酵母RAD24基因区域功能分析
作者：李文芹 韩云 朱应葆 傅欣 汪淑荣
单位：北京医科大学第三医院细胞与分子生物学实验室, 北京 100083
关键词：
北京医科大学学报990536 啤酒酵母是人类基因组计划的重要模式生物,其全基因组序列测定通过国际合作已于1996年完成。我们继先前(1993年)克隆出RAD24基因区域DNA大片段后,对照全基因组测序结果进行比较,发现在我们曾预测的RAD24基因编码区存在一个移码突变。为此,我们对该区域进行了再测序,结果证实在我们报道的RAD24基因编码区少了一个碱基。应用plasmid premier基因分析软件对下载的该区域10 kb DNA大片段进行6相开放阅读框(ORF)分析,发现原RAD24基因区域的左侧尚存在一个ORF,命名为RAD24L,于是将原RAD24基因处的ORF改名为RAD24R,预测的编码蛋白质含2 130个氨基酸。应用一步基中断法和质粒交换技术，发现RAD24L缺失突变不影响细胞存活，但生长速度减慢，对紫外线和X线敏感；RAD24R基因缺失则细胞死亡，这与我们以前报道的原RAD24基因缺失的结果是一致的，说明所谓的RAD24基因缺失引起细胞死亡，实际上是由于RAD24R基因缺失所致。我们用功能互补法克隆了RAD24L的人类同源基因hR24L(Genbank No. AF126424)，它参与细胞周期检定点调控，RAD24R的人类同源基因的克隆工作目前正在进行中。
注：国家自然科学基金(39770409)及国家高技术发展计划青年基金资助课题；
朱应葆：联系人。
(1999-07-26收稿), http://www.100md.com
单位：北京医科大学第三医院细胞与分子生物学实验室, 北京 100083
关键词：
北京医科大学学报990536 啤酒酵母是人类基因组计划的重要模式生物,其全基因组序列测定通过国际合作已于1996年完成。我们继先前(1993年)克隆出RAD24基因区域DNA大片段后,对照全基因组测序结果进行比较,发现在我们曾预测的RAD24基因编码区存在一个移码突变。为此,我们对该区域进行了再测序,结果证实在我们报道的RAD24基因编码区少了一个碱基。应用plasmid premier基因分析软件对下载的该区域10 kb DNA大片段进行6相开放阅读框(ORF)分析,发现原RAD24基因区域的左侧尚存在一个ORF,命名为RAD24L,于是将原RAD24基因处的ORF改名为RAD24R,预测的编码蛋白质含2 130个氨基酸。应用一步基中断法和质粒交换技术，发现RAD24L缺失突变不影响细胞存活，但生长速度减慢，对紫外线和X线敏感；RAD24R基因缺失则细胞死亡，这与我们以前报道的原RAD24基因缺失的结果是一致的，说明所谓的RAD24基因缺失引起细胞死亡，实际上是由于RAD24R基因缺失所致。我们用功能互补法克隆了RAD24L的人类同源基因hR24L(Genbank No. AF126424)，它参与细胞周期检定点调控，RAD24R的人类同源基因的克隆工作目前正在进行中。
注：国家自然科学基金(39770409)及国家高技术发展计划青年基金资助课题；
朱应葆：联系人。
(1999-07-26收稿), http://www.100md.com