血小板输注患者的血小板抗体检测意义
作者：戴建溪 沈溪英 葛林阜
单位：250031 济南军区总医院
关键词：
中华内科杂志990118 临床发现,一些血液病患者因血小板减少引起的出血倾向,在给予血小板浓缩液输注治疗后,出血倾向可好转,但随着血小板输注次数输注量的增加,出血倾向又复出现,甚至更加严重。为了解其中可能的原因,我们对采用血小板输注治疗的47例血液病患者,进行了血小板抗体检测。
一、资料和方法
1.对象：血液病组：47例中男21例,女26例,年龄11～73岁,平均45.24岁。其中白血病13例，再生障碍性贫血10例，骨髓增生异常综合征9例，48例免疫性血小板减少性紫癜中15例血小板抗体阴性的患者。全部患者均经骨髓细胞学确诊,输注血小板治疗前血小板抗体检测阴性。血小板浓缩液是我院采用白膜回浆法制备的,200 ml全血分离的血小板为1 U血小板,所含血小板>4.0×109/L, 白细胞<2.0×109/L,每袋2U,总量50～70 ml,当天分离并输注,以每次每10 kg患者体重输注1 U,每周2～3次。对照组：健康献血员35例,男20例,女15例,年龄20～42岁。献血次数1～32次,均无输血史。
, 百拇医药
2.血小板抗体检测方法：采用双抗体夹心固相酶免疫法,检测血小板表面相关抗体(PA), 包括PAIgG、PAIgM、PAIgA,试剂由天津金十字医学科技有限公司提供,严格按说明书操作。对血小板抗体阳性者进行抗体效价测定, 将提取的血小板递倍稀释1∶4, 1∶8…1∶64后再进行检测。PAIgG、PAIgM、PAIgA其中一项出现阳性,即为血小板抗体检测阳性。
3.血小板增值计算(CCI)与输注反应观察：输注前及输注后18～24小时进行血小板计数,计算1小时和18～24小时CCI[1]。 CCI＝(输注后血小板计数-输注前血小板计数)×体表面积(m)/输入血小板总数。(1)输注无效标准：输注血小板后1小时CCI<7.0×109/L或18～24小时CCI<4.0 ×109/L为输注无效。 高于此计数为有效值。(2)非溶血性输血反应(NHTR)[2],输注血小板后4小时内体温升高1℃以上和(或)伴皮疹、寒战、心悸等, 并能排除溶血性输血反应者。
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二、结果
1.血液病患者输注血小板后血小板抗体检测情况，见表1。从表1显示,47例输注血小板的血液病患者中，血小板抗体阳性共18例，总阳性率38.30%。由表2资料经趋势χ2检验，χ2=8.218，P<0.05。说明血小板抗体阳性率随着输注血小板单位数和次数的增加而上升。
2.血小板抗体阳性患者，血小板抗体效价与输注无效和NHTR发生率的关系，见表2。
从表2亦可见，输注血小板的47例患者中，血小板抗体阴性的29例发生输注无效4例，占13.79%，而18例血小板抗体阳性患者输注无效12例，占66.67%，二者经χ2检验，χ2=13.885，P<0.001；血小板抗体阴性患者中NHTR 2例，血小板抗体阳性患者中5例，二者比较,χ2=3.749，P>0.05，但比较接近P<0.05，χ2=3.84。显示了血小板抗体效价越高，输注无效和NHTR发生率越高。
, 百拇医药
表1 血液病47例输注不同数量和次数血小板患者血小板抗体阳性率 输注血小板
例数
抗体阳性例数
阳性率(%)
单位数(U)
次数
PAIgG
PAIgM
<30
<6
11
1
, 百拇医药
0
9.09
32～80
7～20
26
10
1
38.48
>82
>21
10
7
0
, 百拇医药 70.00
表2 血小板抗体效价与输注无效及非溶血性输血反应的关系 血小板抗
体效价
例数
输注无效
例数
非溶血性
输血反应
0
29
4
2
<4
, 百拇医药
3
0
0
8～32
7
5
2
>64
8
7
3
同时发现，血小板抗体效价4以下的患者，CCI均在输注有效值内，抗体效价低于32的10例患者中，有5例低于输注有效值。抗体效价在高于64的8例患者中，则有7例CCI明显低于有效值。表明抗体效价随滴度增高，CCI降低越明显的趋势,但由于例数太少,差异尚未达到显著界值χ2=
, 百拇医药
2.812，P>0.05)。对照组35例健康献血员，血小板抗体检测均阴性。
讨论 迄今发现血小板表面除有红细胞ABO同种抗原外,血小板还有11种特异性抗原。如此众多和复杂的抗原,对反复输注血小板的患者体内便可产生血小板抗体。从本组结果表明,对照组健康献血员血液中无血小板抗体存在, 即使在47例血液病患者,在输注血小板浓缩液之前,血液中也未测出血小板抗体。显然,血小板抗体的出现与血小板的输注有关,而且, 随着血小板输注量的增大,输注次数的增多,血小板抗体阳性患者的检出率越高, 血小板抗体效价也越高。同时,本组患者中,血小板抗体阳性18例,其中17 例患者输注血小板在7次以上,即输注血小板的时间在2周以上, 表明血小板抗体的产生符合免疫反应过程。
临床观察发现,在大量的临床输血工作中，NHTR并不多见，有人在5 030次(26 318 U)输血中，发现继发性NHTR 191例次，合每单位血液成分的反应率为0.73%[2]。而本组血小板抗体阳性患者，在输注血小板治疗过程中，特别是输注2周以上的患者，有的出现皮肤出血点，瘀斑和黏膜出血加重表现，有的出现内脏出血和颅内出血，有的因颅内出血而死亡。结合输注无效和NHTR的发生率说明，上述表现是由于这些患者体内抗原抗体免疫反应。尽管给予血小板输注治疗，血小板不仅不增加，反而减少而造成出血加重。因此，对于输注血小板治疗的血液病患者，当出现出血加重时，血小板抗体和CCI检测，可以做为是否继续应用血小板治疗的标准。同时借此和原发病出血相鉴别。但是，本组资料也表明，并不是所有输注血小板治疗的血液病患者，都测定出了血小板抗体。从而说明，血小板抗体的产生与否是一个复杂的问题，亦可能与检测手段有关。
《参考文献》
[1] 李敬兰，曹金霓.血小板输注无效的原因与防治.中国输血杂志，1994，7：217-218.
[2] 田丁，陈峰，董志兵，等.HLA与非溶血性输血反应.中华内科杂志，1988，27：88-91.
(收稿：1997-11-26 修回：1998-04-10), 百拇医药
单位：250031 济南军区总医院
关键词：
中华内科杂志990118 临床发现,一些血液病患者因血小板减少引起的出血倾向,在给予血小板浓缩液输注治疗后,出血倾向可好转,但随着血小板输注次数输注量的增加,出血倾向又复出现,甚至更加严重。为了解其中可能的原因,我们对采用血小板输注治疗的47例血液病患者,进行了血小板抗体检测。
一、资料和方法
1.对象：血液病组：47例中男21例,女26例,年龄11～73岁,平均45.24岁。其中白血病13例，再生障碍性贫血10例，骨髓增生异常综合征9例，48例免疫性血小板减少性紫癜中15例血小板抗体阴性的患者。全部患者均经骨髓细胞学确诊,输注血小板治疗前血小板抗体检测阴性。血小板浓缩液是我院采用白膜回浆法制备的,200 ml全血分离的血小板为1 U血小板,所含血小板>4.0×109/L, 白细胞<2.0×109/L,每袋2U,总量50～70 ml,当天分离并输注,以每次每10 kg患者体重输注1 U,每周2～3次。对照组：健康献血员35例,男20例,女15例,年龄20～42岁。献血次数1～32次,均无输血史。
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2.血小板抗体检测方法：采用双抗体夹心固相酶免疫法,检测血小板表面相关抗体(PA), 包括PAIgG、PAIgM、PAIgA,试剂由天津金十字医学科技有限公司提供,严格按说明书操作。对血小板抗体阳性者进行抗体效价测定, 将提取的血小板递倍稀释1∶4, 1∶8…1∶64后再进行检测。PAIgG、PAIgM、PAIgA其中一项出现阳性,即为血小板抗体检测阳性。
3.血小板增值计算(CCI)与输注反应观察：输注前及输注后18～24小时进行血小板计数,计算1小时和18～24小时CCI[1]。 CCI＝(输注后血小板计数-输注前血小板计数)×体表面积(m)/输入血小板总数。(1)输注无效标准：输注血小板后1小时CCI<7.0×109/L或18～24小时CCI<4.0 ×109/L为输注无效。 高于此计数为有效值。(2)非溶血性输血反应(NHTR)[2],输注血小板后4小时内体温升高1℃以上和(或)伴皮疹、寒战、心悸等, 并能排除溶血性输血反应者。
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二、结果
1.血液病患者输注血小板后血小板抗体检测情况，见表1。从表1显示,47例输注血小板的血液病患者中，血小板抗体阳性共18例，总阳性率38.30%。由表2资料经趋势χ2检验，χ2=8.218，P<0.05。说明血小板抗体阳性率随着输注血小板单位数和次数的增加而上升。
2.血小板抗体阳性患者，血小板抗体效价与输注无效和NHTR发生率的关系，见表2。
从表2亦可见，输注血小板的47例患者中，血小板抗体阴性的29例发生输注无效4例，占13.79%，而18例血小板抗体阳性患者输注无效12例，占66.67%，二者经χ2检验，χ2=13.885，P<0.001；血小板抗体阴性患者中NHTR 2例，血小板抗体阳性患者中5例，二者比较,χ2=3.749，P>0.05，但比较接近P<0.05，χ2=3.84。显示了血小板抗体效价越高，输注无效和NHTR发生率越高。
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表1 血液病47例输注不同数量和次数血小板患者血小板抗体阳性率 输注血小板
例数
抗体阳性例数
阳性率(%)
单位数(U)
次数
PAIgG
PAIgM
<30
<6
11
1
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0
9.09
32～80
7～20
26
10
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>82
>21
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表2 血小板抗体效价与输注无效及非溶血性输血反应的关系 血小板抗
体效价
例数
输注无效
例数
非溶血性
输血反应
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8～32
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2
>64
8
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同时发现，血小板抗体效价4以下的患者，CCI均在输注有效值内，抗体效价低于32的10例患者中，有5例低于输注有效值。抗体效价在高于64的8例患者中，则有7例CCI明显低于有效值。表明抗体效价随滴度增高，CCI降低越明显的趋势,但由于例数太少,差异尚未达到显著界值χ2=
, 百拇医药
2.812，P>0.05)。对照组35例健康献血员，血小板抗体检测均阴性。
讨论 迄今发现血小板表面除有红细胞ABO同种抗原外,血小板还有11种特异性抗原。如此众多和复杂的抗原,对反复输注血小板的患者体内便可产生血小板抗体。从本组结果表明,对照组健康献血员血液中无血小板抗体存在, 即使在47例血液病患者,在输注血小板浓缩液之前,血液中也未测出血小板抗体。显然,血小板抗体的出现与血小板的输注有关,而且, 随着血小板输注量的增大,输注次数的增多,血小板抗体阳性患者的检出率越高, 血小板抗体效价也越高。同时,本组患者中,血小板抗体阳性18例,其中17 例患者输注血小板在7次以上,即输注血小板的时间在2周以上, 表明血小板抗体的产生符合免疫反应过程。
临床观察发现,在大量的临床输血工作中，NHTR并不多见，有人在5 030次(26 318 U)输血中，发现继发性NHTR 191例次，合每单位血液成分的反应率为0.73%[2]。而本组血小板抗体阳性患者，在输注血小板治疗过程中，特别是输注2周以上的患者，有的出现皮肤出血点，瘀斑和黏膜出血加重表现，有的出现内脏出血和颅内出血，有的因颅内出血而死亡。结合输注无效和NHTR的发生率说明，上述表现是由于这些患者体内抗原抗体免疫反应。尽管给予血小板输注治疗，血小板不仅不增加，反而减少而造成出血加重。因此，对于输注血小板治疗的血液病患者，当出现出血加重时，血小板抗体和CCI检测，可以做为是否继续应用血小板治疗的标准。同时借此和原发病出血相鉴别。但是，本组资料也表明，并不是所有输注血小板治疗的血液病患者，都测定出了血小板抗体。从而说明，血小板抗体的产生与否是一个复杂的问题，亦可能与检测手段有关。
《参考文献》
[1] 李敬兰，曹金霓.血小板输注无效的原因与防治.中国输血杂志，1994，7：217-218.
[2] 田丁，陈峰，董志兵，等.HLA与非溶血性输血反应.中华内科杂志，1988，27：88-91.
(收稿：1997-11-26 修回：1998-04-10), 百拇医药