大叶马蹄香根中的黄酮类成分
作者：隆长锋 王璇 杨宇新 蔡少青
单位：北京大学药学院天然药物学系，北京 100083
关键词：大叶马蹄香；细辛属；化学；黄酮类；分离和提纯；查耳酮；分离和提纯
北京医科大学学报000310 [摘 要] 目的：研究大叶马蹄香(Asarum maximum Hemsl.)根中的化学成分。方法：用溶剂提取、色谱法分离大叶马蹄香的化学成分，并用理化常数和波谱法鉴定其结构。结果：从大叶马蹄香根的乙醇提取物中分离到5个黄酮类成分，根据理化性质和波谱数据鉴定其结构分别为柚皮素(Ⅰ)，柚皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅱ)，柚皮素-5，7-O-β-D-2吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)，4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′,4′-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(IV)和4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(V)。结论：上述化合物均为首次从该植物中获得，其中化合物Ⅱ，Ⅳ，Ⅴ为首次从细辛属植物中获得。
, 百拇医药
[中图分类号] R932.41 [文献标识码] A
[文章编号] 1000-1530(2000)03-0229-03
Studies on flavonoids from the root of Asarum maximum
LONG Chang-Feng, WANG Xuan, YANG Yu-Xin, CAI Shao-Qing
(Department of Natural Medicines, School of
Pharmaceutical Sciences, Peking University, Beijing 100083, China)
ABSTRACT Objective: To study the constituents of the root of Asarum maximum Hemsl. Methods: The constituents were extracted and separated by various chromatographies , and the structures were identified on the basis of their chemical and physical properties and spectral analysis. Results: Five flavonoids were isolated from the ethanol extract of the roots of Asarum maximum, and their structures were identified as naringenin (Ⅰ), naringenin-5-O-β-D-glucopyranoside (Ⅱ), naringenin-5,7-di-O-β-D-glucopyranoside (Ⅲ), 4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′,4′-di-O-β-D-glucopyranoside (Ⅳ) and 4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′-O-β-D-glucopyranoside (Ⅴ). Conclusion: All of these compounds were separated for the first time from this plant and compounds Ⅱ, Ⅳ and Ⅴ from the genus Asarum.
, 百拇医药
KEY WORDS
KEY WORDS Asarum maximum； Asarum/chem; Flavones/isol; Chalcone/isol▲
细辛为常用中药，中国药典规定细辛为马兜铃科植物北细辛Asarum heterotropoids Fr. Schmidt var. mandshuricum (Maxim.)Kitag.、汉城细辛A. sieboldii Miq.var. seoulense Nakai或华细辛A .sieboldii Miq.的干燥全草，用于风寒感冒、头痛、牙痛、风湿痹痛、痰饮哮喘等症[1]。商品调查[2]发现细辛属植物大叶马蹄香(Asarum maximum Hemsl.)在湖北等地作为细辛使用，药理实验证明其具有镇痛作用[3]，但未见有关大叶马蹄香的化学成分报道。为了阐明大叶马蹄香的有效成分，我们对其化学成分进行了研究。从中分离得到5个黄酮类化合物，分别为柚皮素(naringenin, I, 5,7,4′-三羟基二氢黄酮)，柚皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(naringenin-5-O-β-D-glucopyranoside, Ⅱ),柚皮素-5,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(naringenin-5,7-di-O-β-D-glucopyranoside, Ⅲ)，4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′,4′-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′,4′-di-O-β-D-glucopyrano-side, Ⅳ)和4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′-O-β-D-glucopyranoside, Ⅴ)。这些化合物均为首次从大叶马蹄香中获得，其中化合物Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ为首次从细辛属植物中获得。
, 百拇医药
1 仪器及药材
熔点用XT4A显微熔点测定仪测定，温度计未校正。IR光谱用Perkin-Elmer 983型红外光谱仪测定，KBr压片。NMR光谱用VXR300和VXR500型仪测定，TMS内标。MS用AEI-MS-50型质谱仪测定。柱色谱硅胶(100～200目，200～300目)和薄层色谱硅胶G，GF254，H(400目)均为青岛海洋化工厂产品；聚酰胺膜为浙江黄岩化学实验工厂产品，聚酰胺粉为江苏无锡县电化教具厂产品；Sephadex LH-20为 Pharmacia公司产品；D101型大孔吸附树脂为天津农药厂产品。薄层显色剂为90 g*L-1 H2SO4乙醇溶液，50 g*L-1磷钼酸乙醇溶液，10 g*L-1 AlCl3乙醇溶液。药材经本室蔡少青教授鉴定原植物为大叶马蹄香(Asarun maximum Hemsl.)。
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2 提取和分离
大叶马蹄香根(含根茎)粗粉经95%(体积分数)乙醇温浸4次，提取液减压浓缩后分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。药渣再经50%(体积分数)乙醇温浸4次，提取液减压浓缩后分别用乙酸乙酯和正丁醇萃取。将95%(体积分数)乙醇提取物的正丁醇部分与50%(体积分数)乙醇提取物的正丁醇部分合并，经大孔树脂处理，30%(体积分数)和50%(体积分数)的乙醇洗脱物进一步经反复硅胶柱色谱(CHCl3-MeOH梯度洗脱)，聚酰胺柱色谱(EtOH-H2O梯度洗脱)和Sephadex LH-20色谱(MeOH洗脱)，得到化合物Ⅰ(20 mg), Ⅱ ( 50 mg), Ⅲ(9 g), Ⅳ(300 mg)和Ⅴ(200 mg)。
3 结构鉴定
化合物I：无色针晶(氯仿-甲醇)，mp:246～247℃，分子式C15H12O5。盐酸-镁粉反应阳性。 1HNMR(CD3COCD3):δ2.73(1H, dd, J=17, 2.4 Hz), 3.19(1H, dd, J =17, 12.7 Hz), 5.46(1H, dd, J =12.7, 2.4 Hz)为一组偶合信号，显示此为二氢黄酮特征信号，分别为二氢黄酮母核上H-3e， H-3a, 和H-2; δ12.19(1H,S)为芳环上5位的酚羟基，δ6.90(2H, dd, J=8.5, 2.7 Hz)和δ7.4(2H, dd, J =8.5, 2.7 Hz)为B环上处于邻位相互偶合的H-3′,5′和H-2′,6′两组质子信号，所以B环为4位单取代；δ5.96(1H, d, J =2.2 Hz)和δ5.95(1H, d, J=2.2 Hz)为A环上的H-8，H-6两个质子信号，8.5(OH), 9.6(OH), 12.2(5-OH)。EI-MS显示分子离子峰为272，可推断此化合物为含有3个羟基的二氢黄酮，其取代位置分别为5, 7, 4′位。
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13CNMR(CD3COCD3):δ196.3为酮羰基碳信号，δ42.5和δ79.0为C环C-3，C-2信号，其余为芳环碳信号。根据以上数据，确定Ⅰ为柚皮素。
化合物Ⅱ：无色针晶(氯仿-甲醇)，mp: 164～166℃，分子式C21H22O10，盐酸-镁粉反应阳性。
1HNMR(DMSO-d6): 显示δ6.79(2H, d, J=8.4 Hz)和δ7.31(2H, d, J=8.4 Hz)为B环上处于邻位相互偶合的H-3′, 5′和H-2′,6′两组质子信号，所以B环为4位单取代；δ6.40(1H, d, J=2.1 Hz)和δ6.01(1H, d, J=2.1 Hz)为A环上的H-6，H-8两个质子信号。δ3.1～3.7有多个氢为糖上质子，δ5.38(1H, dd, J=13.2, 2.7 Hz)为H-2, 3.07(1H, dd, J=17.1, 13.2 Hz, 3-α-H), 2.62(1H, dd, J=17.1, 2.7 Hz, 3-β-H),δ4.6～5.2有多个质子为糖上羟基，端基质子5.1(1H, d, J=5.1 Hz, glc 1-H)。碳谱数据显示δ44.5和78.1的峰，为二氢黄酮3-C和2-C信号，Ⅱ为二氢黄酮苷，与柚皮素碳谱比较，碳谱中显示比柚皮素多1个葡萄糖的碳信号，由于苷化位移，端基碳化学位移向低场位移至δ103.4, glc-2-C向高场位移δ1.7, 其它糖上数据与β-D-glc基本一致(表1)， B环部分基本一致，C-4～10化学位移变化为-6.3,-0.1,+3.7,-1.6,+3.8,-2.9,+3.2,具有9.6(OH), 10.8(OH)信号, 5-OH信号消失。所以糖应取代在5位，故确定化合物Ⅱ为柚皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
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化合物Ⅲ：白色粉末(甲醇)，mp: 182～184℃，分子式C27H32O15，盐酸-镁粉反应阳性。IRυ(cm-1):3 392(-OH),1 636(C=O),1 202,1 081(C-O)。 1HNMR(DMSO-d6)显示δ6.79(2H, d, J=7.2 Hz)和δ7.32(2H, d, J=7.2 Hz)为B环上处于邻位相互偶合的H-3′,5′和H-2′,6′两组质子信号，所以B环为4位单取代；δ6.33(1H, s)和δ6.51(1H, s)为A环上的H-6，H-8两个质子信号。δ3.1～3.7有多个氢为糖上质子，δ4.6～5.5有多个质子为糖上羟基和端基质子。UVλMeOHmax nm, 278。碳谱数据显示δ44.6和78.5的峰，为二氢黄酮C-3，C-2信号。Ⅲ为二氢黄酮苷，与柚皮素碳谱比较，碳谱中显示比柚皮素多两个葡萄糖的碳信号，端基碳化学位移为δ99.4，102.4， B环部分基本一致，C-4～10化学位移变化为-6.2，-1.0， +4.5，-2.5，+3.2，-3.6，+4.6，说明两个葡萄糖在5, 7位取代。FAB-MS显示433[M+-glc]，271[M+-glc-glc]。与文献[4]对照，数据一致，故确定其结构为柚皮素-5, 7-O-β-D-二吡喃葡萄糖苷。
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表1 化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的碳谱数据
Table 1 13CNMR data of compounds Ⅰ, Ⅱ and Ⅲ No.
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
2
79.0
78.1
78.5
3
42.5
44.5
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44.6
4
196.3
190.0
190.1
5
164.3
164.2
163.3
6
95.9
98.8
99.4
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7
166.4
164.8
163.9
8
94.9
97.7
98.1
9
163.5
160.6
159.9
10
, http://www.100md.com
102.3
105.5
106.9
1′
129.9
129.0
128.9
2′
128.1
128.2
128.4
3′
115.3
, 百拇医药
115.1
115.2
4′
157.8
157.6
157.8
5′
115.3
115.1
115.2
6′
128.1
128.2
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128.4
1″
103.4
102.4
2″
73.4
73.4
3″
77.5
77.4
4″
69.7
69.9
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5″
75.6
76.4
6″
60.8
60.9
1
99.4
2
73.0
3
77.1
4
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69.7
5
75.8
6
60.8
化合物Ⅳ：黄色粉末(丙酮)，mp: 124～125℃，分子式为C27H32O15，红外显示：3 378(-OH)，1 620(C=O)，1 438(Ar)。 1HNMR(DMSO-d6)显示δ7.83(1H, d, J=15.3 Hz)与7.61(1H, d, J=15.3 Hz)为反式烯氢，为α,β-H.,δ7.64(2H, d, J=8.1 Hz)与6.82(2H, d, J=8.1 Hz)为4位取代的B环上发生邻位偶合的四个氢，δ6.39和6.21处各有1个单峰的氢，为A环上间位的氢，δ5.12和4.98处各有1个氢，呈二重峰，偶合常数为7.2 Hz，为两个糖上的端基质子，且均为β构型，3.11～3.75有多个峰，为糖上的其他质子，根据以上可推测其为查耳酮的苷。FAB-MS显示：m/z 595[M-1]，433[M-glc]。可推测其苷元上有4个羟基，结合氢谱，其苷元上的羟基所接位置为4, 2′,4′,6′位。比较它与isoliquiritigenin(2′,4′,4-三羟基-查耳酮)及化合物A(4, 2′,4′,6′-四甲氧基查耳酮)的碳谱[5]，见表2，发现B环上的碳的化学位移变化较小，说明糖的取代位置不在B环，糖上碳化学位移数据说明其为两个葡萄糖，且分别接在A环上不同位置，将Ⅳ的
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13 CNMR数据与下述化合物Ⅴ苷元部分的数据比较，发现C-α，1′-C和2′-C变化较大，根据生源关系，Ⅳ可能源于化合物Ⅲ，所以另一糖在4′位成苷。所以确定化合物Ⅳ为4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′,4′-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。表2 化合物Ⅳ和Ⅴ的碳谱数据
Table 2 13CNMR data of compounds Ⅳ and Ⅴ No.
Ⅳ
A
isoliquiritigenin
Ⅴ
α
128.3
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127.1
117.8
124.2
β
143.8
143.8
143.8
142.8
C=O
192.7
193.8
191.4
192.1
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1′
107.8
112.2
113.2
105.6
2′
162.5
158.8
164.6
166.0
3′
97.7
91.0
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102.6
96.9
4′
163.9
162.4
165.4
164.5
5′
94.5
910.0
107.9
94.6
6′
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159.3
1588.0
132.3
159.8
1
125.7
127.7
125.8
126.2
2
131.1
130.0
130.6
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130.8
3
116.2
114.4
115.8
115.9
4
160.7
161.5
159.9
160.2
5
116.2
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114.4
115.8
115.9
6
131.1
130.0
130.6
130.8
1″
100.3
100.4
2″
73.6
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73.7
3″
76.6
76.7
4″
69.8
69.4
5″
77.3
77.3
6″
60.8
60.5
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1
99.5
2
73.0
3
76.4
4
69.8
5
77.1
6
60.8
化合物Ⅴ：黄色粉末(丙酮)，mp: 157～159℃，分子式为C21H22O10。红外显示：3 353(-OH)，1 620(C=O),1 545，1 507(Ar)。 1HNMR(DMSO-d6)显示δ13.87(1H, s), 10.64(1H, s)，10.1(1H, s), 为3个酚羟基，δ7.98(1H, d, J=15.3 Hz)与7.62(1H, d, J=15.3 Hz)为反式烯氢，为α, β-H，δ7.65(2H, d, J=8.1 Hz)与6.82(2H, d, J=8.1 Hz)为4位取代的B环上发生邻位偶合的四个氢，δ6.17和5.97处各有1个双峰的氢，偶合常数为1.8 Hz，为A环上间位的氢，说明Ⅴ苷元为4, 2′, 4′, 6′-四羟基查耳酮。δ5.08(1H, d, J=7.2 Hz)，为糖上的端基质子，为β构型，δ3.11～3.75有多重峰，为糖上的其他质子，推测为查耳酮的苷。FAB-MS：m/z457[M+Na],435[M+H],273[M+H-glc]显示含有一个糖。碳谱上可看出：δ100.4, 73.7, 76.7, 69.4, 77.3, 60.5, 为葡萄糖残基上碳的化学位移；δ192.1为羰基碳的化学位移；δ142.8, 124.2为β、α碳的化学位移，其余为苯环上的碳，比较其与化合物A的碳的化学位移，发现1′～3′位碳的化学位移变化较大，且根据生源关系Ⅴ可能源于化合物Ⅱ, 所以糖应该接在2′位。确定化合物Ⅴ为4, 2′, 4′, 6′-四羟基查耳酮-2′-O-β-D吡喃葡萄糖苷。 参考文献
, http://www.100md.com
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会. 中华人民共和国药典[M]：一部.1995年版.广州：广东科技出版社，1995.197
[2]蔡少青，王 璇，朱 姝，等. 中药细辛商品药材的基源研究[J].中国中药杂志，1996，21(12)：712-717， 760
[3]崔景荣，蔡少青，周长春，等. 四种细辛药理作用研究[J].中国药科大学学报，1997，28(专刊)：226-228
[4]矢原正治，加藤公代，野原稔弘，等. 细辛の水溶性成分の研究[J].生药学杂志，1990，44(4)：331-334
[5]于德泉等主编. 分析化学手册：第五分册[M].北京：化学工业出版社，1989.739-748
收稿日期：2000-02-23, 百拇医药
单位：北京大学药学院天然药物学系，北京 100083
关键词：大叶马蹄香；细辛属；化学；黄酮类；分离和提纯；查耳酮；分离和提纯
北京医科大学学报000310 [摘 要] 目的：研究大叶马蹄香(Asarum maximum Hemsl.)根中的化学成分。方法：用溶剂提取、色谱法分离大叶马蹄香的化学成分，并用理化常数和波谱法鉴定其结构。结果：从大叶马蹄香根的乙醇提取物中分离到5个黄酮类成分，根据理化性质和波谱数据鉴定其结构分别为柚皮素(Ⅰ)，柚皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅱ)，柚皮素-5，7-O-β-D-2吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)，4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′,4′-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(IV)和4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(V)。结论：上述化合物均为首次从该植物中获得，其中化合物Ⅱ，Ⅳ，Ⅴ为首次从细辛属植物中获得。
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[中图分类号] R932.41 [文献标识码] A
[文章编号] 1000-1530(2000)03-0229-03
Studies on flavonoids from the root of Asarum maximum
LONG Chang-Feng, WANG Xuan, YANG Yu-Xin, CAI Shao-Qing
(Department of Natural Medicines, School of
Pharmaceutical Sciences, Peking University, Beijing 100083, China)
ABSTRACT Objective: To study the constituents of the root of Asarum maximum Hemsl. Methods: The constituents were extracted and separated by various chromatographies , and the structures were identified on the basis of their chemical and physical properties and spectral analysis. Results: Five flavonoids were isolated from the ethanol extract of the roots of Asarum maximum, and their structures were identified as naringenin (Ⅰ), naringenin-5-O-β-D-glucopyranoside (Ⅱ), naringenin-5,7-di-O-β-D-glucopyranoside (Ⅲ), 4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′,4′-di-O-β-D-glucopyranoside (Ⅳ) and 4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′-O-β-D-glucopyranoside (Ⅴ). Conclusion: All of these compounds were separated for the first time from this plant and compounds Ⅱ, Ⅳ and Ⅴ from the genus Asarum.
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KEY WORDS
KEY WORDS Asarum maximum； Asarum/chem; Flavones/isol; Chalcone/isol▲
细辛为常用中药，中国药典规定细辛为马兜铃科植物北细辛Asarum heterotropoids Fr. Schmidt var. mandshuricum (Maxim.)Kitag.、汉城细辛A. sieboldii Miq.var. seoulense Nakai或华细辛A .sieboldii Miq.的干燥全草，用于风寒感冒、头痛、牙痛、风湿痹痛、痰饮哮喘等症[1]。商品调查[2]发现细辛属植物大叶马蹄香(Asarum maximum Hemsl.)在湖北等地作为细辛使用，药理实验证明其具有镇痛作用[3]，但未见有关大叶马蹄香的化学成分报道。为了阐明大叶马蹄香的有效成分，我们对其化学成分进行了研究。从中分离得到5个黄酮类化合物，分别为柚皮素(naringenin, I, 5,7,4′-三羟基二氢黄酮)，柚皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(naringenin-5-O-β-D-glucopyranoside, Ⅱ),柚皮素-5,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(naringenin-5,7-di-O-β-D-glucopyranoside, Ⅲ)，4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′,4′-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′,4′-di-O-β-D-glucopyrano-side, Ⅳ)和4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-chalcone-2′-O-β-D-glucopyranoside, Ⅴ)。这些化合物均为首次从大叶马蹄香中获得，其中化合物Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ为首次从细辛属植物中获得。
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1 仪器及药材
熔点用XT4A显微熔点测定仪测定，温度计未校正。IR光谱用Perkin-Elmer 983型红外光谱仪测定，KBr压片。NMR光谱用VXR300和VXR500型仪测定，TMS内标。MS用AEI-MS-50型质谱仪测定。柱色谱硅胶(100～200目，200～300目)和薄层色谱硅胶G，GF254，H(400目)均为青岛海洋化工厂产品；聚酰胺膜为浙江黄岩化学实验工厂产品，聚酰胺粉为江苏无锡县电化教具厂产品；Sephadex LH-20为 Pharmacia公司产品；D101型大孔吸附树脂为天津农药厂产品。薄层显色剂为90 g*L-1 H2SO4乙醇溶液，50 g*L-1磷钼酸乙醇溶液，10 g*L-1 AlCl3乙醇溶液。药材经本室蔡少青教授鉴定原植物为大叶马蹄香(Asarun maximum Hemsl.)。
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2 提取和分离
大叶马蹄香根(含根茎)粗粉经95%(体积分数)乙醇温浸4次，提取液减压浓缩后分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。药渣再经50%(体积分数)乙醇温浸4次，提取液减压浓缩后分别用乙酸乙酯和正丁醇萃取。将95%(体积分数)乙醇提取物的正丁醇部分与50%(体积分数)乙醇提取物的正丁醇部分合并，经大孔树脂处理，30%(体积分数)和50%(体积分数)的乙醇洗脱物进一步经反复硅胶柱色谱(CHCl3-MeOH梯度洗脱)，聚酰胺柱色谱(EtOH-H2O梯度洗脱)和Sephadex LH-20色谱(MeOH洗脱)，得到化合物Ⅰ(20 mg), Ⅱ ( 50 mg), Ⅲ(9 g), Ⅳ(300 mg)和Ⅴ(200 mg)。
3 结构鉴定
化合物I：无色针晶(氯仿-甲醇)，mp:246～247℃，分子式C15H12O5。盐酸-镁粉反应阳性。 1HNMR(CD3COCD3):δ2.73(1H, dd, J=17, 2.4 Hz), 3.19(1H, dd, J =17, 12.7 Hz), 5.46(1H, dd, J =12.7, 2.4 Hz)为一组偶合信号，显示此为二氢黄酮特征信号，分别为二氢黄酮母核上H-3e， H-3a, 和H-2; δ12.19(1H,S)为芳环上5位的酚羟基，δ6.90(2H, dd, J=8.5, 2.7 Hz)和δ7.4(2H, dd, J =8.5, 2.7 Hz)为B环上处于邻位相互偶合的H-3′,5′和H-2′,6′两组质子信号，所以B环为4位单取代；δ5.96(1H, d, J =2.2 Hz)和δ5.95(1H, d, J=2.2 Hz)为A环上的H-8，H-6两个质子信号，8.5(OH), 9.6(OH), 12.2(5-OH)。EI-MS显示分子离子峰为272，可推断此化合物为含有3个羟基的二氢黄酮，其取代位置分别为5, 7, 4′位。
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13CNMR(CD3COCD3):δ196.3为酮羰基碳信号，δ42.5和δ79.0为C环C-3，C-2信号，其余为芳环碳信号。根据以上数据，确定Ⅰ为柚皮素。
化合物Ⅱ：无色针晶(氯仿-甲醇)，mp: 164～166℃，分子式C21H22O10，盐酸-镁粉反应阳性。
1HNMR(DMSO-d6): 显示δ6.79(2H, d, J=8.4 Hz)和δ7.31(2H, d, J=8.4 Hz)为B环上处于邻位相互偶合的H-3′, 5′和H-2′,6′两组质子信号，所以B环为4位单取代；δ6.40(1H, d, J=2.1 Hz)和δ6.01(1H, d, J=2.1 Hz)为A环上的H-6，H-8两个质子信号。δ3.1～3.7有多个氢为糖上质子，δ5.38(1H, dd, J=13.2, 2.7 Hz)为H-2, 3.07(1H, dd, J=17.1, 13.2 Hz, 3-α-H), 2.62(1H, dd, J=17.1, 2.7 Hz, 3-β-H),δ4.6～5.2有多个质子为糖上羟基，端基质子5.1(1H, d, J=5.1 Hz, glc 1-H)。碳谱数据显示δ44.5和78.1的峰，为二氢黄酮3-C和2-C信号，Ⅱ为二氢黄酮苷，与柚皮素碳谱比较，碳谱中显示比柚皮素多1个葡萄糖的碳信号，由于苷化位移，端基碳化学位移向低场位移至δ103.4, glc-2-C向高场位移δ1.7, 其它糖上数据与β-D-glc基本一致(表1)， B环部分基本一致，C-4～10化学位移变化为-6.3,-0.1,+3.7,-1.6,+3.8,-2.9,+3.2,具有9.6(OH), 10.8(OH)信号, 5-OH信号消失。所以糖应取代在5位，故确定化合物Ⅱ为柚皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
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化合物Ⅲ：白色粉末(甲醇)，mp: 182～184℃，分子式C27H32O15，盐酸-镁粉反应阳性。IRυ(cm-1):3 392(-OH),1 636(C=O),1 202,1 081(C-O)。 1HNMR(DMSO-d6)显示δ6.79(2H, d, J=7.2 Hz)和δ7.32(2H, d, J=7.2 Hz)为B环上处于邻位相互偶合的H-3′,5′和H-2′,6′两组质子信号，所以B环为4位单取代；δ6.33(1H, s)和δ6.51(1H, s)为A环上的H-6，H-8两个质子信号。δ3.1～3.7有多个氢为糖上质子，δ4.6～5.5有多个质子为糖上羟基和端基质子。UVλMeOHmax nm, 278。碳谱数据显示δ44.6和78.5的峰，为二氢黄酮C-3，C-2信号。Ⅲ为二氢黄酮苷，与柚皮素碳谱比较，碳谱中显示比柚皮素多两个葡萄糖的碳信号，端基碳化学位移为δ99.4，102.4， B环部分基本一致，C-4～10化学位移变化为-6.2，-1.0， +4.5，-2.5，+3.2，-3.6，+4.6，说明两个葡萄糖在5, 7位取代。FAB-MS显示433[M+-glc]，271[M+-glc-glc]。与文献[4]对照，数据一致，故确定其结构为柚皮素-5, 7-O-β-D-二吡喃葡萄糖苷。
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表1 化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的碳谱数据
Table 1 13CNMR data of compounds Ⅰ, Ⅱ and Ⅲ No.
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
2
79.0
78.1
78.5
3
42.5
44.5
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44.6
4
196.3
190.0
190.1
5
164.3
164.2
163.3
6
95.9
98.8
99.4
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7
166.4
164.8
163.9
8
94.9
97.7
98.1
9
163.5
160.6
159.9
10
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102.3
105.5
106.9
1′
129.9
129.0
128.9
2′
128.1
128.2
128.4
3′
115.3
, 百拇医药
115.1
115.2
4′
157.8
157.6
157.8
5′
115.3
115.1
115.2
6′
128.1
128.2
, 百拇医药
128.4
1″
103.4
102.4
2″
73.4
73.4
3″
77.5
77.4
4″
69.7
69.9
, 百拇医药
5″
75.6
76.4
6″
60.8
60.9
1
99.4
2
73.0
3
77.1
4
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69.7
5
75.8
6
60.8
化合物Ⅳ：黄色粉末(丙酮)，mp: 124～125℃，分子式为C27H32O15，红外显示：3 378(-OH)，1 620(C=O)，1 438(Ar)。 1HNMR(DMSO-d6)显示δ7.83(1H, d, J=15.3 Hz)与7.61(1H, d, J=15.3 Hz)为反式烯氢，为α,β-H.,δ7.64(2H, d, J=8.1 Hz)与6.82(2H, d, J=8.1 Hz)为4位取代的B环上发生邻位偶合的四个氢，δ6.39和6.21处各有1个单峰的氢，为A环上间位的氢，δ5.12和4.98处各有1个氢，呈二重峰，偶合常数为7.2 Hz，为两个糖上的端基质子，且均为β构型，3.11～3.75有多个峰，为糖上的其他质子，根据以上可推测其为查耳酮的苷。FAB-MS显示：m/z 595[M-1]，433[M-glc]。可推测其苷元上有4个羟基，结合氢谱，其苷元上的羟基所接位置为4, 2′,4′,6′位。比较它与isoliquiritigenin(2′,4′,4-三羟基-查耳酮)及化合物A(4, 2′,4′,6′-四甲氧基查耳酮)的碳谱[5]，见表2，发现B环上的碳的化学位移变化较小，说明糖的取代位置不在B环，糖上碳化学位移数据说明其为两个葡萄糖，且分别接在A环上不同位置，将Ⅳ的
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13 CNMR数据与下述化合物Ⅴ苷元部分的数据比较，发现C-α，1′-C和2′-C变化较大，根据生源关系，Ⅳ可能源于化合物Ⅲ，所以另一糖在4′位成苷。所以确定化合物Ⅳ为4,2′,4′,6′-四羟基查耳酮-2′,4′-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。表2 化合物Ⅳ和Ⅴ的碳谱数据
Table 2 13CNMR data of compounds Ⅳ and Ⅴ No.
Ⅳ
A
isoliquiritigenin
Ⅴ
α
128.3
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127.1
117.8
124.2
β
143.8
143.8
143.8
142.8
C=O
192.7
193.8
191.4
192.1
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1′
107.8
112.2
113.2
105.6
2′
162.5
158.8
164.6
166.0
3′
97.7
91.0
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102.6
96.9
4′
163.9
162.4
165.4
164.5
5′
94.5
910.0
107.9
94.6
6′
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159.3
1588.0
132.3
159.8
1
125.7
127.7
125.8
126.2
2
131.1
130.0
130.6
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130.8
3
116.2
114.4
115.8
115.9
4
160.7
161.5
159.9
160.2
5
116.2
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114.4
115.8
115.9
6
131.1
130.0
130.6
130.8
1″
100.3
100.4
2″
73.6
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73.7
3″
76.6
76.7
4″
69.8
69.4
5″
77.3
77.3
6″
60.8
60.5
, 百拇医药
1
99.5
2
73.0
3
76.4
4
69.8
5
77.1
6
60.8
化合物Ⅴ：黄色粉末(丙酮)，mp: 157～159℃，分子式为C21H22O10。红外显示：3 353(-OH)，1 620(C=O),1 545，1 507(Ar)。 1HNMR(DMSO-d6)显示δ13.87(1H, s), 10.64(1H, s)，10.1(1H, s), 为3个酚羟基，δ7.98(1H, d, J=15.3 Hz)与7.62(1H, d, J=15.3 Hz)为反式烯氢，为α, β-H，δ7.65(2H, d, J=8.1 Hz)与6.82(2H, d, J=8.1 Hz)为4位取代的B环上发生邻位偶合的四个氢，δ6.17和5.97处各有1个双峰的氢，偶合常数为1.8 Hz，为A环上间位的氢，说明Ⅴ苷元为4, 2′, 4′, 6′-四羟基查耳酮。δ5.08(1H, d, J=7.2 Hz)，为糖上的端基质子，为β构型，δ3.11～3.75有多重峰，为糖上的其他质子，推测为查耳酮的苷。FAB-MS：m/z457[M+Na],435[M+H],273[M+H-glc]显示含有一个糖。碳谱上可看出：δ100.4, 73.7, 76.7, 69.4, 77.3, 60.5, 为葡萄糖残基上碳的化学位移；δ192.1为羰基碳的化学位移；δ142.8, 124.2为β、α碳的化学位移，其余为苯环上的碳，比较其与化合物A的碳的化学位移，发现1′～3′位碳的化学位移变化较大，且根据生源关系Ⅴ可能源于化合物Ⅱ, 所以糖应该接在2′位。确定化合物Ⅴ为4, 2′, 4′, 6′-四羟基查耳酮-2′-O-β-D吡喃葡萄糖苷。 参考文献
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[1]中华人民共和国卫生部药典委员会. 中华人民共和国药典[M]：一部.1995年版.广州：广东科技出版社，1995.197
[2]蔡少青，王 璇，朱 姝，等. 中药细辛商品药材的基源研究[J].中国中药杂志，1996，21(12)：712-717， 760
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收稿日期：2000-02-23, 百拇医药