IL-2对辐射损伤小鼠红细胞免疫粘附功能的影响
作者：曹卉 柳青 曹蕊 陈廷 衣美英 刘昌平 梁春华
单位：(272113 山东，济宁医学院微生物附属医院制剂室)
关键词：
中华放射医学与防护杂志000212 机体的免疫系统对辐射很敏感，经照射后淋巴细胞的多种功能受到损伤，对红细胞免疫粘附功能也有明显的抑制作用。IL-2可使免疫缺陷患者免疫功能重建，能使某些放疗、化疗造成的免疫功能降低得到逆转。红细胞C3b受体花环与红细胞免疫复合物花环是反映红细胞免疫功能的重要指标。作者将小鼠一次性60Co γ射线照射后，给予IL-2治疗，观察其对红细胞C3b受体花环及免疫复合物花环的逆转作用。
一、材料和方法
1.白细胞介素-2(IL-2)：105U/ml，军事医学科学院出品。
, 百拇医药
2.动物：昆明种雄性小鼠，体重20～22 g,60只，山东鲁抗医药股份有限公司实验动物中心提供。将60只小鼠随机分为3组：A组为照射后IL-2治疗组，B组为照射后盐水对照组，C组为正常小鼠对照组。
3.照射及治疗方法：60Co γ射线辐射源，用有机玻璃小鼠照射盒照射，照射野17 cm×15 cm，源皮距60 cm，中平面吸收剂量6 Gy，吸收剂量率0.564 Gy/min，两组均采用6 Gy一次性照射，于照射第2天开始给药。给药途径与剂量：A组IL-2 400 U/只肌肉注射，隔天1次；B组生理盐水0.2 ml/只肌肉注射，隔天1次，分别治疗半个月，眼球摘除放血，肝素抗凝作正式试验。
4.红细胞C3b受体花环和免疫复合物花环试验，参照郭峰(见：中华医学杂志，1982，62：715)方法，补体致敏酵母菌与未致敏酵母菌均由上海长海医院免疫室提供。红细胞与酵母菌的应用浓度分别为1.25×107个/ml和1×108个/ml。结果判断以1个红细胞结上1个以上酵母菌为1个花环，计算其花环形成百分率，用t检验分别测定A组与B组间的差异显著性，A、B各组与C组间差异的显著性。
, 百拇医药
二、结果
1.红细胞C3b受体花环率：A组红细胞C3b受体花环率显著高于B组(P<0.01)，与C组比较差异无显著性(P>0.05)，见表1。
2.红细胞免疫复合物花环：A组与B组对照，差异有非常显著性(P<0.01)。照射各组与C组比差异无显著性(P>0.05)，见表1。
表1 IL-2对受照射小鼠红细胞免疫粘附活性的影响(
±s) 组别
样品数
(n)
给药
途径
, http://www.100md.com
红细胞C3b受体
花环率(%)
红细胞免疫复
合物花环(%)
30天存
活率(%)
A
20
肌肉
16.2±2.6
6.5±1.6*
95
, 百拇医药
B
20
肌肉
3.6±2.0
1.8±1.0
0
C
20
—
16.7±2.2
7.2±1.3
100
注：A组与B组比较：*P<0.01 三、讨论
, 百拇医药
一般认为，外周血红细胞对电离辐射不敏感，有人用20 Gy X射线照射离体红细胞未见其寿命缩短，虽然电离辐射对红细胞的存活影响不大，但对其结构与功能可以有影响。
曹卉等发现60Co γ射线照射使小鼠外周血红细胞C3b受体花环率降低，并认为是电离辐射对C3b受体的直接作用所致。Sato发现大鼠红细胞膜表面负电荷在1 Gy时就有下降，随着剂量的增加进一步下降。Yonei等还发现X射线照射1 Gy后，红细胞膜上脂质双层结构就出现破坏，随着剂量的增加，破坏加剧。因此认为，电离辐射可以破坏质膜的超分子结构，引起细胞膜表面电荷的改变，同样也可以直接破坏膜蛋白，从而引起细胞膜表面受体功能的异常。
Siegel等在1981年首先提出“红细胞免疫系统”的概念，认识到红细胞不仅具有呼吸功能，而且像白细胞一样具有免疫功能；红细胞免疫主要通过其膜上C3b受体清除循环免疫复合物，并具有识别和储存抗原、增强T细胞与抗原接触的功能，红细胞通过过氧化物酶的作用直接消除粘附的抗原物质，起到类似效应细胞的作用。IL-2为免疫调节剂已得到公认，它是机体复杂免疫网络中起调节作用的重要淋巴因子，能促进机体的细胞免疫功能。目前临床上多用于恶性肿瘤的治疗。但用于逆转辐射损伤小鼠红细胞免疫功能尚未见报道。本组实验结果表明，电离辐射对小鼠红细胞免疫粘附功能有明显的抑制作用，应用IL-2治疗后，红细胞免疫粘附功能的降低均得到逆转。由此可见，IL-2能使辐射损伤小鼠免疫功能重建，其作用是一项值得深入研究的课题。本组结果提示，IL-2能特异性地促进红细胞粘附功能，通过RBC膜上CR1介导，RBC膜上存在许多受体。作者认为可能是IL-2与RBC膜上类似IL-2R位点结合后引起的某种变构，进而增进RBC膜上CR1的集簇分布，影响其功能。因此认为IL-2可常规作为肿瘤患者放射治疗的辅助治疗，对肿瘤患者起到免疫重建的作用。红细胞免疫活性的提高，可加强机体免疫监视的能力，减少血路、淋巴结转移，因此，动态观察放射治疗肿瘤患者红细胞免疫功能对评价疗效推测预后有一定的指导作用。
(收稿日期：1999-05-19), http://www.100md.com
单位：(272113 山东，济宁医学院微生物附属医院制剂室)
关键词：
中华放射医学与防护杂志000212 机体的免疫系统对辐射很敏感，经照射后淋巴细胞的多种功能受到损伤，对红细胞免疫粘附功能也有明显的抑制作用。IL-2可使免疫缺陷患者免疫功能重建，能使某些放疗、化疗造成的免疫功能降低得到逆转。红细胞C3b受体花环与红细胞免疫复合物花环是反映红细胞免疫功能的重要指标。作者将小鼠一次性60Co γ射线照射后，给予IL-2治疗，观察其对红细胞C3b受体花环及免疫复合物花环的逆转作用。
一、材料和方法
1.白细胞介素-2(IL-2)：105U/ml，军事医学科学院出品。
, 百拇医药
2.动物：昆明种雄性小鼠，体重20～22 g,60只，山东鲁抗医药股份有限公司实验动物中心提供。将60只小鼠随机分为3组：A组为照射后IL-2治疗组，B组为照射后盐水对照组，C组为正常小鼠对照组。
3.照射及治疗方法：60Co γ射线辐射源，用有机玻璃小鼠照射盒照射，照射野17 cm×15 cm，源皮距60 cm，中平面吸收剂量6 Gy，吸收剂量率0.564 Gy/min，两组均采用6 Gy一次性照射，于照射第2天开始给药。给药途径与剂量：A组IL-2 400 U/只肌肉注射，隔天1次；B组生理盐水0.2 ml/只肌肉注射，隔天1次，分别治疗半个月，眼球摘除放血，肝素抗凝作正式试验。
4.红细胞C3b受体花环和免疫复合物花环试验，参照郭峰(见：中华医学杂志，1982，62：715)方法，补体致敏酵母菌与未致敏酵母菌均由上海长海医院免疫室提供。红细胞与酵母菌的应用浓度分别为1.25×107个/ml和1×108个/ml。结果判断以1个红细胞结上1个以上酵母菌为1个花环，计算其花环形成百分率，用t检验分别测定A组与B组间的差异显著性，A、B各组与C组间差异的显著性。
, 百拇医药
二、结果
1.红细胞C3b受体花环率：A组红细胞C3b受体花环率显著高于B组(P<0.01)，与C组比较差异无显著性(P>0.05)，见表1。
2.红细胞免疫复合物花环：A组与B组对照，差异有非常显著性(P<0.01)。照射各组与C组比差异无显著性(P>0.05)，见表1。
表1 IL-2对受照射小鼠红细胞免疫粘附活性的影响(
±s) 组别样品数
(n)
给药
途径
, http://www.100md.com
红细胞C3b受体
花环率(%)
红细胞免疫复
合物花环(%)
30天存
活率(%)
A
20
肌肉
16.2±2.6
6.5±1.6*
95
, 百拇医药
B
20
肌肉
3.6±2.0
1.8±1.0
0
C
20
—
16.7±2.2
7.2±1.3
100
注：A组与B组比较：*P<0.01 三、讨论
, 百拇医药
一般认为，外周血红细胞对电离辐射不敏感，有人用20 Gy X射线照射离体红细胞未见其寿命缩短，虽然电离辐射对红细胞的存活影响不大，但对其结构与功能可以有影响。
曹卉等发现60Co γ射线照射使小鼠外周血红细胞C3b受体花环率降低，并认为是电离辐射对C3b受体的直接作用所致。Sato发现大鼠红细胞膜表面负电荷在1 Gy时就有下降，随着剂量的增加进一步下降。Yonei等还发现X射线照射1 Gy后，红细胞膜上脂质双层结构就出现破坏，随着剂量的增加，破坏加剧。因此认为，电离辐射可以破坏质膜的超分子结构，引起细胞膜表面电荷的改变，同样也可以直接破坏膜蛋白，从而引起细胞膜表面受体功能的异常。
Siegel等在1981年首先提出“红细胞免疫系统”的概念，认识到红细胞不仅具有呼吸功能，而且像白细胞一样具有免疫功能；红细胞免疫主要通过其膜上C3b受体清除循环免疫复合物，并具有识别和储存抗原、增强T细胞与抗原接触的功能，红细胞通过过氧化物酶的作用直接消除粘附的抗原物质，起到类似效应细胞的作用。IL-2为免疫调节剂已得到公认，它是机体复杂免疫网络中起调节作用的重要淋巴因子，能促进机体的细胞免疫功能。目前临床上多用于恶性肿瘤的治疗。但用于逆转辐射损伤小鼠红细胞免疫功能尚未见报道。本组实验结果表明，电离辐射对小鼠红细胞免疫粘附功能有明显的抑制作用，应用IL-2治疗后，红细胞免疫粘附功能的降低均得到逆转。由此可见，IL-2能使辐射损伤小鼠免疫功能重建，其作用是一项值得深入研究的课题。本组结果提示，IL-2能特异性地促进红细胞粘附功能，通过RBC膜上CR1介导，RBC膜上存在许多受体。作者认为可能是IL-2与RBC膜上类似IL-2R位点结合后引起的某种变构，进而增进RBC膜上CR1的集簇分布，影响其功能。因此认为IL-2可常规作为肿瘤患者放射治疗的辅助治疗，对肿瘤患者起到免疫重建的作用。红细胞免疫活性的提高，可加强机体免疫监视的能力，减少血路、淋巴结转移，因此，动态观察放射治疗肿瘤患者红细胞免疫功能对评价疗效推测预后有一定的指导作用。
(收稿日期：1999-05-19), http://www.100md.com