阿尔茨海默病患者脑脊液中Fas抗原含量的变化
作者：刘孟渊 王达平 郭阳波 刘广南 刘惠纯 郑朝盾 陆泳
单位：刘孟渊(广东省广州市中医中药研究所 510130)；王达平(广东省广州市中医中药研究所 510130)；郭阳波(广东省广州市精神病院 510370)；刘广南(广东省广州市精神病院 510370)；刘惠纯(广东省广州市中医中药研究所 510130)；郑朝盾(广东省广州市精神病院 510370)；陆泳(广东省广州市精神病院 510370)
关键词：Alzheimer病；痴呆；Fas抗原
广东医学000110
【摘要】 目的 探讨Alzheimer病(AD)患者脑脊液(CSF)中细胞凋亡因子Fas抗原含量变化的临床意义。方法 采用ELISA方法测定了27例AD、12例多发梗死性痴呆(MID)和对照组17例患者CSF Fas抗原含量。结果 患者CSF中Fas抗原含量为AD组(11.119±3.095) ng/ml，稍低于MID组的(12.660±7.893) ng/ml及对照组的(13.270±8.491) ng/ml，但三组间Fas含量的差异无统计学意义(P>0.05)；AD组中不同年龄段或不同痴呆程度患者的CSF Fas抗原水平的差异均无显著性(均为P>0.05)。结论 CSF中Fas抗原含量的变化对AD的诊断及鉴别诊断似无重要意义。
, 百拇医药
A study of changes of fas antigen in cerebrospinal fluid of patients with Alzheimer's disease
Liu Mengyuan Wang Daping Guo Yangbo et al
( Guangzhou Institute of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510130)
【Abstract】 Objective To determine Fas antigen concentration in the cerebrospinal fluid (CSF) of patients with Alzheimer's disease (AD) and evaluate its clinical significance.Methods ELISA was used to measure Fas antigen in CSF of 27 patients with AD, 12 patients with multi-infarct dementia (MID) and 18 controls with other diseases of central nerve system.Results CSF Fas antigen concentration was slightly decreased in AD when compared with MID and controls, with no statistical significance. Further more, there was no significant difference among the CSF Fas antigen concentration in different age or dementia severity subgroup of AD patients (P>0.05).Conclusion CSF Fas antigen concentration may be of no important significance in the diagnosis of AD.
, 百拇医药
【Key words】 Alzheimer's disease Dementia Fas antigen
Fas/Apo-1，又称CD95分子，属肿瘤坏死因子(TNF)/神经生长因子(NGF)家族成员，是一种细胞生长因子，Fas的三聚体具有传导死亡信号、诱导凋亡的能力，因此Fas又称死亡分子[1]。研究表明Fas介导的细胞凋亡参与了阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)的发病过程，与AD脑内神经细胞的丢失密切相关[3～4]。为探讨CSF Fas分子在AD生前诊断中是否有意义，我们测定了28例AD、12例多发梗死性痴呆(MID)和17例其他神经系统疾病患者脑脊液(CSF)中Fas抗原的含量，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 所检测的57例病例均为广州市精神病院住院患者。根据CCMD-Ⅱ-R所规定的诊断标准、简易精神状态量表(MMSE)评分、临床病史、神经系统检查、Hachinski缺血指数、颅脑CT和实验室检查，分为AD组、MID组及其他精神系统疾病对照组。其中AD组：28例，男9例、女19例；年龄61～88岁，平均(71.96±6.65)岁；病程0.5 a以上，大多起病缓慢，认知能力障碍先于其他神经系统症状出现，排除其他疾病所致痴呆，Hachinski缺血指数量表得分<4，CT可有大脑萎缩表现。MID组：12例，男9例、女3例；年龄63～81岁，平均(68.75±5.48)岁。曾有卒中发作病史和神经系统症状和体征，呈急性或亚急性起病，病情呈阶梯式进行性过程，Hachinski缺血指数量表记分≥7，CT证实脑内有多发性梗死灶。其他精神系统疾病对照组：17例，男8例、女9例；年龄61～89岁，平均(68.94±7.90)岁。其中包括精神分裂症9例，酒精中毒性痴呆2例，慢性酒中毒1例，脑外伤后痴呆1例，癫痫合并智力障碍1例，练气功致精神障碍1例，抑郁症2例。三组年龄间差异、AD组和对照组及MID组和对照组间性别差异均无显著性。
, 百拇医药
1.2 脑脊液的收集、处理和贮存 均于上午9：00～11：00在安静状态下按常规行腰穿取脑脊液2～3 ml，经离心(3 500 r/min，15 min)后，取上清，分装，置-40℃待测。
1.3 Fas抗原含量的检测 用夹心式酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测，试剂盒购自晶美生物工程有限公司。
1.4 统计学处理 采用F检验或F′检验。
2 结果
2.1 三组病例及AD组各年龄段脑脊液Fas抗原含量的变化 AD组患者CSF Fas抗原含量与MID组及对照组比较有降低的趋势，但三组间差异无显著性(F′＝0.656，P>0.05)；各年龄段的CSF Fas抗原含量差异无显著性(F＝1.881，P>0.05)。见表1。
表1 三组病例及AD组各年龄段CSF Fas抗原含量 (
±s)，ng/ml 组别
, 百拇医药
Fas抗原含量
年龄段(岁)
Fas抗原含量
AD(n=28)
11.119±3.095
60～69(n＝11)
10.898±3.669
MID(n=12)
12.660±7.893
～79(n＝12)
10.363±2.417
, 百拇医药 对照(n=17)
13.270±8.491
>80(n＝4)
13.418±2.545
2.2 痴呆程度轻重不同的AD患者CSF Fas抗原含量比较 轻(n=5)、中(n=8)、重(n=14)不同痴呆程度的AD患者CSF Fas抗原含量分别为10.946±3.224，10.039±3.379，11.208±2.418 ng/ml，三者间差异无显著性(F＝0.444，P>0.05)。3 讨论
在正常情况下，Fas抗原广泛分布于多种类型的细胞，包括胸腺细胞、外周活化T、B淋巴细胞、NK细胞、单核细胞、成纤维细胞、造血系细胞、内皮细胞及多种上皮细胞[6]。研究表明Fas介导凋亡的机制是通过与之相适应的配体(Fas L)结合后，启动靶细胞的Fas死亡信号，并传递至细胞核内，调节基因转录而诱导靶细胞凋亡，Fas介导的凋亡主要负责那些发生快速变化的细胞群体的扩张及限制性，参与免疫应答的调节和细胞生理代谢，是机体正常内源性平衡机制的一部分，并在其中起负调控效应，是一种较早的间接反应细胞凋亡的信号[5，6]。Leithauseer等[7]发现在神经组织中Fas抗原通常仅在自主神经节的卫星细胞上表达，在正常脑实质中是缺乏Fas抗原的。Nishimura等[8]在AD尸解脑中见到β-淀粉样物质沉积的老年斑及其周围有许多Fas阳性细胞，它们主要是星形神经细胞，提示Fas抗原介导星形神经细胞凋亡。Matsuyama等[9]在完全性脑缺血模型鼠中发现大脑皮质神经元表达大量Fas-mRNA，并通过Fas抗原介导细胞凋亡。钱采韵等[5]发现在尸解AD脑内有较多的Fas抗原阳性细胞，其中主要是神经元，少数为星形胶质细胞，Fas抗原不仅在新皮层、海马神经细胞上高度表达，而且在脑的其它部位如杏仁核、小脑、嗅球等处也有少量表达，但Fas在非痴呆老人尸解脑内几乎无阳性表达(除生理性外。这些研究结果提示Fas分子介导的细胞凋亡机制可能参与了AD脑内神经细胞的丢失[5]。
, 百拇医药
Fas主要以膜受体形式存在，还通过转录水平的不同拼接产生可溶性Fas分子，可能在细胞凋亡中起调节作用[1]。为探讨可溶性Fas分子在CSF中的水平及其对于AD生前诊断的意义，本文用ELISA方法检测AD患者CSF中Fas抗原含量，结果较MID组和其他神经系统疾病对照组有降低趋势，但三组间Fas含量的差异无统计学意义，此外，不同年龄段或不同痴呆程度的AD患者的CSF中Fas抗原含量的差异均为无显著性，提示虽然AD患者脑中神经细胞Fas抗原的表达与非痴呆患者有明显的强弱不同，但其CSF中可溶性Fas分子的水平没有明显的差别。这可能因为Fas抗原主要以膜受体形式存在，膜受体形式是其主要的生物学活性形式，可溶性Fas分子仅系其存在的辅助形式，或仅有少量的Fas抗原以可溶性分子的形式存在。这种可溶性Fas分子在细胞凋亡的调节中如何发挥作用?目前尚未明了。因此，即使在AD患者与非AD患者脑中神经细胞上Fas抗原表达有明显不同，亦不足以反映于CSF中Fas含量的变化上。本文的研究结果显示CSF中Fas含量的测定不宜作为AD生前诊断的指标。
, 百拇医药
参考文献
1，Nagata S, Golstein P. The Fas death factor. Science, 1995, 267(5203):1449
2，Lassmann H, Bancher C, Breitschopf H, et al. Cell death in Alzheimer's disease evaluated by DNA fragmentation. Acta Neuropathol Berl, 1995, 89(1):35
3，Smale G, Nichols NR, Brady DR, et al. Evidence for apoptotic cell death in Alzheimer's disease. Exp Neurol, 1995, 133(2):225
4，李卫平，刘晓加，林宏川，等.老年期痴呆患者脑内细胞凋亡现象的研究.中华神经科杂志，1996，29(6)：340
, 百拇医药
5，钱采韵，周伯荣，胡昔权，等.Fas抗原与阿尔茨海默病神经细胞凋亡的研究.中国神经精神疾病杂志，1999，25(1)：10
6，朱锡华.Fas系统研究进展.中华微生物学和免疫学杂志，1996，16(2)：77
7，Leithauser F, Dhein J, Mechtersheimer G, et al. Constitutive and induced ex-pression of Apo-1, a new member of the nerve growth factor/tumor necrosis factor receptor superfamily in normal and neoplastic cells. Invest, 1993, 69(2):415
8，Nishimura T, Akiyama H, Yonehara S, et al. Fas antigen expression in brain of patients with Alzheimer type dementia. Brain Res, 1994, 695(1):137
9，Matsuyama T, Ryuji H, Yamamoto Y, et al. Location of Fas antigen mRNA induced in Postischemic murine forebrain by in situ hypbrization. Brain Res Mol Brein Res, 1995, 34(1):166
(收稿日期：1999-06-16), 百拇医药
单位：刘孟渊(广东省广州市中医中药研究所 510130)；王达平(广东省广州市中医中药研究所 510130)；郭阳波(广东省广州市精神病院 510370)；刘广南(广东省广州市精神病院 510370)；刘惠纯(广东省广州市中医中药研究所 510130)；郑朝盾(广东省广州市精神病院 510370)；陆泳(广东省广州市精神病院 510370)
关键词：Alzheimer病；痴呆；Fas抗原
广东医学000110
【摘要】 目的 探讨Alzheimer病(AD)患者脑脊液(CSF)中细胞凋亡因子Fas抗原含量变化的临床意义。方法 采用ELISA方法测定了27例AD、12例多发梗死性痴呆(MID)和对照组17例患者CSF Fas抗原含量。结果 患者CSF中Fas抗原含量为AD组(11.119±3.095) ng/ml，稍低于MID组的(12.660±7.893) ng/ml及对照组的(13.270±8.491) ng/ml，但三组间Fas含量的差异无统计学意义(P>0.05)；AD组中不同年龄段或不同痴呆程度患者的CSF Fas抗原水平的差异均无显著性(均为P>0.05)。结论 CSF中Fas抗原含量的变化对AD的诊断及鉴别诊断似无重要意义。
, 百拇医药
A study of changes of fas antigen in cerebrospinal fluid of patients with Alzheimer's disease
Liu Mengyuan Wang Daping Guo Yangbo et al
( Guangzhou Institute of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510130)
【Abstract】 Objective To determine Fas antigen concentration in the cerebrospinal fluid (CSF) of patients with Alzheimer's disease (AD) and evaluate its clinical significance.Methods ELISA was used to measure Fas antigen in CSF of 27 patients with AD, 12 patients with multi-infarct dementia (MID) and 18 controls with other diseases of central nerve system.Results CSF Fas antigen concentration was slightly decreased in AD when compared with MID and controls, with no statistical significance. Further more, there was no significant difference among the CSF Fas antigen concentration in different age or dementia severity subgroup of AD patients (P>0.05).Conclusion CSF Fas antigen concentration may be of no important significance in the diagnosis of AD.
, 百拇医药
【Key words】 Alzheimer's disease Dementia Fas antigen
Fas/Apo-1，又称CD95分子，属肿瘤坏死因子(TNF)/神经生长因子(NGF)家族成员，是一种细胞生长因子，Fas的三聚体具有传导死亡信号、诱导凋亡的能力，因此Fas又称死亡分子[1]。研究表明Fas介导的细胞凋亡参与了阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)的发病过程，与AD脑内神经细胞的丢失密切相关[3～4]。为探讨CSF Fas分子在AD生前诊断中是否有意义，我们测定了28例AD、12例多发梗死性痴呆(MID)和17例其他神经系统疾病患者脑脊液(CSF)中Fas抗原的含量，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 所检测的57例病例均为广州市精神病院住院患者。根据CCMD-Ⅱ-R所规定的诊断标准、简易精神状态量表(MMSE)评分、临床病史、神经系统检查、Hachinski缺血指数、颅脑CT和实验室检查，分为AD组、MID组及其他精神系统疾病对照组。其中AD组：28例，男9例、女19例；年龄61～88岁，平均(71.96±6.65)岁；病程0.5 a以上，大多起病缓慢，认知能力障碍先于其他神经系统症状出现，排除其他疾病所致痴呆，Hachinski缺血指数量表得分<4，CT可有大脑萎缩表现。MID组：12例，男9例、女3例；年龄63～81岁，平均(68.75±5.48)岁。曾有卒中发作病史和神经系统症状和体征，呈急性或亚急性起病，病情呈阶梯式进行性过程，Hachinski缺血指数量表记分≥7，CT证实脑内有多发性梗死灶。其他精神系统疾病对照组：17例，男8例、女9例；年龄61～89岁，平均(68.94±7.90)岁。其中包括精神分裂症9例，酒精中毒性痴呆2例，慢性酒中毒1例，脑外伤后痴呆1例，癫痫合并智力障碍1例，练气功致精神障碍1例，抑郁症2例。三组年龄间差异、AD组和对照组及MID组和对照组间性别差异均无显著性。
, 百拇医药
1.2 脑脊液的收集、处理和贮存 均于上午9：00～11：00在安静状态下按常规行腰穿取脑脊液2～3 ml，经离心(3 500 r/min，15 min)后，取上清，分装，置-40℃待测。
1.3 Fas抗原含量的检测 用夹心式酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测，试剂盒购自晶美生物工程有限公司。
1.4 统计学处理 采用F检验或F′检验。
2 结果
2.1 三组病例及AD组各年龄段脑脊液Fas抗原含量的变化 AD组患者CSF Fas抗原含量与MID组及对照组比较有降低的趋势，但三组间差异无显著性(F′＝0.656，P>0.05)；各年龄段的CSF Fas抗原含量差异无显著性(F＝1.881，P>0.05)。见表1。
表1 三组病例及AD组各年龄段CSF Fas抗原含量 (
±s)，ng/ml 组别, 百拇医药
Fas抗原含量
年龄段(岁)
Fas抗原含量
AD(n=28)
11.119±3.095
60～69(n＝11)
10.898±3.669
MID(n=12)
12.660±7.893
～79(n＝12)
10.363±2.417
, 百拇医药 对照(n=17)
13.270±8.491
>80(n＝4)
13.418±2.545
2.2 痴呆程度轻重不同的AD患者CSF Fas抗原含量比较 轻(n=5)、中(n=8)、重(n=14)不同痴呆程度的AD患者CSF Fas抗原含量分别为10.946±3.224，10.039±3.379，11.208±2.418 ng/ml，三者间差异无显著性(F＝0.444，P>0.05)。3 讨论
在正常情况下，Fas抗原广泛分布于多种类型的细胞，包括胸腺细胞、外周活化T、B淋巴细胞、NK细胞、单核细胞、成纤维细胞、造血系细胞、内皮细胞及多种上皮细胞[6]。研究表明Fas介导凋亡的机制是通过与之相适应的配体(Fas L)结合后，启动靶细胞的Fas死亡信号，并传递至细胞核内，调节基因转录而诱导靶细胞凋亡，Fas介导的凋亡主要负责那些发生快速变化的细胞群体的扩张及限制性，参与免疫应答的调节和细胞生理代谢，是机体正常内源性平衡机制的一部分，并在其中起负调控效应，是一种较早的间接反应细胞凋亡的信号[5，6]。Leithauseer等[7]发现在神经组织中Fas抗原通常仅在自主神经节的卫星细胞上表达，在正常脑实质中是缺乏Fas抗原的。Nishimura等[8]在AD尸解脑中见到β-淀粉样物质沉积的老年斑及其周围有许多Fas阳性细胞，它们主要是星形神经细胞，提示Fas抗原介导星形神经细胞凋亡。Matsuyama等[9]在完全性脑缺血模型鼠中发现大脑皮质神经元表达大量Fas-mRNA，并通过Fas抗原介导细胞凋亡。钱采韵等[5]发现在尸解AD脑内有较多的Fas抗原阳性细胞，其中主要是神经元，少数为星形胶质细胞，Fas抗原不仅在新皮层、海马神经细胞上高度表达，而且在脑的其它部位如杏仁核、小脑、嗅球等处也有少量表达，但Fas在非痴呆老人尸解脑内几乎无阳性表达(除生理性外。这些研究结果提示Fas分子介导的细胞凋亡机制可能参与了AD脑内神经细胞的丢失[5]。
, 百拇医药
Fas主要以膜受体形式存在，还通过转录水平的不同拼接产生可溶性Fas分子，可能在细胞凋亡中起调节作用[1]。为探讨可溶性Fas分子在CSF中的水平及其对于AD生前诊断的意义，本文用ELISA方法检测AD患者CSF中Fas抗原含量，结果较MID组和其他神经系统疾病对照组有降低趋势，但三组间Fas含量的差异无统计学意义，此外，不同年龄段或不同痴呆程度的AD患者的CSF中Fas抗原含量的差异均为无显著性，提示虽然AD患者脑中神经细胞Fas抗原的表达与非痴呆患者有明显的强弱不同，但其CSF中可溶性Fas分子的水平没有明显的差别。这可能因为Fas抗原主要以膜受体形式存在，膜受体形式是其主要的生物学活性形式，可溶性Fas分子仅系其存在的辅助形式，或仅有少量的Fas抗原以可溶性分子的形式存在。这种可溶性Fas分子在细胞凋亡的调节中如何发挥作用?目前尚未明了。因此，即使在AD患者与非AD患者脑中神经细胞上Fas抗原表达有明显不同，亦不足以反映于CSF中Fas含量的变化上。本文的研究结果显示CSF中Fas含量的测定不宜作为AD生前诊断的指标。
, 百拇医药
参考文献
1，Nagata S, Golstein P. The Fas death factor. Science, 1995, 267(5203):1449
2，Lassmann H, Bancher C, Breitschopf H, et al. Cell death in Alzheimer's disease evaluated by DNA fragmentation. Acta Neuropathol Berl, 1995, 89(1):35
3，Smale G, Nichols NR, Brady DR, et al. Evidence for apoptotic cell death in Alzheimer's disease. Exp Neurol, 1995, 133(2):225
4，李卫平，刘晓加，林宏川，等.老年期痴呆患者脑内细胞凋亡现象的研究.中华神经科杂志，1996，29(6)：340
, 百拇医药
5，钱采韵，周伯荣，胡昔权，等.Fas抗原与阿尔茨海默病神经细胞凋亡的研究.中国神经精神疾病杂志，1999，25(1)：10
6，朱锡华.Fas系统研究进展.中华微生物学和免疫学杂志，1996，16(2)：77
7，Leithauser F, Dhein J, Mechtersheimer G, et al. Constitutive and induced ex-pression of Apo-1, a new member of the nerve growth factor/tumor necrosis factor receptor superfamily in normal and neoplastic cells. Invest, 1993, 69(2):415
8，Nishimura T, Akiyama H, Yonehara S, et al. Fas antigen expression in brain of patients with Alzheimer type dementia. Brain Res, 1994, 695(1):137
9，Matsuyama T, Ryuji H, Yamamoto Y, et al. Location of Fas antigen mRNA induced in Postischemic murine forebrain by in situ hypbrization. Brain Res Mol Brein Res, 1995, 34(1):166
(收稿日期：1999-06-16), 百拇医药