丙种球蛋白对感染柯萨奇B3病毒小鼠心肌的保护及心肌炎的治疗作用
作者：何志旭 周同甫 曾上勤 金仲和 王泽蓉
单位：610041成都,华西医科大学附属第二医院
关键词：
中华儿科杂志/980922 病毒性心肌炎发病过程免疫反应起了重要作用，近年国外在动物实验及临床上将人血静脉丙种球蛋白(IVIG)用于该疾病的防治，取得了较好的效果[1，2]。我们探讨了不同剂量的国产IVIG对小鼠感染柯萨奇B3病毒(CVB3)后心肌的保护作用及治疗效果。
材料及方法：实验选用156只雄性、4～5周龄、体重13～15 g的Balb/c小鼠，随机分为IVIG保护组80只及治疗组76只。每只小鼠均腹腔注射含5×105 TCID50的CVB3 0.1 ml。IVIG保护组分别按IVIG用量，分为200 mg*kg-1*d-1组、500 mg*kg-1*d-1组、1 g*kg-1*d-1组及对照组4个组每组各20只。CVB3接种半小时后分别腹腔注射上述剂量的IVIG(成都生物制品所提供)，对照组注射相应剂量的5%葡萄糖，各7天。治疗组则将接种CVB3后存活到1周的60只小鼠分为剂量不同的3个用药组及对照组各15只，按上述剂量及方法治疗7天。两组动物均观察14天，记录发病及死亡情况。实验结束时处死存活动物，测体重、心脏重及心脏重/体重，取心脏做病理组织学检查，并用计算机图像分析对心肌病变定量评价。
, http://www.100md.com
生存率分析用Log-rank检验，体重、心脏重/体重用单因素方差分析，图像分析结果用t检验。
结果：(1)IVIG保护组中500 mg及1 g组无发病症状，生存率100%(20/20)，镜检亦未见心肌炎病变发生；200 mg组少数动物出现发病症状，死亡1只，生存率95%，镜检有轻微心肌炎病变发生。对照组死亡7只，生存率为65%，心肌炎症呈弥漫性分布。3个剂量组生存率与对照相比差异有显著意义(χ2=8.64，P<0.05)，但3个剂量组之间却无明显差异(χ2=4.18，P>0.05)。3个组小鼠体重增加，心脏重/体重比值小于对照组(F=21.44，P<0.05)，而对照组体重不增，心脏重/体重比值增大。(2)IVIG治疗组生存率，200 mg组为80%(12/15)，500 mg及1 g组均为93.3%(14/15)，对照组为53.3%(8/15)。治疗组生存率明显升高，但200 mg组与对照相比差异无显著性。实验结束时200 mg治疗组虽然发病症状明显减轻，从87%(13/15)降至33%(4/12)，但组织学病变与对照相比无差异；500 mg及1 g组治疗后症状完全消失，病变明显减轻，病灶平均面积、病灶总面积/所测心肌总面积与对照组比较差异显著。但500 mg与1 g组间病变无显著差异。治疗组体重均有增加，心脏重/体重比值较小，但200 mg组与对照组相比，上述两值无显著差异(q=3.14，P>0.05)。图像分析结果见附表。 组别
, 百拇医药
例数
病灶数
病变总面积(mm2)
所测心肌总面积(mm2)
病变平均面积(mm2)
保护及对照
200mg保护
20
11
0.19
137.21
, http://www.100md.com
0.017*
2.71
0.14**
3.86
500mg保护
20
0
0
-
0
-
lg保护
20
, 百拇医药
0
0
-
0
-
对照组
20
147
15.63
132.61
0.110
11.79
治疗及对照
, http://www.100md.com
200mg治疗
15
98
8.78
131.55
0.089Δ
1.74
6.68Δ
1.83
500mg治疗
15
34
, http://www.100md.com
1.48
149.34
0.044ΔΔ
2.28
1.00**
3.75
lg保护
15
19
0.48
129.75
0.026ΔΔ
, 百拇医药
2.43
0.37**
4.03
对照组
15
154
20.23
142.87
0.130
14.16
讨论：病毒性心肌炎的治疗，目前仍以对症支持疗法为主，针对其发病机理中有免疫反应参与，国外学者分别使用多克隆鼠免疫球蛋白及IVIG进行试验[1，3]，证实在病毒接种前及接种当时用药可抑制心肌炎发生，接种后1周用药可减轻炎症，提高生存率。临床应用中发现患儿血液动力学及一年生存率明显改善[2]。在我们的实验中，进一步明确了不同剂量间的疗效差异，在小鼠感染CVB3后立即用药3个剂量对动物均有明显保护作用。500 mg及1 g剂量组IVIG可完全抑制病毒在体内的复制，不发生心肌炎性病变。200 mg剂量组仅个别小鼠有轻微炎症发生，但生存率与500 mg及1 g组相比差异无显著性。因此，在急性病毒血症期200 mg剂量可基本抑制体内病毒的复制，保护绝大多数小鼠不发生心肌炎。IVIG的保护作用可能是通过其特异性中和抗体实现的[4]。在感染CVB3 1 周后用药，仍然可以使心肌炎症明显减轻，而此时实验动物体内的中和抗体滴度与对照无差异[1]，提示IVIG对炎症及免疫反应有抑制作用。我们也证实了IVIG对心肌炎的疗效。除1 g*kg-1*d-1剂量外，还选取了两个较小剂量，治疗后心肌病变、生存率及发病症状均有改善，但200 mg组疗效与对照相比较差异无显著性。而500 mg及1 g组疗效明显，提示在中等剂量上仍可达到满意的效果。从上述结果看，国产IVIG对病毒性心肌炎有较好的防治效果，其适宜的治疗方案和安全性尚待临床进一步验证。
, 百拇医药
参考文献
1 Takada H, Kishimoto C, Hiraoka Y, et al. Therapy with immunoglobubin suppresses myocarditis in a murine coxsackievirus mode. Circulation, 1995, 92:1604-1610.
2 Drucker NA, Colan SD, Lewis AB, et al. Gamma-globulin treatment of acute myocarditis in the pediatric population. Circulation, 1994. 89:252-256.
3 Weller AH, Hall M, Huber SA. Polyclonal immunoglobubin therapy protects against cardiac damage in experimental coxsackievirus-induced myocarditis. Eur Heart J, 1992, 13:115-119.
4 Sandoglobulin. Immunoglobulins intravenous: pharmacology and clinical studies. New Jersey: Sandoz Inc, 1984. 5-9.
(收稿：1997-08-05 修回：1998-03-11), 百拇医药
单位：610041成都,华西医科大学附属第二医院
关键词：
中华儿科杂志/980922 病毒性心肌炎发病过程免疫反应起了重要作用，近年国外在动物实验及临床上将人血静脉丙种球蛋白(IVIG)用于该疾病的防治，取得了较好的效果[1，2]。我们探讨了不同剂量的国产IVIG对小鼠感染柯萨奇B3病毒(CVB3)后心肌的保护作用及治疗效果。
材料及方法：实验选用156只雄性、4～5周龄、体重13～15 g的Balb/c小鼠，随机分为IVIG保护组80只及治疗组76只。每只小鼠均腹腔注射含5×105 TCID50的CVB3 0.1 ml。IVIG保护组分别按IVIG用量，分为200 mg*kg-1*d-1组、500 mg*kg-1*d-1组、1 g*kg-1*d-1组及对照组4个组每组各20只。CVB3接种半小时后分别腹腔注射上述剂量的IVIG(成都生物制品所提供)，对照组注射相应剂量的5%葡萄糖，各7天。治疗组则将接种CVB3后存活到1周的60只小鼠分为剂量不同的3个用药组及对照组各15只，按上述剂量及方法治疗7天。两组动物均观察14天，记录发病及死亡情况。实验结束时处死存活动物，测体重、心脏重及心脏重/体重，取心脏做病理组织学检查，并用计算机图像分析对心肌病变定量评价。
, http://www.100md.com
生存率分析用Log-rank检验，体重、心脏重/体重用单因素方差分析，图像分析结果用t检验。
结果：(1)IVIG保护组中500 mg及1 g组无发病症状，生存率100%(20/20)，镜检亦未见心肌炎病变发生；200 mg组少数动物出现发病症状，死亡1只，生存率95%，镜检有轻微心肌炎病变发生。对照组死亡7只，生存率为65%，心肌炎症呈弥漫性分布。3个剂量组生存率与对照相比差异有显著意义(χ2=8.64，P<0.05)，但3个剂量组之间却无明显差异(χ2=4.18，P>0.05)。3个组小鼠体重增加，心脏重/体重比值小于对照组(F=21.44，P<0.05)，而对照组体重不增，心脏重/体重比值增大。(2)IVIG治疗组生存率，200 mg组为80%(12/15)，500 mg及1 g组均为93.3%(14/15)，对照组为53.3%(8/15)。治疗组生存率明显升高，但200 mg组与对照相比差异无显著性。实验结束时200 mg治疗组虽然发病症状明显减轻，从87%(13/15)降至33%(4/12)，但组织学病变与对照相比无差异；500 mg及1 g组治疗后症状完全消失，病变明显减轻，病灶平均面积、病灶总面积/所测心肌总面积与对照组比较差异显著。但500 mg与1 g组间病变无显著差异。治疗组体重均有增加，心脏重/体重比值较小，但200 mg组与对照组相比，上述两值无显著差异(q=3.14，P>0.05)。图像分析结果见附表。 组别
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例数
病灶数
病变总面积(mm2)
所测心肌总面积(mm2)
病变平均面积(mm2)
保护及对照
200mg保护
20
11
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137.21
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0.017*
2.71
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500mg保护
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对照组
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治疗及对照
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200mg治疗
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131.55
0.089Δ
1.74
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1.48
149.34
0.044ΔΔ
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2.43
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4.03
对照组
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142.87
0.130
14.16
讨论：病毒性心肌炎的治疗，目前仍以对症支持疗法为主，针对其发病机理中有免疫反应参与，国外学者分别使用多克隆鼠免疫球蛋白及IVIG进行试验[1，3]，证实在病毒接种前及接种当时用药可抑制心肌炎发生，接种后1周用药可减轻炎症，提高生存率。临床应用中发现患儿血液动力学及一年生存率明显改善[2]。在我们的实验中，进一步明确了不同剂量间的疗效差异，在小鼠感染CVB3后立即用药3个剂量对动物均有明显保护作用。500 mg及1 g剂量组IVIG可完全抑制病毒在体内的复制，不发生心肌炎性病变。200 mg剂量组仅个别小鼠有轻微炎症发生，但生存率与500 mg及1 g组相比差异无显著性。因此，在急性病毒血症期200 mg剂量可基本抑制体内病毒的复制，保护绝大多数小鼠不发生心肌炎。IVIG的保护作用可能是通过其特异性中和抗体实现的[4]。在感染CVB3 1 周后用药，仍然可以使心肌炎症明显减轻，而此时实验动物体内的中和抗体滴度与对照无差异[1]，提示IVIG对炎症及免疫反应有抑制作用。我们也证实了IVIG对心肌炎的疗效。除1 g*kg-1*d-1剂量外，还选取了两个较小剂量，治疗后心肌病变、生存率及发病症状均有改善，但200 mg组疗效与对照相比较差异无显著性。而500 mg及1 g组疗效明显，提示在中等剂量上仍可达到满意的效果。从上述结果看，国产IVIG对病毒性心肌炎有较好的防治效果，其适宜的治疗方案和安全性尚待临床进一步验证。
, 百拇医药
参考文献
1 Takada H, Kishimoto C, Hiraoka Y, et al. Therapy with immunoglobubin suppresses myocarditis in a murine coxsackievirus mode. Circulation, 1995, 92:1604-1610.
2 Drucker NA, Colan SD, Lewis AB, et al. Gamma-globulin treatment of acute myocarditis in the pediatric population. Circulation, 1994. 89:252-256.
3 Weller AH, Hall M, Huber SA. Polyclonal immunoglobubin therapy protects against cardiac damage in experimental coxsackievirus-induced myocarditis. Eur Heart J, 1992, 13:115-119.
4 Sandoglobulin. Immunoglobulins intravenous: pharmacology and clinical studies. New Jersey: Sandoz Inc, 1984. 5-9.
(收稿：1997-08-05 修回：1998-03-11), 百拇医药