不同炮制方法对吴茱萸中吴茱萸内酯的影响
作者：任世禾 汪国权
单位：任世禾(上海市中医医院 200071)；汪国权(上海市疾病控制中心 200071)
关键词：吴茱萸；吴茱萸内酯；液质联用
首都医药000940摘要：目的：考察不同炮制工艺对中药吴茱萸中吴茱萸内酯的影响。方法：采用液质联用的方法，以A：0.1%醋酸/水溶液，B：0.1%醋酸/乙腈为流动相，梯度洗脱。结果：通过不同炮制工艺，吴茱萸中吴茱萸内酯含量依次按生品、姜汁、醋、甘草汁、黄酒、黑大豆下降。结论：各地区炮制工艺规范不同，吴茱萸内酯也就有差异。
中药吴茱萸(Evodia rutaecarpa(Juss),Benth)为芸香科植物吴茱萸干燥近成熟的果实，有温中散寒，疏肝止痛之功效[1]。常用于治疗脘腹冷痛、呕吐腹泻、头痛、胃痛、疝痛和痛经等。《本草纲目》称吴茱萸“开郁化滞，治吞酸、厥阴、痰涎头痛、阴毒腹痛、疝气血痢和喉舌口疮”。近代医学亦证明吴茱萸有镇痛、安神、抗菌、降压和抗缺氧等药理作用。目前临床最常用的是以甘草制吴茱萸(药典法)，但文献记载，有醋、酒、姜、大豆汁等炮制方法，且疗效不同[2]，而且收录于各省区炮制规范中，在各地普遍应用。本文用HPLC-MS联用的方法对这几种炮制品中的吴茱萸内酯进行含量测定，报道如下：
, 百拇医药
1 仪器与试药
Waters Alliance 2690,HPLC-MS液质联动仪；吴茱萸内酯标准品(Evodin)由中国药品生物制品检定所提供，乙腈为进口色谱纯，醋酸、甲醇均为分析纯，水为重蒸馏水。米醋：酸度≥4.5g/100ml的醋酸汁，浓度≥4°B′e，产品标准号：0/BLAT22′上海海鸥酿造公司醋厂。黄酒：上海枫泾厂产，含醇量14.5%。生药：购于上海药材公司，经上海市医药管理局中药质量监督检验站鉴定为Evodia rutaecarpa(Juss),Benth的干燥近成熟果实。
2 实验方法
2.1 不同炮制品制法
净吴茱萸：将原药材除去杂质，洗净，干燥。
甘草制吴茱萸[3]：
, 百拇医药
取净吴茱萸200g，生甘草12.5g(新疆条草)。甘草按常规水煎方法煎煮2次，滤过，滤液合并，并浓缩至200ml，(与吴茱萸1∶1量)。趁热倒入吴茱萸生药内，焖润，每隔数小时翻拌一次，待药汁全部吸尽后，个身膨起，表面潮湿而质软时，取置竹匾内摊晒至干，即得甘草制品。
黑大豆制吴茱萸：
取黑大豆(黑皮绿肉)20g，打碎，煎煮滤液浓缩至200ml，与吴茱萸1∶1量，置不锈钢锅多次翻拌，文火炒至汁水全部吸尽，置竹匾内摊晒至干，得黑大豆制品。
米醋制吴茱萸：
取米醋30ml，稀释至200ml，取净吴茱萸倒入容器内(1∶1)，浸透，不时翻动，待吸尽后，焖润2小时，用文火炒至半干，取出，晾晒至干即得醋制品。
黄酒制吴茱萸：
, 百拇医药
取黄酒30ml，稀释至200ml，方法与醋制相同。
生姜制吴茱萸：
鲜生姜50g，捣烂取汁，加水至200ml，方法与醋制相同。
2.2 液相色谱-质谱-计算机联用条件
Watess.Alliance.2690 HPLC条件：层析注：symmetry.C18(2.1mm*150mm)
流动相：A：0.1% 醋酸-水溶液
B：0.1% 醋酸-乙腈
梯度洗脱：0-13分钟，A：47%-20%，B：53%-80%，流速：0.2ml/min。
, 百拇医药
OCP-V3.1-NT4190质谱仪，分辨率500，电离方式EI，电子能量0.5V，离子源温度100℃，加速电压3.99KV。
2.3 吴茱萸生品及炮制品的制备
吴茱萸生品、甘草制品、大豆制品、醋制品、酒制品、姜制品各20g，粉碎过20目筛，加甲醇冷浸12小时，滤过，分别置于10ml容量瓶中，取10ml进样。
2.4 测定结果，见表1。
表1 生药及各炮制品吴茱萸内酯HPLC-MS结果： 名 称
吴茱萸内酯含量%
吴茱萸生药
1.719
, 百拇医药 甘草制品
1.152
大豆制品
0.977
醋制品
1.216
姜制品
1.283
酒制品
1.041
3 讨论
3.1 本实验结果表明吴茱茛内酯含量按生品、姜制、醋制、甘草制、酒制、黑大豆制收得率依次下降，生品内酯含量明显高于炮制品。特别是黑大豆制品，与古人用豆汁作为辅料炮制吴茱萸药材的意图相符。
, 百拇医药
3.2 吴茱萸内酯临床疗效无明确报道。据古代文献记载[2]不同炮制品在临床治疗有偏重。例：酒制品治心腹气滞作痛，醋制品疏肝镇痛，姜制品祛寒镇痛等等。内酯的含量是否对临床治疗有影响、镇痛部位及效果有不同，至于实际疗效尚需进一步药效和药理验证。 参考文献
1，《全国中草药汇编》上册.北京人民卫生出版社，1975：452～453
2，中药炮制学.上海科学技术出版社.1983：158
3，王易宾等.中药材.1993，16(9)
(2000-08-03收稿), 百拇医药
单位：任世禾(上海市中医医院 200071)；汪国权(上海市疾病控制中心 200071)
关键词：吴茱萸；吴茱萸内酯；液质联用
首都医药000940摘要：目的：考察不同炮制工艺对中药吴茱萸中吴茱萸内酯的影响。方法：采用液质联用的方法，以A：0.1%醋酸/水溶液，B：0.1%醋酸/乙腈为流动相，梯度洗脱。结果：通过不同炮制工艺，吴茱萸中吴茱萸内酯含量依次按生品、姜汁、醋、甘草汁、黄酒、黑大豆下降。结论：各地区炮制工艺规范不同，吴茱萸内酯也就有差异。
中药吴茱萸(Evodia rutaecarpa(Juss),Benth)为芸香科植物吴茱萸干燥近成熟的果实，有温中散寒，疏肝止痛之功效[1]。常用于治疗脘腹冷痛、呕吐腹泻、头痛、胃痛、疝痛和痛经等。《本草纲目》称吴茱萸“开郁化滞，治吞酸、厥阴、痰涎头痛、阴毒腹痛、疝气血痢和喉舌口疮”。近代医学亦证明吴茱萸有镇痛、安神、抗菌、降压和抗缺氧等药理作用。目前临床最常用的是以甘草制吴茱萸(药典法)，但文献记载，有醋、酒、姜、大豆汁等炮制方法，且疗效不同[2]，而且收录于各省区炮制规范中，在各地普遍应用。本文用HPLC-MS联用的方法对这几种炮制品中的吴茱萸内酯进行含量测定，报道如下：
, 百拇医药
1 仪器与试药
Waters Alliance 2690,HPLC-MS液质联动仪；吴茱萸内酯标准品(Evodin)由中国药品生物制品检定所提供，乙腈为进口色谱纯，醋酸、甲醇均为分析纯，水为重蒸馏水。米醋：酸度≥4.5g/100ml的醋酸汁，浓度≥4°B′e，产品标准号：0/BLAT22′上海海鸥酿造公司醋厂。黄酒：上海枫泾厂产，含醇量14.5%。生药：购于上海药材公司，经上海市医药管理局中药质量监督检验站鉴定为Evodia rutaecarpa(Juss),Benth的干燥近成熟果实。
2 实验方法
2.1 不同炮制品制法
净吴茱萸：将原药材除去杂质，洗净，干燥。
甘草制吴茱萸[3]：
, 百拇医药
取净吴茱萸200g，生甘草12.5g(新疆条草)。甘草按常规水煎方法煎煮2次，滤过，滤液合并，并浓缩至200ml，(与吴茱萸1∶1量)。趁热倒入吴茱萸生药内，焖润，每隔数小时翻拌一次，待药汁全部吸尽后，个身膨起，表面潮湿而质软时，取置竹匾内摊晒至干，即得甘草制品。
黑大豆制吴茱萸：
取黑大豆(黑皮绿肉)20g，打碎，煎煮滤液浓缩至200ml，与吴茱萸1∶1量，置不锈钢锅多次翻拌，文火炒至汁水全部吸尽，置竹匾内摊晒至干，得黑大豆制品。
米醋制吴茱萸：
取米醋30ml，稀释至200ml，取净吴茱萸倒入容器内(1∶1)，浸透，不时翻动，待吸尽后，焖润2小时，用文火炒至半干，取出，晾晒至干即得醋制品。
黄酒制吴茱萸：
, 百拇医药
取黄酒30ml，稀释至200ml，方法与醋制相同。
生姜制吴茱萸：
鲜生姜50g，捣烂取汁，加水至200ml，方法与醋制相同。
2.2 液相色谱-质谱-计算机联用条件
Watess.Alliance.2690 HPLC条件：层析注：symmetry.C18(2.1mm*150mm)
流动相：A：0.1% 醋酸-水溶液
B：0.1% 醋酸-乙腈
梯度洗脱：0-13分钟，A：47%-20%，B：53%-80%，流速：0.2ml/min。
, 百拇医药
OCP-V3.1-NT4190质谱仪，分辨率500，电离方式EI，电子能量0.5V，离子源温度100℃，加速电压3.99KV。
2.3 吴茱萸生品及炮制品的制备
吴茱萸生品、甘草制品、大豆制品、醋制品、酒制品、姜制品各20g，粉碎过20目筛，加甲醇冷浸12小时，滤过，分别置于10ml容量瓶中，取10ml进样。
2.4 测定结果，见表1。
表1 生药及各炮制品吴茱萸内酯HPLC-MS结果： 名 称
吴茱萸内酯含量%
吴茱萸生药
1.719
, 百拇医药 甘草制品
1.152
大豆制品
0.977
醋制品
1.216
姜制品
1.283
酒制品
1.041
3 讨论
3.1 本实验结果表明吴茱茛内酯含量按生品、姜制、醋制、甘草制、酒制、黑大豆制收得率依次下降，生品内酯含量明显高于炮制品。特别是黑大豆制品，与古人用豆汁作为辅料炮制吴茱萸药材的意图相符。
, 百拇医药
3.2 吴茱萸内酯临床疗效无明确报道。据古代文献记载[2]不同炮制品在临床治疗有偏重。例：酒制品治心腹气滞作痛，醋制品疏肝镇痛，姜制品祛寒镇痛等等。内酯的含量是否对临床治疗有影响、镇痛部位及效果有不同，至于实际疗效尚需进一步药效和药理验证。 参考文献
1，《全国中草药汇编》上册.北京人民卫生出版社，1975：452～453
2，中药炮制学.上海科学技术出版社.1983：158
3，王易宾等.中药材.1993，16(9)
(2000-08-03收稿), 百拇医药