变形链球菌粘附与义齿基托材表面粗糙度的关系
作者：张振庭 赵谌 袁玉姝
单位：(首都医科大学附属北京口腔医院)
关键词：义齿基托；变形链球菌；粘附
首都医科大学学报000119 摘 要：为了探讨变形链球菌(简称变链菌)粘附与义齿基托材表面粗糙度的关系，体外研究变链菌在不同粗糙度基托材试片上的粘附，并通过荧光显微镜计数观察，用方差分析法进行统计学分析。结果发现表面粗糙度高的义齿基托材表面变链菌粘附量高于粗糙度低的(P<0.05)。提示应重视提高义齿表面光洁度，以减少菌斑附着。
分类号：R783
The Relationship between the Degree of
Roughness of the Denture Surface and the
, 百拇医药
Adherence of Streptococcus mutans in Vitro
Zhang Zhenting Zhao Chen Yuan Yushu
(Beijing Stomatological Hospital, Affiliate of Capital University of Medical Sciences)
Abstract：The purpose of this study was to assess the adherentive ability of Streptococcus mutans to the various textures of base resin surface. The adherence of Streptococcus mutans to three different roughness of denture base was examined in vitro. The results indicated that the degree of roughness of denture base could affect the adherence of the bacteria. The adherence of Streptococcus mutans to higher roughness of denture base was much stronger than that of lower roughness of denture base(P<0.05). It was important to polish the denture base surface to decrease the adherence of Streptococcus.
, 百拇医药
Key words：denture base; Streptococcus mutans; adherence▲
当牙列缺损或缺失进行义齿修复后，口腔微生物的种类及数量可以发生变化[1]，一些致病菌粘附在修复体或基牙上，可致龋发生率升高或引起义齿性口炎与牙周组织病变[2]。1996年至1997年，我们对义齿基托材表面粗糙度与变形链球菌(Streptococcus mutans，以下简称变链菌)在其表面粘附的关系进行了研究，进而研究了义齿磨光情况对口腔健康的影响。
1 材料和方法
义齿基托材试片制备及分组：选用3种基托材料，按基托材和表面粗糙度不同分为5组(表1)，每组有10个试片，每个试片按30 mm×10 mm×1 mm标准制作。试片的一面采用光学镜片磨光机按试验设计的粗糙度要求，分别采用不同粒度的研磨料进行磨光。
, http://www.100md.com
表1 5组基托材的厂家及表面粗糙度 组别
基托材
粗糙度/Ra
厂家
Ⅰ
0.31±0.2
山西长治热凝
Ⅱ
1.40±0.2
山西长治热凝
Ⅲ
3.50±0.2
, 百拇医药 山西长治热凝
Ⅳ
0.31±0.2
山西长治自凝
Ⅴ
0.31±0.2
拜耳-上海热凝
变链菌的培养、粘附和计数：培养基分为固体和液体2种。固体培养基为轻唾培养基(MSB)；液体培养基(MS)是在固体培养基中去掉琼脂和染料。培养：将变链菌株接种在MSB上，在95% N2、5% CO2环境下，37 ℃培养48 h，待细菌生长后挑菌接种在MS中。在与上述条件相同的环境培养12 h后，震荡使菌液成均匀状，取出菌液2 mL，转种到200 mL MS中，在与上述培养条件相同环境中培养12 h。然后将上述培养的菌液离心，用Tris-HCl(pH 7.2)缓冲液洗涤2次，再用Tris-HCl缓冲液制备3.65×108 mL-1、OD值0.3(550 nm)的菌悬液备用。
, http://www.100md.com
变链菌的粘附：将5组试片固定于一圆形框架上，试片磨光面朝向中央，放入上述已制备好的菌悬液中搅拌，37 ℃下保持2 h，然后取出试片，用蒸馏水冲洗，2.5%戊二醛4 ℃固定30 min，1%吖啶橙染色，室温下30 min，蒸馏水冲洗试片准备计数。
计数：上述试片在Olympas荧光显微镜下(滤光片515，40×20)观察计数，每个试片取20个视野，计数每个视野下的菌体个数，对记录的数值计算其均值和标准差，并进行方差分析。2 结果和讨论
固化方法相同、同一厂家生产的基托材，其粗糙度不同时变链菌粘附量也不同。试片粗糙度高的菌粘附量明显高于粗糙度低的(P<0.05，表2)。固化方法不同、不同厂家生产的基托材，其粗糙度相同时变链菌粘附量无显著差异(表3)。
表2 不同粗糙度基托材菌粘附量对比 厂家
粗糙度/Ra
, http://www.100md.com
菌数/每视野*
山西长治热凝
0.31
398±34
山西长治热凝
1.40
445±40
山西长治热凝
3.50
503±40
*任意2组间比较均P<0.05表3 不同固化方法、不同厂家、粗糙度相同基托材的菌粘附量对比 厂家
, 百拇医药
粗糙度/Ra
菌数/每视野
拜耳-上海热凝
0.31
399±33
山西长治热凝
0.31
398±34
山西长治热凝
0.31
396±36
本实验目的是观察变链菌粘附与基托材表面粗糙度的关系。选用变链菌是因为它是主要致龋菌，且有研究证明变链菌是义齿上早期形成菌斑中的主要成分，也有研究表明变链菌与白色念珠菌在修复材料表面粘附有互补关系。
, 百拇医药
本实验选用的基托材表面粗糙度是参照对临床义齿不同部位的实测均值而确定的，为的是根据目前义齿磨光上的现状，研究基托表面粗糙度对义齿基托表面变链菌附着的情况，以求指导临床实践。本研究结果提示：基托材表面粗糙度对变链菌在其表面粘附有影响，粗糙度大的变链菌粘附量也多。因此，要减少基托材表面变链菌附着必须提高义齿表面光洁度。
由于义齿组织面不能磨光，曾有人试用在基托表面涂布无毒多糖[3]，涂布光固化高分子涂料[4]，在基托中加入抗菌剂[5]，以控制、减少细菌在基托表面的粘附，但长期效果不佳。总之如何防止组织面的菌斑附着还是一个尚待解决的问题。但义齿基托磨光面、与基牙相邻面光洁度的提高，也是一个应该重视的问题。临床应采取措施提高义齿磨光面的光洁度。 参考文献：
[1]Bemtley C D. Relationship between salivary levels of mutans streptococci and restoration longevity. Caries Res, 1990,24:298～300
, http://www.100md.com
[2]栾文民等.182名戴上颌全口义齿老年人的义齿性口炎患病情况.中华口腔医学杂志,1990,25(1):57～58
[3]Wilson M. Prevention of bacterial adhesion to denture acrylic. J Dent, 1989, 17(4):66～90
[4]Budtz-Jorgensen E. Clinical effects of glazing denture acrylic resin bases using an ultraviolet curing method. J Dent Res, 1986, 94:569～574
[5]Yamanchi M. Antibacterial actions of denture base resin on oral bacterial. Nippon Hotetsu Shika Gakkai Zasshi, 1989, 33(3):571～576
收稿日期：1999-08-27, 百拇医药
单位：(首都医科大学附属北京口腔医院)
关键词：义齿基托；变形链球菌；粘附
首都医科大学学报000119 摘 要：为了探讨变形链球菌(简称变链菌)粘附与义齿基托材表面粗糙度的关系，体外研究变链菌在不同粗糙度基托材试片上的粘附，并通过荧光显微镜计数观察，用方差分析法进行统计学分析。结果发现表面粗糙度高的义齿基托材表面变链菌粘附量高于粗糙度低的(P<0.05)。提示应重视提高义齿表面光洁度，以减少菌斑附着。
分类号：R783
The Relationship between the Degree of
Roughness of the Denture Surface and the
, 百拇医药
Adherence of Streptococcus mutans in Vitro
Zhang Zhenting Zhao Chen Yuan Yushu
(Beijing Stomatological Hospital, Affiliate of Capital University of Medical Sciences)
Abstract：The purpose of this study was to assess the adherentive ability of Streptococcus mutans to the various textures of base resin surface. The adherence of Streptococcus mutans to three different roughness of denture base was examined in vitro. The results indicated that the degree of roughness of denture base could affect the adherence of the bacteria. The adherence of Streptococcus mutans to higher roughness of denture base was much stronger than that of lower roughness of denture base(P<0.05). It was important to polish the denture base surface to decrease the adherence of Streptococcus.
, 百拇医药
Key words：denture base; Streptococcus mutans; adherence▲
当牙列缺损或缺失进行义齿修复后，口腔微生物的种类及数量可以发生变化[1]，一些致病菌粘附在修复体或基牙上，可致龋发生率升高或引起义齿性口炎与牙周组织病变[2]。1996年至1997年，我们对义齿基托材表面粗糙度与变形链球菌(Streptococcus mutans，以下简称变链菌)在其表面粘附的关系进行了研究，进而研究了义齿磨光情况对口腔健康的影响。
1 材料和方法
义齿基托材试片制备及分组：选用3种基托材料，按基托材和表面粗糙度不同分为5组(表1)，每组有10个试片，每个试片按30 mm×10 mm×1 mm标准制作。试片的一面采用光学镜片磨光机按试验设计的粗糙度要求，分别采用不同粒度的研磨料进行磨光。
, http://www.100md.com
表1 5组基托材的厂家及表面粗糙度 组别
基托材
粗糙度/Ra
厂家
Ⅰ
0.31±0.2
山西长治热凝
Ⅱ
1.40±0.2
山西长治热凝
Ⅲ
3.50±0.2
, 百拇医药 山西长治热凝
Ⅳ
0.31±0.2
山西长治自凝
Ⅴ
0.31±0.2
拜耳-上海热凝
变链菌的培养、粘附和计数：培养基分为固体和液体2种。固体培养基为轻唾培养基(MSB)；液体培养基(MS)是在固体培养基中去掉琼脂和染料。培养：将变链菌株接种在MSB上，在95% N2、5% CO2环境下，37 ℃培养48 h，待细菌生长后挑菌接种在MS中。在与上述条件相同的环境培养12 h后，震荡使菌液成均匀状，取出菌液2 mL，转种到200 mL MS中，在与上述培养条件相同环境中培养12 h。然后将上述培养的菌液离心，用Tris-HCl(pH 7.2)缓冲液洗涤2次，再用Tris-HCl缓冲液制备3.65×108 mL-1、OD值0.3(550 nm)的菌悬液备用。
, http://www.100md.com
变链菌的粘附：将5组试片固定于一圆形框架上，试片磨光面朝向中央，放入上述已制备好的菌悬液中搅拌，37 ℃下保持2 h，然后取出试片，用蒸馏水冲洗，2.5%戊二醛4 ℃固定30 min，1%吖啶橙染色，室温下30 min，蒸馏水冲洗试片准备计数。
计数：上述试片在Olympas荧光显微镜下(滤光片515，40×20)观察计数，每个试片取20个视野，计数每个视野下的菌体个数，对记录的数值计算其均值和标准差，并进行方差分析。2 结果和讨论
固化方法相同、同一厂家生产的基托材，其粗糙度不同时变链菌粘附量也不同。试片粗糙度高的菌粘附量明显高于粗糙度低的(P<0.05，表2)。固化方法不同、不同厂家生产的基托材，其粗糙度相同时变链菌粘附量无显著差异(表3)。
表2 不同粗糙度基托材菌粘附量对比 厂家
粗糙度/Ra
, http://www.100md.com
菌数/每视野*
山西长治热凝
0.31
398±34
山西长治热凝
1.40
445±40
山西长治热凝
3.50
503±40
*任意2组间比较均P<0.05表3 不同固化方法、不同厂家、粗糙度相同基托材的菌粘附量对比 厂家
, 百拇医药
粗糙度/Ra
菌数/每视野
拜耳-上海热凝
0.31
399±33
山西长治热凝
0.31
398±34
山西长治热凝
0.31
396±36
本实验目的是观察变链菌粘附与基托材表面粗糙度的关系。选用变链菌是因为它是主要致龋菌，且有研究证明变链菌是义齿上早期形成菌斑中的主要成分，也有研究表明变链菌与白色念珠菌在修复材料表面粘附有互补关系。
, 百拇医药
本实验选用的基托材表面粗糙度是参照对临床义齿不同部位的实测均值而确定的，为的是根据目前义齿磨光上的现状，研究基托表面粗糙度对义齿基托表面变链菌附着的情况，以求指导临床实践。本研究结果提示：基托材表面粗糙度对变链菌在其表面粘附有影响，粗糙度大的变链菌粘附量也多。因此，要减少基托材表面变链菌附着必须提高义齿表面光洁度。
由于义齿组织面不能磨光，曾有人试用在基托表面涂布无毒多糖[3]，涂布光固化高分子涂料[4]，在基托中加入抗菌剂[5]，以控制、减少细菌在基托表面的粘附，但长期效果不佳。总之如何防止组织面的菌斑附着还是一个尚待解决的问题。但义齿基托磨光面、与基牙相邻面光洁度的提高，也是一个应该重视的问题。临床应采取措施提高义齿磨光面的光洁度。 参考文献：
[1]Bemtley C D. Relationship between salivary levels of mutans streptococci and restoration longevity. Caries Res, 1990,24:298～300
, http://www.100md.com
[2]栾文民等.182名戴上颌全口义齿老年人的义齿性口炎患病情况.中华口腔医学杂志,1990,25(1):57～58
[3]Wilson M. Prevention of bacterial adhesion to denture acrylic. J Dent, 1989, 17(4):66～90
[4]Budtz-Jorgensen E. Clinical effects of glazing denture acrylic resin bases using an ultraviolet curing method. J Dent Res, 1986, 94:569～574
[5]Yamanchi M. Antibacterial actions of denture base resin on oral bacterial. Nippon Hotetsu Shika Gakkai Zasshi, 1989, 33(3):571～576
收稿日期：1999-08-27, 百拇医药