从诱发兔耳血管损伤后再出血评价体外超声助溶血栓的效果
作者：贾如意 沈学东 李志善 陈灏珠
单位：200032 上海医科大学中山医院 上海市心血管病研究所
关键词：血栓形成/治疗；超声疗法；链激酶类/治疗应用；兔
中华物理医学杂志980105.htm 摘 要 目的 评价体外治疗性超声(简称超声)促进血栓溶解的有效性。方法 用手
术刀将22只兔耳全层割穿，共176处。出血停止1小时及4小时后随机分组。单用超声组、单用
重组链激酶(r-SK)组和r-SK加超声组，后者又根据超声强度不同分成1.2 W/cm2和2.2 W/cm2两个亚组。超声的频率均为0.8 MHz。结果 单用超声组，观察2小时兔耳无再出血。1及4小
, http://www.100md.com
时切口，r-SK加超声组兔耳再出血时间明显短于单用r-SK组(P<0.001)。1.2 W/cm2组与2.2 W/cm2组1小时切口的再出血时间无显著差别(P>0.05)，但4小时切口的再出血时间后者显著短于前
者。结论 超声有促进r-SK溶解血栓的作用。
中图号 R318.03;R364.15
AcceleratingThrombolysis by Therapeutic Ultrasound from Induced Rebleeding ofRabbit Ear after
Injury Jia Ruyi, Shen Xuedong, Li Zhishan, et al. ShanghaiInstitute of Cardiovascular Diseases, Zhongshan
, 百拇医药
Hospital, Shanghai Medical University, Shanghai 200032
Abstract Objective The purpose was to assess the efficacy of therapeutic ultrasound to enhance
thrombolysis by inducing rebleeding of rabbit after injury in vivo. Methods One hundred and seventy
six full thickness puncture wounds in rabbit ears were made in 22 rabbits. The rabbits were randomly
, http://www.100md.com
allocated to different groups according to 1 and 4 hours after cessation of bleeding: ① Ultrasound
adding saline group; with ultrasound at 2.2 W/cm2, ② recombinantstreptokinase (r-SK ) alone group,and ③ combining r-SK and ultrasound group.Ultrasound was applied at 0.8 MHz with a 50% duty
cycle at 1.2 W/cm2 and 2.2 W/cm2intensities. Results: There was no rebleeding phenomena after 2
, 百拇医药
hours in ultrasound adding saline group. The rebleeding timeswere shorter in ultrasound plus r-SK
group than in r-SK alone group (P<0.001). The rebleeding timesof 4 hour lesions in ultrasound plus
r-SK group were shorter than that of 1 hour lesions in r-SK alonegroup. The rebleeding times with
1.2 W/cm2 were not significantly different compared tothat with 2.2 W/cm2 for 1 hour lesions (P<0.05).
, 百拇医药
But for 4 hour lesions the latter was shorter than the former(P<0.001). Conclusion Therapeutic
ultrasound can accelerate thrombolysis with r-SK.
Key words thrombosis/ther;ultrasonic therapy; streptokinase/ther use;rabbits
经静脉药物溶栓是目前治疗急性心肌梗塞的主要方法。但是溶栓后仅29～54%的病人能
得到正常的血流灌注，这样的治疗结果是不能令人满意的。而且溶栓的效果受梗塞时间(>6
, http://www.100md.com
小时效果较差)和用药剂量的影响〔1〕。大剂量应用溶栓药可以提高溶栓效果，但并发症增
多，甚至造成致命性损害。如何提高溶栓效果是目前人们亟需解决的问题。体外治疗性超声
(external therapeutic ultrasound,简称ETUS)是近年来发展起来的促进血栓溶解的新技术〔2～6〕，实验室初步研究结果令人鼓舞，本研究旨在：①用重组链激酶(RecombinantStreptokinase, r-SK)
诱发兔耳小血管损伤后再出血的方法评价ETUS促进血栓溶解的有效性；②观察ETUS的促进血
栓溶解(助溶)作用的量效和时效关系。
材 料 与 方 法
, http://www.100md.com
一、兔耳血管损伤模型的建立
选择纯种新西兰白兔22只，体重2.2～2.6 kg。静脉注射戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉。耳
部脱毛后，在肉眼看不到血管的部位，在不同时间内用11号手术刀片割穿兔耳，切口长约3～4 mm，从距耳尖5～8 mm开始，对每侧兔耳做4个切口，切口间相距5 mm。先做2个切口，3小时后做
另外2个切口。创面均于割伤后2～5分内止血。4小时后建成2个止血后4小时切口和2个止血后
1小时切口。共有88个止血后4小时切口和88个止血后1小时切口。颈外静脉插管输液供静脉注
射药物用。
二、超声助溶
, http://www.100md.com
采用上海亚医实业有限公司生产的UTU-3000型心血管超声治疗仪。工作频率0.8 MHz，发
射方式为脉冲式，传空比为1∶1，输出功率1.2、2.2 W/cm2，有4个直径2 cm换能器轮流工作，工作2秒停6秒。换能器与兔耳之间置装满水的塑料袋，透声膏涂在塑料袋的上下两面以防因接
触不良有空气存在导致超声波反射。塑料袋内的水温保持在25～30℃。
三、实验动物分组设4个研究组。单用ETUS组(6只兔耳，24个切口)，超声强度为2.2 W/cm2，ETUS作用时
间60分钟；单用药物组(19只兔耳，76个切口，静脉用r-SK 2.5万单位/kg，上海医科大学分子
遗传研究室提供)；药物加2.2 W/cm2 ETUS组(10只兔耳，40个切口，r-SK用量同单用药物组)；
, http://www.100md.com
r-SK加1.2 W/cm2 ETUS组(9只兔耳，36个切口)。后二组在静脉给药的同时，一侧兔耳给予
ETUS治疗，另一侧兔耳不给予ETUS治疗。ETUS作用时间60分钟。四、观察和分析 每5 min观察伤口一次，以伤口的再出血作为显效的标志，计算再出血时间。采用两个样本
均数比较的t检验分析各组之间的差别有无显著意义。评价ETUS强度、凝血时间对助溶效果的影
响。
结 果
6只兔耳，24个切口单用ETUS观察2小时后，所有切口均未发生再出血。表示单独应用ETUS
, http://www.100md.com
并无溶栓效果。
一、单用药物组与药物加2.2 W/cm2 ETUS组再出血时间的比较(表1)。
表1 药物加2.2W/cm2组与单用药物组
再出血时间的比较(分钟)
例数
1小时切口
4小时切口
单用药
20
21.5±1.88
, 百拇医药
31.8±2.24
药物加ETUS
20
11.95±2.19*△
17±1.78*▲
增加(%)
44.42
46.54
注 *：与单药组；△：与同组4小时切口相比；▲：与单药组1小时切口相比；P均<0.001
如表所示，1小时及4小时切口药物加2.2 W/cm2 ETUS助溶后再出血时间分别较单用药组
, 百拇医药
缩短44.42%及46.54%，二、单用药物组与药物加1.2 W/cm2 ETUS组再出血时间的比较(表2)。
表2 药物加1.2 W/cm2组与单用药物组再出血时间的比较(分钟)
例数
1小时切口
4小时切口
单药
18
22.67±2.17
33.5±2.77
药加ETUS
, http://www.100md.com
18
12.55±1.58*△
20.61±2.52*▲
增加(%)
44.64
38.48
注 *：与单药组，P<0.001；△：与同组4小时切口相比，P<0.001；
▲：与单药组1小时切口相比；P均<0.05
如表所示，1小时及4小时切口超声助溶后再出血时间分别较单用药组缩短44.46%及38.48%。
三、药物加2.2 W/cm2 ETUS组和药物加1.2 W/cm2 ETUS组再出血时间的比较(表3)。
, 百拇医药
表3 药物加2.2 W/cm2组和加1.2 W/cm2组
再出血时间比较(分钟)
例数
1小时切口
4小时切口
1.2W/cm2组
18
12.55±1.58
20.61±2.52
2.2W/cm2组
, 百拇医药
20
11.95±2.19
17±1.78
P
>0.05
<0.001
如表所示，两组相比，超声助溶后1小时切口再出血时间的差别无显著意义。但4小时切口
药物加1.2 W/cm2 ETUS助溶组效果低于药物加2.2 W/cm2 ETUS助溶组(P<0.001)。
讨 论
以往的动脉及静脉溶栓实验显示，低能量ETUS有促进纤维蛋白溶解的作用。Kudo〔7〕用球
, 百拇医药
囊损伤动脉内膜的方法双测股动脉血栓模型。在静脉用rt-PA的同时，一测血栓给予频率为200 KHz，强度为0.5 W/cm2的ETUS处理，发现超声治疗侧血管再通时间比单用药物侧快(17.1±9.0 min比
71.0±29.8 min)。用同样的模型和超声能量，Yoshizwa〔8〕还发现ETUS治疗能降低rt-PA溶栓
后急性再闭塞的发生率。但也有作者对ETUS助溶血栓的效果持有异议〔4〕。我们从诱发兔耳血
管损伤后再出血评价体外超声助溶血栓效果的实验结果显示：
1.药物加ETUS与单用药物组比较，可使诱发再出血的时间明显缩短。
2.对凝血时间短的伤口，功率1.2 W/cm2 ETUS的超声助溶效果与2.2 W/cm2 ETUS相似，但
, http://www.100md.com
对凝血时间长的血栓，1.2 W/cm2 ETUS的效果不及2.2 W/cm2 ETUS。
3.单独应用ETUS并无溶栓效果。 我们的实验模型和以前犬及兔股动脉血栓模型有重要的区别。该模型的优点之一是能合理
代表正常止血块的形成，并且不需要诸如损伤内皮及向血管内注射血块等用于动脉血栓模型的
操作，实验模型稳定。这种模型的第二个优点是超声场定位准确，因为损伤区表浅。用装有水
的容器将超声与组织隔开，声能衰减小，用此模型来观察ETUS的助溶作用比较客观而准确。必
须指出，我们的实验模型比较表浅，ETUS对深部血栓，特别是冠状动脉血栓的助溶效果尚需做
, 百拇医药
进一步研究。在以后的研究中我们将对此进行探讨。
本文为卫生部课题基金资助项目(96-1-164)
参 考 文 献
1 Timi Study Group. The thrombolysis in myocardial infarction (TIMI) trial: Phase 1 findings. N Engl J Med,1985, 312: 932-936.
2 Hamano K, Kudo M, Yoshizawa S, et al. A new noninvasive thrombolysis enhanced by transcutaneous
ultrasonic irradiation. Eur Heart J, 1991, 12 (Suppl):135-136.
, 百拇医药
3 Kashyap A, Blinc A, Marder VJ, et al. Acceleration of ultrasound in a rabbit ear model of small vessel injury.
Thrombosis Res, 1994, 76(50):475-485.
4 Luo H, Steffen W, Cercek B, et al. Enhancement of thrombolysis by external ultrasound. Am Heart J,1993, 125:1564-1569.
5 Kornowski R, Meltzer RS, Chernine A, et al. Dose external ultrasound accelerate thrombolysis results from
, 百拇医药
a rabbit model.Circulation, 1994, 89(1): 339-344.
6 Harpaz D, Chen X, Francis CW, et al. Ultrasound enhancement ofthrombolysis and reperfusion in vitro. J
Am Coll Cardiol , 1993, 21(6): 1507-1511.
7 Kudo S. Thrombolysis with ultrasound effect. Tokyo Jukeikai MedJ,1989,104:1005-1006.
8 Yoshizawa S. Ultrasound irradiation method for prevention ofacute reoccolution after thrombolysis. Tokyo
Jukeikai Med J, 1992, 107: 265-274.
(收稿 1997-07-02 修回 1997-12-28), http://www.100md.com
单位：200032 上海医科大学中山医院 上海市心血管病研究所
关键词：血栓形成/治疗；超声疗法；链激酶类/治疗应用；兔
中华物理医学杂志980105.htm 摘 要 目的 评价体外治疗性超声(简称超声)促进血栓溶解的有效性。方法 用手
术刀将22只兔耳全层割穿，共176处。出血停止1小时及4小时后随机分组。单用超声组、单用
重组链激酶(r-SK)组和r-SK加超声组，后者又根据超声强度不同分成1.2 W/cm2和2.2 W/cm2两个亚组。超声的频率均为0.8 MHz。结果 单用超声组，观察2小时兔耳无再出血。1及4小
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时切口，r-SK加超声组兔耳再出血时间明显短于单用r-SK组(P<0.001)。1.2 W/cm2组与2.2 W/cm2组1小时切口的再出血时间无显著差别(P>0.05)，但4小时切口的再出血时间后者显著短于前
者。结论 超声有促进r-SK溶解血栓的作用。
中图号 R318.03;R364.15
AcceleratingThrombolysis by Therapeutic Ultrasound from Induced Rebleeding ofRabbit Ear after
Injury Jia Ruyi, Shen Xuedong, Li Zhishan, et al. ShanghaiInstitute of Cardiovascular Diseases, Zhongshan
, 百拇医药
Hospital, Shanghai Medical University, Shanghai 200032
Abstract Objective The purpose was to assess the efficacy of therapeutic ultrasound to enhance
thrombolysis by inducing rebleeding of rabbit after injury in vivo. Methods One hundred and seventy
six full thickness puncture wounds in rabbit ears were made in 22 rabbits. The rabbits were randomly
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allocated to different groups according to 1 and 4 hours after cessation of bleeding: ① Ultrasound
adding saline group; with ultrasound at 2.2 W/cm2, ② recombinantstreptokinase (r-SK ) alone group,and ③ combining r-SK and ultrasound group.Ultrasound was applied at 0.8 MHz with a 50% duty
cycle at 1.2 W/cm2 and 2.2 W/cm2intensities. Results: There was no rebleeding phenomena after 2
, 百拇医药
hours in ultrasound adding saline group. The rebleeding timeswere shorter in ultrasound plus r-SK
group than in r-SK alone group (P<0.001). The rebleeding timesof 4 hour lesions in ultrasound plus
r-SK group were shorter than that of 1 hour lesions in r-SK alonegroup. The rebleeding times with
1.2 W/cm2 were not significantly different compared tothat with 2.2 W/cm2 for 1 hour lesions (P<0.05).
, 百拇医药
But for 4 hour lesions the latter was shorter than the former(P<0.001). Conclusion Therapeutic
ultrasound can accelerate thrombolysis with r-SK.
Key words thrombosis/ther;ultrasonic therapy; streptokinase/ther use;rabbits
经静脉药物溶栓是目前治疗急性心肌梗塞的主要方法。但是溶栓后仅29～54%的病人能
得到正常的血流灌注，这样的治疗结果是不能令人满意的。而且溶栓的效果受梗塞时间(>6
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小时效果较差)和用药剂量的影响〔1〕。大剂量应用溶栓药可以提高溶栓效果，但并发症增
多，甚至造成致命性损害。如何提高溶栓效果是目前人们亟需解决的问题。体外治疗性超声
(external therapeutic ultrasound,简称ETUS)是近年来发展起来的促进血栓溶解的新技术〔2～6〕，实验室初步研究结果令人鼓舞，本研究旨在：①用重组链激酶(RecombinantStreptokinase, r-SK)
诱发兔耳小血管损伤后再出血的方法评价ETUS促进血栓溶解的有效性；②观察ETUS的促进血
栓溶解(助溶)作用的量效和时效关系。
材 料 与 方 法
, http://www.100md.com
一、兔耳血管损伤模型的建立
选择纯种新西兰白兔22只，体重2.2～2.6 kg。静脉注射戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉。耳
部脱毛后，在肉眼看不到血管的部位，在不同时间内用11号手术刀片割穿兔耳，切口长约3～4 mm，从距耳尖5～8 mm开始，对每侧兔耳做4个切口，切口间相距5 mm。先做2个切口，3小时后做
另外2个切口。创面均于割伤后2～5分内止血。4小时后建成2个止血后4小时切口和2个止血后
1小时切口。共有88个止血后4小时切口和88个止血后1小时切口。颈外静脉插管输液供静脉注
射药物用。
二、超声助溶
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采用上海亚医实业有限公司生产的UTU-3000型心血管超声治疗仪。工作频率0.8 MHz，发
射方式为脉冲式，传空比为1∶1，输出功率1.2、2.2 W/cm2，有4个直径2 cm换能器轮流工作，工作2秒停6秒。换能器与兔耳之间置装满水的塑料袋，透声膏涂在塑料袋的上下两面以防因接
触不良有空气存在导致超声波反射。塑料袋内的水温保持在25～30℃。
三、实验动物分组设4个研究组。单用ETUS组(6只兔耳，24个切口)，超声强度为2.2 W/cm2，ETUS作用时
间60分钟；单用药物组(19只兔耳，76个切口，静脉用r-SK 2.5万单位/kg，上海医科大学分子
遗传研究室提供)；药物加2.2 W/cm2 ETUS组(10只兔耳，40个切口，r-SK用量同单用药物组)；
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r-SK加1.2 W/cm2 ETUS组(9只兔耳，36个切口)。后二组在静脉给药的同时，一侧兔耳给予
ETUS治疗，另一侧兔耳不给予ETUS治疗。ETUS作用时间60分钟。四、观察和分析 每5 min观察伤口一次，以伤口的再出血作为显效的标志，计算再出血时间。采用两个样本
均数比较的t检验分析各组之间的差别有无显著意义。评价ETUS强度、凝血时间对助溶效果的影
响。
结 果
6只兔耳，24个切口单用ETUS观察2小时后，所有切口均未发生再出血。表示单独应用ETUS
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并无溶栓效果。
一、单用药物组与药物加2.2 W/cm2 ETUS组再出血时间的比较(表1)。
表1 药物加2.2W/cm2组与单用药物组
再出血时间的比较(分钟)
例数
1小时切口
4小时切口
单用药
20
21.5±1.88
, 百拇医药
31.8±2.24
药物加ETUS
20
11.95±2.19*△
17±1.78*▲
增加(%)
44.42
46.54
注 *：与单药组；△：与同组4小时切口相比；▲：与单药组1小时切口相比；P均<0.001
如表所示，1小时及4小时切口药物加2.2 W/cm2 ETUS助溶后再出血时间分别较单用药组
, 百拇医药
缩短44.42%及46.54%，二、单用药物组与药物加1.2 W/cm2 ETUS组再出血时间的比较(表2)。
表2 药物加1.2 W/cm2组与单用药物组再出血时间的比较(分钟)
例数
1小时切口
4小时切口
单药
18
22.67±2.17
33.5±2.77
药加ETUS
, http://www.100md.com
18
12.55±1.58*△
20.61±2.52*▲
增加(%)
44.64
38.48
注 *：与单药组，P<0.001；△：与同组4小时切口相比，P<0.001；
▲：与单药组1小时切口相比；P均<0.05
如表所示，1小时及4小时切口超声助溶后再出血时间分别较单用药组缩短44.46%及38.48%。
三、药物加2.2 W/cm2 ETUS组和药物加1.2 W/cm2 ETUS组再出血时间的比较(表3)。
, 百拇医药
表3 药物加2.2 W/cm2组和加1.2 W/cm2组
再出血时间比较(分钟)
例数
1小时切口
4小时切口
1.2W/cm2组
18
12.55±1.58
20.61±2.52
2.2W/cm2组
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20
11.95±2.19
17±1.78
P
>0.05
<0.001
如表所示，两组相比，超声助溶后1小时切口再出血时间的差别无显著意义。但4小时切口
药物加1.2 W/cm2 ETUS助溶组效果低于药物加2.2 W/cm2 ETUS助溶组(P<0.001)。
讨 论
以往的动脉及静脉溶栓实验显示，低能量ETUS有促进纤维蛋白溶解的作用。Kudo〔7〕用球
, 百拇医药
囊损伤动脉内膜的方法双测股动脉血栓模型。在静脉用rt-PA的同时，一测血栓给予频率为200 KHz，强度为0.5 W/cm2的ETUS处理，发现超声治疗侧血管再通时间比单用药物侧快(17.1±9.0 min比
71.0±29.8 min)。用同样的模型和超声能量，Yoshizwa〔8〕还发现ETUS治疗能降低rt-PA溶栓
后急性再闭塞的发生率。但也有作者对ETUS助溶血栓的效果持有异议〔4〕。我们从诱发兔耳血
管损伤后再出血评价体外超声助溶血栓效果的实验结果显示：
1.药物加ETUS与单用药物组比较，可使诱发再出血的时间明显缩短。
2.对凝血时间短的伤口，功率1.2 W/cm2 ETUS的超声助溶效果与2.2 W/cm2 ETUS相似，但
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对凝血时间长的血栓，1.2 W/cm2 ETUS的效果不及2.2 W/cm2 ETUS。
3.单独应用ETUS并无溶栓效果。 我们的实验模型和以前犬及兔股动脉血栓模型有重要的区别。该模型的优点之一是能合理
代表正常止血块的形成，并且不需要诸如损伤内皮及向血管内注射血块等用于动脉血栓模型的
操作，实验模型稳定。这种模型的第二个优点是超声场定位准确，因为损伤区表浅。用装有水
的容器将超声与组织隔开，声能衰减小，用此模型来观察ETUS的助溶作用比较客观而准确。必
须指出，我们的实验模型比较表浅，ETUS对深部血栓，特别是冠状动脉血栓的助溶效果尚需做
, 百拇医药
进一步研究。在以后的研究中我们将对此进行探讨。
本文为卫生部课题基金资助项目(96-1-164)
参 考 文 献
1 Timi Study Group. The thrombolysis in myocardial infarction (TIMI) trial: Phase 1 findings. N Engl J Med,1985, 312: 932-936.
2 Hamano K, Kudo M, Yoshizawa S, et al. A new noninvasive thrombolysis enhanced by transcutaneous
ultrasonic irradiation. Eur Heart J, 1991, 12 (Suppl):135-136.
, 百拇医药
3 Kashyap A, Blinc A, Marder VJ, et al. Acceleration of ultrasound in a rabbit ear model of small vessel injury.
Thrombosis Res, 1994, 76(50):475-485.
4 Luo H, Steffen W, Cercek B, et al. Enhancement of thrombolysis by external ultrasound. Am Heart J,1993, 125:1564-1569.
5 Kornowski R, Meltzer RS, Chernine A, et al. Dose external ultrasound accelerate thrombolysis results from
, 百拇医药
a rabbit model.Circulation, 1994, 89(1): 339-344.
6 Harpaz D, Chen X, Francis CW, et al. Ultrasound enhancement ofthrombolysis and reperfusion in vitro. J
Am Coll Cardiol , 1993, 21(6): 1507-1511.
7 Kudo S. Thrombolysis with ultrasound effect. Tokyo Jukeikai MedJ,1989,104:1005-1006.
8 Yoshizawa S. Ultrasound irradiation method for prevention ofacute reoccolution after thrombolysis. Tokyo
Jukeikai Med J, 1992, 107: 265-274.
(收稿 1997-07-02 修回 1997-12-28), http://www.100md.com