实验性面瘫面肌次级突触间隙结构变化的电镜观察
作者：任重 柳斌 谷贺
单位：110001沈阳，中国医科大学附属第一临床学院耳鼻喉科
关键词：面神经麻痹/病理学；运动神经元/病理学；突触/分析；豚鼠
980306.htm 摘 要 目的 探讨面瘫时眼轮匝肌(简称眼肌)和口轮匝肌(简称口肌)受伤程度差异(简称受伤差)机制。方法 应用扫描电镜观察眼肌和口肌运动终板次级突触间隙的病理变化差异。结果 眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙数量减少，而且眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙恢复得慢。结论 由于眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙受伤程度重，决定了两肌间受伤差异，支持了面肌程度判定的“局部评价系统”的合理性。
中图号 R745.12
Observation of Structural Difference of Secondary Synaptic Space of Facial Muscle in Facial Paralysis Ren Zhong,Liu Bin,Gu He.Department of Otolaryngology,First Affiliated Hospital of China Medical University,Shenyang 110001
, 百拇医药
Abstract Objective To study the mechanism of differences in vulnerability of orbicularis oculi and oris muscles in facial paralysis.Methods The differences in pathological changes of secondary synaptic space of motor end plate of orbicularis oculi and oris muscles were observed under scanning electron microscope.Results Quantity of secondary synaptic space of orbicularis oculi muscles was less than that of oris muscles.Restoration of secondary space of orbicularis oculi muscles was slower than that of oris muscles.Conclusion Since injury degree of secondary synaptic space of orbicularis oculi muscles was more severe than that of oris muscles, it determined the differences in vulnerability and supported the local estimating system.
, 百拇医药
Key words facial paralysis/pathol;motor neurons/pathol;synapes/anal;guinea pigs
人的表情是靠面肌间协调作功而完成的，各面肌及其支配神经都有各自的生理学和解剖学特点。这些不同特点决定了面神经麻痹时面肌间受伤程度的差异(简称受伤差)。作者通过机能学和组织学进行了临床和实验研究，得出了眼轮匝肌(简称眼肌)比口轮匝肌(简称口肌)具有易受伤性和难恢复性的特点〔1〕。为了进一步探讨面神经麻痹时眼肌和口肌间的受伤差机理，制作颞骨内面瘫实验模型，应用扫描电镜观察运动终板次级突触间隙的病理变化差异，报道如下。
材 料 和 方 法
一、面瘫实验模型制作
使用550～900 g的豚鼠，用戊巴比妥30 mg/Kg腹腔内注射麻醉后，仰卧位固定，再用0.5%利多卡因局部追加麻醉，在手术显微镜下切开颞骨骨泡，用钻石钻磨开，显露面神经的水平段和垂直段，在镫骨肌支上约2 mm处面神经上置200 μm直径的钨制双极刺激电极，用定电压刺激装置(SANEI 3F36)以0.1 ms脉冲宽度的矩形波的最大刺激阈值，单发刺激面神经。将直径200 μm的双极钨针电极直接刺入眼肌和口肌，导出的动作电位通过增幅仪(SANEI 180)、平均加算装置(SANEI 7S06)及X-Y记录仪描记。
, 百拇医药
首先描记25只豚鼠面神经压榨前眼肌和口肌神经电图(ENoG)的最大振幅动作电位，并记录刺激阈值。然后用压强7.84×106 Pa微型持针器压榨镫骨肌支下约2 mm处的面神经。压榨持续时间10 s组10只、30 s组10只，另外5只作为未受压的正常对照组。在行扫描电镜标本制作前分别用压榨前刺激阈值测试每只豚鼠眼肌和口肌动作电位。
二、扫描电镜标本制作
应用盐酸组织消化法〔2〕将对照组5只，压榨实验后第30天10 s组5只、30 s组5只，压榨实验后第60天10 s组5只、30 s组5只豚鼠经3%戊二醛灌流固定后，摘除眼肌和口肌，再经2%锇酸固定。然后在8NHCL 600 ℃环境下经约30 min左右处理去掉结缔组织，经脱水、浸透、干燥、喷金供扫描电镜观察。
结 果
一、ENoG振幅
, 百拇医药
扫描电镜标本制作前ENoG振幅与压榨面神经前振幅平均百分比值，压榨后30天、60天10 s组和30 s组的眼肌百分比值均显著小于口肌的百分比值(附表)。
附表 眼肌和口肌ENoG振幅百分比比较
n
眼肌
口肌
t
P
压榨后30天
10 s组
10
6.1±2.4
, 百拇医药
32.8±10.1
8.765
<0.01
30 s组
10
0
8.2±4.0
3.196
<0.05
压榨后60天
10 s组
5
13.3±5.2
, 百拇医药
45.6±12.8
7.412
<0.01
30 s组
5
0
8.3±3.4
3.204
<0.05
二、次级突触间隙观察 对照组眼肌次级突触间隙(图1)比口肌次级突触(图2)的数量多、长而大。但二者的形态相同，均呈裂隙状。
压榨面神经后第30天，10 s组眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙数量少而浅；30 s组眼肌次级突触间隙(图3)比口肌次级突触间隙(图4)数量明显减少而且平滑。二者均比对照组的次级突触间隙的数量减少、变小、变浅。
, 百拇医药
压榨面神经后第60天、10 s组眼肌次级突触间隙(图5)比口肌次级突触间隙(图6)数量少。但二者均比第30天的次级突触间隙数量有所增加。30 s组二者与第30天的刺激突触间隙相比无明显改变，眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙仍然数量减少而且平滑。
讨 论
著者曾报道面神经因某种原因受损伤时，眼肌的麻痹程度比口肌的麻痹程度重，同时眼肌功能恢复比口肌恢复速度慢〔1〕。实验研究也表明，眼肌支配神经的神经兴奋传导的抑制时间比口肌支配神经的神经兴奋传导的抑制时间长，说明前者受损程度重。本文ENoG振幅测试也重复了上述实验结果，即眼肌比口肌受损伤重，压榨后第60天10 s组眼肌功能恢复比口肌功能恢复速度慢。产生这种受损伤程度差异的原因，与神经纤维直径大小不同有关，直径越大，兴奋传导速度越快者，受损伤程度也越大〔3〕。著者测量了豚鼠、兔眼肌支配神经和口肌支配神经的有髓神经纤维直径〔4〕，前者比后者的直径大。应用ENoG分别测试了神经兴奋传导速度，前者比后者传导速度快。因而眼肌支配神经比口肌支配神经的受损伤程度大。换言之，即口肌支配神经纤维对损伤的抵抗性强，表现为眼肌麻痹程度比口肌麻痹程度重。但是，面神经受损伤后眼肌和口肌本身有什么变化，在眼肌和口肌间产生受伤差中起什么作用尚不清楚。本文扫描电镜观察运动终板次级突触间隙，发现眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙数量多，长而大。即次级突触间隙面积大，表明肌膜上的乙酰胆碱受体多，能接受较多的乙酰胆碱分子。眼肌上刺激突触间隙的胆碱受体比口肌肌膜上的胆碱受体多，能多量接受乙酰胆碱，引起肌膜上大电位发生，即显示兴奋性高。兴奋性高者，易受损伤，损伤程度重。本文结果也表明，面神经受损伤后眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙面积明显变小，恢复也慢。因此，表现眼肌运动点的兴奋性比口肌运动点的兴奋性变低。即眼肌麻痹程度比口肌麻痹程度重。进一步揭示了眼肌易受伤性和难恢复性的机理。面肌间受伤差的结论，对面瘫程度评价有重大意义。目前有两大类评价法，一类是大体上评价整个面瘫程度的整体评价系统。另一类是把面部分成几个单位，进行各单位功能量的评价，即部分评价系统。本文结果支持部分评价系统的合理性。应用部分评价系统评价面瘫程度，将更有利于预后的判定和治疗方案的制定。
, 百拇医药
图1 对照组眼肌次级突触间隙
图2 对照组口肌次级突触间隙
图3 压榨面神经后第30天30 s组眼肌次级突触间隙
图4 压榨面神经后第30天30 s组口肌次级突触间隙
图5 压榨面神经后第60天10 s眼肌次级突触间隙
图6 压榨面神经后第60天10 s口肌次级突触间隙
国家自然科学基金资助项目(No.3967079)
参 考 文 献
1 任重.侧头骨内颜面神麻痹におけ眼轮筋とロ轮筋の受伤差に阌研究.耳鼻咽喉科临床,1984,77：763-768.
, 百拇医药
2 Desaki J,Uehara Y.The overall morphology of neuromuscular junctions as revealed by scanning electron microscopy.J Neurocytol,1981,10:101-108.
3 Fowlar TJ Danta.Recovery of never conduction of after a pneumatic tourniquet.J Neurology and Psychiatry,1972,35:638-646.
4 Ren Zhong, Liu Bin, Ma Xiulan.Characteristics of facial muscle and efferent nerve on physiology and anatomy.Chinese Medical Science Journal,1997,12:50-53.
(收稿 1998-03-05 修回 1998-05-15), http://www.100md.com
单位：110001沈阳，中国医科大学附属第一临床学院耳鼻喉科
关键词：面神经麻痹/病理学；运动神经元/病理学；突触/分析；豚鼠
980306.htm 摘 要 目的 探讨面瘫时眼轮匝肌(简称眼肌)和口轮匝肌(简称口肌)受伤程度差异(简称受伤差)机制。方法 应用扫描电镜观察眼肌和口肌运动终板次级突触间隙的病理变化差异。结果 眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙数量减少，而且眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙恢复得慢。结论 由于眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙受伤程度重，决定了两肌间受伤差异，支持了面肌程度判定的“局部评价系统”的合理性。
中图号 R745.12
Observation of Structural Difference of Secondary Synaptic Space of Facial Muscle in Facial Paralysis Ren Zhong,Liu Bin,Gu He.Department of Otolaryngology,First Affiliated Hospital of China Medical University,Shenyang 110001
, 百拇医药
Abstract Objective To study the mechanism of differences in vulnerability of orbicularis oculi and oris muscles in facial paralysis.Methods The differences in pathological changes of secondary synaptic space of motor end plate of orbicularis oculi and oris muscles were observed under scanning electron microscope.Results Quantity of secondary synaptic space of orbicularis oculi muscles was less than that of oris muscles.Restoration of secondary space of orbicularis oculi muscles was slower than that of oris muscles.Conclusion Since injury degree of secondary synaptic space of orbicularis oculi muscles was more severe than that of oris muscles, it determined the differences in vulnerability and supported the local estimating system.
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Key words facial paralysis/pathol;motor neurons/pathol;synapes/anal;guinea pigs
人的表情是靠面肌间协调作功而完成的，各面肌及其支配神经都有各自的生理学和解剖学特点。这些不同特点决定了面神经麻痹时面肌间受伤程度的差异(简称受伤差)。作者通过机能学和组织学进行了临床和实验研究，得出了眼轮匝肌(简称眼肌)比口轮匝肌(简称口肌)具有易受伤性和难恢复性的特点〔1〕。为了进一步探讨面神经麻痹时眼肌和口肌间的受伤差机理，制作颞骨内面瘫实验模型，应用扫描电镜观察运动终板次级突触间隙的病理变化差异，报道如下。
材 料 和 方 法
一、面瘫实验模型制作
使用550～900 g的豚鼠，用戊巴比妥30 mg/Kg腹腔内注射麻醉后，仰卧位固定，再用0.5%利多卡因局部追加麻醉，在手术显微镜下切开颞骨骨泡，用钻石钻磨开，显露面神经的水平段和垂直段，在镫骨肌支上约2 mm处面神经上置200 μm直径的钨制双极刺激电极，用定电压刺激装置(SANEI 3F36)以0.1 ms脉冲宽度的矩形波的最大刺激阈值，单发刺激面神经。将直径200 μm的双极钨针电极直接刺入眼肌和口肌，导出的动作电位通过增幅仪(SANEI 180)、平均加算装置(SANEI 7S06)及X-Y记录仪描记。
, 百拇医药
首先描记25只豚鼠面神经压榨前眼肌和口肌神经电图(ENoG)的最大振幅动作电位，并记录刺激阈值。然后用压强7.84×106 Pa微型持针器压榨镫骨肌支下约2 mm处的面神经。压榨持续时间10 s组10只、30 s组10只，另外5只作为未受压的正常对照组。在行扫描电镜标本制作前分别用压榨前刺激阈值测试每只豚鼠眼肌和口肌动作电位。
二、扫描电镜标本制作
应用盐酸组织消化法〔2〕将对照组5只，压榨实验后第30天10 s组5只、30 s组5只，压榨实验后第60天10 s组5只、30 s组5只豚鼠经3%戊二醛灌流固定后，摘除眼肌和口肌，再经2%锇酸固定。然后在8NHCL 600 ℃环境下经约30 min左右处理去掉结缔组织，经脱水、浸透、干燥、喷金供扫描电镜观察。
结 果
一、ENoG振幅
, 百拇医药
扫描电镜标本制作前ENoG振幅与压榨面神经前振幅平均百分比值，压榨后30天、60天10 s组和30 s组的眼肌百分比值均显著小于口肌的百分比值(附表)。
附表 眼肌和口肌ENoG振幅百分比比较
n
眼肌
口肌
t
P
压榨后30天
10 s组
10
6.1±2.4
, 百拇医药
32.8±10.1
8.765
<0.01
30 s组
10
0
8.2±4.0
3.196
<0.05
压榨后60天
10 s组
5
13.3±5.2
, 百拇医药
45.6±12.8
7.412
<0.01
30 s组
5
0
8.3±3.4
3.204
<0.05
二、次级突触间隙观察 对照组眼肌次级突触间隙(图1)比口肌次级突触(图2)的数量多、长而大。但二者的形态相同，均呈裂隙状。
压榨面神经后第30天，10 s组眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙数量少而浅；30 s组眼肌次级突触间隙(图3)比口肌次级突触间隙(图4)数量明显减少而且平滑。二者均比对照组的次级突触间隙的数量减少、变小、变浅。
, 百拇医药
压榨面神经后第60天、10 s组眼肌次级突触间隙(图5)比口肌次级突触间隙(图6)数量少。但二者均比第30天的次级突触间隙数量有所增加。30 s组二者与第30天的刺激突触间隙相比无明显改变，眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙仍然数量减少而且平滑。
讨 论
著者曾报道面神经因某种原因受损伤时，眼肌的麻痹程度比口肌的麻痹程度重，同时眼肌功能恢复比口肌恢复速度慢〔1〕。实验研究也表明，眼肌支配神经的神经兴奋传导的抑制时间比口肌支配神经的神经兴奋传导的抑制时间长，说明前者受损程度重。本文ENoG振幅测试也重复了上述实验结果，即眼肌比口肌受损伤重，压榨后第60天10 s组眼肌功能恢复比口肌功能恢复速度慢。产生这种受损伤程度差异的原因，与神经纤维直径大小不同有关，直径越大，兴奋传导速度越快者，受损伤程度也越大〔3〕。著者测量了豚鼠、兔眼肌支配神经和口肌支配神经的有髓神经纤维直径〔4〕，前者比后者的直径大。应用ENoG分别测试了神经兴奋传导速度，前者比后者传导速度快。因而眼肌支配神经比口肌支配神经的受损伤程度大。换言之，即口肌支配神经纤维对损伤的抵抗性强，表现为眼肌麻痹程度比口肌麻痹程度重。但是，面神经受损伤后眼肌和口肌本身有什么变化，在眼肌和口肌间产生受伤差中起什么作用尚不清楚。本文扫描电镜观察运动终板次级突触间隙，发现眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙数量多，长而大。即次级突触间隙面积大，表明肌膜上的乙酰胆碱受体多，能接受较多的乙酰胆碱分子。眼肌上刺激突触间隙的胆碱受体比口肌肌膜上的胆碱受体多，能多量接受乙酰胆碱，引起肌膜上大电位发生，即显示兴奋性高。兴奋性高者，易受损伤，损伤程度重。本文结果也表明，面神经受损伤后眼肌次级突触间隙比口肌次级突触间隙面积明显变小，恢复也慢。因此，表现眼肌运动点的兴奋性比口肌运动点的兴奋性变低。即眼肌麻痹程度比口肌麻痹程度重。进一步揭示了眼肌易受伤性和难恢复性的机理。面肌间受伤差的结论，对面瘫程度评价有重大意义。目前有两大类评价法，一类是大体上评价整个面瘫程度的整体评价系统。另一类是把面部分成几个单位，进行各单位功能量的评价，即部分评价系统。本文结果支持部分评价系统的合理性。应用部分评价系统评价面瘫程度，将更有利于预后的判定和治疗方案的制定。
, 百拇医药
图1 对照组眼肌次级突触间隙
图2 对照组口肌次级突触间隙
图3 压榨面神经后第30天30 s组眼肌次级突触间隙
图4 压榨面神经后第30天30 s组口肌次级突触间隙
图5 压榨面神经后第60天10 s眼肌次级突触间隙
图6 压榨面神经后第60天10 s口肌次级突触间隙
国家自然科学基金资助项目(No.3967079)
参 考 文 献
1 任重.侧头骨内颜面神麻痹におけ眼轮筋とロ轮筋の受伤差に阌研究.耳鼻咽喉科临床,1984,77：763-768.
, 百拇医药
2 Desaki J,Uehara Y.The overall morphology of neuromuscular junctions as revealed by scanning electron microscopy.J Neurocytol,1981,10:101-108.
3 Fowlar TJ Danta.Recovery of never conduction of after a pneumatic tourniquet.J Neurology and Psychiatry,1972,35:638-646.
4 Ren Zhong, Liu Bin, Ma Xiulan.Characteristics of facial muscle and efferent nerve on physiology and anatomy.Chinese Medical Science Journal,1997,12:50-53.
(收稿 1998-03-05 修回 1998-05-15), http://www.100md.com