月桂氮酮及其混合透皮促进剂对苯佐卡因透皮吸收的影响
作者：李盾 郑明新 王越
单位：深圳市人民医院药学部 518020
关键词：月桂氮酮；苯佐卡因；二甲基亚砜；透皮吸收
中国药师990502月桂氮
酮及其混合透皮促进剂对苯佐卡因透皮吸收的影响
摘 要 目的：研究月桂氮酮(azone)及其混合透皮促进剂对苯佐卡因透皮吸收的影响。方法：以简单小室为装置，以离体大鼠皮为渗透屏障，用紫外分光光度法测定13种供试品透皮接受液的苯佐卡因浓度。结果：经方差分析，含7%azone的苯佐卡因软膏的接受液浓度明显高于含1%，3%，5%，10%，13%，16%azone的软膏(P<0.01)；含azone和二甲基亚砜(DMSO)的混合透皮促进剂其接受液浓度明显高于单一的azone组(P<0.05)。结论：azone对苯佐卡因有极显著的透皮促进作用，其最佳浓度为7%；azone-DMSO混合透皮吸收作用明显比单一的azone好。
, 百拇医药
Effect of Laurocapram and Its Mixed Transdermal Absorpting Accelerating Agent
on the Transdermal Absorption of Benzocaine
Li Dun, Zhen Minxin, Wang Yue
Pharmacy Department, Shenzhen People's hospital, Shenzhen 518020,P.R. China
ABSTRACT Aim: To study the effect of laurocapram (LP) and its mixed transdermal accelerator on the transdermal absorption of benzocaine.Methods:The UV spectrophotometry was used for determining the concentration of benzzocaine of 13 kinds of transdermal accepting liquids with the isolated mice skin as permeable barrier.Results:The accepting liquid concentration of benzocaine ointment containing 7% of LP was singnificant higher than that containing 1%, 3%, 5%, 10%, 13%, and 16% (P<0.01) by the analsis of variance. The accepting liquid concentration of mixed transdermal accelerator containing LP and DMSO was significant higher than that containing single LP (P<0.05).Conclusion:There was very significant transdermal accelerating effect as concerns LP on benzocaine, of them, the best one was that containing 7% of azone. The mixed transdermal absorpting action of that containing azone and DMSO was significant higher than that containing single LP.
, 百拇医药
KEY WORDS Laurocapram; benzocaine; DMSO; transdermal absorption
苯佐卡因(benzocaine,简称BC)为临床常用的非水溶性局部麻醉药，特点：渗透性差、毒性低，国外使用其制剂较多[1]。azone是一种高效、无毒透皮吸收促进剂，它能促进多种药物的透皮吸收，国内外对其研究较多[2～4]。DMSO亦为透皮吸收促进剂[5]，azone及其DMSO的混合透皮促进剂对BC的透皮影响，目前在国内未见报道。本文开展BC透皮吸收的研究，为开发其外用新制剂提供实验依据。
1 实验材料
1.1 仪器与药品
HP8452二级管阵列紫外—可见光分光光度计(美国惠普公司)；azone(广州助剂化工厂)；苯佐卡因(常州药物研究所)；DMSO(广州新港化工厂)；聚乙二醇300和聚乙二醇4000(日本)。
, http://www.100md.com
1.2 受试对象
雄性大白鼠(英国路易纯种，重300±40g)。
2 实验方法
2.1 吸收光谱的测定
将BC、azone、DMSO分别配制成20μg.ml-1的生理盐水(NS)溶液。再按2.4项下进行空白鼠皮透皮试验，8h时取接受液5ml，在200～400nm波长范围内，以NS为空白，分别对以上3种溶液扫描，得吸收光谱(图1)。由图可见BC在279nm处有最大吸收、azone、DMSO液和空白鼠皮接受液(blank)在此处的吸收值极小，对本实验测定无干扰。
2.2 标准曲线的绘制
精密称取干燥至恒重的BC50mg，置100ml容量瓶中，加NS至刻度，摇匀，即得0.05mg.ml-1贮备液。精密量取贮备液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别置50ml容量瓶中，加NS至刻度，在279nm处，以NS为空白测定吸收度，经HP8452处理，在5～50μg.ml-1线性范围内得标准曲线方程：C=37.57A+0.11，r=0.9998,n=6。
, http://www.100md.com
2.3 供试品的制备
图1 干扰实验吸收光谱图
以聚乙二醇(PEG300和PEG4000)为软膏基质，按下表取azone、DMSO，配制得13种含不同透皮促进剂的20%BC软膏供试品(见表1)。
表1 供试品透皮促进剂含量 编号
A
B
C
D
E
F
, 百拇医药
G
H
I
J
K
L
M
氮酮含量(%)
0
1
3
5
7
10
, http://www.100md.com
13
16
5
5
7
0
0
二甲基亚砜含量(%)
0
0
0
0
0
0
, http://www.100md.com
0
0
5
10
10
5
10
2.4 透皮实验
将体重300±40g的雄性大鼠断颈处死后，剥离腹部皮，用剪刀去毛后NS冲洗数遍备用。实验装置按简单小室[6]制作。释放池为内径1.3cm的玻璃通管，将处理好的离体鼠皮角质层朝上用逢合线固定在释放池下端，上端加供试品1g，接受池加NS130ml，在37±2℃水温下连续搅拌(200r.min-1)，在样品池进入接受池后的1，2，3，4，5，6，7，8h，分别定点精密吸取接受液5ml，同时补充NS5ml。在λ=279nm处以NS作空白，测定吸收度，将吸收值代入标准曲线方程，计算浓度(Ct)，然后算出各时间的BC透皮累积浓度(简称CBC，μg.ml-1)。
, http://www.100md.com
3 数据处理与结果
结果见表2，单一氮酮组(A，B，C，D，E，F，G，H)、单一DMSO组(L，M)和混合组(I，J，K)于各时间(1，2，3，4，5，6，7，8h)的CBC分别经statistics统计学软件进行方差分析及各组均数的两两比较。结果如下：
3.1 单一氮酮组中E分别在各时间(1，2，3，4，5，6，7，8h)与A，B，C，D，F，G，H各时间的CBC平均数间都有极显著性差异(P<0.01)，即E组的CBC在各时间均明显高于A，B，C，D，F，G，H组。
表2 不同浓度的单一及混合透皮促进剂各时刻累积透皮量 样品编号
累积透皮含量
±s(μg.ml-1)n=6
, 百拇医药
1h
2h
3h
4h
5h
6h
7h
8h
A
2.54±0.47
4.58±0.89
6.01±1.33
7.55±0.77
, http://www.100md.com
9.03±0.81
11.84±1.04
12.95±0.93
14.83±1.26
B
10.64±1.67
12.75±1.14
15.21±1.27
19.37±1.84
22.57±2.35
25.49±2.18
27.37±2.46
, http://www.100md.com
31.94±2.71
C
11.42±1.36
18.83±2.17
28.44±2.61
37.24±2.86
45.83±3.58
54.14±3.91
63.71±3.76
69.52±4.95
D
15.74±2.14
, http://www.100md.com
19.63±2.49
22.38±2.77
27.13±3.42
32.52±3.21
34.63±2.83
37.11±3.64
42.13±3.75
E
24.31±2.89
35.08±3.24
48.86±3.97
56.64±4.75
, 百拇医药
69.42±5.47
78.24±5.91
89.03±7.12
99.76±7.49
F
10.15±0.81
20.48±1.86
27.96±3.28
41.44±3.94
48.92±4.17
62.43±5.02
69.92±5.82
, http://www.100md.com
78.36±6.31
G
10.28±0.92
15.15±1.37
19.31±1.54
25.47±1.78
30.63±2.08
34.79±2.57
41.33±2.91
46.11±3.46
H
18.09±1.24
, http://www.100md.com
23.42±1.74
28.84±2.39
32.26±2.81
38.68±2.95
44.15±3.52
50.57±4.18
55.94±4.53
I
12.10±0.87
19.48±1.59
24.86±1.87
34.24±2.68
, 百拇医药
41.62±3.31
48.26±3.83
56.47±3.92
63.76±4.77
J
5.76±0.72
18.43±1.29
27.87±2.34
43.89±3.17
54.62±3.86
69.35±5.39
82.11±7.92
, http://www.100md.com
94.81±9.51
K
28.85±4.71
45.17±5.26
53.54±5.64
63.91±6.73
74.28±7.19
84.65±9.83
92.69±8.24
105.4±8.61
L
8.51±0.98
, 百拇医药
13.81±2.42
19.74±1.63
23.45±1.73
25.18±2.52
29.34±2.49
33.85±2.46
37.27±3.67
M
3.98±1.27
15.52±1.38
21.06±1.57
26.73±2.38
, http://www.100md.com
30.14±2.59
32.62±3.92
35.07±2.61
39.97±3.85
3.2 混合组中I、J在4，5，6，7，8h的CBC分别高于单一氮酮组中的D，在统计学上有极显著性差异(P<0.01)；K组在1，2，3，4，5，8h的CBC分别高于E组，有极显著性差异(P<0.01)；K组在6，7h的CBC分别高于E组，有显著性差异(P<0.05)。
3.3 混合组的I在各时间的CBC分别高于单一DMSO组中L，有极显著性差异(P<0.01)；J、K组在各时间的CBC分别高于单一DMSO组中M，有极显著性差异(P<0.01)。
, 百拇医药
3.4 A组在各时间CBC明显低于其它组的CBC，有极显著性差异(P<0.01)。
4 讨论
4.1 azone对亲水性或疏水性化合物均有增强透皮吸收的作用，用差示扫描热法和傅里叶变换红外光谱研究其对角质层的影响表明：它主要作用于细胞类脂双分子层，增加双分子层的流动性，降低了相变温度，促进了药物通过细胞间的扩散。azone的促透作用往往不随浓度的提高而增加，其最佳浓度与药物的物理化学性质及所用介质有关[4]。BC为疏水性化合物，从3.1的实验结果表明：azone对BC有极显著透皮促进作用，其对BC的透皮作用并不随其浓度(1%～16%)的增大而增大，在单一氮酮组中7%azone对BC软膏的透皮促进作用最佳(P<0.01)。
4.2 从3.2和3.3可知，混合透皮促进剂(azone—DMSO)组比其对应含量的单一azone和单一的DMSO组促透效果好。
, 百拇医药
4.3 从3.4可知无透皮吸收促进剂组A，比其它组的透皮吸收差。
4.4 本体外透皮实验，应用离体鼠皮，方法简捷，为了消除皮下脂肪游离皮毛对测定的影响，在准备离体鼠皮时，应尽量去除皮下脂肪。为防止损伤皮肤角质层，以免影响药物在皮肤上的渗透，本实验采用剪刀去毛。
参考文献
1 倪宏. 开发苯佐卡因新剂型. 现代应用药学， 1987， 4(6)：32
2 Sugibayashi K, hosoya K, Morimoto Y, et al. Effect of the absorption enhancer, azone, on the transport 5-fluorouracil across hairless rat skin. J Pharm Pharmacol， 1985, 37(8):578～580
, http://www.100md.com
3 Eika T.Transdermal delivery of anxiolytics: In vitro skin permeation of midazolam maleate and diazepam. Int J Pharm, 1986, 33:37～43
4 陆彬. 药物新剂型与新技术. 第一版. 北京： 人民卫生出版社. 1998. 353～385
5 汤光. 现代药物学. 第一版. 北京： 中国医药科技出版社. 1997.947
6 Vromans H, Moolenaar F. Effect of solvents on rectal absorption rate of paracetamol in man: an in vitro approach. Int J Pharm, 1985, 26:5～13
(19990203收稿 19990430修回), http://www.100md.com
单位：深圳市人民医院药学部 518020
关键词：月桂氮酮；苯佐卡因；二甲基亚砜；透皮吸收
中国药师990502月桂氮
酮及其混合透皮促进剂对苯佐卡因透皮吸收的影响摘 要 目的：研究月桂氮
酮(azone)及其混合透皮促进剂对苯佐卡因透皮吸收的影响。方法：以简单小室为装置，以离体大鼠皮为渗透屏障，用紫外分光光度法测定13种供试品透皮接受液的苯佐卡因浓度。结果：经方差分析，含7%azone的苯佐卡因软膏的接受液浓度明显高于含1%，3%，5%，10%，13%，16%azone的软膏(P<0.01)；含azone和二甲基亚砜(DMSO)的混合透皮促进剂其接受液浓度明显高于单一的azone组(P<0.05)。结论：azone对苯佐卡因有极显著的透皮促进作用，其最佳浓度为7%；azone-DMSO混合透皮吸收作用明显比单一的azone好。, 百拇医药
Effect of Laurocapram and Its Mixed Transdermal Absorpting Accelerating Agent
on the Transdermal Absorption of Benzocaine
Li Dun, Zhen Minxin, Wang Yue
Pharmacy Department, Shenzhen People's hospital, Shenzhen 518020,P.R. China
ABSTRACT Aim: To study the effect of laurocapram (LP) and its mixed transdermal accelerator on the transdermal absorption of benzocaine.Methods:The UV spectrophotometry was used for determining the concentration of benzzocaine of 13 kinds of transdermal accepting liquids with the isolated mice skin as permeable barrier.Results:The accepting liquid concentration of benzocaine ointment containing 7% of LP was singnificant higher than that containing 1%, 3%, 5%, 10%, 13%, and 16% (P<0.01) by the analsis of variance. The accepting liquid concentration of mixed transdermal accelerator containing LP and DMSO was significant higher than that containing single LP (P<0.05).Conclusion:There was very significant transdermal accelerating effect as concerns LP on benzocaine, of them, the best one was that containing 7% of azone. The mixed transdermal absorpting action of that containing azone and DMSO was significant higher than that containing single LP.
, 百拇医药
KEY WORDS Laurocapram; benzocaine; DMSO; transdermal absorption
苯佐卡因(benzocaine,简称BC)为临床常用的非水溶性局部麻醉药，特点：渗透性差、毒性低，国外使用其制剂较多[1]。azone是一种高效、无毒透皮吸收促进剂，它能促进多种药物的透皮吸收，国内外对其研究较多[2～4]。DMSO亦为透皮吸收促进剂[5]，azone及其DMSO的混合透皮促进剂对BC的透皮影响，目前在国内未见报道。本文开展BC透皮吸收的研究，为开发其外用新制剂提供实验依据。
1 实验材料
1.1 仪器与药品
HP8452二级管阵列紫外—可见光分光光度计(美国惠普公司)；azone(广州助剂化工厂)；苯佐卡因(常州药物研究所)；DMSO(广州新港化工厂)；聚乙二醇300和聚乙二醇4000(日本)。
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1.2 受试对象
雄性大白鼠(英国路易纯种，重300±40g)。
2 实验方法
2.1 吸收光谱的测定
将BC、azone、DMSO分别配制成20μg.ml-1的生理盐水(NS)溶液。再按2.4项下进行空白鼠皮透皮试验，8h时取接受液5ml，在200～400nm波长范围内，以NS为空白，分别对以上3种溶液扫描，得吸收光谱(图1)。由图可见BC在279nm处有最大吸收、azone、DMSO液和空白鼠皮接受液(blank)在此处的吸收值极小，对本实验测定无干扰。
2.2 标准曲线的绘制
精密称取干燥至恒重的BC50mg，置100ml容量瓶中，加NS至刻度，摇匀，即得0.05mg.ml-1贮备液。精密量取贮备液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别置50ml容量瓶中，加NS至刻度，在279nm处，以NS为空白测定吸收度，经HP8452处理，在5～50μg.ml-1线性范围内得标准曲线方程：C=37.57A+0.11，r=0.9998,n=6。
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2.3 供试品的制备
图1 干扰实验吸收光谱图
以聚乙二醇(PEG300和PEG4000)为软膏基质，按下表取azone、DMSO，配制得13种含不同透皮促进剂的20%BC软膏供试品(见表1)。
表1 供试品透皮促进剂含量 编号
A
B
C
D
E
F
, 百拇医药
G
H
I
J
K
L
M
氮酮含量(%)
0
1
3
5
7
10
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13
16
5
5
7
0
0
二甲基亚砜含量(%)
0
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0
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0
0
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0
0
5
10
10
5
10
2.4 透皮实验
将体重300±40g的雄性大鼠断颈处死后，剥离腹部皮，用剪刀去毛后NS冲洗数遍备用。实验装置按简单小室[6]制作。释放池为内径1.3cm的玻璃通管，将处理好的离体鼠皮角质层朝上用逢合线固定在释放池下端，上端加供试品1g，接受池加NS130ml，在37±2℃水温下连续搅拌(200r.min-1)，在样品池进入接受池后的1，2，3，4，5，6，7，8h，分别定点精密吸取接受液5ml，同时补充NS5ml。在λ=279nm处以NS作空白，测定吸收度，将吸收值代入标准曲线方程，计算浓度(Ct)，然后算出各时间的BC透皮累积浓度(简称CBC，μg.ml-1)。
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3 数据处理与结果
结果见表2，单一氮酮组(A，B，C，D，E，F，G，H)、单一DMSO组(L，M)和混合组(I，J，K)于各时间(1，2，3，4，5，6，7，8h)的CBC分别经statistics统计学软件进行方差分析及各组均数的两两比较。结果如下：
3.1 单一氮酮组中E分别在各时间(1，2，3，4，5，6，7，8h)与A，B，C，D，F，G，H各时间的CBC平均数间都有极显著性差异(P<0.01)，即E组的CBC在各时间均明显高于A，B，C，D，F，G，H组。
表2 不同浓度的单一及混合透皮促进剂各时刻累积透皮量 样品编号
累积透皮含量
±s(μg.ml-1)n=6, 百拇医药
1h
2h
3h
4h
5h
6h
7h
8h
A
2.54±0.47
4.58±0.89
6.01±1.33
7.55±0.77
, http://www.100md.com
9.03±0.81
11.84±1.04
12.95±0.93
14.83±1.26
B
10.64±1.67
12.75±1.14
15.21±1.27
19.37±1.84
22.57±2.35
25.49±2.18
27.37±2.46
, http://www.100md.com
31.94±2.71
C
11.42±1.36
18.83±2.17
28.44±2.61
37.24±2.86
45.83±3.58
54.14±3.91
63.71±3.76
69.52±4.95
D
15.74±2.14
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19.63±2.49
22.38±2.77
27.13±3.42
32.52±3.21
34.63±2.83
37.11±3.64
42.13±3.75
E
24.31±2.89
35.08±3.24
48.86±3.97
56.64±4.75
, 百拇医药
69.42±5.47
78.24±5.91
89.03±7.12
99.76±7.49
F
10.15±0.81
20.48±1.86
27.96±3.28
41.44±3.94
48.92±4.17
62.43±5.02
69.92±5.82
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78.36±6.31
G
10.28±0.92
15.15±1.37
19.31±1.54
25.47±1.78
30.63±2.08
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41.33±2.91
46.11±3.46
H
18.09±1.24
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23.42±1.74
28.84±2.39
32.26±2.81
38.68±2.95
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50.57±4.18
55.94±4.53
I
12.10±0.87
19.48±1.59
24.86±1.87
34.24±2.68
, 百拇医药
41.62±3.31
48.26±3.83
56.47±3.92
63.76±4.77
J
5.76±0.72
18.43±1.29
27.87±2.34
43.89±3.17
54.62±3.86
69.35±5.39
82.11±7.92
, http://www.100md.com
94.81±9.51
K
28.85±4.71
45.17±5.26
53.54±5.64
63.91±6.73
74.28±7.19
84.65±9.83
92.69±8.24
105.4±8.61
L
8.51±0.98
, 百拇医药
13.81±2.42
19.74±1.63
23.45±1.73
25.18±2.52
29.34±2.49
33.85±2.46
37.27±3.67
M
3.98±1.27
15.52±1.38
21.06±1.57
26.73±2.38
, http://www.100md.com
30.14±2.59
32.62±3.92
35.07±2.61
39.97±3.85
3.2 混合组中I、J在4，5，6，7，8h的CBC分别高于单一氮酮组中的D，在统计学上有极显著性差异(P<0.01)；K组在1，2，3，4，5，8h的CBC分别高于E组，有极显著性差异(P<0.01)；K组在6，7h的CBC分别高于E组，有显著性差异(P<0.05)。
3.3 混合组的I在各时间的CBC分别高于单一DMSO组中L，有极显著性差异(P<0.01)；J、K组在各时间的CBC分别高于单一DMSO组中M，有极显著性差异(P<0.01)。
, 百拇医药
3.4 A组在各时间CBC明显低于其它组的CBC，有极显著性差异(P<0.01)。
4 讨论
4.1 azone对亲水性或疏水性化合物均有增强透皮吸收的作用，用差示扫描热法和傅里叶变换红外光谱研究其对角质层的影响表明：它主要作用于细胞类脂双分子层，增加双分子层的流动性，降低了相变温度，促进了药物通过细胞间的扩散。azone的促透作用往往不随浓度的提高而增加，其最佳浓度与药物的物理化学性质及所用介质有关[4]。BC为疏水性化合物，从3.1的实验结果表明：azone对BC有极显著透皮促进作用，其对BC的透皮作用并不随其浓度(1%～16%)的增大而增大，在单一氮酮组中7%azone对BC软膏的透皮促进作用最佳(P<0.01)。
4.2 从3.2和3.3可知，混合透皮促进剂(azone—DMSO)组比其对应含量的单一azone和单一的DMSO组促透效果好。
, 百拇医药
4.3 从3.4可知无透皮吸收促进剂组A，比其它组的透皮吸收差。
4.4 本体外透皮实验，应用离体鼠皮，方法简捷，为了消除皮下脂肪游离皮毛对测定的影响，在准备离体鼠皮时，应尽量去除皮下脂肪。为防止损伤皮肤角质层，以免影响药物在皮肤上的渗透，本实验采用剪刀去毛。
参考文献
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(19990203收稿 19990430修回), http://www.100md.com