精子-去透明带仓鼠卵穿透试验与精液分析主要参数的关系
作者：李世勤 王春湘 王亦凡
单位：广东省深圳市计划生育科学研究所 518048
关键词：精液分析；精子-去透明带仓鼠卵穿透试验
广东医学000809
【摘要】 目的 了解精液分析(SA)与精子-去透明带仓鼠卵穿透试验 (ZHOT)检测结果的关系，以评价此两种实验方法对评估男性生育力的临床实用价值。方法 对22例男性不育症患者作了SA和ZHOT(改良的Yanagimachi方法)的检 测，并对SA主要参数指标的检测结果与ZHOT的检测结果(穿卵率)进行统计分析。结果 ZHOT之穿卵率与SA主要参数：精子密度、正常形态精子百分率间有显 著的正相关(P<0.05)，与a,b级活动精子百分率间则有非常显著的正相关(P<0 .01)。另外，以ZHOT检测结果正常与否分成之两组间其SA主要参数的检测结果间差异均有 显著性(t检验)，其中a,b级活动精子百分率之差异最为显著(P<0.001)。结论 改良的Yamagimchi精子-去透明带仓鼠卵穿透试验确实能比较好的综合反 映精液 的质量，但因其方法较复杂，设备要求较高，精液分析仍应是一般临床单位评估男性生育力 的首选实验室方法。特别是其中精子活动力的测定对男性生育力的评估更具临床实用价值。
, 百拇医药
Relationship between the main parameters of semen analysis and zona-fre e hamster oocyte test
Li Shiqin Wang Chunxiang Wang Yifan
(Family Plann ing Research Institute of Shenzhen, Shenzhen 518048)
【Abstract】 Objective To study the relationship betwe en Semen analysis (SA) and zona-free hamster oocyte test (ZHOT) as well as the ir values in assessing fertile potential of man.Methods SA and ZHOT (improved Yangagimachi method) were measured an d analyzed in 22 infertile men.Results There were significant correlations between the oocyte penetrating rate and sperm concentration(P<0.05) or the percentage of normal mo rphological sperm (P<0.05). There was also significant correlation between the oocyte penetrating rate an d a,b grade motile sperm concentration (P<0.01). In addi tion, the comparisons between two groups of semen specimens with normal or abnor mal oocyte penetrating rate (t test) showed that there were very significan t difference in all main parameters of SA, of which the difference of a,b grade motile sperm percentage was the most significant (P<0.01).Conclusion ZHOT of improved Yanagimachi method can well reflect the comprehensive semen quality. Because of its simplicity, SA should be the fir st and practical selection for assessing male fertility potential, most valuable in assessing sperm motility.
, 百拇医药
【Key words】 Semen analysis Zona-free hamster oocyte test
常规精液分析(SA)一直是评价男性生育力的主要实验室手段。但由于其主观性较强及评价男 性生育力的正确性不高等缺点，人们仍在不断探寻新的更好的男性生育力的实验室评估方法 。 其中精子-去透明带仓鼠卵穿透试验(ZHOT)是逐步开展起来的精子功能的检测方法。但对该 方法的实际意义及其与精液分析的关系结论尚不一致[1～4]。本研究通过对不育 男性的精液作SA和ZHOT检查以探讨SA各主要参数与ZHOT结果间的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料 在我所不育门诊就诊，女方经初步检查未发现有明显不孕原因的男性不育症患者 22例。年龄28～43岁，身体健康，婚后正常性生活2 a以上不育，无性功能障碍病史，体 检未发现有明显睾丸、附睾及输精管异常。
, 百拇医药
1.2 方法 SA按照世界卫生组织的精液分析标准方法进行[5]。检测的主要参数包括精液量， 精子 密度，活动精子百分率，精子前向运动分级以及精子形态学检查。ZHOT按改良的Yanagimach i方法[2]进行。
1.3 统计学处理 测定ZHOT的检测结果与SA各项主要参数的检测结果间的相关系数，并用t检验以检测ZHO T和SA各参数间的相关性；依ZHOT的检查结果将被检标本分成正常与异常两组，并对两组的S A主要参数测定值的差异用t检验进行分析比较。
2 结果
2.1 ZHOT检测结果与精子密度 见表1。其中与a,b级活动精子百分率相 关性最显著。按穿卵率≥10%的正常标准[2]和国人精液分析正常值指标[6 ]进行衡量。22例被测量标本中有7例其ZHOT和SA检测结果均正常。1例ZHOT正常而SA异常 和1例SA正常而ZHOT异常(表2)。其余13例两项检测结果均异常。ZHOT正常而SA异常者，其精 子密度过高(350×106/ml),而活动精子率低(20%)。
, 百拇医药
2.2 ZHOT穿透率正常与异常间的比较 将22例标本按其ZHOT的结果正常与否分成两组，并对此两组的SA主要参数的检测结果(几何 均数)进行t检验。见表3。
表1 SA与ZHOT穿透率检测结果及它们间的相关分析
±s
范围
相关系数(r)
P值
精子密度(×106/ml)
88.73±86.10
2.0～324
, http://www.100md.com
0.478
<0.0 5
总精子数(×106/1次射精)
227.62±202.48
5.0～724.8
0.327
>0.05
精子活动率(%)
50±20
20～90
0.404
>0.05
, http://www.100md.com
a,b级活动精子率(%)
35±20
0～75
0.596
<0.01
正常形态精子率(%)
58±21
10～84
0.479
<0.05
ZHOT穿卵率△
13.9±22.1
, 百拇医药
0～90.5
各数检测值均先转换成对数 后再计算相关系数；△与上述所有项目作相关分析表2 SA和ZHOT不一致的2例标本的检测结果 编
号
精液量
(ml)
精子密度
(×106/ml)
精子总数
(×106 / 1次射精)
活动精子
率(%)
, http://www.100md.com
a,b级活动
精子率(%)
正常形态精
子率(%)
ZH OT穿卵
率(%)
1
2.0
138
276
50
40
84
, 百拇医药
0
2
3.0
350
1 050
20
15
75
65
表3 ZHOT穿透率正常与异常两组之SA各主要
参数值及其差异性比较±s SA参数
, http://www.100md.com 正常组(n=8)
异常组(n=14)
P值
精子密度(×106/ml)
182±91.35
46.71±47.46
<0.01
精子总数(×106/1次射精)
360.10±171.42
151.96±182.85
<0.05
, http://www.100md.com
活动精子率(%)
61±10
45±21
<0.05
a,b级活动精子率(%)
54±10
24±18
<0.001
正常精子形态率(%)
74±7
48±20
<0.01
, 百拇医药
各参数用对数均数 进行t检验比较两组间的差异3 讨论
目前对ZHOT与精液分析检测结果的关系，通过直接的和间接的研究尚有不同的结论[1 ～4，7]。但一般都认为在不育男性中其精液分析的主要参数与ZHOT之间存在显著相关 [1，2]，本研究结果与此相符。ZHOT被不少学者认为能用于评价精子的受精能力 。其常用于损害或改善精子受精能力的各种因素的研究[3，4，7]，也是评估男 性生 育能力的一个十分有效的实验方法。特别是改良的Yanagimachi法能比较全面和综合地反映 出与生育力有关的各项精子功能。近年来该方法作了不少改进[1]，比如固定加入 的活动精子数量和使用钙离子载体A23187。但其检测结果被认为仅能反映精子的自发性顶体反应功能状况，排除了精子其它质量参数的影响。
本研究显示ZHOT检测结果与精液分析的几个主要参数：精子密度，a,b级活动精子百分率和 正常形态精子百分率之间均有显著正相关。其中a,b级活动精子百分率与ZHOT间之相关尤为 显著。与近期有些研究所获得的间接结论一致[4，7]。这种显著的相关性反映出 全面和准确的精液分析也能使我们间接地获得精子受精能力的信息。鉴于精液分析有实验设 备要求低，容易掌握，操作简单并已为临床广泛运用之优点，我们认为精液分析尤其是精子 前向运动的观察(如a,b级活动精子百分率的检测)仍应是一般临床单位评估男性生育力首选 的实验室手段。然而值得注意的是，一般的精液分析对精子前向运动的检测和精子形态学的 检 查往往甚为粗糙，这样就会使我们在通过用精液分析来评估男性的生育力时失掉十分重要的 信息。
, http://www.100md.com
虽然本研究显示ZHOT能比较好的综合反映精子的质量，但相对精液分析而言其设备要求较高 ，实验方法较复杂不易掌握，实验费用也比较高，尚难在一般医疗机构临床上作为常规的检 测男性生育力的方法被广泛运用。但在有条件的临床单位，改良的Ya nagimachi精子-去透明带仓鼠卵穿透试验也不失为一个精子质量综合评估的好方法。根据以 往的研究和本研究的结果显示，仅依靠SA或ZHOT的检测结果来判断男性的生育力是否正 常都是不全面和存在着很大的误差。因此，除了必须结合临床资料进行综合判断外，进一步 研究探索更简便，评估男性生育力效率更高的实验手段仍是十分必要的。
参考文献
1，Hall JL. Relationship between semen quality and human sperm p enetration of zona-free hamster ova. Fertil Steril, 1981, 35:457
, 百拇医药
2，Rogers BJ. The sperm penetration assay: its usefulness reevaluated. F ertil Steril, 1985, 43:823
3，徐惠明.人精子冷冻前后穿卵试验的对比研究.浙江医学，1998，20(1)：22
4，伏晓敏.冷冻精子受精能力的综合评价.男科学报，1999，5(2)：73
5，WHO laboratory manul for the examination of human semen and sperm-cer vical mucus interaction. Fourth Edition. Published on behalf of the World Health Organization by Cambridge University Press, 1999.1～120
6，江，鱼，王益鑫，李世勤，等.542例正常生育力男子的精液分析.生殖与避孕 ，1987，7(4)：22
7，朱伟杰.卵黄缓冲液4℃保存3种低品质精液后的穿卵率变化.中国优生与遗传杂 志，1998，6(6)：14
(收稿日期：2000-01-26), 百拇医药
单位：广东省深圳市计划生育科学研究所 518048
关键词：精液分析；精子-去透明带仓鼠卵穿透试验
广东医学000809
【摘要】 目的 了解精液分析(SA)与精子-去透明带仓鼠卵穿透试验 (ZHOT)检测结果的关系，以评价此两种实验方法对评估男性生育力的临床实用价值。方法 对22例男性不育症患者作了SA和ZHOT(改良的Yanagimachi方法)的检 测，并对SA主要参数指标的检测结果与ZHOT的检测结果(穿卵率)进行统计分析。结果 ZHOT之穿卵率与SA主要参数：精子密度、正常形态精子百分率间有显 著的正相关(P<0.05)，与a,b级活动精子百分率间则有非常显著的正相关(P<0 .01)。另外，以ZHOT检测结果正常与否分成之两组间其SA主要参数的检测结果间差异均有 显著性(t检验)，其中a,b级活动精子百分率之差异最为显著(P<0.001)。结论 改良的Yamagimchi精子-去透明带仓鼠卵穿透试验确实能比较好的综合反 映精液 的质量，但因其方法较复杂，设备要求较高，精液分析仍应是一般临床单位评估男性生育力 的首选实验室方法。特别是其中精子活动力的测定对男性生育力的评估更具临床实用价值。
, 百拇医药
Relationship between the main parameters of semen analysis and zona-fre e hamster oocyte test
Li Shiqin Wang Chunxiang Wang Yifan
(Family Plann ing Research Institute of Shenzhen, Shenzhen 518048)
【Abstract】 Objective To study the relationship betwe en Semen analysis (SA) and zona-free hamster oocyte test (ZHOT) as well as the ir values in assessing fertile potential of man.Methods SA and ZHOT (improved Yangagimachi method) were measured an d analyzed in 22 infertile men.Results There were significant correlations between the oocyte penetrating rate and sperm concentration(P<0.05) or the percentage of normal mo rphological sperm (P<0.05). There was also significant correlation between the oocyte penetrating rate an d a,b grade motile sperm concentration (P<0.01). In addi tion, the comparisons between two groups of semen specimens with normal or abnor mal oocyte penetrating rate (t test) showed that there were very significan t difference in all main parameters of SA, of which the difference of a,b grade motile sperm percentage was the most significant (P<0.01).Conclusion ZHOT of improved Yanagimachi method can well reflect the comprehensive semen quality. Because of its simplicity, SA should be the fir st and practical selection for assessing male fertility potential, most valuable in assessing sperm motility.
, 百拇医药
【Key words】 Semen analysis Zona-free hamster oocyte test
常规精液分析(SA)一直是评价男性生育力的主要实验室手段。但由于其主观性较强及评价男 性生育力的正确性不高等缺点，人们仍在不断探寻新的更好的男性生育力的实验室评估方法 。 其中精子-去透明带仓鼠卵穿透试验(ZHOT)是逐步开展起来的精子功能的检测方法。但对该 方法的实际意义及其与精液分析的关系结论尚不一致[1～4]。本研究通过对不育 男性的精液作SA和ZHOT检查以探讨SA各主要参数与ZHOT结果间的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料 在我所不育门诊就诊，女方经初步检查未发现有明显不孕原因的男性不育症患者 22例。年龄28～43岁，身体健康，婚后正常性生活2 a以上不育，无性功能障碍病史，体 检未发现有明显睾丸、附睾及输精管异常。
, 百拇医药
1.2 方法 SA按照世界卫生组织的精液分析标准方法进行[5]。检测的主要参数包括精液量， 精子 密度，活动精子百分率，精子前向运动分级以及精子形态学检查。ZHOT按改良的Yanagimach i方法[2]进行。
1.3 统计学处理 测定ZHOT的检测结果与SA各项主要参数的检测结果间的相关系数，并用t检验以检测ZHO T和SA各参数间的相关性；依ZHOT的检查结果将被检标本分成正常与异常两组，并对两组的S A主要参数测定值的差异用t检验进行分析比较。
2 结果
2.1 ZHOT检测结果与精子密度 见表1。其中与a,b级活动精子百分率相 关性最显著。按穿卵率≥10%的正常标准[2]和国人精液分析正常值指标[6 ]进行衡量。22例被测量标本中有7例其ZHOT和SA检测结果均正常。1例ZHOT正常而SA异常 和1例SA正常而ZHOT异常(表2)。其余13例两项检测结果均异常。ZHOT正常而SA异常者，其精 子密度过高(350×106/ml),而活动精子率低(20%)。
, 百拇医药
2.2 ZHOT穿透率正常与异常间的比较 将22例标本按其ZHOT的结果正常与否分成两组，并对此两组的SA主要参数的检测结果(几何 均数)进行t检验。见表3。
表1 SA与ZHOT穿透率检测结果及它们间的相关分析
±s范围
相关系数(r)
P值
精子密度(×106/ml)
88.73±86.10
2.0～324
, http://www.100md.com
0.478
<0.0 5
总精子数(×106/1次射精)
227.62±202.48
5.0～724.8
0.327
>0.05
精子活动率(%)
50±20
20～90
0.404
>0.05
, http://www.100md.com
a,b级活动精子率(%)
35±20
0～75
0.596
<0.01
正常形态精子率(%)
58±21
10～84
0.479
<0.05
ZHOT穿卵率△
13.9±22.1
, 百拇医药
0～90.5
各数检测值均先转换成对数 后再计算相关系数；△与上述所有项目作相关分析表2 SA和ZHOT不一致的2例标本的检测结果 编
号
精液量
(ml)
精子密度
(×106/ml)
精子总数
(×106 / 1次射精)
活动精子
率(%)
, http://www.100md.com
a,b级活动
精子率(%)
正常形态精
子率(%)
ZH OT穿卵
率(%)
1
2.0
138
276
50
40
84
, 百拇医药
0
2
3.0
350
1 050
20
15
75
65
表3 ZHOT穿透率正常与异常两组之SA各主要
参数值及其差异性比较
±s SA参数, http://www.100md.com 正常组(n=8)
异常组(n=14)
P值
精子密度(×106/ml)
182±91.35
46.71±47.46
<0.01
精子总数(×106/1次射精)
360.10±171.42
151.96±182.85
<0.05
, http://www.100md.com
活动精子率(%)
61±10
45±21
<0.05
a,b级活动精子率(%)
54±10
24±18
<0.001
正常精子形态率(%)
74±7
48±20
<0.01
, 百拇医药
各参数用对数均数 进行t检验比较两组间的差异3 讨论
目前对ZHOT与精液分析检测结果的关系，通过直接的和间接的研究尚有不同的结论[1 ～4，7]。但一般都认为在不育男性中其精液分析的主要参数与ZHOT之间存在显著相关 [1，2]，本研究结果与此相符。ZHOT被不少学者认为能用于评价精子的受精能力 。其常用于损害或改善精子受精能力的各种因素的研究[3，4，7]，也是评估男 性生 育能力的一个十分有效的实验方法。特别是改良的Yanagimachi法能比较全面和综合地反映 出与生育力有关的各项精子功能。近年来该方法作了不少改进[1]，比如固定加入 的活动精子数量和使用钙离子载体A23187。但其检测结果被认为仅能反映精子的自发性顶体反应功能状况，排除了精子其它质量参数的影响。
本研究显示ZHOT检测结果与精液分析的几个主要参数：精子密度，a,b级活动精子百分率和 正常形态精子百分率之间均有显著正相关。其中a,b级活动精子百分率与ZHOT间之相关尤为 显著。与近期有些研究所获得的间接结论一致[4，7]。这种显著的相关性反映出 全面和准确的精液分析也能使我们间接地获得精子受精能力的信息。鉴于精液分析有实验设 备要求低，容易掌握，操作简单并已为临床广泛运用之优点，我们认为精液分析尤其是精子 前向运动的观察(如a,b级活动精子百分率的检测)仍应是一般临床单位评估男性生育力首选 的实验室手段。然而值得注意的是，一般的精液分析对精子前向运动的检测和精子形态学的 检 查往往甚为粗糙，这样就会使我们在通过用精液分析来评估男性的生育力时失掉十分重要的 信息。
, http://www.100md.com
虽然本研究显示ZHOT能比较好的综合反映精子的质量，但相对精液分析而言其设备要求较高 ，实验方法较复杂不易掌握，实验费用也比较高，尚难在一般医疗机构临床上作为常规的检 测男性生育力的方法被广泛运用。但在有条件的临床单位，改良的Ya nagimachi精子-去透明带仓鼠卵穿透试验也不失为一个精子质量综合评估的好方法。根据以 往的研究和本研究的结果显示，仅依靠SA或ZHOT的检测结果来判断男性的生育力是否正 常都是不全面和存在着很大的误差。因此，除了必须结合临床资料进行综合判断外，进一步 研究探索更简便，评估男性生育力效率更高的实验手段仍是十分必要的。
参考文献
1，Hall JL. Relationship between semen quality and human sperm p enetration of zona-free hamster ova. Fertil Steril, 1981, 35:457
, 百拇医药
2，Rogers BJ. The sperm penetration assay: its usefulness reevaluated. F ertil Steril, 1985, 43:823
3，徐惠明.人精子冷冻前后穿卵试验的对比研究.浙江医学，1998，20(1)：22
4，伏晓敏.冷冻精子受精能力的综合评价.男科学报，1999，5(2)：73
5，WHO laboratory manul for the examination of human semen and sperm-cer vical mucus interaction. Fourth Edition. Published on behalf of the World Health Organization by Cambridge University Press, 1999.1～120
6，江，鱼，王益鑫，李世勤，等.542例正常生育力男子的精液分析.生殖与避孕 ，1987，7(4)：22
7，朱伟杰.卵黄缓冲液4℃保存3种低品质精液后的穿卵率变化.中国优生与遗传杂 志，1998，6(6)：14
(收稿日期：2000-01-26), 百拇医药