冬虫夏草和中国拟青霉水提取物对小鼠免疫功能的影响
作者：张传开 袁盛榕 刘进学
单位：首都医科大学药理学教研室
关键词：冬虫夏草；中国拟青霉；非特异性免疫；体液免疫
首都医科大学学报990105 提要： 采用碳廓清实验和腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定以及定量溶血分光光度法，分别研究了冬虫夏草(CS)和中国拟青霉(PS)对小鼠非特异性免疫功能和体液免疫功能的影响。结果：CS和PS均呈剂量依赖性增强小鼠的碳廓清能力(P<0.01)，CS〔2.0 g/(kg.d)，3 d，灌胃〕和PS〔4.0 g/(kg.d)，3 d，灌胃〕均可明显拮抗环磷酰胺(Cy)引起的碳廓清率的下降(P<0.01)。在体外，CS和PS(均0.25～8.0 g/L)均呈剂量依赖性增强腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力(P<0.01)。CS、PS〔均4.0 g/(kg.d)，7 d，灌胃〕均可显著提高正常小鼠的抗体形成细胞数和血清溶血素-IgM水平(P<0.01)，并且显著对抗Cy所引起的体液免疫功能的降低(P<0.01)。结果提示：CS和PS均可显著增强小鼠的非特异性免疫功能和体液免疫功能。
, 百拇医药
中图分类号： R285.5
Effect of Water Extract of Cordyceps sinensis and Paecilomyces sinensis on Immune Function in Mice
Zhang Chuankai, Yuan Shengrong, Liu Jinxue
Department of Pharmacology, Capital University of Medical Sciences
Abstract: Effect of water extract of Cordyceps sinensis (CS) and Paecilomyces sinensis (PS) on nonspecific and humoral immue function in mice was investigated. Charcoal particles clearance rate assay and peritoneal macrophages (PMφ) phagocytosis of neutral red were measured by colorimetric method as well as quantitative hemolysis spectrometric (QHS) assay. The results demons-trated that both CS and PS 〔1.0, 2.0, 4.0 g/(kg.d)×3 d, ig〕 dose dependently intensified charcoal particle clearance rate in mice (P<0.01) and significantly reversed cyclophosphamide (Cy) reduced clearance rate at the dose of 2.0, 4.0 g/(kg.d)×3 d, ig respectively (P<0.01). In vitro, both CS and PS (0.25～8.0 g/L) significantly enhanced PMφ to phagocytize neutral red in a concentration dependent manner (P<0.01), both CS and PS 〔4.0 g/(kg.d)×7 d, ig〕 significantly enhanced antibody formation cell (AFC) and serum hemolysin IgM level in normal mice (P<0.01), makedly reversed Cy-depressed humoral immunity (P<0.01). In conclusion, both CS and PS markedly strengthened nonspecific and humoral immune function in mice.
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Key words: Cordyceps sinensis (Berk) sacc; Paecilomyces sinensis sp nov; immune function nonspecific; humoral immune function
冬虫夏草〔Cordyceps sinensis (Berk) sacc, CS〕是我国传统的名贵滋补强壮药。清朝赵学敏《本草纲目拾遗》载“冬虫夏草味甘、性温”；主要作用有“保肺气”，“益肾，补精髓”。现代医学研究表明CS具有调节免疫功能、抗肿瘤、促进造血、抗炎抑菌及抗心律失常等多种药理作用[1]，临床上应用于多种疾病的治疗。
天然虫草主要产于我国四川、青海、西藏、云南等地，因产量很低，难以满足逐年增长的市场需求。中国拟青霉(Paecilomyces sinensis sp nov, PS)是从新鲜冬虫夏草中分离并进行发酵培养的虫草菌丝体。PS在形态学[2]、药理学及化学成分方面与天然冬虫夏草非常相似[3～5]。本研究从整体和离体实验水平比较2种药物对机体非特异性免疫和体液免疫功能的影响，以探讨它们对机体免疫功能影响的异同。
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1 材料和方法
1.1 实验动物
昆明种小鼠，雌雄兼用，6～8周龄(首都医科大学动物部)。C57BL/6小鼠，雄性，6～8周龄(北京医科大学实验动物中心)。
1.2 药品与试剂
冬虫夏草：西藏产，购于北京同仁堂药材公司参茸部。中国拟青霉由中国科学院微生物所发酵工程部姜国杨厂长惠赠。按文献[4]分别制备2种水煎剂，每100 mL溶液中含100 g生药，体外实验时需将制剂经浓缩灭菌处理。环磷酰胺(Cy)为上海华联制药公司产品(批号951209)。硫代乙醇酸钠肉汤为Sigma公司产品。去纤维SRBC购于北京丰台区军马厂。补体为SRBC吸收后的豚鼠血清，按V(SRBC)∶V(补体)=1∶20的比例混匀，4 ℃冰箱保存20 min后，离心，收集上清分装后-20 ℃保存；印度墨汁为北京第二化工厂产品(批号871203)。
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1.3 碳廓清率测定
将雄性昆明种小鼠随机分组，分别灌胃给予不同剂量的CS〔每kg体质量1.0、2.0、4.0 g〕和PS(每kg体质量1.0、2.0、4.0 g)水煎剂共3 d。免疫抑制组于d0(给药当天)和d2(给药第3天)，给予Cy 50 mg/(kg.d)腹腔内注射。空白对照组给予同体积的溶媒。末次给药后24 h，按文献[3]方法测定各组的吞噬指数K和校正吞噬指数α值。
1.4 巨噬细胞吞噬功能的测定
小鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)的制备[6]：C57BL/6雄性小鼠腹腔无菌注射3%硫代乙醇酸钠肉汤3 mL，3 d后断颈处死，收集腹腔巨噬细胞，离心，用PBS洗细胞2次，计数，再用完全RPMI-1640培养液调至1×106 mL-1备用。
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巨噬细胞吞噬功能的测定：小鼠PMφ用不完全RPMI-1640调至1×106 mL-1，加到96孔板中，每孔100 μL，置37 ℃5%CO2培养箱(西德Heraeus Co.)中培养2 h，待细胞贴壁后，弃上清，分别加入倍比稀释的药物100 μL和完全RPMI-1640培养基100 μL，总体积为200 μL，每样3个复孔，培养24 h。按文献[7]方法测定PMφ吞噬功能。
1.5 体液免疫功能的测定
昆明种小鼠雌雄兼用，随机分组，分别先灌胃给予CS、PS 4.0 g/(kg.d) 3 d，对照组灌胃给予同体积的溶媒。第4天给药的同时，以5% SRBC 0.2 mL/只腹腔注射致敏，免疫抑制模型组致敏当日与第3天腹腔内注射Cy 50 mg/kg，共2次，继续给药3 d，于致敏后第4天按文献[8，9]方法测定血清溶血素含量，按文献[8]方法测定抗体形成细胞数及其功能变化。
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2 结果
2.1 CS和PS对小鼠碳廓清率的影响
由表1、2可见不同剂量的CS和PS均能够剂量依赖性地提高吞噬指数K值和校正指数α值(与对照组比较均P<0.01)；并且发现CS和PS在相同剂量时作用基本一致(P>0.05)。当CS 2.0 g/kg、PS 4.0 g/kg时可分别使Cy显著降低的K值和α值恢复到正常水平，即CS和PS均可提高小鼠正常及低下的非特异性免疫功能。
表1 CS和PS对小鼠碳廓清率影响的量效关系 分组
n
K
α
±s
, 百拇医药
对照组
9
0.031±0.014
5.402±1.160
PS
1.0 g.(kg.d)-1
8
0.044±0.019**
6.670±1.070**
2.0 g.(kg.d)-1
, 百拇医药
9
0.088±0.020**
8.540±0.606**
4.0 g.(kg.d)-1
9
0.095±0.014**
9.920±1.290**
CS
1.0 g.(kg.d)-1
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9
0.053±0.019**
7.490±0.920**
2.0 g.(kg.d)-1
9
0.093±0.005**
8.810±0.750**
4.0 g.(kg.d)-1
9
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0.099±0.016**
9.240±1.930**
**与对照组比较P<0.01表2 CS和PS对免疫抑制小鼠碳廓清率的影响±s 分组
K
α
对照组
0.039±0.009
5.930±1.200
Cy/50 mg.(kg.d)-1
, 百拇医药
0.013±0.011**
3.927±0.950**
PS/4.0 g.(kg.d)-1+Cy/50 mg.(kg.d)-1
0.032±0.013△△
6.234±0.810△△
CS/2.0 g.(kg.d)-1+Cy/50 mg.(kg.d)-1
, 百拇医药
0.034±0.010△△
6.067±0.860△△
各组均n=10；**与对照组比较P<0.01；△△与Cy组比较P<0.01
2.2 CS和PS对腹腔巨噬细胞吞噬功能影响
结果见图1。由图1可见CS和PS(均为0.25～8 g/L)均可明显增强小鼠PMφ吞噬中性红的能力，并呈现一定的剂量依赖性(P<0.01)。并且发现当质量浓度为4、8 g/L时PS的作用明显强于CS，而在质量浓度较低时(0.25、0.5 g/L)PS的作用则弱于CS(P<0.01)。
图1 CS和PS对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
, 百拇医药
n=6；与CS组相比*P<0.05，**P<0.01
2.3 CS和PS对小鼠体液免疫功能的影响
结果见表3、4。结果表明：CS、PS在4.0 g/kg时均可显著增高正常小鼠的抗体形成细胞数(antibody formation cell, AFC)和溶血素-IgM含量(P<0.01)；并可显著对抗Cy所致的小鼠抗体形成细胞数的减少和溶血素-IgM水平的降低(P<0.01)。
表3 CS和PS对小鼠抗体形成细胞和溶血素-IgM的影响(OD值) 分组
AFC
λ/413 nm
IgM
λ/540 nm
, 百拇医药
对照组
0.548±0.025
0.304±0.039
PS/4.0 g.(kg.d)-1
0.745±0.009**
0.454±0.032**
CS/4.0 g.(kg.d)-1
0.730±0.015**
0.568±0.191**
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各组n=10；**与对照组比较P<0.01表4 CS和PS对免疫抑制小鼠抗体形成细胞和溶血素-IgM的影响 分组
AFC
λ/413 nm
IgM
λ/540 nm
对照组
0.539±0.027
0.366±0.039
Cy/50 mg.(kg.d)-1
0.242±0.075**
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0.111±0.007**
PS/4.0 g.(kg.d)-1+Cy/50 mg.(kg.d)-1
0.531±0.061△△
0.336±0.022*△△
CS/4.0 g.(kg.d)-1+Cy/50 mg.(kg.d)-1
0.549±0.033△△
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0.316±0.006*△△
各组n=10；与对照组比较*P<0.05，**P<0.01；△△与Cy组比较P<0.01
3 讨论
单核巨噬细胞系统(网状内皮系统，reticuloendothelial system, RES)是机体非特异性免疫系统的重要组成部分。因能迅速清除多种致病物质，是维持机体内环境稳定的一个最重要的系统。巨噬细胞是免疫细胞的一种，具有多种免疫功能如吞噬和杀伤多种病原微生物、处理和呈递抗原、分泌细胞因子(IL-1、IL-6、IL-8、IL-12、TNF-α)、表达共刺激分子以加强与T细胞的相互作用等方式参与免疫反应，在炎症、感染和肿瘤等许多疾病过程中发挥了重要的作用。
本研究发现CS和PS水煎剂在体内均能提高小鼠碳廓清率，增强RES功能，并发现CS的作用稍强于PS，两者均可对抗Cy的抑制作用，与文献报道一致[4]。在体外CS和PS均可直接激活小鼠PMφ，增强其吞噬功能。在较低剂量时CS的作用强于PS，而较大剂量时则弱于PS，这种特点与免疫调节剂的双相作用有关。因此，CS和PS对机体的非特异性免疫功能均具有明显增强作用。而两者对PMφ产生细胞因子有何影响有待进一步研究。
, 百拇医药
应用定量溶血分光光度法(QHS)检测抗体形成细胞所分泌的抗SRBC抗体，其结果不仅反映抗体形成细胞的数量，也提示合成抗体的能力，此法较溶血空斑法精确。CS和PS均可提高正常和Cy抑制小鼠的体液免疫功能。鉴于有报道CS在体外可直接刺激B淋巴细胞增殖[10]，因此推测CS、PS可能通过直接作用于B淋巴细胞而增强小鼠体液免疫功能。但其确切机制尚需深入研究。
感谢北京医科大学免疫学系钱玉昆教授的指导。
首都医科大学青年科技基金资助项目
参考文献
1 孙云汉.冬虫夏草与虫草菌丝的药理研究.见：周金黄主编.免疫药理学进展(基础与临床).北京:中国科技出版社,1993.179～191
2 陈庆涛.中国拟青霉新种及其与虫草的关系.真菌学报,1984,3(1):24～28
, http://www.100md.com
3 李常春,黄自强,郭秀碧,等.冬虫夏草与中国拟青霉的药理研究.福建医药杂志,1983,5(5):51～54
4 郑幼兰,叶聚荣,林大杰,等.冬虫夏草与中国拟青霉对免疫功能的影响.福建医药杂志,1983,5(5):55～57
5 归筱铭，陈晓亮.冬虫夏草和冬虫夏草菌丝体的化学成分比较.福建中医药，1982，13(2)：32
6 章灵华.黄岑总甙对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响.中国免疫学杂志,1994,10(增刊):133～136
7 鞠田文.商陆皂甙甲抑制小鼠巨噬细胞的作用.中国免疫学杂志,1993,9:381～382
8 徐叔云.药理实验方法学.第2版.北京:人民卫生出版社,1991.1215,1230,1231
9 Simpson M A, Gozzo J J. Spectophotometric determination of lymphocyte mediated sheep red cell hemolysis in vitro. J Immunol Methods, 1978,21:159～165
10 匡彦德，王美英，钱琴芳，等.冬虫夏草免疫增强作用机理研究.上海免疫学杂志，1989，9(1)：6～8
收稿日期：1998-03-15, 百拇医药
单位：首都医科大学药理学教研室
关键词：冬虫夏草；中国拟青霉；非特异性免疫；体液免疫
首都医科大学学报990105 提要： 采用碳廓清实验和腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定以及定量溶血分光光度法，分别研究了冬虫夏草(CS)和中国拟青霉(PS)对小鼠非特异性免疫功能和体液免疫功能的影响。结果：CS和PS均呈剂量依赖性增强小鼠的碳廓清能力(P<0.01)，CS〔2.0 g/(kg.d)，3 d，灌胃〕和PS〔4.0 g/(kg.d)，3 d，灌胃〕均可明显拮抗环磷酰胺(Cy)引起的碳廓清率的下降(P<0.01)。在体外，CS和PS(均0.25～8.0 g/L)均呈剂量依赖性增强腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力(P<0.01)。CS、PS〔均4.0 g/(kg.d)，7 d，灌胃〕均可显著提高正常小鼠的抗体形成细胞数和血清溶血素-IgM水平(P<0.01)，并且显著对抗Cy所引起的体液免疫功能的降低(P<0.01)。结果提示：CS和PS均可显著增强小鼠的非特异性免疫功能和体液免疫功能。
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中图分类号： R285.5
Effect of Water Extract of Cordyceps sinensis and Paecilomyces sinensis on Immune Function in Mice
Zhang Chuankai, Yuan Shengrong, Liu Jinxue
Department of Pharmacology, Capital University of Medical Sciences
Abstract: Effect of water extract of Cordyceps sinensis (CS) and Paecilomyces sinensis (PS) on nonspecific and humoral immue function in mice was investigated. Charcoal particles clearance rate assay and peritoneal macrophages (PMφ) phagocytosis of neutral red were measured by colorimetric method as well as quantitative hemolysis spectrometric (QHS) assay. The results demons-trated that both CS and PS 〔1.0, 2.0, 4.0 g/(kg.d)×3 d, ig〕 dose dependently intensified charcoal particle clearance rate in mice (P<0.01) and significantly reversed cyclophosphamide (Cy) reduced clearance rate at the dose of 2.0, 4.0 g/(kg.d)×3 d, ig respectively (P<0.01). In vitro, both CS and PS (0.25～8.0 g/L) significantly enhanced PMφ to phagocytize neutral red in a concentration dependent manner (P<0.01), both CS and PS 〔4.0 g/(kg.d)×7 d, ig〕 significantly enhanced antibody formation cell (AFC) and serum hemolysin IgM level in normal mice (P<0.01), makedly reversed Cy-depressed humoral immunity (P<0.01). In conclusion, both CS and PS markedly strengthened nonspecific and humoral immune function in mice.
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Key words: Cordyceps sinensis (Berk) sacc; Paecilomyces sinensis sp nov; immune function nonspecific; humoral immune function
冬虫夏草〔Cordyceps sinensis (Berk) sacc, CS〕是我国传统的名贵滋补强壮药。清朝赵学敏《本草纲目拾遗》载“冬虫夏草味甘、性温”；主要作用有“保肺气”，“益肾，补精髓”。现代医学研究表明CS具有调节免疫功能、抗肿瘤、促进造血、抗炎抑菌及抗心律失常等多种药理作用[1]，临床上应用于多种疾病的治疗。
天然虫草主要产于我国四川、青海、西藏、云南等地，因产量很低，难以满足逐年增长的市场需求。中国拟青霉(Paecilomyces sinensis sp nov, PS)是从新鲜冬虫夏草中分离并进行发酵培养的虫草菌丝体。PS在形态学[2]、药理学及化学成分方面与天然冬虫夏草非常相似[3～5]。本研究从整体和离体实验水平比较2种药物对机体非特异性免疫和体液免疫功能的影响，以探讨它们对机体免疫功能影响的异同。
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1 材料和方法
1.1 实验动物
昆明种小鼠，雌雄兼用，6～8周龄(首都医科大学动物部)。C57BL/6小鼠，雄性，6～8周龄(北京医科大学实验动物中心)。
1.2 药品与试剂
冬虫夏草：西藏产，购于北京同仁堂药材公司参茸部。中国拟青霉由中国科学院微生物所发酵工程部姜国杨厂长惠赠。按文献[4]分别制备2种水煎剂，每100 mL溶液中含100 g生药，体外实验时需将制剂经浓缩灭菌处理。环磷酰胺(Cy)为上海华联制药公司产品(批号951209)。硫代乙醇酸钠肉汤为Sigma公司产品。去纤维SRBC购于北京丰台区军马厂。补体为SRBC吸收后的豚鼠血清，按V(SRBC)∶V(补体)=1∶20的比例混匀，4 ℃冰箱保存20 min后，离心，收集上清分装后-20 ℃保存；印度墨汁为北京第二化工厂产品(批号871203)。
, 百拇医药
1.3 碳廓清率测定
将雄性昆明种小鼠随机分组，分别灌胃给予不同剂量的CS〔每kg体质量1.0、2.0、4.0 g〕和PS(每kg体质量1.0、2.0、4.0 g)水煎剂共3 d。免疫抑制组于d0(给药当天)和d2(给药第3天)，给予Cy 50 mg/(kg.d)腹腔内注射。空白对照组给予同体积的溶媒。末次给药后24 h，按文献[3]方法测定各组的吞噬指数K和校正吞噬指数α值。
1.4 巨噬细胞吞噬功能的测定
小鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)的制备[6]：C57BL/6雄性小鼠腹腔无菌注射3%硫代乙醇酸钠肉汤3 mL，3 d后断颈处死，收集腹腔巨噬细胞，离心，用PBS洗细胞2次，计数，再用完全RPMI-1640培养液调至1×106 mL-1备用。
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巨噬细胞吞噬功能的测定：小鼠PMφ用不完全RPMI-1640调至1×106 mL-1，加到96孔板中，每孔100 μL，置37 ℃5%CO2培养箱(西德Heraeus Co.)中培养2 h，待细胞贴壁后，弃上清，分别加入倍比稀释的药物100 μL和完全RPMI-1640培养基100 μL，总体积为200 μL，每样3个复孔，培养24 h。按文献[7]方法测定PMφ吞噬功能。
1.5 体液免疫功能的测定
昆明种小鼠雌雄兼用，随机分组，分别先灌胃给予CS、PS 4.0 g/(kg.d) 3 d，对照组灌胃给予同体积的溶媒。第4天给药的同时，以5% SRBC 0.2 mL/只腹腔注射致敏，免疫抑制模型组致敏当日与第3天腹腔内注射Cy 50 mg/kg，共2次，继续给药3 d，于致敏后第4天按文献[8，9]方法测定血清溶血素含量，按文献[8]方法测定抗体形成细胞数及其功能变化。
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2 结果
2.1 CS和PS对小鼠碳廓清率的影响
由表1、2可见不同剂量的CS和PS均能够剂量依赖性地提高吞噬指数K值和校正指数α值(与对照组比较均P<0.01)；并且发现CS和PS在相同剂量时作用基本一致(P>0.05)。当CS 2.0 g/kg、PS 4.0 g/kg时可分别使Cy显著降低的K值和α值恢复到正常水平，即CS和PS均可提高小鼠正常及低下的非特异性免疫功能。
表1 CS和PS对小鼠碳廓清率影响的量效关系 分组
n
K
α
±s, 百拇医药
对照组
9
0.031±0.014
5.402±1.160
PS
1.0 g.(kg.d)-1
8
0.044±0.019**
6.670±1.070**
2.0 g.(kg.d)-1
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9
0.088±0.020**
8.540±0.606**
4.0 g.(kg.d)-1
9
0.095±0.014**
9.920±1.290**
CS
1.0 g.(kg.d)-1
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9
0.053±0.019**
7.490±0.920**
2.0 g.(kg.d)-1
9
0.093±0.005**
8.810±0.750**
4.0 g.(kg.d)-1
9
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0.099±0.016**
9.240±1.930**
**与对照组比较P<0.01表2 CS和PS对免疫抑制小鼠碳廓清率的影响
±s 分组K
α
对照组
0.039±0.009
5.930±1.200
Cy/50 mg.(kg.d)-1
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0.013±0.011**
3.927±0.950**
PS/4.0 g.(kg.d)-1+Cy/50 mg.(kg.d)-1
0.032±0.013△△
6.234±0.810△△
CS/2.0 g.(kg.d)-1+Cy/50 mg.(kg.d)-1
, 百拇医药
0.034±0.010△△
6.067±0.860△△
各组均n=10；**与对照组比较P<0.01；△△与Cy组比较P<0.01
2.2 CS和PS对腹腔巨噬细胞吞噬功能影响
结果见图1。由图1可见CS和PS(均为0.25～8 g/L)均可明显增强小鼠PMφ吞噬中性红的能力，并呈现一定的剂量依赖性(P<0.01)。并且发现当质量浓度为4、8 g/L时PS的作用明显强于CS，而在质量浓度较低时(0.25、0.5 g/L)PS的作用则弱于CS(P<0.01)。
图1 CS和PS对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
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n=6；与CS组相比*P<0.05，**P<0.01
2.3 CS和PS对小鼠体液免疫功能的影响
结果见表3、4。结果表明：CS、PS在4.0 g/kg时均可显著增高正常小鼠的抗体形成细胞数(antibody formation cell, AFC)和溶血素-IgM含量(P<0.01)；并可显著对抗Cy所致的小鼠抗体形成细胞数的减少和溶血素-IgM水平的降低(P<0.01)。
表3 CS和PS对小鼠抗体形成细胞和溶血素-IgM的影响(OD值) 分组
AFC
λ/413 nm
IgM
λ/540 nm
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对照组
0.548±0.025
0.304±0.039
PS/4.0 g.(kg.d)-1
0.745±0.009**
0.454±0.032**
CS/4.0 g.(kg.d)-1
0.730±0.015**
0.568±0.191**
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各组n=10；**与对照组比较P<0.01表4 CS和PS对免疫抑制小鼠抗体形成细胞和溶血素-IgM的影响 分组
AFC
λ/413 nm
IgM
λ/540 nm
对照组
0.539±0.027
0.366±0.039
Cy/50 mg.(kg.d)-1
0.242±0.075**
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0.111±0.007**
PS/4.0 g.(kg.d)-1+Cy/50 mg.(kg.d)-1
0.531±0.061△△
0.336±0.022*△△
CS/4.0 g.(kg.d)-1+Cy/50 mg.(kg.d)-1
0.549±0.033△△
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0.316±0.006*△△
各组n=10；与对照组比较*P<0.05，**P<0.01；△△与Cy组比较P<0.01
3 讨论
单核巨噬细胞系统(网状内皮系统，reticuloendothelial system, RES)是机体非特异性免疫系统的重要组成部分。因能迅速清除多种致病物质，是维持机体内环境稳定的一个最重要的系统。巨噬细胞是免疫细胞的一种，具有多种免疫功能如吞噬和杀伤多种病原微生物、处理和呈递抗原、分泌细胞因子(IL-1、IL-6、IL-8、IL-12、TNF-α)、表达共刺激分子以加强与T细胞的相互作用等方式参与免疫反应，在炎症、感染和肿瘤等许多疾病过程中发挥了重要的作用。
本研究发现CS和PS水煎剂在体内均能提高小鼠碳廓清率，增强RES功能，并发现CS的作用稍强于PS，两者均可对抗Cy的抑制作用，与文献报道一致[4]。在体外CS和PS均可直接激活小鼠PMφ，增强其吞噬功能。在较低剂量时CS的作用强于PS，而较大剂量时则弱于PS，这种特点与免疫调节剂的双相作用有关。因此，CS和PS对机体的非特异性免疫功能均具有明显增强作用。而两者对PMφ产生细胞因子有何影响有待进一步研究。
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应用定量溶血分光光度法(QHS)检测抗体形成细胞所分泌的抗SRBC抗体，其结果不仅反映抗体形成细胞的数量，也提示合成抗体的能力，此法较溶血空斑法精确。CS和PS均可提高正常和Cy抑制小鼠的体液免疫功能。鉴于有报道CS在体外可直接刺激B淋巴细胞增殖[10]，因此推测CS、PS可能通过直接作用于B淋巴细胞而增强小鼠体液免疫功能。但其确切机制尚需深入研究。
感谢北京医科大学免疫学系钱玉昆教授的指导。
首都医科大学青年科技基金资助项目参考文献
1 孙云汉.冬虫夏草与虫草菌丝的药理研究.见：周金黄主编.免疫药理学进展(基础与临床).北京:中国科技出版社,1993.179～191
2 陈庆涛.中国拟青霉新种及其与虫草的关系.真菌学报,1984,3(1):24～28
, http://www.100md.com
3 李常春,黄自强,郭秀碧,等.冬虫夏草与中国拟青霉的药理研究.福建医药杂志,1983,5(5):51～54
4 郑幼兰,叶聚荣,林大杰,等.冬虫夏草与中国拟青霉对免疫功能的影响.福建医药杂志,1983,5(5):55～57
5 归筱铭，陈晓亮.冬虫夏草和冬虫夏草菌丝体的化学成分比较.福建中医药，1982，13(2)：32
6 章灵华.黄岑总甙对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响.中国免疫学杂志,1994,10(增刊):133～136
7 鞠田文.商陆皂甙甲抑制小鼠巨噬细胞的作用.中国免疫学杂志,1993,9:381～382
8 徐叔云.药理实验方法学.第2版.北京:人民卫生出版社,1991.1215,1230,1231
9 Simpson M A, Gozzo J J. Spectophotometric determination of lymphocyte mediated sheep red cell hemolysis in vitro. J Immunol Methods, 1978,21:159～165
10 匡彦德，王美英，钱琴芳，等.冬虫夏草免疫增强作用机理研究.上海免疫学杂志，1989，9(1)：6～8
收稿日期：1998-03-15, 百拇医药