宽其临床用途提供理论依据。
1 材料
1.1 实验动物 昆明种小鼠,20 g±2 g,热板法用♀小鼠,其他实验♂♀各半。由安徽医科大学实验动物中心(皖医实动准第01号)提供。
1.2 药品 当归补血汤：本室自制( 每克浸膏含生药当归8.025 g、生药黄芪1.605 g)，批号991013。吲哚美辛(IM)：安徽医科大学临床药理研究所赠送，用时以羟甲基纤维素钠配成混悬液。福尔马林：AR级，上海溶剂厂提供，批号940508。冰醋酸(acetic acid)：AR级，蚌埠化学试剂厂产品，批号920610。
, http://www.100md.com
1.3 仪器 电子分析天平，上海天平仪器厂产品。超级恒温水浴(GS-501型)，重庆实验设备厂生产。电热恒温水浴锅，上海医疗器械二厂产品。
2 方法
2.1 实验分组和给药方式 小鼠随机分为5组：对照组(蒸馏水)、阳性对照组(IM)、当归补血汤组(1、2、4 g.kg-1*d-1)，每组10只。连续灌胃3天，第3天灌胃后1 h开始实验。
2.2 小鼠扭体法(acetic acid writhing test)〔4〕 实验小鼠ip 0.1 mol*L-1冰醋酸10 ml*kg-1致扭体，记录15 min内扭体次数。
2.3 小鼠福尔马林实验(formalin test)〔5〕 实验小鼠右足底皮下注射(implanter injection)1.67 mol*L-1福尔马林10 μl后，立即置于20 cm 玻璃缸中，记录累计舔足时间(licking time, LT)为疼痛指标，在0～5 min及15～35 min两个时间段记录，分别代表Ⅰ相和Ⅱ相疼痛指标。
, http://www.100md.com
2.4 小鼠热水缩尾法(tail-immersion test,TIT)〔4〕 将实验小鼠尾浸入48℃恒温水浴5 cm,记录缩尾潜伏期(tail-curl latency,TCL)为痛阈指标,给药前测两次(间隔5 min),以其均值作为基础痛阈,剔除过敏或迟钝动物(TCL<5s或>30s者)。
2.5 小鼠热板法(hot plate)〔4〕 将♀小鼠置于55℃±0.5℃的金属板上,以小鼠舔后足为疼痛反应信号,以疼痛反应潜伏期为痛阈指标,给药前测两次(间隔5 min),以其均值作为基础痛阈,剔除过敏(<5 s)或迟钝动物(>30 s)。
2.6 统计学处理 各组实验数据均以
±s表示，组间比较采用t检验。3 结果
, 百拇医药
3.1 当归补血汤对小鼠扭体反应的影响 表1结果表明，当归补血汤(1、2、4 g.kg-1)均可抑制小鼠扭体反应。
表1 当归补血汤对小鼠扭体反应的抑制作用(
±s,n=10)组别
剂量(g.kg-1)
15 min扭体次数
对照
-
31.8±10.0
, http://www.100md.com IM
0.002
14.2±3.6**
当归补血汤
1
25.8±4.7
2
15.3±4.0**
4
14.6±3.5**
与对照组比较：**P<0.01
, http://www.100md.com 3.2 当归补血汤对小鼠福尔马林实验的影响 表2结果显示，3种剂量的当归补血汤均可显著抑制Ⅱ相反应，而对Ⅰ相反应无明显作用。
表2 当归补血汤对小鼠福尔马林实验的抑制作用(
±s,n=10)组别
剂量(g.kg-1)
Ⅰ相反应(s)
Ⅱ相反应(s)
对照
-
34.3±12.7
, http://www.100md.com
116.0±14.6
IM
0.002
30.8±9.8
61.4±8.8**
当归补血汤
1
38.3±10.2
94.1±21.9
2
32.7±10.8
82.2±21.2*
, 百拇医药
4
37.7±13.5
58.2±17.3**
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.01
3.3 当归补血汤对小鼠热水缩尾法的影响 图1结果表明-1)可延长小鼠缩尾潜伏期。给药后1h时镇痛作用最强。
图1 当归补血汤对小鼠热水缩尾法的影响(
±s,n=10)与对照组比较：*P<0.05，**P<0.01
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3.4 当归补血汤对小鼠热板法的影响 表3结果显示，当归补血汤(2、4 g.kg-1)可明显延长小鼠热板舔足反应潜伏期。
4 讨论
伤害性刺激通过复杂的生理、心理反射过程引起疼痛。目前常用的致痛方法有物理性和化学性刺激法，本研究采用4种物理性和化学性刺激法，观察了当归补血汤的镇痛作用。实验结果表明其能明显抑制小鼠扭体反应，抑制小鼠福尔马林实验Ⅱ相反应，延长小鼠热水缩尾和热板舔足反应潜伏期，提示此药有一定的镇痛作用。福尔马林致痛模型是目前公认的一种较好的研究药物镇痛作用的模型〔5〕，其特点是疼痛分为两个时相，Ⅰ相是由于直接刺激外周神经末梢所致，Ⅱ相则主要为炎症介质的产生、释放引起。本研究实验结果表明当归补血汤可明显抑制Ⅱ相反应，但对Ⅰ相反应无明显作用，从而提示此药对由炎症介质产生释放而引起的继发炎性疼痛有一定的镇痛作用，其镇痛机制有待进一步研究。
, 百拇医药
表3 当归补血汤对小鼠热板舔足
反应潜伏期的影响(x±s,n=10)
组别
剂量(g.kg-1)
舔足反应潜伏期(s)
给药前
给药后1 h
对照
-
22.5±3.4
20.5±4.1
, 百拇医药 IM
0.002
17.6±2.5
31.0±5.3**
当归补血汤
1
19.4±2.6
22.1±7.0
2
21.6±2.3
24.5±1.3*
4
, 百拇医药
20.2±3.2
28.1±4.1**
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.01
The analgesic effect of angelic enrich blood soup
Yin Yanyan， Wang Yuling， Jiang Qin et al
(Dept of Pharmacology ,Anhui Medical University, Hefei 230032)
Abstract Objective To study the analgesic effect of angelic enrich blood soup(AEBS). Methods The analgesic effects were studied by the writhing, tail-immersion test , formalin test , and hot plate tests in mice. Results AEBS(2, 4 g.kg-1*d-1, 3 d,ig) could significantly decrease the freqency of writhings, and licking time(Ⅱ) of formalin test; AEBS could also delay the latent period of hot plate and tail-curl latency. Conclusion AEBS has analgesic effect.
, 百拇医药
MeSH duangui buxue decoction/pharmacol;analgesia; mice
作者简介：尹艳艳，女，26岁，助教；明亮，女，52岁，教授
参考文献
1，丁炜,例惊子,邹万忠.黄芪当归合剂对肾病综合征鼠肾转化因子β1的影响.中华肾脏病杂志,1998;14(4)：229～232
2，庄学煊, 李长潮，陈少如. 当归注射液对大鼠心肌缺血再灌注时心律失常的保护作用. 中西医结合杂志,1991;11(6):360～361
3，阴健,郭力弓主编.中药现代研究与临床应用. 第1版，北京：学苑出版社,1993:592～602
4，赵明敏. 镇痛药物实验法. 见：徐叔云，卞如濂，陈修主编. 药理实验方法学.第2版， 北京：人民卫生出版社，1991：695～701
5，Hunskaar S, Hole K. The formalin test in mice, dissociation between inflammatory and non inflammatory pain. Pain, 1987;30(1):103～114
2000-03-17收稿
2000-04-03修回, 百拇医药