微波技术在髓鞘染色中的应用
作者：郑辉 沈明 杨晓静
单位：郑辉 沈明 杨晓静(湖南医科大学病理学教研室，长沙410078)
关键词：微波；染色法；髓鞘
微波技术在髓鞘染色中的应用
中国图书分类号 R329-33
文献标识码 A 文章编号 1001-7399(1999)02-0182-01
碳酸锂苏木素法是显示髓鞘的经典方法，该法结果比较稳定、试剂来源方便、且易于掌握，但其染色时间长、易脱片。为此我们利用微波处理可大大缩短染色时间，解决脱片问题，且结果更满意，现介绍如下。
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 标本 6例慢性炎性脱髓鞘多神经根神经病(CIDP)患者，2例非神经系统疾病死亡病人，分别取腓肠神经1～2 cm，10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，6 μm连续切片，粘附剂(slide adhesive, Pacific Trade Service Co， USA)贴片，54℃烤24 h备用。
1.2 主要试剂配制
1.2.1 10%苏木素无水乙醇液 苏木素10 g，无水乙醇加至100 ml。用小口瓶盛装，混合溶解后放置2～3周成熟。
1.2.2 碳酸锂苏木素染液 10%苏木素无水乙醇液(成熟)10 ml，碳酸锂饱和水溶液2 ml，蒸馏水88 ml。
1.2.3 Loyez分化液 四硼酸钠1 g，铁氰化钾1.25 g，蒸馏水100 ml。
, http://www.100md.com 1.3 仪器 采用日本National IEC-705微波炉(700 W)。
1.4 方法 切片脱蜡至水→5%重铬酸钾水溶液中，于中火档微波处理3 min→4%硫酸铁铵媒染液中，于中火档微波处理3 min→蒸馏水洗2×3 min→碳酸锂苏木素，在低火档微波下染色5 min→自来水洗2×5 min→4%硫酸铁铵分化(显微镜下控制)至背景呈淡黄色，髓鞘深蓝色→自来水洗2×2 min→Loyez分化液中分化2 min，水洗→脱水、透明、封片。
1.5 对照 采用凌启波〔1〕介绍的经典碳酸锂苏木素染色法作对照。
2 结果
髓鞘呈深蓝色，背景浅。髓鞘环绕神经轴索外周，纵切面呈竹节状，横切面呈小圆圈状(图1)。与经典方法比较图例象更清晰，特别是染色时间从96 h减少至1 h，且无脱片现象。
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图1 髓鞘呈深蓝色，背景浅。髓鞘环绕神经轴索外周，纵切面呈竹节状，横切面呈小圆圈状。×200
3 讨论
经典碳酸锂苏木素染色法的主要缺陷是染色时间长和极易脱片，在常规病理检验中不太适用。以前为防止脱片，在切片脱蜡后用0.5%火棉胶处理，但并不能完全解决脱片问题。我们利用粘附剂贴片，各主要部步骤(媒染和染色)用微波处理，既大大缩短了操作时间，又可完全避免脱片，故特别适合病理科的临床诊断，值得推广。
根据我们的经验，在操作中应特别注意选用合适的微波强度和处理时间，微波强度过高或(和)处理时间太长，不但增加脱片机率，而且试剂挥发增多，造成浪费；微波强度太弱或(和)处理时间不足，则染色过浅，故在实验中应根据切片厚度和固定时间长短进行摸索。作者认为，固定时间不超过1周，6 μm的切片，在5%重铬酸钾和4%硫酸铁铵中媒染时用中火档微波处理3 min；碳酸锂苏木素染色时则用低火档微波处理5 min，可获满意结果。
作者简介：郑辉，女，35岁，实验师
参考文献
1 凌启波. 实用病理特殊染色和组化技术. 广州：广东高等教育出版社，1989：158～161
收稿日期：1998-05-15
修回日期：1998-09-09, 百拇医药
单位：郑辉 沈明 杨晓静(湖南医科大学病理学教研室，长沙410078)
关键词：微波；染色法；髓鞘
微波技术在髓鞘染色中的应用
中国图书分类号 R329-33
文献标识码 A 文章编号 1001-7399(1999)02-0182-01
碳酸锂苏木素法是显示髓鞘的经典方法，该法结果比较稳定、试剂来源方便、且易于掌握，但其染色时间长、易脱片。为此我们利用微波处理可大大缩短染色时间，解决脱片问题，且结果更满意，现介绍如下。
1 材料和方法
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1.1 标本 6例慢性炎性脱髓鞘多神经根神经病(CIDP)患者，2例非神经系统疾病死亡病人，分别取腓肠神经1～2 cm，10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，6 μm连续切片，粘附剂(slide adhesive, Pacific Trade Service Co， USA)贴片，54℃烤24 h备用。
1.2 主要试剂配制
1.2.1 10%苏木素无水乙醇液 苏木素10 g，无水乙醇加至100 ml。用小口瓶盛装，混合溶解后放置2～3周成熟。
1.2.2 碳酸锂苏木素染液 10%苏木素无水乙醇液(成熟)10 ml，碳酸锂饱和水溶液2 ml，蒸馏水88 ml。
1.2.3 Loyez分化液 四硼酸钠1 g，铁氰化钾1.25 g，蒸馏水100 ml。
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1.4 方法 切片脱蜡至水→5%重铬酸钾水溶液中，于中火档微波处理3 min→4%硫酸铁铵媒染液中，于中火档微波处理3 min→蒸馏水洗2×3 min→碳酸锂苏木素，在低火档微波下染色5 min→自来水洗2×5 min→4%硫酸铁铵分化(显微镜下控制)至背景呈淡黄色，髓鞘深蓝色→自来水洗2×2 min→Loyez分化液中分化2 min，水洗→脱水、透明、封片。
1.5 对照 采用凌启波〔1〕介绍的经典碳酸锂苏木素染色法作对照。
2 结果
髓鞘呈深蓝色，背景浅。髓鞘环绕神经轴索外周，纵切面呈竹节状，横切面呈小圆圈状(图1)。与经典方法比较图例象更清晰，特别是染色时间从96 h减少至1 h，且无脱片现象。
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图1 髓鞘呈深蓝色，背景浅。髓鞘环绕神经轴索外周，纵切面呈竹节状，横切面呈小圆圈状。×200
3 讨论
经典碳酸锂苏木素染色法的主要缺陷是染色时间长和极易脱片，在常规病理检验中不太适用。以前为防止脱片，在切片脱蜡后用0.5%火棉胶处理，但并不能完全解决脱片问题。我们利用粘附剂贴片，各主要部步骤(媒染和染色)用微波处理，既大大缩短了操作时间，又可完全避免脱片，故特别适合病理科的临床诊断，值得推广。
根据我们的经验，在操作中应特别注意选用合适的微波强度和处理时间，微波强度过高或(和)处理时间太长，不但增加脱片机率，而且试剂挥发增多，造成浪费；微波强度太弱或(和)处理时间不足，则染色过浅，故在实验中应根据切片厚度和固定时间长短进行摸索。作者认为，固定时间不超过1周，6 μm的切片，在5%重铬酸钾和4%硫酸铁铵中媒染时用中火档微波处理3 min；碳酸锂苏木素染色时则用低火档微波处理5 min，可获满意结果。
作者简介：郑辉，女，35岁，实验师
参考文献
1 凌启波. 实用病理特殊染色和组化技术. 广州：广东高等教育出版社，1989：158～161
收稿日期：1998-05-15
修回日期：1998-09-09, 百拇医药