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编号:10280251
荷泽口服液对大白鼠减肥的实验研究
http://www.100md.com 《湖北中医学院学报》 1999年第1期
     作者:王大宪 许培斌

    单位:湖北中医学院附属医院 430061

    关键词:肥胖;动物模型;荷泽口服液;预防;治疗

    湖北中医学院学报/990127 指导:熊先敏 倪群芝

    摘要 对刚断奶的幼小大白鼠喂以高脂高营养饲料,造成大鼠实验性肥胖模型,分别观察中药复方制剂荷泽口服液在大鼠致肥过程中及形成肥胖后对大鼠的影响。两部分实验结果显示,荷泽口服液对大鼠肥胖指数(Lee’s index)、脂肪指数(g/100g体重)及血胆固醇、甘油三脂含量均有降低或抑制其增长作用,且能控制大鼠脂肪细胞体积增大或使增大的脂肪细胞回缩。以上各项指标与肥胖造模组及肥胖模型组相比,其结果在统计学上均有不同程度的差异,而与正常对照组及对照药物天雁减肥茶组相当。整个实验中未发现有不良反应出现。提示一方面荷泽口服液对大鼠肥胖的发生有一定预防作用;另一方面对已形成肥胖的大鼠具有减肥消脂的治疗作用。
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    中国图书分类号 R289.5

    肥胖病患者易发生高血压、糖尿病、动脉硬化、冠心病及胆囊病变,为预防和治疗该病,笔者研制出荷泽口服液的纯中药制剂,观察其对大鼠致肥过程中及形成肥胖后大鼠的影响,并探讨其对肥胖病治疗的作用及机理结果。现报告如下。

    1 实验材料和方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物

    选用Wistar幼大白鼠,日龄为30天左右,体重70~90g之间,雌雄各40只共80只。购自湖北省医学科学院实验动物中心。

    1.1.2 大鼠饲料

    分普通饲料与高营养饲料两种。前者购自湖北省医药工业研究所动物房。后者在每100g普通饲料中再加奶粉、猪油各10g,鸡蛋1个,浓鱼肝油10滴,新鲜黄豆芽250g(切碎)相拌制成固体饲料,烘干而成。
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    1.1.3 实验药物

    天雁减肥茶:由合肥神鹿药业有限公司生产。批准文号:皖卫药准字(85255)号。具有清热利湿,促进脂肪代谢,降低血脂等功能。

    荷泽口服液:即本课题研究药物,由荷叶、泽泻、草决明、苍术、知母、枳实等数味中药组成。由湖北中医学院附属医院药剂科制备。药物浓度为100%,即每ml含1g生药。

    1.1.4 主要仪器

    台式电子秤:100g/0.5g,杭州无线电二厂生产。

    普通天平:100g/0.01g,上海测量仪器厂生产。

    双目多功能显微镜:AD150CNE-T661,美国进口。
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    1.2 实验方法

    本实验分为预防与治疗两个部分。预防部分主要观察大鼠在同时应用高营养饲料与荷泽口服液的情况下,其实验结果是否与用高营养饲料与生理盐水的肥胖造模组在统计学上有差异;治疗部分则观察实验药物对肥胖大鼠的减肥功效。两部分相互衔接,前后各四周时间。

    1.2.1 分组及处理方法

    将80只大鼠随机分为8组,每组10只,雌雄各半。前四组编为A、B、C、D组,供预防部分实验用;后四组编为E、F、G、H组,供治疗部分用。具体分组及处理方法如下:

    A组:正常对照组,喂普通饲料,用生理盐水灌胃(量与中药相同,下同),四周后处死。

    B组:肥胖对照组,喂高营养饲料,用生理盐水灌胃。四周后处死。
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    C组:天雁对照组,喂高营养饲料,用天雁减肥茶灌胃,剂量为0.15ml/10g体重。四周后处死。

    D组:荷泽预防组,喂高营养饲料,用荷泽口服液灌胃,剂量为0.15ml/10g体重。四周后处死。

    E组:正常对照组,前四周喂普通饲料,后四周继续喂普通饲料并用生理盐水灌胃。

    F组:肥胖对照组,前四周喂高营养饲料,后四周改喂普通饲料并用生理盐水灌胃。

    G组:天雁对照组,前四周喂高营养饲料,后四周改喂普通饲料并用天雁减肥茶灌胃,量同前。

    H组:荷泽治疗组,前四周喂高营养饲料,后四周改喂普通饲料并用荷泽口服液灌胃。量同前。

    1.2.2 供应饲料量
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    每天平均每只大鼠饲量从14g开始,每周增加2g,到第四周为20g/只/天,第二阶段则给予25g/只/天。每天吃完为止,不再添食,饮水不限。

    1.2.3 药物用量

    将天雁减肥茶与荷泽口服液按儿童用量换算成不同体重的大鼠用量。前者以每10g减肥茶兑100ml开水泡半小时而成的茶给予(按0.15ml/10g体重),后者则直接以口服液形式给予(按0.15ml/10g体重),每天一次。

    1.3 实验指标与观察方法

    1.3.1 实验指标

    一般状况:包括饮食、粪便、活动及体能测试(游泳试验)。

    生长指标检测值:实验初体重,实验末体重与体长,肥胖指数(LI=×103/身长)。
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    脂肪代谢观察值:脂肪指数(g/100g体重)、脂肪细胞大小、数目测定及血胆固醇、甘油三酯含量测定。

    1.3.2 观察方法

    每只大鼠每周称重一次。实验期间随时观察大鼠每天的饮食情况,精神活动及粪便干稀程度。在每一部分实验结束时,即第四周末和第八周末,分别对相应的实验动物组进行处理:空腹称大鼠体重,每组取居于本组体重均值水平的二只大鼠做游泳耐力负荷试验。方法是投入水内开始,用秒表计算至大鼠死亡,即为大鼠游泳时间。为缩短观察时间,于大鼠尾部吊相当体重10%的重量。其余大鼠用2%戊巴比妥钠50mg/kg腹腔注射麻醉,眼球取血,测体长(鼻至肛门长度)。将鼠颈椎脱臼处死,剥离出生殖器周围全部脂肪,称脂重。再在剥离出的脂肪中取一小块脂肪组织,用10%甲醛固定,石蜡切片,在400倍显微镜下计数全视野中脂肪细胞个数,并用测微器测脂肪细胞大小。此外将所取得的血液立即分离出血清,测甘油三酯(用乙酰丙酮法)和胆固醇(用磷酸铁法)。
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    1.3.3 统计方法

    各组结果首先进行方差齐性检验,方差齐者用F检验比较组间异同;方差不齐者,用近似F检验。如组间差异显著,用q检验进行样本均数的两两比较。

    2 实验结果与分析

    表1 大鼠生长指标测定值(+SD) 组 别

    n

    实验初体重(g)

    实验后体重(g)

    实验后体长(cm)

    肥胖指数
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    A(正常对照组)

    8

    79.1±14.9

    140.1±21.3**

    17.7±0.95

    296.5±13.5*

    B(造模对照组)

    8

    78.6±13.1

    183.3±18.8

    18.3±1.22

    313.2±16.2
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    C(天雁对照组)

    7

    78.3±12.1

    120.9±15.0**

    17.2±1.08

    287.5±10.8**

    D(荷泽预防组)

    7

    76.8±10.3

    124.4±19.6**

    17.3±0.91

    288.6±15.3**
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    *P<0.05,**P<00.1(与B比较);A、D间P>0.55,C、D间P>0.55

    2.1 荷泽口服液对高营养所致大鼠肥胖的预防作用 参见表1、表2。

    表1示,实验初经随机处理后的各组间体重差别无显著性(F=0.05,P>0.05),但经过四周的肥胖造模及预防用药实验后,大鼠体重则出现了较大变化。B组即肥胖造模组体重明显高于用药组及正常组(P<0.01),而相互间体长差别无显著性(F=1.38,P>0.05)。肥胖指数的差别与体重变化情况大致相似,造模组与正常组差别有显著意义(P<0.05),与用药组差别有高度显著意义(P<0.01),而C与D间各项指标差别均无显著意义(P>0.05)。 表2 大鼠脂肪代谢测定值(+SD) 组 别

    n
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    脂肪指数

    (g/100g体重)

    脂肪细胞数

    /HBF

    脂肪细胞

    大小(um)

    胆固醇

    (mmol/L)

    甘油三酯

    (mmol/L)

    A(正常对照组)

    8

    0.51±0.16**
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    112.4±12.01**

    28.4±8.10*

    1.47±0.32*

    0.90±0.44

    B(造模对照组)

    8

    0.82±0.20

    80.5±11.73

    38.6±7.02

    2.19±0.75

    1.45±0.46

    C(天雁对照组)
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    7

    0.37±0.21**△

    132.2±11.41**△

    23.0±7.38**

    1.65±0.24*

    0.92±0.41

    D(荷泽预防组)

    7

    0.36±0.17**

    132.3±12.60**△

    24.5±7.51**

    1.57±0.36*
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    0.83±0.37*

    *P<0.05,**P<0.01(与B比较),△P<0.05(与A比较);C与D间P>0.05。 表2示,单位体重内(100g体重)造模对照组大鼠体内所含脂肪量最多,与正常对照组及用药组比较P<0.01且脂肪细胞较大,与其余三组比较均有高度显著意义(P<0.01),每高倍镜下脂肪细胞数偏小,其统计学差别见上表,造模组血胆固醇含量亦较其它组为高(P<0.05),血甘油三酯含量偏高,与荷泽预防组比较P<0.05,与正常及天雁对照组间P>0.05。

    2.2 荷泽口服液对肥胖大鼠的治疗作用 参见表3、表4。

    表3 大鼠生长指标测定值(+SD) 组 别

    n
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    实验初体重(g)

    实验后体重(g)

    实验后体长(cm)

    肥胖指数

    E(正常对照组)

    8

    141.8±25.1

    234.8±25.8

    20.5±1.04

    300.9±6.07*

    F(肥胖对照组)

    7
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    186.6±17.5△

    279.8±15.9

    20.8±1.36

    314.5±10.40

    G(天雁对照组)

    7

    185.3±15.4△

    210.9±19.7**△

    19.9±1.13

    299.1±6.08*

    H(荷泽治疗组)

    8
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    187.8±20.1△

    206.0±28.6**△

    19.8±1.22

    298.3±8.63*

    *P<0.05,**P<0.01(与F比较),△P<0.05(与E比较);G与H间P>0.05。

    表3示,治疗阶段实验开始时,F、G、H组体重基本一致,差别无显著性(P>0.05),而高出E组约25%左右,差别有显著意义(P<0.05)。经过4周的药物治疗之后,G、H体重比E略低(P<0.05)而明显低于F(P<0.01),各组体长差异仍然无显著意义(P>0.05)。而肥胖指数仍以F组为最高,与E、G、H间均有显著意义差别(P<0.05)。

    4 大鼠脂肪代谢测定值(+SD) 组 别
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    n

    脂肪指数

    (g/100g体重)

    脂肪细胞数

    /HBF

    脂肪细胞

    大小(cm)

    胆固醇

    (mmol/L)

    甘油三酯

    (mmol/L)

    E(正常对照组)

    8
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    0.79±0.20*

    110.2±12.51*

    29.0±7.72**

    1.85±0.56

    0.57±0.15

    F(肥胖对照组)

    7

    1.02±0.22

    82.5±12.56

    39.7±7.18

    1.78±0.42

    0.41±0.17
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    G(天雁对照组)

    7

    0.57±0.18**△

    129.2±12.82**

    25.2±8.78*

    1.82±0.38

    0.55±0.15

    H(荷泽对照组)

    8

    0.61±0.10**△

    122.6±13.30**

    26.6±8.55*
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    1.76±0.29

    0.54±0.11

    *P<0.05,**P<0.01(与F比较),△P<0.05(与E比较);G与H间P>0.05。

    表4示,在治疗阶段肥胖组脂肪指数没有因给予普通饲料喂养而下降,相反仍维持在一个较高水平,其与各组差别见上表,而药物治疗组体脂则下降到较低水平,甚至低于正常对照组(P<0.05),治疗组脂肪细胞体积较肥胖组缩小(P<0.05),而每高倍镜下所见脂肪细胞数增多(P<0.01),值得一提的是经过治疗阶段实验后的各组大鼠血胆固醇及甘油三酯含量都处于一个较低状态,彼此差异均无显著意义(P>0.05),这可能与大鼠由高脂高营养饲料改为普通饲料后,其高血脂状态存在一个自然恢复过程有关。

    3 讨论

    从中医理论分析,肥胖症多由脾胃失运,气机失调以及嗜食肥甘厚味,脂质类摄入过多引起,二者互为因果,导致运化失司,影响水谷精微的正常代谢,造成痰湿瘀浊滋生,脂质沉积,形成肥胖。故有“肥人形盛气衰”、“肥人多湿”、“肥人多痰”之说。现代医学研究表明,肥胖者体内脂肪组织增多,脂肪细胞体积增大且往往伴有高脂血症,这与中医辨证所属脾虚痰湿型、胃热湿阻型[1]是相吻合的。提示脾胃在脂质代谢中的重要地位,从而使我们加深理解中医关于肥胖因“痰湿瘀积”的含义,并可提供中西医结合分型防治肥胖症的客观依据。
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    在临床上,对于肥胖症的防治,不少学者作了许多探讨。通常按国际标准,减肥保健药物必须达到三个要求:即不厌食、不腹泻、减低体重且不降低体力。

    荷泽口服液由苍术、知母、枳实、山楂、荷叶、泽泻、草决明等数味中药组成。其组成主要针对儿童单纯性肥胖症之胃强脾弱,脾胃不和。此症具有一方面多食善饥、且喜食膏粱厚味之丰腴食品,另一方面脾失健运、导致食积痰湿瘀阻的病理特征。故在治则上以调和脾胃、化痰祛湿消导为主,佐以平和清热及升清降浊之品。

    本实验研究表明,荷泽口服液对于预防肥胖的发生有一定作用。本方能控制饲以高脂、高蛋白饮食的大鼠体重的增长,与造模组比较,体重有明显差异(P<0.01),且体重的减轻主要是靠对致肥大鼠体内的脂肪的消减而产生的。这从肥胖指数,脂肪指数等指标中可以明确反应出来。与造模组相比,荷泽组大鼠肥胖指数低(P<0.05),而肥胖指数是结合体长来考虑的能全面反映大鼠肥胖程度的一个常用指标;再从单位体重的脂肪来看,荷泽组亦明显低于造模组(P<0.01)。此外,血胆固醇与甘油三酯含量亦较造模组低(P<0.05)。
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    其次,荷泽口服液对肥胖大鼠能起到明显的减肥消脂作用。本实验在成功造模的基础上,将肥胖大鼠分为模型对照组与治疗组。观察实验结果,荷泽口服液对肥胖大鼠体重的减轻、体内脂肪的消减等都有明显的作用,较模型对照组均有不同程度的差异(见表4)。尤其从脂肪的病理切片来看,在高倍镜下,每个视野中所见脂肪细胞数,荷泽治疗组明显多于模型对照组,而每个脂肪细胞体积则明显小于模型对照组(P<0.01)。但与天雁对照组及正常对照组接近。

    本实验通过荷泽口服液对大鼠减肥的实验研究,对荷泽口服液的药效学方面有了初步认识。荷泽口服液是根据祖国医学对肥胖症的认识,结合有关人员多年临床实践经验,而研制的一种主要用于防治儿童期单纯性肥胖症的中药复方制剂。该方在组方上既考虑了肥胖症的一般特征,又兼顾了儿童期肥胖的自身特点。通过对大鼠动物实验观察,已初步显示了其良好的应用效果:①对高脂高营养所致的大鼠肥胖有预防作用。②对已形成肥胖的大鼠有减肥消脂的治疗作用。③其对大鼠的减肥效果大致与目前临床上广泛应用的天雁减肥茶相当。④实验中未发现大鼠有明显的不良反应。
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    通过对各项实验指标的分析判定,初步认为本方的减肥机理可能与影响机体脂肪代谢有关。

    参 考 文 献

    1.危北海.单纯性肥胖病的中医结合诊断、疗效标准.中国中西结合杂志,1992,(11):690

    2.原桃介.国外医学中医药分册 1987,(3):21

    3.戴岳.泽泻对谷氨酸钠肥胖对大鼠的影响.中成药,1992,(2):28

    4.钱伯初.花粉营养药理作用研究近况—国内外中医科技进展.上海科技出版社,1991.166

    5.施新猷.大鼠性别年龄的鉴别,医用动物实施方法 北京:人民卫生出版社,1998.38

    6.泰正誉.实验性肥胖动物模型.应用生理学杂志,1985,(4):279

    7.赵晓梅.中药复方水煎剂对大白鼠减肥的实验观察,天津中医,1992,(5):24

    收稿日期:1999-01-29, http://www.100md.com