PCR快速检测粪便中志贺菌属和侵袭性大肠埃希菌IpaH基因及其临床应用
作者：丁建强 徐冉行 马亦林 陈亚岗
单位：丁建强 马亦林 陈亚岗 310003 杭州 浙江医科大学附属一院(现在浙江大学附属邵逸夫医院)；徐冉杭 杭州市传染病医院
关键词：
中华微生物学和免疫学杂志990308 煮沸法从粪便标本中快速抽提出细菌DNA作为聚合酶链反应(PCR)模板，用自行设计的1对特异性引物扩增位于志贺菌和侵袭性大肠埃希菌染色体和质粒DNA上的多拷贝侵袭性质粒抗原(Ipa)H基因，扩增产物为620bp，以常规细菌培养检出率为对照。用20种常见肠道病原菌标准菌株的DNA抽提物进行PCR反应的方法来对PCR反应的特异性进行检验。用DNA序列分析的方法对PCR扩增产物的特异性进行检验。共检测81份门诊粪便标本，细菌培养阳性有27例，福氏志贺菌25株，宋内志贺菌2株，培养阳性率为33.3%，PCR检测阳性有39例，阳性率为48.1%，PCR检测阳性率比常规细菌培养阳性率高14.8%，其中细菌培养阳性的标本PCR检测均为阳性，29例住院病人经过正规治疗1周后，PCR检测12例仍然阳性。统计学分析显示两者之间差异有显著性(P<0.05)。标准菌的PCR检测和PCR产物的DNA序列测定结果显示我们设计的PCR方法具有较高的特异性。本研究中采用的PCR方法是一种快速简便、特异性高和敏感性强的检测细菌性痢疾病原菌的现代分子生物学方法。
(收稿：1998-10-16 修回：1999-03-08), http://www.100md.com
单位：丁建强 马亦林 陈亚岗 310003 杭州 浙江医科大学附属一院(现在浙江大学附属邵逸夫医院)；徐冉杭 杭州市传染病医院
关键词：
中华微生物学和免疫学杂志990308 煮沸法从粪便标本中快速抽提出细菌DNA作为聚合酶链反应(PCR)模板，用自行设计的1对特异性引物扩增位于志贺菌和侵袭性大肠埃希菌染色体和质粒DNA上的多拷贝侵袭性质粒抗原(Ipa)H基因，扩增产物为620bp，以常规细菌培养检出率为对照。用20种常见肠道病原菌标准菌株的DNA抽提物进行PCR反应的方法来对PCR反应的特异性进行检验。用DNA序列分析的方法对PCR扩增产物的特异性进行检验。共检测81份门诊粪便标本，细菌培养阳性有27例，福氏志贺菌25株，宋内志贺菌2株，培养阳性率为33.3%，PCR检测阳性有39例，阳性率为48.1%，PCR检测阳性率比常规细菌培养阳性率高14.8%，其中细菌培养阳性的标本PCR检测均为阳性，29例住院病人经过正规治疗1周后，PCR检测12例仍然阳性。统计学分析显示两者之间差异有显著性(P<0.05)。标准菌的PCR检测和PCR产物的DNA序列测定结果显示我们设计的PCR方法具有较高的特异性。本研究中采用的PCR方法是一种快速简便、特异性高和敏感性强的检测细菌性痢疾病原菌的现代分子生物学方法。
(收稿：1998-10-16 修回：1999-03-08), http://www.100md.com