A亚型呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的临床研究
作者：陈慧中 苏英姿 齐春华 耿学辉 张梓荆
单位：100020 北京，首都儿科研究所
关键词：呼吸道合胞病毒；细支气管炎；病毒性
中华儿科杂志990110 【摘要】 目的 了解呼吸道合胞病毒(RSV)的亚型感染情况及其所致毛细支气管炎的临床特征。方法 (1)对1995年冬～1997年春住院的85例临床拟诊为毛细支气管炎的患儿进行鼻咽分泌物病毒培养、抗原检测及RSV阳性分离株的单克隆抗体间接免疫荧光法亚型鉴定；(2)分析亚型感染病例的临床资料。结果 (1)共培养出RSV 22株，阳性率为26%，经鉴定全部为A亚型株；(2)22例A亚型RSV毛细支气管炎中幼婴(1～6月龄)占82%，男∶女=4.5∶1；发热小于38℃(54%)，起病2天后出现喘憋(64%)，胸部X线表现为两肺野片状阴影和肺气肿影者分别占77%和64%。经临床Lowell评分，8例评为重症。结论 (1)1995年冬～1997年春住院RSV毛细支气管炎的抗原亚型是A亚型；(2)A亚型RSV毛细支气管炎临床特征主要有：幼婴为多，低热和喘憋出现较早等。
, 百拇医药
An etiological and clinical study on bronchiolitis caused by respiratory syncytial virus subgroup A CHEN Huizhong, SU Yingzi, QI Chunhua, et al. The Capital Institute of Pediatrics, Beijing 100020
【Abstract】 Objective To understand the etiological and clinical characteristics of bronchiolitis caused by respiratory syncytial virus (RSV) subgroups.Methods Eighty-five specimens of nasopharyngeal aspirates from infants with bronchiolitis admitted to the Affiliated Children′s Hospital of the Capital Institute of Pediatrics during the period of the winter of 1995 through the spring of 1997 were cultured for viruses, and RSV antigen in the nasopharyngeal cells was also detected, followed by subgroup identification of RSV positive isolates by using monoclonal antibodies and indirect immunofluorescent technique. The clinical data of the patients diagnosed etiologically as RSV subgroup infection were analyzed.Results Twenty-two RSV isolates were obtained and the positive rate was 26%; the 22 isolates were all identified as RSV subgroup A. The young infants with RSV subgroup A bronchiolitis (1～6 month of age) accounted for 82% and the male: female ratio was 4.5∶1. The patients presented a low-grade fever (<38℃) and an early wheezing (2 days right after the onset) accounted for 54% and 64%, respectively. The radiological findings were patches in both lungs (77%) and hyperinflation (64%), etc. Assessed by the Lowell score system, 8 out of 22 cases were considered as severe cases.Conclusions The subtype of RSV caused bronchiolitis in infants hospitalized in our institute from the winter of 1995 through the spring of 1997 was subtype A. These data showed that the RSV subgroup A mainly attacked young infants, and a low grade fever, an early wheezing, etc. were the main characteristics of the infection.
, 百拇医药
【Key words】 Respiratory syncytial viruses Bronchiolitis, viral
分子生物学技术的发展已将呼吸道合胞病毒(RSV)的研究由单一血清型提高到A、B两亚型的水平。流行病学资料指出，在我国，RSV所致毛细支气管炎和流行性喘憋性肺炎的抗原亚型主要是A亚型[1-3]。为深入了解RSV亚型感染情况和临床特征，我们于1995年冬～1997年春对82例临床拟诊为毛细支气管炎的住院患儿进行了病原和临床研究，并将22例诊断为A亚型RSV感染病例的资料进行了总结，现报告如下。
对象和方法
一、对象
为1995年冬～1997年春住我所呼吸病房的患儿，85例均符合毛细支气管炎诊断标准[4]。自发病至纳入研究时间均在4天以内，尽量留住院12～14天，以获恢复期资料。
, 百拇医药
85例患儿年龄最小为1月龄、最大为1岁10个月。22例A亚型RSV感染者全为婴儿，年龄分布为1～10个月，平均4.8(4.8±2.5)个月，小于6月龄者18例，占82%，男∶女=4.5∶1。
二、方法
1.病毒分离和亚型鉴定：采用负压吸引法取患儿急性期鼻咽分泌物接种于Hep-2细胞，吸附4小时后换细胞维持液并置33℃旋转培养，每日观察细胞病变。然后采用间接免疫荧光技术对RSV阳性株的抗原亚型进行鉴定。我们采用的分别针对RSV不同抗原位点的8株单克隆抗体(McAb)(A亚型单克隆株C793、B151、B27、C771和B亚型单克隆株B18、B158、B90、C787)系由瑞典Karalinska研究所提供，羊抗鼠和羊抗兔IgG荧光标记抗体均由军事医学科学院流行病学研究所提供(批号分别为9401和9302，效价均为1∶10)，兔抗RSV免疫血清、正常兔血清由本所病毒室制备，RSV A亚型标准株为A2和Long株，B亚型标准株为C18537株，单克隆抗体位点与以往研究相
, 百拇医药
同[2]。在做亚型鉴定时，同时设正常细胞、RSV A、B亚型标准株感染细胞及兔抗RSV阳性和阴性血清作对照。
2.抗原检测：同时做鼻咽脱落细胞的间接免疫荧光法RSV抗原检测。
结果
一、病毒分离、亚型鉴定及抗原检测结果
85份标本中分离得RSV 22株，阳性率26%，经8株RSV McAb鉴定，均属A亚型；47例鼻咽脱落细胞RSV抗原检测阳性；22例培养阳性者的鼻咽脱落细胞RSV抗原检测亦阳性，符合率100%。
二、临床资料(表1)
1.发热：本组病例的上感前驱症状持续1～4天不等，多数为2天(14例，64%)，表现为发热、咳嗽和咽充血。全病程中，12例(54%)最高体温未超过38℃，6例38～39℃，仅2例达39℃以上，2例始终不发热。发热时间多为2～3天(59%)，平均发热3.3(3.3±2.1)天。
, 百拇医药
2.喘憋和Lowell评分[5]：阵发性喘憋是毛细支气管炎的突出症状。本组中14例在起病2天后即出现喘憋。阵发性喘憋持续平均3.1天(3.1±1.0)。表1示入院后由专人每日定时记录的呼吸频率、心率和Lowell评分于研究0天(入院当日或次日)、7天和大于12天时的结果。共有8例(36%)Lowell评分大于10分，为重症。
3.肺部罗音：全部病例均闻及细湿罗音，其消失时间平均为6.5(6.5±3.8)天。
4.其他：1例佝偻病，3例有腹泻，1例室间隔膜部缺损。
表1 22例患儿呼吸频率、心率和Lowell评分结果 研究时间
呼吸频率(次/min)
心率(次/min)
, 百拇医药
Lowell评分
±s
范围±s
范围±s
范围
入院当天或次日
60±15
40～84
140±13
120～160
, 百拇医药
9±3
3～13
第7天
47± 9
30～48
122±11
104～140
3±3
0～ 8
≥12天
40± 5
30～36
116± 7
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104～128
0.05±0.05*
0～ 1
*±s
三、胸部X线和实验室检查
1.胸部X线：17例(77%)见肺野片状阴影。两肺中内带和心影后点、片状阴影及右上肺大片影(包括两例肺不张影)各为13例和4例。14例(64%)肺气肿影。
2.血气分析：本组中4例动脉化耳血酸碱度小于7.35，最低值7.304，二氧化碳分压大于
, 百拇医药
50 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)，最高值62 mm Hg，剩余碱(BE)不小于-5 mmol/L；11例氧分压小于55～75 mmHg，氧饱和度(SO2)0.8～0.9。8例Lowell评分为重症者氧分压均低于50 mm Hg，其中6例Ⅰ型呼吸衰竭(有2例临床诊断心力衰竭)，2例Ⅱ型呼吸衰竭。
3.血常规、生化、免疫指标：15例外周血白细胞总数<10.0×109/L，其中中性粒细胞占0.5以下者为86%；10例有一过性天冬氨酸转氨酶(AST)和(或)丙氨酸转氨酶(ALT)轻度升高；表现有单项T辅助淋巴细胞与T抑制淋巴细胞比值小于1或IgA值偏低者各3例。
四、主要治疗
在采用传统中西医结合治疗措施时[6]，对9例应用了基因工程干扰素
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α50～70 kU/(kg.d)，1周，对5例特应性体质患儿试用了舒喘灵雾化吸入(舒喘灵0.25 ml+生理盐水
1.75 ml)2～3天(2次/d)。所有病例均接受超声雾化、拍背吸痰的呼吸治疗。采用国产亚都医用雾化器，雾化液为生理盐水20 ml。每次雾化吸入20分钟，根据PCO2值调整吸入次数，平均每天2次。雾化吸入停止25分钟左右后由护士轻拍患儿背部，由下至上，双侧轮回，然后吸痰。拍背吸痰动作宜轻巧柔顺，遇有青紫、喘憋严重和鼻出血时均应中止治疗并配以吸氧、平喘和止血措施。根据病情转归和所吸痰液多少决定疗程。本组病例平均超声雾化吸痰时间为6.3(6.3±1.9)天。经治疗，22例患儿全部痊愈出院。讨论
本组病例经鼻咽脱落细胞抗原检测和阳性分离株的亚型鉴定，证实病原为A亚型RSV，表明1995年冬至1997年春，我所住院的患儿毛细支气管炎是由感染A亚型RSV引起，与1995年以来北京地区RSV分离株的亚型鉴定结果、1985～1995年广州、南京、长春等地及1991～1992年期间津冀地区所获RSV分离株的亚型鉴定结果相吻合[2，3]。提示近年来我国无论南方还是北方，无论散发还是流行的RSV感染主要是A亚型所致。A亚型RSV感染占绝对优势的原因推测与其有较强的致病性、人群对A亚型RSV保护性免疫力较弱、已形成地区性流行趋势以及分离培养相对较易等因素有关。
, 百拇医药
本组22例全为婴儿，病程中86%的患儿有发热，而津冀地区A亚型RSV流行性喘憋性肺炎住院患儿中婴儿占80%，病中发热者占43%，考虑此为散发与流行病例的临床表现之差异所致。但均以小婴儿比例高(65%)、以低度热为主要热型。本组婴儿中多数在起病2天后出现喘憋，胸部X线显示片状阴影和肺气肿影。8例Lowell评分为重症者表现为Ⅰ、Ⅱ型呼吸衰竭和心力衰竭。Lowell评分是根据喘鸣音性质、范围和三凹征程度进行的客观评分，与现行重症肺炎诊断标准的诊断率一致[5]。我们在以往的研究中和本次临床应用中，都体会到了Lowell评分的实用性。
在综合疗法基础上，本组婴儿均接受雾化吸痰治疗。不仅有助于气道湿化和炎症分泌物的清除，而且由于梗阻解除和通气改善，使重症病例的呼吸性酸中毒乃至Ⅱ型呼吸衰竭得以较迅速的纠正和扭转，避免了误用、滥用碱性药物。
本研究应用McAb技术对RSV分离株作了进一步的亚型鉴定，并对A亚型RSV毛细支气管炎的临床特征作了初步总结，较有关毛细支气管炎的类似研究[6]前进了一步。值得指出，关于RSV
, http://www.100md.com
A、B两亚型感染及RSV与非RSV感染所致毛细支气管炎之间的特征比较，还需进行更多的研究。
参考文献
[1] 林良明，刘玉琳，刘成贵，等.1991河北及天津部分地区儿童流行性喘憋性肺炎调查.中国妇幼保健，1993，8：51-52.
[2] 刘成贵，王之梁 ，耿学辉，等.流行性喘憋性肺炎与呼吸道合胞病毒亚型的研究.中华儿科杂志，1994，32：22-23.
[3] 耿学辉，朱汝南，孙晓鸥，等.我国部分地区呼吸道合胞病毒分离株的亚型鉴定.中华儿科杂志，1997，35：405-407.
[4] 中华人民共和国卫生部.小儿四病防治方案(二)，小儿肺炎防治方案.中华儿科杂志，1987，25：47-49.
[5] 黄荣妍，陈慧中，耿学辉，等.呼吸道合胞病毒毛细支气管炎维生素A水平的变化.中华儿科杂志，1996，34：372-375.
[6] 张梓荆，王之梁，韩秀兰.毛细支气管炎的病原学和临床研究.中华医学杂志，1976，56：731-734.
(收稿：1997-09-08 修回：1998-09-03), 百拇医药
单位：100020 北京，首都儿科研究所
关键词：呼吸道合胞病毒；细支气管炎；病毒性
中华儿科杂志990110 【摘要】 目的 了解呼吸道合胞病毒(RSV)的亚型感染情况及其所致毛细支气管炎的临床特征。方法 (1)对1995年冬～1997年春住院的85例临床拟诊为毛细支气管炎的患儿进行鼻咽分泌物病毒培养、抗原检测及RSV阳性分离株的单克隆抗体间接免疫荧光法亚型鉴定；(2)分析亚型感染病例的临床资料。结果 (1)共培养出RSV 22株，阳性率为26%，经鉴定全部为A亚型株；(2)22例A亚型RSV毛细支气管炎中幼婴(1～6月龄)占82%，男∶女=4.5∶1；发热小于38℃(54%)，起病2天后出现喘憋(64%)，胸部X线表现为两肺野片状阴影和肺气肿影者分别占77%和64%。经临床Lowell评分，8例评为重症。结论 (1)1995年冬～1997年春住院RSV毛细支气管炎的抗原亚型是A亚型；(2)A亚型RSV毛细支气管炎临床特征主要有：幼婴为多，低热和喘憋出现较早等。
, 百拇医药
An etiological and clinical study on bronchiolitis caused by respiratory syncytial virus subgroup A CHEN Huizhong, SU Yingzi, QI Chunhua, et al. The Capital Institute of Pediatrics, Beijing 100020
【Abstract】 Objective To understand the etiological and clinical characteristics of bronchiolitis caused by respiratory syncytial virus (RSV) subgroups.Methods Eighty-five specimens of nasopharyngeal aspirates from infants with bronchiolitis admitted to the Affiliated Children′s Hospital of the Capital Institute of Pediatrics during the period of the winter of 1995 through the spring of 1997 were cultured for viruses, and RSV antigen in the nasopharyngeal cells was also detected, followed by subgroup identification of RSV positive isolates by using monoclonal antibodies and indirect immunofluorescent technique. The clinical data of the patients diagnosed etiologically as RSV subgroup infection were analyzed.Results Twenty-two RSV isolates were obtained and the positive rate was 26%; the 22 isolates were all identified as RSV subgroup A. The young infants with RSV subgroup A bronchiolitis (1～6 month of age) accounted for 82% and the male: female ratio was 4.5∶1. The patients presented a low-grade fever (<38℃) and an early wheezing (2 days right after the onset) accounted for 54% and 64%, respectively. The radiological findings were patches in both lungs (77%) and hyperinflation (64%), etc. Assessed by the Lowell score system, 8 out of 22 cases were considered as severe cases.Conclusions The subtype of RSV caused bronchiolitis in infants hospitalized in our institute from the winter of 1995 through the spring of 1997 was subtype A. These data showed that the RSV subgroup A mainly attacked young infants, and a low grade fever, an early wheezing, etc. were the main characteristics of the infection.
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【Key words】 Respiratory syncytial viruses Bronchiolitis, viral
分子生物学技术的发展已将呼吸道合胞病毒(RSV)的研究由单一血清型提高到A、B两亚型的水平。流行病学资料指出，在我国，RSV所致毛细支气管炎和流行性喘憋性肺炎的抗原亚型主要是A亚型[1-3]。为深入了解RSV亚型感染情况和临床特征，我们于1995年冬～1997年春对82例临床拟诊为毛细支气管炎的住院患儿进行了病原和临床研究，并将22例诊断为A亚型RSV感染病例的资料进行了总结，现报告如下。
对象和方法
一、对象
为1995年冬～1997年春住我所呼吸病房的患儿，85例均符合毛细支气管炎诊断标准[4]。自发病至纳入研究时间均在4天以内，尽量留住院12～14天，以获恢复期资料。
, 百拇医药
85例患儿年龄最小为1月龄、最大为1岁10个月。22例A亚型RSV感染者全为婴儿，年龄分布为1～10个月，平均4.8(4.8±2.5)个月，小于6月龄者18例，占82%，男∶女=4.5∶1。
二、方法
1.病毒分离和亚型鉴定：采用负压吸引法取患儿急性期鼻咽分泌物接种于Hep-2细胞，吸附4小时后换细胞维持液并置33℃旋转培养，每日观察细胞病变。然后采用间接免疫荧光技术对RSV阳性株的抗原亚型进行鉴定。我们采用的分别针对RSV不同抗原位点的8株单克隆抗体(McAb)(A亚型单克隆株C793、B151、B27、C771和B亚型单克隆株B18、B158、B90、C787)系由瑞典Karalinska研究所提供，羊抗鼠和羊抗兔IgG荧光标记抗体均由军事医学科学院流行病学研究所提供(批号分别为9401和9302，效价均为1∶10)，兔抗RSV免疫血清、正常兔血清由本所病毒室制备，RSV A亚型标准株为A2和Long株，B亚型标准株为C18537株，单克隆抗体位点与以往研究相
, 百拇医药
同[2]。在做亚型鉴定时，同时设正常细胞、RSV A、B亚型标准株感染细胞及兔抗RSV阳性和阴性血清作对照。
2.抗原检测：同时做鼻咽脱落细胞的间接免疫荧光法RSV抗原检测。
结果
一、病毒分离、亚型鉴定及抗原检测结果
85份标本中分离得RSV 22株，阳性率26%，经8株RSV McAb鉴定，均属A亚型；47例鼻咽脱落细胞RSV抗原检测阳性；22例培养阳性者的鼻咽脱落细胞RSV抗原检测亦阳性，符合率100%。
二、临床资料(表1)
1.发热：本组病例的上感前驱症状持续1～4天不等，多数为2天(14例，64%)，表现为发热、咳嗽和咽充血。全病程中，12例(54%)最高体温未超过38℃，6例38～39℃，仅2例达39℃以上，2例始终不发热。发热时间多为2～3天(59%)，平均发热3.3(3.3±2.1)天。
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2.喘憋和Lowell评分[5]：阵发性喘憋是毛细支气管炎的突出症状。本组中14例在起病2天后即出现喘憋。阵发性喘憋持续平均3.1天(3.1±1.0)。表1示入院后由专人每日定时记录的呼吸频率、心率和Lowell评分于研究0天(入院当日或次日)、7天和大于12天时的结果。共有8例(36%)Lowell评分大于10分，为重症。
3.肺部罗音：全部病例均闻及细湿罗音，其消失时间平均为6.5(6.5±3.8)天。
4.其他：1例佝偻病，3例有腹泻，1例室间隔膜部缺损。
表1 22例患儿呼吸频率、心率和Lowell评分结果 研究时间
呼吸频率(次/min)
心率(次/min)
, 百拇医药
Lowell评分
±s范围
±s范围
±s范围
入院当天或次日
60±15
40～84
140±13
120～160
, 百拇医药
9±3
3～13
第7天
47± 9
30～48
122±11
104～140
3±3
0～ 8
≥12天
40± 5
30～36
116± 7
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104～128
0.05±0.05*
0～ 1
*
±s三、胸部X线和实验室检查
1.胸部X线：17例(77%)见肺野片状阴影。两肺中内带和心影后点、片状阴影及右上肺大片影(包括两例肺不张影)各为13例和4例。14例(64%)肺气肿影。
2.血气分析：本组中4例动脉化耳血酸碱度小于7.35，最低值7.304，二氧化碳分压大于
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50 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)，最高值62 mm Hg，剩余碱(BE)不小于-5 mmol/L；11例氧分压小于55～75 mmHg，氧饱和度(SO2)0.8～0.9。8例Lowell评分为重症者氧分压均低于50 mm Hg，其中6例Ⅰ型呼吸衰竭(有2例临床诊断心力衰竭)，2例Ⅱ型呼吸衰竭。
3.血常规、生化、免疫指标：15例外周血白细胞总数<10.0×109/L，其中中性粒细胞占0.5以下者为86%；10例有一过性天冬氨酸转氨酶(AST)和(或)丙氨酸转氨酶(ALT)轻度升高；表现有单项T辅助淋巴细胞与T抑制淋巴细胞比值小于1或IgA值偏低者各3例。
四、主要治疗
在采用传统中西医结合治疗措施时[6]，对9例应用了基因工程干扰素
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α50～70 kU/(kg.d)，1周，对5例特应性体质患儿试用了舒喘灵雾化吸入(舒喘灵0.25 ml+生理盐水
1.75 ml)2～3天(2次/d)。所有病例均接受超声雾化、拍背吸痰的呼吸治疗。采用国产亚都医用雾化器，雾化液为生理盐水20 ml。每次雾化吸入20分钟，根据PCO2值调整吸入次数，平均每天2次。雾化吸入停止25分钟左右后由护士轻拍患儿背部，由下至上，双侧轮回，然后吸痰。拍背吸痰动作宜轻巧柔顺，遇有青紫、喘憋严重和鼻出血时均应中止治疗并配以吸氧、平喘和止血措施。根据病情转归和所吸痰液多少决定疗程。本组病例平均超声雾化吸痰时间为6.3(6.3±1.9)天。经治疗，22例患儿全部痊愈出院。讨论
本组病例经鼻咽脱落细胞抗原检测和阳性分离株的亚型鉴定，证实病原为A亚型RSV，表明1995年冬至1997年春，我所住院的患儿毛细支气管炎是由感染A亚型RSV引起，与1995年以来北京地区RSV分离株的亚型鉴定结果、1985～1995年广州、南京、长春等地及1991～1992年期间津冀地区所获RSV分离株的亚型鉴定结果相吻合[2，3]。提示近年来我国无论南方还是北方，无论散发还是流行的RSV感染主要是A亚型所致。A亚型RSV感染占绝对优势的原因推测与其有较强的致病性、人群对A亚型RSV保护性免疫力较弱、已形成地区性流行趋势以及分离培养相对较易等因素有关。
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本组22例全为婴儿，病程中86%的患儿有发热，而津冀地区A亚型RSV流行性喘憋性肺炎住院患儿中婴儿占80%，病中发热者占43%，考虑此为散发与流行病例的临床表现之差异所致。但均以小婴儿比例高(65%)、以低度热为主要热型。本组婴儿中多数在起病2天后出现喘憋，胸部X线显示片状阴影和肺气肿影。8例Lowell评分为重症者表现为Ⅰ、Ⅱ型呼吸衰竭和心力衰竭。Lowell评分是根据喘鸣音性质、范围和三凹征程度进行的客观评分，与现行重症肺炎诊断标准的诊断率一致[5]。我们在以往的研究中和本次临床应用中，都体会到了Lowell评分的实用性。
在综合疗法基础上，本组婴儿均接受雾化吸痰治疗。不仅有助于气道湿化和炎症分泌物的清除，而且由于梗阻解除和通气改善，使重症病例的呼吸性酸中毒乃至Ⅱ型呼吸衰竭得以较迅速的纠正和扭转，避免了误用、滥用碱性药物。
本研究应用McAb技术对RSV分离株作了进一步的亚型鉴定，并对A亚型RSV毛细支气管炎的临床特征作了初步总结，较有关毛细支气管炎的类似研究[6]前进了一步。值得指出，关于RSV
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A、B两亚型感染及RSV与非RSV感染所致毛细支气管炎之间的特征比较，还需进行更多的研究。
参考文献
[1] 林良明，刘玉琳，刘成贵，等.1991河北及天津部分地区儿童流行性喘憋性肺炎调查.中国妇幼保健，1993，8：51-52.
[2] 刘成贵，王之梁 ，耿学辉，等.流行性喘憋性肺炎与呼吸道合胞病毒亚型的研究.中华儿科杂志，1994，32：22-23.
[3] 耿学辉，朱汝南，孙晓鸥，等.我国部分地区呼吸道合胞病毒分离株的亚型鉴定.中华儿科杂志，1997，35：405-407.
[4] 中华人民共和国卫生部.小儿四病防治方案(二)，小儿肺炎防治方案.中华儿科杂志，1987，25：47-49.
[5] 黄荣妍，陈慧中，耿学辉，等.呼吸道合胞病毒毛细支气管炎维生素A水平的变化.中华儿科杂志，1996，34：372-375.
[6] 张梓荆，王之梁，韩秀兰.毛细支气管炎的病原学和临床研究.中华医学杂志，1976，56：731-734.
(收稿：1997-09-08 修回：1998-09-03), 百拇医药