盐酸多西环素有关物质检查方法的改进
作者：赵长敏 徐捷京
单位：赵长敏(河南省药品检验所 郑州 450003)；徐捷京(河南省新乡市药品检验所)
关键词：多西环素，盐酸；薄层层析法
中国药师000127 Improvement of Testing Method for Related Substances in Doxycycline Hydrochloride
Zhao Changmin
(Henan Province Institute for Drug Control, Zhengzhou 450003, P.R.China)
Xu Jiejing
, 百拇医药
(Xinxiang Institute for Drug Control)
ABSTRACT The new testing method for related substances in doxycycline hydrochloride(DC) was reported. The method was simple, and had good Separating effect and reproducibility. Two unknown impurities were found besides oxycetracycline, metacycline and 6-epidoxycycline in doxycycline hydrochloride.
KEY WORDS Doxycycline hydrochloride▲
盐酸多西环素(DC)是以土霉素(OTC)为原料的半合成四环素类广谱抗生素，合成过程中可能产生美他环节(MeC)、β-差向异构体(EDC)等有关物质，使毒性增大，效疗降低，因此，有必要进行有关物质检查。文献法[1]样品溶液的斑点拖尾严重，DC、OTC、MeC、EDC的混合溶液只能显示出三个斑点；现介绍检测盐酸多西环素及有关物质的改进薄层色谱法。
, http://www.100md.com
1 仪器与药品
1.1 薄层层析缸，薄层板(20cm×10cm)，紫外灯(365nm)。
1.2 DC原料(河南开封抗生素制药厂)；DC、OTC、MeC标准品及EDC对照品(中国药品生物制品检定所)；硅胶H(青岛海洋化工厂)；EDTA-2Na、氢氧化钠、二氯甲烷、甲醇均为分析纯。
2 实验方法
2.1 薄层条件 取硅胶H1g，加10%EDTA-2Na溶液(pH9.0)3.5ml，研磨成均匀糊浆，涂布于玻璃板上，室温下晾干，临用时于105℃活化1h。展开剂为二氯甲烷-甲醇-水(57∶35∶6)。
2.2 方法与结果 取按文献[1]配制好的供试品溶液(1)，对照品溶液(2)，(3)，(4)及混合溶液(5)各1μl，分别点于同一薄层板上，用展开剂展开后，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，结果见图1。供试品溶液(1)斑点圆整，混合溶液中各物斑点能明显分离，并在供试品溶液(1)中发现2个未知斑点。
, 百拇医药
图1 薄层色谱图
(1)DC样品(10mg.ml-1) (2)OTC标准品(0.1mg.ml-1) (3)MeC标准品(0.2mg.ml-1) (4)EDC对
照品(0.2mg.ml-1) (5)含EDC、DC、OTC、MeC(0.2，0.1，0.1，0.2mg.ml-1)的混合对照品
A.EDC(Rf值0.23) B.MeC(Rf值0.30) C.OTC(Rf值0.38) D.DC(Rf值0.46) E.F.(两未知
物Rf值分别为0.55、0.59)
, 百拇医药
3 讨论
3.1 10%EDTA-2Na溶液pH值的选择：选用pH值7.5，8.5，9.0，10.0的10%EDTA-2Na溶液调制薄层板，结果显示，pH9.0时样品斑点圆整，混合溶液分离效果较好，在pH值偏低时，样品斑点拖尾严重，混合溶液分离效果不佳。
3.2 文献[2]乃将制备的薄层板上均匀喷洒EDTA-2Na溶液(pH9.0)，操作繁琐，且不易喷匀。本文则将溶液直接调制薄层板，操作简单，效果好。
3.3 由图1可见，未知物质DC样品中存在两个未知物质，Rf值分别为0.55(淡兰色)、0.59(黄色)，而对照品和混合溶液中均未见这种物质，两种物质性质如何，有待于进一步探讨。
3.4 本法能适应较宽的温度范围(10～30℃)和湿度范围(40～80%)。
参 考 文 献
[1]中国药典1995年版二部： 612
[2]BP1993： 243
[3]刘利军. 盐酸脱氧土霉素有关物质检查方法的改进. 药物分析杂志， 1993， 13(5)：318～319
(19990628收稿 19991227修回), 百拇医药
单位：赵长敏(河南省药品检验所 郑州 450003)；徐捷京(河南省新乡市药品检验所)
关键词：多西环素，盐酸；薄层层析法
中国药师000127 Improvement of Testing Method for Related Substances in Doxycycline Hydrochloride
Zhao Changmin
(Henan Province Institute for Drug Control, Zhengzhou 450003, P.R.China)
Xu Jiejing
, 百拇医药
(Xinxiang Institute for Drug Control)
ABSTRACT The new testing method for related substances in doxycycline hydrochloride(DC) was reported. The method was simple, and had good Separating effect and reproducibility. Two unknown impurities were found besides oxycetracycline, metacycline and 6-epidoxycycline in doxycycline hydrochloride.
KEY WORDS Doxycycline hydrochloride▲
盐酸多西环素(DC)是以土霉素(OTC)为原料的半合成四环素类广谱抗生素，合成过程中可能产生美他环节(MeC)、β-差向异构体(EDC)等有关物质，使毒性增大，效疗降低，因此，有必要进行有关物质检查。文献法[1]样品溶液的斑点拖尾严重，DC、OTC、MeC、EDC的混合溶液只能显示出三个斑点；现介绍检测盐酸多西环素及有关物质的改进薄层色谱法。
, http://www.100md.com
1 仪器与药品
1.1 薄层层析缸，薄层板(20cm×10cm)，紫外灯(365nm)。
1.2 DC原料(河南开封抗生素制药厂)；DC、OTC、MeC标准品及EDC对照品(中国药品生物制品检定所)；硅胶H(青岛海洋化工厂)；EDTA-2Na、氢氧化钠、二氯甲烷、甲醇均为分析纯。
2 实验方法
2.1 薄层条件 取硅胶H1g，加10%EDTA-2Na溶液(pH9.0)3.5ml，研磨成均匀糊浆，涂布于玻璃板上，室温下晾干，临用时于105℃活化1h。展开剂为二氯甲烷-甲醇-水(57∶35∶6)。
2.2 方法与结果 取按文献[1]配制好的供试品溶液(1)，对照品溶液(2)，(3)，(4)及混合溶液(5)各1μl，分别点于同一薄层板上，用展开剂展开后，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，结果见图1。供试品溶液(1)斑点圆整，混合溶液中各物斑点能明显分离，并在供试品溶液(1)中发现2个未知斑点。
, 百拇医药
图1 薄层色谱图
(1)DC样品(10mg.ml-1) (2)OTC标准品(0.1mg.ml-1) (3)MeC标准品(0.2mg.ml-1) (4)EDC对
照品(0.2mg.ml-1) (5)含EDC、DC、OTC、MeC(0.2，0.1，0.1，0.2mg.ml-1)的混合对照品
A.EDC(Rf值0.23) B.MeC(Rf值0.30) C.OTC(Rf值0.38) D.DC(Rf值0.46) E.F.(两未知
物Rf值分别为0.55、0.59)
, 百拇医药
3 讨论
3.1 10%EDTA-2Na溶液pH值的选择：选用pH值7.5，8.5，9.0，10.0的10%EDTA-2Na溶液调制薄层板，结果显示，pH9.0时样品斑点圆整，混合溶液分离效果较好，在pH值偏低时，样品斑点拖尾严重，混合溶液分离效果不佳。
3.2 文献[2]乃将制备的薄层板上均匀喷洒EDTA-2Na溶液(pH9.0)，操作繁琐，且不易喷匀。本文则将溶液直接调制薄层板，操作简单，效果好。
3.3 由图1可见，未知物质DC样品中存在两个未知物质，Rf值分别为0.55(淡兰色)、0.59(黄色)，而对照品和混合溶液中均未见这种物质，两种物质性质如何，有待于进一步探讨。
3.4 本法能适应较宽的温度范围(10～30℃)和湿度范围(40～80%)。
参 考 文 献
[1]中国药典1995年版二部： 612
[2]BP1993： 243
[3]刘利军. 盐酸脱氧土霉素有关物质检查方法的改进. 药物分析杂志， 1993， 13(5)：318～319
(19990628收稿 19991227修回), 百拇医药