人工授精临床应用相关因素分析
作者：陈奕权 王建新 华庆和 周瑞祥 王世鄂 林 静 高学勇 何为民
单位：福建医科大学组织胚胎学教研室,福建省生殖医学中心(福州 350004)
关键词：人工授精；宫颈情况；性别比率
福建医科大学学报990416
目的 探讨对供者人工授精(AID)治疗效果产生影响的因素。 方法 收集人工授精成功的男性不育症夫妇123对。治疗前按不同授精形式分为冻精组、鲜精组和混合组，施行供者人工授精。B超监测卵泡发育，记录宫颈积分及AID后24 h宫颈粘液内精子存活情况。 结果 123次AID妊娠共出生婴儿126个，其中双胎妊娠3次，男婴68个，女婴58个，经统计处理，与自然出生婴儿性别比例没有显著区别。三组之间婴儿性别比例不存在差异。混合组的AID成功平均周期为2.52，明显长于冻精组和鲜精组的1.95和1.65(P<0.01)。 结论 AID成功妊娠所需的授精周期，冻精组与鲜精组之间没有显著差异。三种AID形式出生的婴儿性别比例没无明显不同。
, 百拇医药
Artificial Insemination and its Relative Factors
Chen Yiquan, Wang Jianxin, Hua Qinghe, et al
(Department of Histology and Embryology, Fujian Medical University,Fujian Province Reproductive Medicine Center, Fuzhou, 350004)
Objective To analyze the clinical effect of artificial insemination and it's relative conditions. Methods 123 sterile couples resulted pregnancy with artificial insemination with the donor(AID) were collected in this study. Before AID treatment, they were divided randomly into three groups:cryopreservation semen group, mixed semen group and fresh semen group. Follicles were detected with B-ultrasonic. Cervical circumstances and sperm viability in the cervical mucus were observed 24 hrs after AID. Sex of new born was investigated. Results 126 babies were born in 123 times of AID pregnancy and 3 twins occurred. Among them there were 69 males and 57 females. The difference of sex ratio between nature pregnancy and this study is unremarkable. Mean cycle of resulted pregnancy in mixed group is 2.52±1.30. It's significantly longer than the frozen semen group(2.12±1.57) and fresh semen group(1.76±1.20,P<0.05). The cervical circumstance and sperm viability in cervical mucus 24 h after AID have no significant relation with sex ratio of babies. Conclusion The sex ratio of born AID babies among frozen semen group,mixed semen group and fresh semen group has no difference.2.52 cycles of resulted pregnancy in mixed group is obviously longer than other groups.
, 百拇医药
Key words artificial insemination; cervical circumstance; sex ratio
人类生殖辅助技术包括精子冻存、人工授精、体外授精-胚胎移植、胚胎冻存-胚胎捐赠、显微授精以及生殖激素的应用等方面，然而精子库技术和人工授精仍然是最常用和基本的方法，特别是对男性不育的夫妇，为了家庭的幸福及得到生育子女的机会，给予施行供者人工授精(AID)是必要的。精子数量质量、人工授精的形式、授精时间等均影响AID的治疗效果。为了进一步提高治疗效果，笔者对三种形式AID的治疗效果及相关因素作分析研究。
1 材料与方法
1.1 病例的选择
选择男性因素所致不孕夫妇，包括无精子症、小睾症、精子数少、精子活力欠佳，或因性功能障碍及行丈夫精液人工授精(AIH)治疗无效者。女方年龄在24～35岁，有正常月经周期，输卵管通畅，经检验排除严重免疫因素，即抗精抗体阳性，抗子宫内膜抗体阳性，泌乳素(PRL)过高，解脲支原体或沙眼衣原体感染等。B型超声波定期监测卵泡发育；当卵泡发育至18 mm×18 mm时，结合宫颈情况，积分(按Insler评分法)达到10分时，连续给予人工授精，直至B超检查证实已排卵为止，通常每天宫颈管注入同一人或非同一人精液一次，连续2～4天。
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1.2 人工授精的方式
1.2.1 冻存复温精子组 合格供精者禁欲5～7天，手式取精，精子密度(60×106/ml，液化时间<20 min，活动率>60%，畸形率<15%，活力Ⅲ级以上精子>50%，pH 7.2～7.4。采用Harrison配方改良法(即枸橼酸三钠3.2 g,果糖2.2 g,甘油28 ml及蛋黄的混合液),以0.5∶1与液化后的精液混合,甘油的最终浓度为5%左右。混合液置室温25 min以充分甘油化。继之分装入安瓿并封口，程序降温入液氮保存。临用时取出快速升温复苏,计算精子存活率，合格者用于AID，每次注入1.5 ml。每隔24 h取宫颈粘液于高倍镜下检查精子存活情况：“0分”表示未见活精子，“1分”偶见精子，“2分”活精子少见(2～5个/HP)，“3分”活精子多见(6～10个/HP)，“4分”非常多见，以宫颈粘液内存活最多精子的一次作统计。
1.2.2 新鲜精子组 每次把液化后合格的新鲜精液1.0 ml注入宫颈管，每天一次，直至B超排卵日止。
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1.2.3 混合精液组 在AID过程中随机使用冻存精液和新鲜精液，每个周期内至少使用一次冻存精液和一次新鲜精液。
1.3 分组及随访
适合行AID的病例选择一种AID方式治疗，以信访或电话随访，以回复表格作分组登记统计,包括婴儿出生日期、性别、健康情况等。将妊娠成功并分娩婴儿的病例分成三组：即冻精组、鲜精组和混合精液组。对AID治疗成功并已分娩的病例进行调查，获得123对夫妇回复，其中冻精组41例，鲜精组38例，混合精液组44例。结合病史记载、化验结果及AID过程中的宫颈情况和精液质量等因素，采用SPSS统计软件进行χ2分析。
2 结 果
2.1 不同授精形式与胎儿出生性别(表1)
表1 不同授精形式与胎儿出生性别 供精方法
, 百拇医药
婴儿性别
男
女
冻精组
20
21
鲜精组
23
17
混合组
25
20
合计
68
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58
总共出生126人，其中双胎3人，死产1人次，男女婴儿出生比例差异没有统计学意义(P>0.05)。冻精组出生男女婴儿比例为20∶21，鲜精组为23∶17，混合组为25∶20。三组间男女出生比例差异没有显著性(P>0.05)。
2.2 不同授精形式成功妊娠的平均周期(表2)表2 不同授精形式成功妊娠的平均周期 供精方法
成功周期
平均周期
1
2
3
4
5
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6
冻精组
22
6
7
1
2
3
2.12±1.57*
鲜精组
23
7
5
, http://www.100md.com
0
3
0
1.76±1.20*
混合组
12
12
9
7
4
0
2.52±1.30
*：与混合组相比，P<0.05(下同).
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2.3 不同授精形式成功妊娠周期输精次数(表3)
表3 不同授精形式成功妊娠周期输精次数 供精方法
成功周期输入精液次数
1
2
3
4
5
冻精组
3
10
20
, http://www.100md.com 6
2
鲜精组
6
14
15
1
2*
混合组
1
15
17
10
1
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成功周期输入精液次数指AID 取得妊娠成功的该周期所输入精液次数。经统计学处理，冻精组与鲜精组、冻精组与混合组之间差异无显著性，而混合组与新鲜组差异存在显著性(P<0.05)。
2.4 不同授精形式宫颈粘液精子存活情况(表4)
表4 不同授精形式宫颈粘液精子存活情况 供精方法
输精后24 h精子存活积分
0
1
2
3
4
冻精组
, 百拇医药
1
2
7
13
16
鲜精组
1
1
8
14
10
混合组
0
0
, 百拇医药
13
16
19
在不同方式AID过程中，每24 h宫颈粘液内精子存活情况积分，3组间差异无显著性。
2.5 胎儿性别与授精后宫颈粘液精子存活关系(表5)
表5 胎儿性别与授精后宫颈粘液精子存活关系 性别
n
24 h精子存活积分
0
1
2
, http://www.100md.com
3
4
男
62
3
3
11
23
22
女
55
5
0
19
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19
12
AID出生婴儿性别与授精24 h后宫颈粘液内精子存活积分的相关性，男婴授精时3～4分者占45/62，而女婴授精时2～3分者占38/55。经统计分析，男女婴儿与宫颈精子存活积分之间差异无显著性(P>0.05)。
3 讨 论
人工授精包括供者精液授精(AID)和配偶的人工授精(AIH)，对男性无精症、少精症或弱精症等不育症患者配偶施行AID已有数百年历史，但采用供者精液超低温冷冻保存并适时复苏应用的技术是1949年Polge[1]首创，此后低温生物学和本技术获得迅速发展，人类精子库在许多国家建立，在优生优育原则下开展人工授精并获得良好社会效益。然而人精子的超低温冻存技术较复杂，涉及冷冻保护液的组分、各个温度段的降温程序、复温过程等因素，因此冻存后的精子存活率、活动力、形态结构等效果及妊娠率的报道各不相同。本中心人类精子库的精子复苏率达72%，AID妊娠成功率48.2%(以6个治疗周期统计),每次成功妊娠的平均治疗周期为1.84[2]。但妊娠成功因素除了与精子冻存技术有关外，与授精的适时、次数、卵子质量、宫颈情况、内分泌因素等相关。本研究就不同方式人工授精对临床治疗效果的影响作多因素分析。
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3.1 冻精AID成功率
有报道，新鲜精液人工授精的成功率为71%，成功周期数为1.3[3]；黄泽宇[4]报道AID成功率为64%，与冻精AID相比，成功率相近或略低。然而1990年美国生育协会报道冻精AID的妊娠率明显低于新鲜精液[5]。Byrd[6]用冷冻精液(AID)作宫内授精，发现冻精效果较新鲜精液效果差。其原因一般认为与冷冻后精子的存活率和活动力降低有关[7]，也可能与冷冻复苏后膜流动性降低有关[8]。笔者研究三种不同授精方式成功妊娠所需的授精周期结果，说明混合式AID成功妊娠所需的周期明显多于其他两组，原因尚待进一步研究，而冻精组与新鲜精液组的效果相近似。
3.2 AID出生婴儿性别比例
AID与出生婴儿性别比例关系，虽然有人认为冻精AID出生的婴儿中男婴多于女婴，而新鲜精液AID出生的婴儿，女婴多于男婴。这些看法大都出自印象，并没有充分的统计资料报道。James[9]认为诱导排卵用药出生的婴儿性别比例倾向女性优势。人工授精对性别影响的分析比较困难，影响受精孕育因素复杂，例如精液来源，冻精或非冻精，以及不同的授精形式、授精时间与排卵时间的关系等，因而缺乏正确和规范的统计分析。也有人报道用供者鲜精或自家精液人工授精出生的婴儿男性多于女性(7%～10%)。Shettles[9]认为采用排卵中期性交同时调节使生殖道偏碱性出生的男婴远多于女婴，而远离排卵期性交，出生的女婴远多于男婴。现在多数人认为掌握与排卵相关时间性交来选择胎儿性别是没有充分根据的。本研究AID过程中B超监控排卵时间，分别采用鲜精或冻精授精，于排卵前、排卵日、排卵后连续3天进行，所有病人的授精时间类似，均能保证在排卵中期授精，虽然直接统计总体AID出生婴儿男性多于女性，但经统计学处理(P>0.05)，说明AID妊娠与自然妊娠出生婴儿的性别比例，以及各实验组出生婴儿的性别比例差异均无显著性。
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3.3 AID平均成功妊娠周期数
不同形式AID的平均成功妊娠周期数存在着一定差异，主要存于混合组与其他两组之间，这可能一方面与精子结构和机能状态有关，另一方面与女性生殖道,特别是宫颈微环境有关，本研究测定AID 24 h后宫颈粘液内精子存活积分，表明三组精子存活程度差异没有显著性。良好的冻存技术使精子结构保存完好，在宫颈粘液内存活时间未受明显影响。宫颈精子存活积分与出生婴儿性别比例关系，统计中男婴较多分布在3和4分(45/62)，女婴多分布在2和3分(38/55)，但统计处理说明，积分与婴儿性别比例没有相关性。
3.4 AID成功周期与输入精液次数
不同形式AID成功周期输入精液次数，混合组与鲜精组之间存在着显著差异，说明混合AID成功妊娠所需的输入精液次数明显多于新鲜AID组；各组妊娠成功周期宫颈内精子存活情况，组间差异均无显著性，与乃东红[10]报道的新鲜精液授精24 h后的存活精子高于冻融精子组不一致。其原因有待进一步研究。此外，笔者认为一个AID治疗周期中采用非同一供精者精子不存在着杂交、重复受精或其他社会伦理道德问题，因为每个卵子只容许单个精子受精。
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参考文献
1 Sherman JK. Synopsis of the use of frozen human semen.since,1964: state of the art of human semen banking. Fertil Steril, 1973;24:397
2 陈奕权, 王建新，华庆和. 人类精子超低温冻存技术和临床应用研究. 福建医学院学报, 1991;25:1
3 Chong AP,Taymor MI. Sixteen year experience with therapeutic donor insemination. Fertil Steril, 1975;26:791
4 黄泽宇, 刘德惠. 75例人工授精临床小结. 生殖与避孕, 1987;7(3):69
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5 AFS.New guidelines for the use of semen donor insemination:1990. Fertil Steril, 1990;53(3 Suppl):1
6 Byrd W,Edman C. A prospective randomized study of pregnancy rates following intrauterine and intracervical insemination using frozen donor sperm. Fertil Steril, 1990;53:521
7 李运星，马天根，唐 慧. 精子保存于HT卵黄缓冲液后对SPA、存活率及活动度的影响. 男性学杂志， 1996；10:5
8 曾 星. 正常人精子和冷贮后精子的膜动性及乙烯雌酚对其影响. 同济医科大学学报，1994；25:395
9 Benjamin E,Reubinoff MD. New advances in sex. Preselec Fertil Steril，1996；66：343
10 乃东红. 人工授精术后精子在宫颈的存在状况研究(附55例月经周期对比分析). 广西医学， 1996；14:338
(收稿：1999-05-28 修回：1999-11-08), 百拇医药
单位：福建医科大学组织胚胎学教研室,福建省生殖医学中心(福州 350004)
关键词：人工授精；宫颈情况；性别比率
福建医科大学学报990416
目的 探讨对供者人工授精(AID)治疗效果产生影响的因素。 方法 收集人工授精成功的男性不育症夫妇123对。治疗前按不同授精形式分为冻精组、鲜精组和混合组，施行供者人工授精。B超监测卵泡发育，记录宫颈积分及AID后24 h宫颈粘液内精子存活情况。 结果 123次AID妊娠共出生婴儿126个，其中双胎妊娠3次，男婴68个，女婴58个，经统计处理，与自然出生婴儿性别比例没有显著区别。三组之间婴儿性别比例不存在差异。混合组的AID成功平均周期为2.52，明显长于冻精组和鲜精组的1.95和1.65(P<0.01)。 结论 AID成功妊娠所需的授精周期，冻精组与鲜精组之间没有显著差异。三种AID形式出生的婴儿性别比例没无明显不同。
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Artificial Insemination and its Relative Factors
Chen Yiquan, Wang Jianxin, Hua Qinghe, et al
(Department of Histology and Embryology, Fujian Medical University,Fujian Province Reproductive Medicine Center, Fuzhou, 350004)
Objective To analyze the clinical effect of artificial insemination and it's relative conditions. Methods 123 sterile couples resulted pregnancy with artificial insemination with the donor(AID) were collected in this study. Before AID treatment, they were divided randomly into three groups:cryopreservation semen group, mixed semen group and fresh semen group. Follicles were detected with B-ultrasonic. Cervical circumstances and sperm viability in the cervical mucus were observed 24 hrs after AID. Sex of new born was investigated. Results 126 babies were born in 123 times of AID pregnancy and 3 twins occurred. Among them there were 69 males and 57 females. The difference of sex ratio between nature pregnancy and this study is unremarkable. Mean cycle of resulted pregnancy in mixed group is 2.52±1.30. It's significantly longer than the frozen semen group(2.12±1.57) and fresh semen group(1.76±1.20,P<0.05). The cervical circumstance and sperm viability in cervical mucus 24 h after AID have no significant relation with sex ratio of babies. Conclusion The sex ratio of born AID babies among frozen semen group,mixed semen group and fresh semen group has no difference.2.52 cycles of resulted pregnancy in mixed group is obviously longer than other groups.
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Key words artificial insemination; cervical circumstance; sex ratio
人类生殖辅助技术包括精子冻存、人工授精、体外授精-胚胎移植、胚胎冻存-胚胎捐赠、显微授精以及生殖激素的应用等方面，然而精子库技术和人工授精仍然是最常用和基本的方法，特别是对男性不育的夫妇，为了家庭的幸福及得到生育子女的机会，给予施行供者人工授精(AID)是必要的。精子数量质量、人工授精的形式、授精时间等均影响AID的治疗效果。为了进一步提高治疗效果，笔者对三种形式AID的治疗效果及相关因素作分析研究。
1 材料与方法
1.1 病例的选择
选择男性因素所致不孕夫妇，包括无精子症、小睾症、精子数少、精子活力欠佳，或因性功能障碍及行丈夫精液人工授精(AIH)治疗无效者。女方年龄在24～35岁，有正常月经周期，输卵管通畅，经检验排除严重免疫因素，即抗精抗体阳性，抗子宫内膜抗体阳性，泌乳素(PRL)过高，解脲支原体或沙眼衣原体感染等。B型超声波定期监测卵泡发育；当卵泡发育至18 mm×18 mm时，结合宫颈情况，积分(按Insler评分法)达到10分时，连续给予人工授精，直至B超检查证实已排卵为止，通常每天宫颈管注入同一人或非同一人精液一次，连续2～4天。
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1.2 人工授精的方式
1.2.1 冻存复温精子组 合格供精者禁欲5～7天，手式取精，精子密度(60×106/ml，液化时间<20 min，活动率>60%，畸形率<15%，活力Ⅲ级以上精子>50%，pH 7.2～7.4。采用Harrison配方改良法(即枸橼酸三钠3.2 g,果糖2.2 g,甘油28 ml及蛋黄的混合液),以0.5∶1与液化后的精液混合,甘油的最终浓度为5%左右。混合液置室温25 min以充分甘油化。继之分装入安瓿并封口，程序降温入液氮保存。临用时取出快速升温复苏,计算精子存活率，合格者用于AID，每次注入1.5 ml。每隔24 h取宫颈粘液于高倍镜下检查精子存活情况：“0分”表示未见活精子，“1分”偶见精子，“2分”活精子少见(2～5个/HP)，“3分”活精子多见(6～10个/HP)，“4分”非常多见，以宫颈粘液内存活最多精子的一次作统计。
1.2.2 新鲜精子组 每次把液化后合格的新鲜精液1.0 ml注入宫颈管，每天一次，直至B超排卵日止。
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1.2.3 混合精液组 在AID过程中随机使用冻存精液和新鲜精液，每个周期内至少使用一次冻存精液和一次新鲜精液。
1.3 分组及随访
适合行AID的病例选择一种AID方式治疗，以信访或电话随访，以回复表格作分组登记统计,包括婴儿出生日期、性别、健康情况等。将妊娠成功并分娩婴儿的病例分成三组：即冻精组、鲜精组和混合精液组。对AID治疗成功并已分娩的病例进行调查，获得123对夫妇回复，其中冻精组41例，鲜精组38例，混合精液组44例。结合病史记载、化验结果及AID过程中的宫颈情况和精液质量等因素，采用SPSS统计软件进行χ2分析。
2 结 果
2.1 不同授精形式与胎儿出生性别(表1)
表1 不同授精形式与胎儿出生性别 供精方法
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婴儿性别
男
女
冻精组
20
21
鲜精组
23
17
混合组
25
20
合计
68
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58
总共出生126人，其中双胎3人，死产1人次，男女婴儿出生比例差异没有统计学意义(P>0.05)。冻精组出生男女婴儿比例为20∶21，鲜精组为23∶17，混合组为25∶20。三组间男女出生比例差异没有显著性(P>0.05)。
2.2 不同授精形式成功妊娠的平均周期(表2)表2 不同授精形式成功妊娠的平均周期 供精方法
成功周期
平均周期
1
2
3
4
5
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6
冻精组
22
6
7
1
2
3
2.12±1.57*
鲜精组
23
7
5
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0
3
0
1.76±1.20*
混合组
12
12
9
7
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2.52±1.30
*：与混合组相比，P<0.05(下同).
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2.3 不同授精形式成功妊娠周期输精次数(表3)
表3 不同授精形式成功妊娠周期输精次数 供精方法
成功周期输入精液次数
1
2
3
4
5
冻精组
3
10
20
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2
鲜精组
6
14
15
1
2*
混合组
1
15
17
10
1
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成功周期输入精液次数指AID 取得妊娠成功的该周期所输入精液次数。经统计学处理，冻精组与鲜精组、冻精组与混合组之间差异无显著性，而混合组与新鲜组差异存在显著性(P<0.05)。
2.4 不同授精形式宫颈粘液精子存活情况(表4)
表4 不同授精形式宫颈粘液精子存活情况 供精方法
输精后24 h精子存活积分
0
1
2
3
4
冻精组
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1
2
7
13
16
鲜精组
1
1
8
14
10
混合组
0
0
, 百拇医药
13
16
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在不同方式AID过程中，每24 h宫颈粘液内精子存活情况积分，3组间差异无显著性。
2.5 胎儿性别与授精后宫颈粘液精子存活关系(表5)
表5 胎儿性别与授精后宫颈粘液精子存活关系 性别
n
24 h精子存活积分
0
1
2
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3
4
男
62
3
3
11
23
22
女
55
5
0
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AID出生婴儿性别与授精24 h后宫颈粘液内精子存活积分的相关性，男婴授精时3～4分者占45/62，而女婴授精时2～3分者占38/55。经统计分析，男女婴儿与宫颈精子存活积分之间差异无显著性(P>0.05)。
3 讨 论
人工授精包括供者精液授精(AID)和配偶的人工授精(AIH)，对男性无精症、少精症或弱精症等不育症患者配偶施行AID已有数百年历史，但采用供者精液超低温冷冻保存并适时复苏应用的技术是1949年Polge[1]首创，此后低温生物学和本技术获得迅速发展，人类精子库在许多国家建立，在优生优育原则下开展人工授精并获得良好社会效益。然而人精子的超低温冻存技术较复杂，涉及冷冻保护液的组分、各个温度段的降温程序、复温过程等因素，因此冻存后的精子存活率、活动力、形态结构等效果及妊娠率的报道各不相同。本中心人类精子库的精子复苏率达72%，AID妊娠成功率48.2%(以6个治疗周期统计),每次成功妊娠的平均治疗周期为1.84[2]。但妊娠成功因素除了与精子冻存技术有关外，与授精的适时、次数、卵子质量、宫颈情况、内分泌因素等相关。本研究就不同方式人工授精对临床治疗效果的影响作多因素分析。
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3.1 冻精AID成功率
有报道，新鲜精液人工授精的成功率为71%，成功周期数为1.3[3]；黄泽宇[4]报道AID成功率为64%，与冻精AID相比，成功率相近或略低。然而1990年美国生育协会报道冻精AID的妊娠率明显低于新鲜精液[5]。Byrd[6]用冷冻精液(AID)作宫内授精，发现冻精效果较新鲜精液效果差。其原因一般认为与冷冻后精子的存活率和活动力降低有关[7]，也可能与冷冻复苏后膜流动性降低有关[8]。笔者研究三种不同授精方式成功妊娠所需的授精周期结果，说明混合式AID成功妊娠所需的周期明显多于其他两组，原因尚待进一步研究，而冻精组与新鲜精液组的效果相近似。
3.2 AID出生婴儿性别比例
AID与出生婴儿性别比例关系，虽然有人认为冻精AID出生的婴儿中男婴多于女婴，而新鲜精液AID出生的婴儿，女婴多于男婴。这些看法大都出自印象，并没有充分的统计资料报道。James[9]认为诱导排卵用药出生的婴儿性别比例倾向女性优势。人工授精对性别影响的分析比较困难，影响受精孕育因素复杂，例如精液来源，冻精或非冻精，以及不同的授精形式、授精时间与排卵时间的关系等，因而缺乏正确和规范的统计分析。也有人报道用供者鲜精或自家精液人工授精出生的婴儿男性多于女性(7%～10%)。Shettles[9]认为采用排卵中期性交同时调节使生殖道偏碱性出生的男婴远多于女婴，而远离排卵期性交，出生的女婴远多于男婴。现在多数人认为掌握与排卵相关时间性交来选择胎儿性别是没有充分根据的。本研究AID过程中B超监控排卵时间，分别采用鲜精或冻精授精，于排卵前、排卵日、排卵后连续3天进行，所有病人的授精时间类似，均能保证在排卵中期授精，虽然直接统计总体AID出生婴儿男性多于女性，但经统计学处理(P>0.05)，说明AID妊娠与自然妊娠出生婴儿的性别比例，以及各实验组出生婴儿的性别比例差异均无显著性。
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3.3 AID平均成功妊娠周期数
不同形式AID的平均成功妊娠周期数存在着一定差异，主要存于混合组与其他两组之间，这可能一方面与精子结构和机能状态有关，另一方面与女性生殖道,特别是宫颈微环境有关，本研究测定AID 24 h后宫颈粘液内精子存活积分，表明三组精子存活程度差异没有显著性。良好的冻存技术使精子结构保存完好，在宫颈粘液内存活时间未受明显影响。宫颈精子存活积分与出生婴儿性别比例关系，统计中男婴较多分布在3和4分(45/62)，女婴多分布在2和3分(38/55)，但统计处理说明，积分与婴儿性别比例没有相关性。
3.4 AID成功周期与输入精液次数
不同形式AID成功周期输入精液次数，混合组与鲜精组之间存在着显著差异，说明混合AID成功妊娠所需的输入精液次数明显多于新鲜AID组；各组妊娠成功周期宫颈内精子存活情况，组间差异均无显著性，与乃东红[10]报道的新鲜精液授精24 h后的存活精子高于冻融精子组不一致。其原因有待进一步研究。此外，笔者认为一个AID治疗周期中采用非同一供精者精子不存在着杂交、重复受精或其他社会伦理道德问题，因为每个卵子只容许单个精子受精。
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参考文献
1 Sherman JK. Synopsis of the use of frozen human semen.since,1964: state of the art of human semen banking. Fertil Steril, 1973;24:397
2 陈奕权, 王建新，华庆和. 人类精子超低温冻存技术和临床应用研究. 福建医学院学报, 1991;25:1
3 Chong AP,Taymor MI. Sixteen year experience with therapeutic donor insemination. Fertil Steril, 1975;26:791
4 黄泽宇, 刘德惠. 75例人工授精临床小结. 生殖与避孕, 1987;7(3):69
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5 AFS.New guidelines for the use of semen donor insemination:1990. Fertil Steril, 1990;53(3 Suppl):1
6 Byrd W,Edman C. A prospective randomized study of pregnancy rates following intrauterine and intracervical insemination using frozen donor sperm. Fertil Steril, 1990;53:521
7 李运星，马天根，唐 慧. 精子保存于HT卵黄缓冲液后对SPA、存活率及活动度的影响. 男性学杂志， 1996；10:5
8 曾 星. 正常人精子和冷贮后精子的膜动性及乙烯雌酚对其影响. 同济医科大学学报，1994；25:395
9 Benjamin E,Reubinoff MD. New advances in sex. Preselec Fertil Steril，1996；66：343
10 乃东红. 人工授精术后精子在宫颈的存在状况研究(附55例月经周期对比分析). 广西医学， 1996；14:338
(收稿：1999-05-28 修回：1999-11-08), 百拇医药