降纤酶对大鼠血液流变性影响的研究
作者：张海 王平 顾振纶
单位：苏州医学院药理学教研室 苏州 215007
关键词：降纤酶；血液流变学；大鼠
中国血液流变学杂志000404 摘要 目的 旨的观察降纤酶对大鼠急性高粘血症血液流变性的影响。
方法 将SD大鼠40只分为5组，即正常对照组、高粘血症模型组、降纤酶大剂量组(0.8u/kg)、降纤酶小剂量组(0.4u/kg)、丹参阳性对照组(0.72g/kg)，用皮下注射肾上腺素加冷水浴刺激做高粘血症模型。结果 降纤酶能非常显著地降低全血低切粘度(ηbL)、高切粘度(ηbH)、血浆纤维蛋白原浓度(PFC)、血浆粘度(ηP)、全血低切还原粘度(ηrL)，并能显著降低红细胞压积(Hct)、全血高切还原粘度(ηrH)、红细胞聚集指数(EAI)，但对红细胞刚性指数(ERI)无影响。而丹参仅能轻度降低ηbL、ηP、HCT及PFC。结论 提示降纤酶能改善高粘血症血液流变学特性，可用来防治冠心病伴高纤维蛋白原血症。
, 百拇医药
中图分类号 R973+.2 文献标识码 A
STUDY OF EFFECTS OF DEFNBRASE
ON HEMORHEOLOGY IN RATS
ZhangHai Wang Ping Gu Zhenglun
(Institute of Traditional Chinese Medicine,Suzhou,215003)
Abstract Rats were administrated i.v.,by Defibrase 0.8u/kg and 0.4u/kg.The results indicated that Defibrase could remarkably reduce ηbL、ηbH,ηrL,ηP,especially selectively reduce PFC.and it can remarkably reduce Hct,ηrH,EAI but has no effect on ERI.So Defibrase can be used to treat CHD with high PFC.
, 百拇医药
Keywords Defibrase Rat Hemorhelohy
降纤酶(Defibrase,DF)是蛇毒制品，是用现代高科技工艺从蛇毒Svate 3中提取的单组分生物制品，它能选择性降低血浆纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg)，改善血液流变学特性，故用于治疗缺血性心脑血管疾病。本实验就DF对大鼠血液流变性的影响进行了研究，旨在探讨其对心血管疾病的作用机理，为临床提供基础资料。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 降纤酶，由山东中美合资烟台北方制药公司提供，每支5单位，批号为980428-1。
1.1.2 复方丹参注射液，每支2ml，每毫升含丹参和降香各1克，上海第九制药厂生产，批号为990719。
, 百拇医药
1.1.3 肾上腺素注射液，每支1mg(1mg/ml)，由上海禾丰制药公司生产，批号为980702。
1.2 实验动物
SD大鼠，雄性，共40只，体重238±19g，由苏州医学院实验动物中心提供。
1.3 仪器
LBY-N6型旋转式血液流变测定仪，北京普利生集团生产。
1.4 方法
1.4.1 大鼠急性高粘血症模型的制备方法
将SD大鼠40只随机分为5组，每组8只，即正常对照组、高粘血症模型组、DF大剂量组(0.8u/kg)、DF小剂组(0.4u/kg)、丹参阳性对照组(0.72g/kg)。参照文献[1]制备高粘血症模型，即将除正常对照组以外的其余4组SC0.1%肾上腺素0.12mg/100g体重，并用冰水进行一次冷刺激5min，其中丹参对照组按0.72g/kg用生理盐水稀释成5倍，取等效量的稀释液(约0.5ml/100g)ip一次，经上述处理后停食，18小时后按下列安排再给药一次，即正常对照组仍给盐水0.5ml/100g，其余4组用3%戊巴比妥0.3ml,ip将大鼠麻醉，然后每鼠注射肾上腺素0.12mg/100g体重，降纤酶5u用生理盐水稀释至20ml(0.25u/ml)，大剂量组(0.8u/kg)和小剂量组(0.4u/kg，再稀释一倍)取等效量的稀释液股静脉注射，丹参对照组再静脉一次丹参稀释液，模型组只给肾上腺素。75min后经腹主动脉取血待查(每只大鼠5ml)。
, 百拇医药
1.4.2 测试指标
用LBY-N6型血液流变测定仪，测定全血低切、中切和高切粘度，并测定血浆粘度。用普利生公司提供的随机软件计算出全血低切、中切和高切还原粘度，并推算出红细胞变形指数和电泳指数。红细胞刚性指数(ERI)和聚集指数(EAI)按文献方法[2]测定。
红细胞压积(HCT)用微量毛细管法[2]测定。
纤维蛋白原(Fg)利用微量加热凝固法[2]测定。
2 结果
降纤酶除ERI未见明显影响外，ηbL、ηbH、Fg、Hct等8项指标均有明显影响(P<0.001,P<0.01)。
, 百拇医药
降纤酶对大鼠血液流变指标的影响 (n=8,
±s)
正常对照
高粘血症模型
丹参组
DF大剂量组
DF小剂量组
ηbL(mPa.s)
12.48±1.98
21.47±2.55△△
17.45±2.90*
, 百拇医药
9.52±2.04***
10.75±0.39***
ηbH(mPa.s)
5.70±0.81
7.58±1.29△△
6.69±0.97
4.27±0.42**
5.72±0.28*
ηP(mPa.s)
1.42±0.07
, 百拇医药
1.86±1.45△△
1.53±0.04*
1.15±0.08***
1.33±0.11**
HCT(%)
42±2
46.25±2.25△△
42.63±1.19*
40±1.31***
40.87±1.46**
, 百拇医药
ηrL
26.37±4.71
42.38±4.57△△
37.42±6.89
20.87±4.62***
23.08±1.53**
ηrH
10.21±1.94
12.34±1.92△
12.09±2.18
, 百拇医药
7.84±1.26**
10.74±1.02
EAI
2.19±0.13
2.86±0.26△△
2.62±0.29
2.24±0.45**
1.88±0.03**
ERI
7.16±1.23
6.80±1.26
, http://www.100md.com
6.92±1.44
8.15±1.38
Fg(g/L)
1.96±0.04
3.11±0.20△△
2.10±0.04**
1.82±0.05***
1.98±0.06***
△P<0.05,△△P<0.01高粘血症模型与正常对照比较
*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001高粘血症模型与给药组比较
, 百拇医药
3 讨论
1962年有学者[2]首次报道了AMI病人Hct升高，RBC聚集性增强，全血粘度升高，并认为这些变化可能是引起冠脉血流减少，加重心肌梗塞的重要因素，且认为血流变指标的变化及程度是影响心肌梗塞患者预后和某些并发症的重要因素。
80年代末，血流变的变化与CHD的关系为临床医生所关注，并采取了抗凝、降粘、溶栓、血液稀释等疗法。近年来Fg升高视为同胆固醇一样，是CHD的危险因素，Fg与AMI和不稳定型心绞痛的关系密切[3、4、5]，甚至把Fg看作是心血管疾病的一个独立的可改变的危险因素[6]。因而通过降低血液粘度、改善微循环，是近十几年来临床医生积极探索的治疗冠心病的有效途径之一。降纤酶是迄今为止国内开发的唯一能够选择性降低Fg的药物。
从表中可看出，高粘血症模型组与正常对照组比较，除ERI外，ηbL、ηbH、PFC、ηP、ηrL、Hct等8项指标均有显著差异(P<0.01,P<0.05)。这说明本实验中模型复制是成功的。本实验高粘血症模型的制作是根据中医有关血瘀证的“暴怒”“寒邪”病因、病机所设计[7]。给大鼠SC大剂量肾上腺素模拟暴怒时的机体状态，以冰水浸泡模拟寒邪侵袭，两者综合作用后迅速复制出血液流变性呈现“粘、浓、聚、凝”状态的高粘血症模型，重复性好，符合研究要求。
, http://www.100md.com
表中所示，降纤酶对血粘度的作用，除ERI外，其它8项指标比模型组均呈现有统计学意义的下降，其中ηbL、ηbH、Fg、Hct、ηP等与模型组相比较，有极其显著意义的降低(P<0.001)，并显示出有剂量相关性。这是因为该药进入机体后，能立即选择性降低Fg，促使血管内皮细胞释放t-PA，增强t-PA的活性，减少α2-PI和PAI的产生[8]，降低血液粘度，进而改善微循环。从对Fg的作用来看，用药后Fg水平：大剂量组为1.82g/L， 小剂量组则为
1.98g/L，也呈现出一定的剂量相关效应。阳性对照丹参组，虽然全血低切粘度、Hct及Fg均有显著意义的降低(P<0.05,P<0.01)，但总的情况来说作用不如降纤酶。
综上所述，本研究表明，降纤酶能显著改善皮下注射肾上腺素和冰水浴所致大鼠的急性血液流变学的异常，尤其是可选择性降低PFC，且呈现出一定的剂量相关效应。
, 百拇医药
参 考 文 献
1，陆国才.醒脑饮对血液流变学影响的实验观察.中国血液流变学杂志，1994，4(4)：54
2，王天佑.血液流变学.新疆科技卫生出版社，1992，43、47、176～178
3，Toss-H;Lindahl-B,Siegbahn-A,et al.Circulation,1997,96(12):4204-10
4，DE-Lata-Romero-M,et al.Plasma fibrinogen during the stage of angina or myocardial infarct.Gac-Med-Mex,1997,133(3):178-80
5，Becker-RC,Cannon-CP,Bovill-EG,et al.Prognostic value of plasma fibrinogen concentration in patients with unstable angina and non-Q-wave myocardial infarct.AM-J-Cardiol,1996,78(2):142-7
, 百拇医药
6，Montalescot-G,Collet-JP,Choussat-R,et al.Fibrinogen as a risk factor for coronary heart disease.Eur-Heart-J,1998,19 suppl H:1-7
7，朱路佳，谢梅林，陈星织，等.中国野生植物资源，1996，3：6
8，Klicking HP,Hoffmann A,Markwardt F.Release of plasminogen activator by batroxibin.Haemostasis,1987,17:235
(2000年2月22日收稿), http://www.100md.com
单位：苏州医学院药理学教研室 苏州 215007
关键词：降纤酶；血液流变学；大鼠
中国血液流变学杂志000404 摘要 目的 旨的观察降纤酶对大鼠急性高粘血症血液流变性的影响。
方法 将SD大鼠40只分为5组，即正常对照组、高粘血症模型组、降纤酶大剂量组(0.8u/kg)、降纤酶小剂量组(0.4u/kg)、丹参阳性对照组(0.72g/kg)，用皮下注射肾上腺素加冷水浴刺激做高粘血症模型。结果 降纤酶能非常显著地降低全血低切粘度(ηbL)、高切粘度(ηbH)、血浆纤维蛋白原浓度(PFC)、血浆粘度(ηP)、全血低切还原粘度(ηrL)，并能显著降低红细胞压积(Hct)、全血高切还原粘度(ηrH)、红细胞聚集指数(EAI)，但对红细胞刚性指数(ERI)无影响。而丹参仅能轻度降低ηbL、ηP、HCT及PFC。结论 提示降纤酶能改善高粘血症血液流变学特性，可用来防治冠心病伴高纤维蛋白原血症。
, 百拇医药
中图分类号 R973+.2 文献标识码 A
STUDY OF EFFECTS OF DEFNBRASE
ON HEMORHEOLOGY IN RATS
ZhangHai Wang Ping Gu Zhenglun
(Institute of Traditional Chinese Medicine,Suzhou,215003)
Abstract Rats were administrated i.v.,by Defibrase 0.8u/kg and 0.4u/kg.The results indicated that Defibrase could remarkably reduce ηbL、ηbH,ηrL,ηP,especially selectively reduce PFC.and it can remarkably reduce Hct,ηrH,EAI but has no effect on ERI.So Defibrase can be used to treat CHD with high PFC.
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Keywords Defibrase Rat Hemorhelohy
降纤酶(Defibrase,DF)是蛇毒制品，是用现代高科技工艺从蛇毒Svate 3中提取的单组分生物制品，它能选择性降低血浆纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg)，改善血液流变学特性，故用于治疗缺血性心脑血管疾病。本实验就DF对大鼠血液流变性的影响进行了研究，旨在探讨其对心血管疾病的作用机理，为临床提供基础资料。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 降纤酶，由山东中美合资烟台北方制药公司提供，每支5单位，批号为980428-1。
1.1.2 复方丹参注射液，每支2ml，每毫升含丹参和降香各1克，上海第九制药厂生产，批号为990719。
, 百拇医药
1.1.3 肾上腺素注射液，每支1mg(1mg/ml)，由上海禾丰制药公司生产，批号为980702。
1.2 实验动物
SD大鼠，雄性，共40只，体重238±19g，由苏州医学院实验动物中心提供。
1.3 仪器
LBY-N6型旋转式血液流变测定仪，北京普利生集团生产。
1.4 方法
1.4.1 大鼠急性高粘血症模型的制备方法
将SD大鼠40只随机分为5组，每组8只，即正常对照组、高粘血症模型组、DF大剂量组(0.8u/kg)、DF小剂组(0.4u/kg)、丹参阳性对照组(0.72g/kg)。参照文献[1]制备高粘血症模型，即将除正常对照组以外的其余4组SC0.1%肾上腺素0.12mg/100g体重，并用冰水进行一次冷刺激5min，其中丹参对照组按0.72g/kg用生理盐水稀释成5倍，取等效量的稀释液(约0.5ml/100g)ip一次，经上述处理后停食，18小时后按下列安排再给药一次，即正常对照组仍给盐水0.5ml/100g，其余4组用3%戊巴比妥0.3ml,ip将大鼠麻醉，然后每鼠注射肾上腺素0.12mg/100g体重，降纤酶5u用生理盐水稀释至20ml(0.25u/ml)，大剂量组(0.8u/kg)和小剂量组(0.4u/kg，再稀释一倍)取等效量的稀释液股静脉注射，丹参对照组再静脉一次丹参稀释液，模型组只给肾上腺素。75min后经腹主动脉取血待查(每只大鼠5ml)。
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1.4.2 测试指标
用LBY-N6型血液流变测定仪，测定全血低切、中切和高切粘度，并测定血浆粘度。用普利生公司提供的随机软件计算出全血低切、中切和高切还原粘度，并推算出红细胞变形指数和电泳指数。红细胞刚性指数(ERI)和聚集指数(EAI)按文献方法[2]测定。
红细胞压积(HCT)用微量毛细管法[2]测定。
纤维蛋白原(Fg)利用微量加热凝固法[2]测定。
2 结果
降纤酶除ERI未见明显影响外，ηbL、ηbH、Fg、Hct等8项指标均有明显影响(P<0.001,P<0.01)。
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降纤酶对大鼠血液流变指标的影响 (n=8,
±s)正常对照
高粘血症模型
丹参组
DF大剂量组
DF小剂量组
ηbL(mPa.s)
12.48±1.98
21.47±2.55△△
17.45±2.90*
, 百拇医药
9.52±2.04***
10.75±0.39***
ηbH(mPa.s)
5.70±0.81
7.58±1.29△△
6.69±0.97
4.27±0.42**
5.72±0.28*
ηP(mPa.s)
1.42±0.07
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1.86±1.45△△
1.53±0.04*
1.15±0.08***
1.33±0.11**
HCT(%)
42±2
46.25±2.25△△
42.63±1.19*
40±1.31***
40.87±1.46**
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ηrL
26.37±4.71
42.38±4.57△△
37.42±6.89
20.87±4.62***
23.08±1.53**
ηrH
10.21±1.94
12.34±1.92△
12.09±2.18
, 百拇医药
7.84±1.26**
10.74±1.02
EAI
2.19±0.13
2.86±0.26△△
2.62±0.29
2.24±0.45**
1.88±0.03**
ERI
7.16±1.23
6.80±1.26
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6.92±1.44
8.15±1.38
Fg(g/L)
1.96±0.04
3.11±0.20△△
2.10±0.04**
1.82±0.05***
1.98±0.06***
△P<0.05,△△P<0.01高粘血症模型与正常对照比较
*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001高粘血症模型与给药组比较
, 百拇医药
3 讨论
1962年有学者[2]首次报道了AMI病人Hct升高，RBC聚集性增强，全血粘度升高，并认为这些变化可能是引起冠脉血流减少，加重心肌梗塞的重要因素，且认为血流变指标的变化及程度是影响心肌梗塞患者预后和某些并发症的重要因素。
80年代末，血流变的变化与CHD的关系为临床医生所关注，并采取了抗凝、降粘、溶栓、血液稀释等疗法。近年来Fg升高视为同胆固醇一样，是CHD的危险因素，Fg与AMI和不稳定型心绞痛的关系密切[3、4、5]，甚至把Fg看作是心血管疾病的一个独立的可改变的危险因素[6]。因而通过降低血液粘度、改善微循环，是近十几年来临床医生积极探索的治疗冠心病的有效途径之一。降纤酶是迄今为止国内开发的唯一能够选择性降低Fg的药物。
从表中可看出，高粘血症模型组与正常对照组比较，除ERI外，ηbL、ηbH、PFC、ηP、ηrL、Hct等8项指标均有显著差异(P<0.01,P<0.05)。这说明本实验中模型复制是成功的。本实验高粘血症模型的制作是根据中医有关血瘀证的“暴怒”“寒邪”病因、病机所设计[7]。给大鼠SC大剂量肾上腺素模拟暴怒时的机体状态，以冰水浸泡模拟寒邪侵袭，两者综合作用后迅速复制出血液流变性呈现“粘、浓、聚、凝”状态的高粘血症模型，重复性好，符合研究要求。
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表中所示，降纤酶对血粘度的作用，除ERI外，其它8项指标比模型组均呈现有统计学意义的下降，其中ηbL、ηbH、Fg、Hct、ηP等与模型组相比较，有极其显著意义的降低(P<0.001)，并显示出有剂量相关性。这是因为该药进入机体后，能立即选择性降低Fg，促使血管内皮细胞释放t-PA，增强t-PA的活性，减少α2-PI和PAI的产生[8]，降低血液粘度，进而改善微循环。从对Fg的作用来看，用药后Fg水平：大剂量组为1.82g/L， 小剂量组则为
1.98g/L，也呈现出一定的剂量相关效应。阳性对照丹参组，虽然全血低切粘度、Hct及Fg均有显著意义的降低(P<0.05,P<0.01)，但总的情况来说作用不如降纤酶。
综上所述，本研究表明，降纤酶能显著改善皮下注射肾上腺素和冰水浴所致大鼠的急性血液流变学的异常，尤其是可选择性降低PFC，且呈现出一定的剂量相关效应。
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参 考 文 献
1，陆国才.醒脑饮对血液流变学影响的实验观察.中国血液流变学杂志，1994，4(4)：54
2，王天佑.血液流变学.新疆科技卫生出版社，1992，43、47、176～178
3，Toss-H;Lindahl-B,Siegbahn-A,et al.Circulation,1997,96(12):4204-10
4，DE-Lata-Romero-M,et al.Plasma fibrinogen during the stage of angina or myocardial infarct.Gac-Med-Mex,1997,133(3):178-80
5，Becker-RC,Cannon-CP,Bovill-EG,et al.Prognostic value of plasma fibrinogen concentration in patients with unstable angina and non-Q-wave myocardial infarct.AM-J-Cardiol,1996,78(2):142-7
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6，Montalescot-G,Collet-JP,Choussat-R,et al.Fibrinogen as a risk factor for coronary heart disease.Eur-Heart-J,1998,19 suppl H:1-7
7，朱路佳，谢梅林，陈星织，等.中国野生植物资源，1996，3：6
8，Klicking HP,Hoffmann A,Markwardt F.Release of plasminogen activator by batroxibin.Haemostasis,1987,17:235
(2000年2月22日收稿), http://www.100md.com