福建肝癌细胞EBV感染与HBV及P53蛋白表达的关系*
作者：袁芳平 黄培生 王 镛 龚华实
单位：福建医科大学病理解剖学教研室 福建省福州市 350004
关键词：肝肿瘤/病理学；人疱疹病毒，4型；肝炎病毒，乙型；原位杂交；P53蛋白
世界华人消化杂志990610
摘 要
目的 探讨肝细胞癌(HCC)中EBV与HBV感染的相关性及EBV与P53 蛋白表达的关系.
方法 采用原位杂交技术以地高辛标记的单链cDNA探针、生物素标记的双 链cDNA探针及免疫组化SP法检测HCC 59例(含癌旁肝组织)和9例肝硬变组织中高拷贝数EBER -1(EBV编码的小RNA)、HBVDNA和P53蛋白.
, http://www.100md.com
结果 肝癌细胞核内EBER-1阳性率为20.3%，显著高于癌旁肝组织(P <0.01). 肝癌组织内HBVDNA阳性率为59.3%，EBV存在与HBV感染无明显相关性(P> 0.05). 肝癌组织内P53蛋白表达率为33.9%，P53表达与EBER-1无显著关系(P>0.05 ).
结论 肝癌细胞内EBV感染与HBV存在无明显关系，肝癌中P53表达与EBER -1无关.
中国图书馆分类号 R735.7
Relationship between EBV infection in Fujian HCC and HBV and P53 protein expression*
YUAN Fang-Ping, HUANG Pei-Sheng, WANG Yong and GONG Hua-Shi
, 百拇医药
Department of Pathology, Fujian Medical University, Fuzhou 350004,Fu jian Province, China
Subject headings liver neoplasm/pathology; Epstein-Barr vir us; P53 protein; in situ hybridization
Abstract
AIM To study the correlation of EBV and HBV infection in the hepatocellular carcinoma(HCC), and the relationship between EBER-1 and P53 protein in HCC.
METHODS EBER-1(EBV encoded small RNA),HBVDNA and P53 prot ein of 59 cases of HCC including surrounding liver tissues and 9 cases of liver c irrhosis(LC) were detected using in situ hybridization with digoxin-labe ling single-strand cDNA probe, biotin-labeling double-strand cDNA probe and strep tavidin-peroxidase(SP) immunohistochemistry respectively.
, http://www.100md.com
RESULTS BEER-1 expression was found in the nuclei of tumor cel ls i n 12/59 (20.3%) cases of HCC. No expression was seen in paratumorous live r tissues including dysplasia liver cells, infiltrating lymphocytes and liver ci rrhosis cases. The positive rate of HBVDNA was 59.3% in HCC tissues. There was no relationship between EBER-1 and HBVDNA (P>0.05). P53 protein exp ression was shown in 20/59 (33.9%). No expression was found in the surrounding nontumors liver tissues. P53 protein expression was independent of EBER-1 (P>0.05).
, 百拇医药
CONCLUSION EBV infection is independent of HBV in HCC tissues. There is no relationship between the P53 expression and EBER-1 in HCC.
0 引言
HCC是福建地区常见的恶性肿瘤，且与HBV感染有密切关系[1]. 广泛存在的EBV与多种肿瘤的发生有关，如鼻咽癌[2]、肺癌[3]、胃癌[4]的癌细胞 中均 存在EBV基因. 因此，EBV与恶性肿瘤的关系引起了人们很大关注. 我们采用原位核酸分子杂交技术及免疫组化SP法，对59例肝细胞癌(HCC)行EBER-1，HBVDNA和P53蛋白检测，以了解EBV感染在HCC中与HBV的关系及P53蛋白表达与EBV的关系.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 收集福建地区1990/1995年HCC 59例，肝硬变9例. 标本经100mL/L福尔马林固定 ，石蜡包埋连续切片，常规HE染色. 地高辛标记的针对EBER-1的寡核苷酸探针由美国明尼苏达州Mayo Clinic病理系金龙医师提供，生物素标记的HBVDNA探针由北京生物技术有限公司提供，P53 PAb 1801 mAb购自荷兰Dako公司，SP试剂盒购自福州迈新公司.
1.2 方法 ①原位杂交EBER-1：上述HCC及肝硬变蜡块 切成5μm切片贴附于多聚赖氨酸处理过的载玻片上. 切片经脱蜡及梯度水化，蛋白酶K消化( 25mg/L，37℃，15min). 预杂交20min，加入杂交混合液，杂交后洗涤， 加抗地高 辛单克隆抗体(1∶200稀释)37℃，3h. 缓冲液冲洗. 最后NBT/BCIP避光显色，直至 细胞核出现紫蓝色颗粒为止，水洗中断显色，快红复染. HBVDNA：参考苏慧慈博士《原位杂 交》一书. ②免疫组化SP法：DAB显色，甲基绿复染. 阳性对照用已知EBER-1阳性的鼻咽癌组织，HBVDNA阳性的肝硬变组织与已知P53阳性的胃癌组织；阴性对照用杂交液中省去探针或以PBS代替第一抗体.
, 百拇医药
统计学处理统计采用χ2检验.
2 结果
HCC分化按Sugihara[5]病理组织学标准：高分化6例，中分化17例，低分化36例. 19 例癌间质内有淋巴细胞浸润. 56例有癌旁肝组织存在，其中32例癌周肝组织见肝硬变，29例癌周组织有肝细胞不典型增生.
2.1 EBER-1原位杂交 HCC59例中12例EBER-1阳性，占20.3%，E BER-1阳性信号定位于癌细胞核内，呈紫蓝色中等颗粒状(图1，2)，其中4例有75%以上的肿瘤细胞阳性，3例25%～50%的肿瘤细胞阳性，5例<25%的肿瘤细胞阳性. EBER-1阳性的病例其癌间质多有淋巴细胞浸润. 癌组织、癌旁肝组织(包括肝硬变组织、不典型增生肝细胞)及间质内的淋巴细胞未见有阳性信号. 肝硬变组织9例均无阳性表达. 经统计学处理，χ2=12.86(χ20.01=6.63)，P<0.01，HCC中EBER-1阳性率显著高于癌旁肝组织.
, 百拇医药
图1 HCC癌细胞核内EBER-1阳性，快红复染，原位杂交×200
图2 HCC癌细胞核内EBER-1阳性，快红复染，原位杂交×400
2.2 HBVDNA原位杂交 HCC 59例中HBVDNA阳性率为59.3% (35/59)，阳性表达均位于核内. 癌旁组织34例阳性，其中核内阳性10例. 肝硬变9例中6 例阳性，阳性表达均位于胞质内.
2.3 P53免疫组化 P53蛋白阳性表达位于细胞核内，呈棕 黄色颗粒状(图3). HCC 59例中20例阳性，占33.9%. 癌周肝组织及肝硬变组均无阳 性表达. 经统计学处理，χ2=22.97(χ20.01=6.63)，P<0.01 ，P53在HCC中的表达显著高于癌旁组织.
, 百拇医药
图3 HCC癌细胞核内P53蛋白阳性，甲基绿复染，免疫组化，SP法×400
2.4 EBER-1与HBVDNA的关系12例EBER-1阳性的HCC，8例HBVDNA阳性；47例EBER-1阳性的HCC，27例HBVDNA阳性，经统计学处理，χ1=0 .063(χ20.05=3.84)，P>0.05，HCC中EBER-1表达与HBVDNA无明显关系.
2.5 P53表达与EBER-1的关系20例P53阳 性者，7例EBER-1阳性，39例P53阴性者5例EBER-1阳性，经统计学处理，χ2=2.76(χ20.05=3.84)，P>0.05，癌组织P53表达与EBER-1无明显 关系.
3 讨论
, 百拇医药
EBV是广泛存在的双链DNA病毒，可导致淋巴系统增生紊乱的疾病[6]但EBV自它从Bu rkitt's淋巴瘤中被发现至今，就确定它与恶性肿瘤有密切关系[2]. 除Burkitt's淋巴瘤外，鼻咽癌[2]、肺癌[3]及胃癌[4]等肿瘤组织中均有EBVDN A 被检出. EBV基因为172000碱基对，EBER-1是EBV在潜伏感染期间编码的高拷贝RNA，约有18 0个核苷酸，EBV编码EBER-1的区域为ECOR1-J限制片断的3000个核苷酸，这部分是E BVDNA最 有活性的部位[7]. 我们采用原位杂交技术，以地高辛标记的单链cDNA探针检测肝 癌组织中的EBER -1，阳性率为20%，1/3病例有强阳性表达，表明肝癌细胞中有EBV存在. 本研究中HCC癌旁组织及肝硬变中有HBVDNA存在，但EBER-1只表达于癌组织，提示HBV感染 发生于肝细胞癌变早期，而EBV对已癌变的肝细胞有一定的亲和性. 与EBV密切相关的Burkitt 's淋巴瘤有C-myc原癌基因的失调，且EBV潜伏感染的宿主细胞中有EBV的基因产物潜在膜蛋白(LMP-1)存在，后者能阻止细胞的凋亡[6]，表明EBV可能对肿瘤发展起一定作用. 我们在肝硬变组织及不典型增生的肝细胞中未见有EBER-1存在，提示EBV可能在肝细 胞癌变起动过程中不起主要作用. 本结果表明，HCC中反映EBV潜伏感染的EBER-1与HBVDNA 无明显关系，提示HCC中至少有两种病毒存在.
, 百拇医药
EBV阳性的HCC病例多为癌间质有淋巴细胞浸润者，这与一些有关肺癌[3]、胃癌 4]的研究结果一致. 这是否由于表达EBER-1的癌细胞有特异性的识别淋巴细胞的受 体，值得进一步探讨. 已知抑癌基因P53的突变与多种肿瘤发生有关，本组肝细胞癌 有突变型P53蛋白的表达，但与EBER-1无关，这和Margaret et al[4] 在胃癌中的研究结果一致. Margaret还认为，EBV相关的癌组织中P53过度表达不是突 变的结果，而是EBV蛋白连接正常的P53蛋白导致其T1/2延长的表现. Szekely et al[8]认为EBV能表达某些连接P53的蛋白，而本研究中检测到的是突变型 P53蛋白的过度表达，欲进一步探讨P53蛋白与EBV的关系，还需研究EBV相关的 肝癌中是否有EBV编码的P53连接因子.
作者简介：袁芳平，女1968-05-08生，福建省柘荣县人，汉族，1991年福建医科大学 医学系毕业，1997年获福建医科大学病理学硕士，发表论文3篇.
, 百拇医药
*福建省科委八五重点攻关项目，No.93A014
通讯作者 黄培生，350004，福建省福州市交通路88号，福建医科大 学病理解剖学教研室.
Supported by the key research projects of the Eighth Five-Year Plan, Fujian Provincial Science and Technology Committee, No.93A014
Correspondence to:HUANG Pei-Sheng, Department of Pathology, Fuj ian Medical University, Fuzhou 350004, Fujian Province, China
Tel. +86.591.3317210
, 百拇医药
4 参考文献
1 Yuan FP, Huang PS, Wu RL, Chen YY, Wang Y, Gong HS. Expreeion of P 53 protein in hepatocellular carcinomas and its relationship with HBV infect ion. Fujian Yike Daxue Xuebao, 1997；31(Suppl)：12-14
2 Nonyoama M, Pagano JS. Homology between Epstein-Barr virus DNA and viral DNA from Burkitt's lymphoma and nasopharyngeal carcinoma determined by DNA-DNA rea ssociation kinetics. Nature, 1973;242:44-47
, 百拇医药
3 Zhang L, Liu HR, Wang ZY, Zhang SH. Detection of EB virus in pulmonary by in situ hybridization. Zhonghua Binglixue Zazhi, 1996;25:1-3
4 Gulley ML, Pulitzer DR, Eagan PA, schneider BG. Epstein-Barr virus infect ion is an early event in gastric carcinogenesis and is independent of bcl-2 ex pression and P53 accumulation. Hum Pathol. 1996;27:20-27
5 Sugihara S, Nakashima O, Kojiro M,Majima Y, Tanaka M, Tanikawa K. The morp ho logic transition in hepatocellular carcinoma: A comparison of the individual his tologic features disclosed by ultrasound-guided fine-needle biopsy with those of autopsy. Cancer, 1992;70:1488-1492
, http://www.100md.com
6 Straus SE, Cohen JI, Tosato G, Meier J. Epstein-Barr virus infections: bi ology, pathogenesis and management. Ann Intern Med, 1993;118:45-48
7 Lerner MR, Andrews NC, Miller G, Steitz JA. Two small RNAs encoded by Epstein -Barr virus and complexed with protein are precipitated by antibodies from pa tients with systemic lupus erythematosus. Proc Natl Acad Sci USA, 1981;78:805-809
8 Szekely L, Selivanova G, Magnusson KP, Klein G, Wiman KG. EBNA-5, an Epstein -Barr virus-encoded nuclear antigen, binds to the retinoblastoma and P53 proteins, Proc Natl Acad Sci USA, 1993;90:5455-5459
收稿日期 1998-12-21 修回日期 1999-04-13, http://www.100md.com
单位：福建医科大学病理解剖学教研室 福建省福州市 350004
关键词：肝肿瘤/病理学；人疱疹病毒，4型；肝炎病毒，乙型；原位杂交；P53蛋白
世界华人消化杂志990610
摘 要
目的 探讨肝细胞癌(HCC)中EBV与HBV感染的相关性及EBV与P53 蛋白表达的关系.
方法 采用原位杂交技术以地高辛标记的单链cDNA探针、生物素标记的双 链cDNA探针及免疫组化SP法检测HCC 59例(含癌旁肝组织)和9例肝硬变组织中高拷贝数EBER -1(EBV编码的小RNA)、HBVDNA和P53蛋白.
, http://www.100md.com
结果 肝癌细胞核内EBER-1阳性率为20.3%，显著高于癌旁肝组织(P <0.01). 肝癌组织内HBVDNA阳性率为59.3%，EBV存在与HBV感染无明显相关性(P> 0.05). 肝癌组织内P53蛋白表达率为33.9%，P53表达与EBER-1无显著关系(P>0.05 ).
结论 肝癌细胞内EBV感染与HBV存在无明显关系，肝癌中P53表达与EBER -1无关.
中国图书馆分类号 R735.7
Relationship between EBV infection in Fujian HCC and HBV and P53 protein expression*
YUAN Fang-Ping, HUANG Pei-Sheng, WANG Yong and GONG Hua-Shi
, 百拇医药
Department of Pathology, Fujian Medical University, Fuzhou 350004,Fu jian Province, China
Subject headings liver neoplasm/pathology; Epstein-Barr vir us; P53 protein; in situ hybridization
Abstract
AIM To study the correlation of EBV and HBV infection in the hepatocellular carcinoma(HCC), and the relationship between EBER-1 and P53 protein in HCC.
METHODS EBER-1(EBV encoded small RNA),HBVDNA and P53 prot ein of 59 cases of HCC including surrounding liver tissues and 9 cases of liver c irrhosis(LC) were detected using in situ hybridization with digoxin-labe ling single-strand cDNA probe, biotin-labeling double-strand cDNA probe and strep tavidin-peroxidase(SP) immunohistochemistry respectively.
, http://www.100md.com
RESULTS BEER-1 expression was found in the nuclei of tumor cel ls i n 12/59 (20.3%) cases of HCC. No expression was seen in paratumorous live r tissues including dysplasia liver cells, infiltrating lymphocytes and liver ci rrhosis cases. The positive rate of HBVDNA was 59.3% in HCC tissues. There was no relationship between EBER-1 and HBVDNA (P>0.05). P53 protein exp ression was shown in 20/59 (33.9%). No expression was found in the surrounding nontumors liver tissues. P53 protein expression was independent of EBER-1 (P>0.05).
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CONCLUSION EBV infection is independent of HBV in HCC tissues. There is no relationship between the P53 expression and EBER-1 in HCC.
0 引言
HCC是福建地区常见的恶性肿瘤，且与HBV感染有密切关系[1]. 广泛存在的EBV与多种肿瘤的发生有关，如鼻咽癌[2]、肺癌[3]、胃癌[4]的癌细胞 中均 存在EBV基因. 因此，EBV与恶性肿瘤的关系引起了人们很大关注. 我们采用原位核酸分子杂交技术及免疫组化SP法，对59例肝细胞癌(HCC)行EBER-1，HBVDNA和P53蛋白检测，以了解EBV感染在HCC中与HBV的关系及P53蛋白表达与EBV的关系.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 收集福建地区1990/1995年HCC 59例，肝硬变9例. 标本经100mL/L福尔马林固定 ，石蜡包埋连续切片，常规HE染色. 地高辛标记的针对EBER-1的寡核苷酸探针由美国明尼苏达州Mayo Clinic病理系金龙医师提供，生物素标记的HBVDNA探针由北京生物技术有限公司提供，P53 PAb 1801 mAb购自荷兰Dako公司，SP试剂盒购自福州迈新公司.
1.2 方法 ①原位杂交EBER-1：上述HCC及肝硬变蜡块 切成5μm切片贴附于多聚赖氨酸处理过的载玻片上. 切片经脱蜡及梯度水化，蛋白酶K消化( 25mg/L，37℃，15min). 预杂交20min，加入杂交混合液，杂交后洗涤， 加抗地高 辛单克隆抗体(1∶200稀释)37℃，3h. 缓冲液冲洗. 最后NBT/BCIP避光显色，直至 细胞核出现紫蓝色颗粒为止，水洗中断显色，快红复染. HBVDNA：参考苏慧慈博士《原位杂 交》一书. ②免疫组化SP法：DAB显色，甲基绿复染. 阳性对照用已知EBER-1阳性的鼻咽癌组织，HBVDNA阳性的肝硬变组织与已知P53阳性的胃癌组织；阴性对照用杂交液中省去探针或以PBS代替第一抗体.
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统计学处理统计采用χ2检验.
2 结果
HCC分化按Sugihara[5]病理组织学标准：高分化6例，中分化17例，低分化36例. 19 例癌间质内有淋巴细胞浸润. 56例有癌旁肝组织存在，其中32例癌周肝组织见肝硬变，29例癌周组织有肝细胞不典型增生.
2.1 EBER-1原位杂交 HCC59例中12例EBER-1阳性，占20.3%，E BER-1阳性信号定位于癌细胞核内，呈紫蓝色中等颗粒状(图1，2)，其中4例有75%以上的肿瘤细胞阳性，3例25%～50%的肿瘤细胞阳性，5例<25%的肿瘤细胞阳性. EBER-1阳性的病例其癌间质多有淋巴细胞浸润. 癌组织、癌旁肝组织(包括肝硬变组织、不典型增生肝细胞)及间质内的淋巴细胞未见有阳性信号. 肝硬变组织9例均无阳性表达. 经统计学处理，χ2=12.86(χ20.01=6.63)，P<0.01，HCC中EBER-1阳性率显著高于癌旁肝组织.
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图1 HCC癌细胞核内EBER-1阳性，快红复染，原位杂交×200
图2 HCC癌细胞核内EBER-1阳性，快红复染，原位杂交×400
2.2 HBVDNA原位杂交 HCC 59例中HBVDNA阳性率为59.3% (35/59)，阳性表达均位于核内. 癌旁组织34例阳性，其中核内阳性10例. 肝硬变9例中6 例阳性，阳性表达均位于胞质内.
2.3 P53免疫组化 P53蛋白阳性表达位于细胞核内，呈棕 黄色颗粒状(图3). HCC 59例中20例阳性，占33.9%. 癌周肝组织及肝硬变组均无阳 性表达. 经统计学处理，χ2=22.97(χ20.01=6.63)，P<0.01 ，P53在HCC中的表达显著高于癌旁组织.
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图3 HCC癌细胞核内P53蛋白阳性，甲基绿复染，免疫组化，SP法×400
2.4 EBER-1与HBVDNA的关系12例EBER-1阳性的HCC，8例HBVDNA阳性；47例EBER-1阳性的HCC，27例HBVDNA阳性，经统计学处理，χ1=0 .063(χ20.05=3.84)，P>0.05，HCC中EBER-1表达与HBVDNA无明显关系.
2.5 P53表达与EBER-1的关系20例P53阳 性者，7例EBER-1阳性，39例P53阴性者5例EBER-1阳性，经统计学处理，χ2=2.76(χ20.05=3.84)，P>0.05，癌组织P53表达与EBER-1无明显 关系.
3 讨论
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EBV是广泛存在的双链DNA病毒，可导致淋巴系统增生紊乱的疾病[6]但EBV自它从Bu rkitt's淋巴瘤中被发现至今，就确定它与恶性肿瘤有密切关系[2]. 除Burkitt's淋巴瘤外，鼻咽癌[2]、肺癌[3]及胃癌[4]等肿瘤组织中均有EBVDN A 被检出. EBV基因为172000碱基对，EBER-1是EBV在潜伏感染期间编码的高拷贝RNA，约有18 0个核苷酸，EBV编码EBER-1的区域为ECOR1-J限制片断的3000个核苷酸，这部分是E BVDNA最 有活性的部位[7]. 我们采用原位杂交技术，以地高辛标记的单链cDNA探针检测肝 癌组织中的EBER -1，阳性率为20%，1/3病例有强阳性表达，表明肝癌细胞中有EBV存在. 本研究中HCC癌旁组织及肝硬变中有HBVDNA存在，但EBER-1只表达于癌组织，提示HBV感染 发生于肝细胞癌变早期，而EBV对已癌变的肝细胞有一定的亲和性. 与EBV密切相关的Burkitt 's淋巴瘤有C-myc原癌基因的失调，且EBV潜伏感染的宿主细胞中有EBV的基因产物潜在膜蛋白(LMP-1)存在，后者能阻止细胞的凋亡[6]，表明EBV可能对肿瘤发展起一定作用. 我们在肝硬变组织及不典型增生的肝细胞中未见有EBER-1存在，提示EBV可能在肝细 胞癌变起动过程中不起主要作用. 本结果表明，HCC中反映EBV潜伏感染的EBER-1与HBVDNA 无明显关系，提示HCC中至少有两种病毒存在.
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EBV阳性的HCC病例多为癌间质有淋巴细胞浸润者，这与一些有关肺癌[3]、胃癌 4]的研究结果一致. 这是否由于表达EBER-1的癌细胞有特异性的识别淋巴细胞的受 体，值得进一步探讨. 已知抑癌基因P53的突变与多种肿瘤发生有关，本组肝细胞癌 有突变型P53蛋白的表达，但与EBER-1无关，这和Margaret et al[4] 在胃癌中的研究结果一致. Margaret还认为，EBV相关的癌组织中P53过度表达不是突 变的结果，而是EBV蛋白连接正常的P53蛋白导致其T1/2延长的表现. Szekely et al[8]认为EBV能表达某些连接P53的蛋白，而本研究中检测到的是突变型 P53蛋白的过度表达，欲进一步探讨P53蛋白与EBV的关系，还需研究EBV相关的 肝癌中是否有EBV编码的P53连接因子.
作者简介：袁芳平，女1968-05-08生，福建省柘荣县人，汉族，1991年福建医科大学 医学系毕业，1997年获福建医科大学病理学硕士，发表论文3篇.
, 百拇医药
*福建省科委八五重点攻关项目，No.93A014
通讯作者 黄培生，350004，福建省福州市交通路88号，福建医科大 学病理解剖学教研室.
Supported by the key research projects of the Eighth Five-Year Plan, Fujian Provincial Science and Technology Committee, No.93A014
Correspondence to:HUANG Pei-Sheng, Department of Pathology, Fuj ian Medical University, Fuzhou 350004, Fujian Province, China
Tel. +86.591.3317210
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4 参考文献
1 Yuan FP, Huang PS, Wu RL, Chen YY, Wang Y, Gong HS. Expreeion of P 53 protein in hepatocellular carcinomas and its relationship with HBV infect ion. Fujian Yike Daxue Xuebao, 1997；31(Suppl)：12-14
2 Nonyoama M, Pagano JS. Homology between Epstein-Barr virus DNA and viral DNA from Burkitt's lymphoma and nasopharyngeal carcinoma determined by DNA-DNA rea ssociation kinetics. Nature, 1973;242:44-47
, 百拇医药
3 Zhang L, Liu HR, Wang ZY, Zhang SH. Detection of EB virus in pulmonary by in situ hybridization. Zhonghua Binglixue Zazhi, 1996;25:1-3
4 Gulley ML, Pulitzer DR, Eagan PA, schneider BG. Epstein-Barr virus infect ion is an early event in gastric carcinogenesis and is independent of bcl-2 ex pression and P53 accumulation. Hum Pathol. 1996;27:20-27
5 Sugihara S, Nakashima O, Kojiro M,Majima Y, Tanaka M, Tanikawa K. The morp ho logic transition in hepatocellular carcinoma: A comparison of the individual his tologic features disclosed by ultrasound-guided fine-needle biopsy with those of autopsy. Cancer, 1992;70:1488-1492
, http://www.100md.com
6 Straus SE, Cohen JI, Tosato G, Meier J. Epstein-Barr virus infections: bi ology, pathogenesis and management. Ann Intern Med, 1993;118:45-48
7 Lerner MR, Andrews NC, Miller G, Steitz JA. Two small RNAs encoded by Epstein -Barr virus and complexed with protein are precipitated by antibodies from pa tients with systemic lupus erythematosus. Proc Natl Acad Sci USA, 1981;78:805-809
8 Szekely L, Selivanova G, Magnusson KP, Klein G, Wiman KG. EBNA-5, an Epstein -Barr virus-encoded nuclear antigen, binds to the retinoblastoma and P53 proteins, Proc Natl Acad Sci USA, 1993;90:5455-5459
收稿日期 1998-12-21 修回日期 1999-04-13, http://www.100md.com