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编号:10284321
养阴抗毒散对受照小鼠红细胞免疫粘附功能的影响
http://www.100md.com 《第四军医大学学报》 2000年第4期
     作者:侯军峰 张盈华 史恒军 郝晓柯 张利朝 邓贤碧

    单位:侯军峰(第四军医大学唐都医院:临床实验科,陕西 西安 710038);张盈华(第四军医大学唐都医院:临床实验科,陕西 西安 710038);郝晓柯(第四军医大学唐都医院:临床实验科,陕西 西安 710038);张利朝(第四军医大学唐都医院:临床实验科,陕西 西安 710038);邓贤碧(第四军医大学唐都医院:临床实验科,陕西 西安 710038);史恒军(第四军医大学唐都医院:中医科,陕西 西安 710038)

    关键词:急性放射损伤;红细胞免疫粘附功能;辐射防护;中药

    第四军医大学学报000433 摘要:目的 研究小鼠急性中度骨髓型放射损伤期间红细胞免疫粘附功能的变化 及中药养阴抗毒散的放射防护作用. 方法 以6 Gy X射线照射后小鼠作为动物 模型 ,给予中药养阴抗毒散灌胃,应用酵母菌红细胞花环试验测定红细胞免疫粘附功能. 结果 和正常组(RBC-C3bR花环率15.4%±4.3%,RBC-IC 花环率14.8%±3.1%)相比,照 射 对照组小鼠RBC-C3bR花环率从第12日(8.0±2.6)%开始下降(P<0.01),实验 结束 时(10.1±3.2)%仍未恢复正常,RBC-IC 花环率在照后第4日(19.9±2.2)%和8 d(19. 5±3.1)%升高(P<0.01), 随后逐步下降至 正常. 照射中药组小鼠RBC-C3bR花环率仅在第12日(10.5±3.0)%下降(P<0. 01),RBC-IC 花环率仅在第4日(18.5±3.0)%升高(P<0.05),照射中药组RBC-C 3bR花 环率在第4,12,20,28日均高于照射对照组(P<0.05). 结论 6GyX线照射 可造成小鼠红细胞免疫功能低下, 中药养阴抗毒散对此有一定的预防和治疗作用.
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    中图号:R818.71 文献标识栁:A

    文章编号:1000-2790(2000)04-0496-03

    Effect of Yangyin Kangdu powder on erythrocyte immune adhesion function in irrad iated mice

    HOU Jun-Feng ZHANG Ying-Hua SHI Heng-Jun HAO Xiao-Ke ZHANG L i-Chao DENG Xian-Bi

    (Department of Clinical Medical Research,Department of Trad itional Chinese Medicine, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical Universit y, Xi'an 710038, China)
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    Abstract:AIM To study the change of erythrocyte immune ad hesion function in mice with moderate acute radiation injuries and protective effect of Yangyin Ka ngdu powder, a Traditional Chinese Medicine, on acute radiation injuries in mice .METHODS RBC-microzyme rosette test was used to study the cha nge regularity of erythrocyte immune function.RBC-C3b receptor rosette ratio (RBC-C3b RR) and WBC quantity were used to study the protective effects of Yangyin Kangdu powder on radiation injuries.RESULTS Compared with normal group,the RB C-C3bRR ratio of the irradiated group was significantly lower on the 12th, 20th and 28th day ( P< 0.01),and RBC-IC (Immune complex) rosette ratio was higher on the 4th and 8th d ay and subsequently declined to normal range.RBC-C3bR rosette ratio was lower o nly on the 12th day and RBC-IC rosette ratio was higher only on the 4th day in t he group treated with Yangyin Kangdu powder.RBC-C3bR rosette ratio in th e group treated with Yangyin Kangdu powder was higher than that of the irridated group on the 4th, 12th, 20th, and 28th day (P<0.05).CONCLUSION Erythrocyte im mune adhesion function of the mice irradiated by 6Gy X-ray is low and Yangyin K a ngdu powder has some effect in protecting erythrocyte immune function from irrad iation injuries.
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    Keywords:acute radiation injuries;erythrocyte immune adhesion function;radiation protection; Traditional Chinese Medicine

    0 引言

    电离辐射对白细胞免疫系统可造成严重损伤,但红细胞免疫系统辐射损伤的研究报 道甚 少,许多物质与红细胞免疫相关,如CR1,CR3,CD58,CD59,DAF,SOD等,其中红细胞补体 受体1型( CR1 )最受关注. 为此对急性中度骨髓型放射损伤小鼠的红细胞CR1活性及中药 养阴抗毒散的防护作用进行了实验研究.

    1 材料和方法

    1.1 材料 养阴抗毒散由西洋参、羚羊角粉、沙参、石斛、紫草等十余味中药组 成,其中西洋参粉碎,与羚羊角粉共研为细末,其余味药煎煮浓缩、烘干、打碎,与西洋参 粉 、羚羊角粉混匀,过100目筛,备用. 临床成人0.25 g.kg-1.d-1,按小鼠用 药量为人的40倍计算为10 mg.g-1.d-1,灌胃悬液由药粉333.3 g∶1 L蒸 馏水比例混合而成,根据预实验,给小鼠灌胃液体量每次不宜超过0.5 mL,按平均体质量20 g计算,故予0.3 mL,2/d.
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    1.2 方法 Siemens X线治疗机,30只小鼠放入30 cm×30 cm浅底(2 . 5 cm深)木盒内,木盒上盖1 cm厚有机玻璃,小鼠在盒内呈分散状态,射源距小鼠100 cm, 射野为30 cm×30 cm,剂量率 为2 Gy.min-1,剂量为6 Gy,一次性全身照射. 昆明种雄性小鼠,8 wk龄,体质 量(20±2)g(购自本校实验动物中心). 小鼠随机分为3组:A.正常对照组,20只,不予 任何 处理;B.照射对照组,15只,给予X线照射,从照前3d开始给予生理盐水灌胃,0.3 mL,2/ d;C.照射中药组,15只,给予与B组相同的X线照射,从照前3 d开始给予中药溶液灌胃, 0.3 mL,2/d. B,C两组均连续灌胃1 wk. 红细胞免疫粘附功能测定:以RBC- C3bR及 RBC-IC花环率为指标 ,采用酵母菌红细胞花环法,参考刘景田等[1]方法. 根据预实验结果,分别于照 射 后4,8,12,20,28 d观测取值,由于小鼠免疫细胞存在昼夜节律,故采样时间均定于上午 09∶00. 白细胞计数采用常规方法,观测时间同上.
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    统计学处理:采用SPLM软件对各组检测数据进行方差分析及t检验.

    2 结果

    2.1 放射损伤模型 B,C两组小鼠照射后1 wk内精神差,饮食减少,活动减少, 毛 色暗、缺少光泽,WBC数显著下降(Tab 1),说明6 Gy X线照射已造成小鼠骨髓型急性放 射损伤.

    表 1 6 Gy X射线照射后小鼠外周血白细胞数

    Tab 1 Effect of Yangyin Kangdu powder on WBC count in mice after 6 Gy X-ray ir radiation (×109.L-1,±s) t/d
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    A(n=20)

    B(n=15)

    C (n=15)

    4

    6.2±1.6

    1.1±0.2b

    1.9±0.2bd

    8

    1.8±0.4b

    2.8±0.6 bd

    12
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    2.6±0.6b

    3.8±0.7 bd

    20

    3.3±0.5b

    4.6±1.3 bd

    28

    4.2±0.4b

    6.0±1.1 d

    bP<0.01 vs A,dP<0.01 B vs C.

    A. normal group;B. control group;C. treated group.
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    2.2 RBC-C3bR花环率及RBC-IC花环率 与正常 对 照组相比,照射对照组RBC-花环率在12,20 d时降至低谷(P<0.01,Tab 2),到28 d 时仍 未恢复正常. RBC-IC花环率在照后4,8 d显著升高(P<0.01). 照射中药组RBC- C 3b R花环率在12 d时降至低谷(P<0.05,Tab 2),其余各时点与正常对照组相比无显著 差异 . RBC-IC花环率在照后4 d显著升高(P<0.05),其余各时点与正常对照组相比无显著 差异 . B,C两组比较,照射中药组RBC-C3bR花环率在4,12,20,28 d均高于照射对照组 (P<0.05/P<0.01),RBC-IC花环率在照后8 d显著低于生理盐水灌胃组(P<0 .05).

    表 2 6 Gy X射线照射后小鼠RBC-C3bR及RBC-IC花环率变化情况

    Tab 2 Effect of Yangyin Kangdu powder on the RBC-C3bR and RBC-IC rosette ratio in mice after 6 Gy X-ray irradiation (±s,%)
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    A(n=20)

    B(n=15)

    C(n=15)

    t/d

    RBC-C3b

    RBC-IC

    RBC-C3b

    RBC -IC

    RBC-C3b

    RBC-IC

    4

    15.4±4.3
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    14.8±3.1

    14.5±2.5

    19.9±2. 2b

    17.2±2.0d

    18.5±3.0b

    8

    13.7±2.7

    19.5±3.1b

    15.1±2.8

    16.8±2.5c

    12
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    8.0±2.6b

    12.1±4.0

    10.5±3.0bc

    14.5±2.8

    20

    8.0±2.2b

    15.5±2.8

    13.6±2.8d

    14.4±2.5

    28

    10.1±3.2b
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    14.9±2.1

    14.9±2.5d

    15.5±2.8

    aP<0.05,bP<0.01 vs A;cP<0.05,dP<0.01 B vs C .A,B,C see Tab 1.3 讨论

    红细胞具有识别、粘附、浓缩、杀伤抗原、清除循环免疫复合物的作用,并且参与机体 的免疫调控. 红细胞CR1数量的增减与结构的变化,以及其特异性、结合力的改变均可导致 红细胞免疫粘附功能改变. 根据RBC-C3bR及RBC-IC花环率的实验室检测情况,可将 红细胞免 疫功能缺陷分为3类:①两项都低为原发性红细胞免疫功能低下,是由于遗传缺陷引起(如C R1数量基因低表达),或由疾病等其他因素引起(如辐射破坏CR1的分子结构);②RBC- C 3bR花环率降低而RBC-IC花环率升高,为继发性红细胞免疫功能低下,是由于CR1活 性降低同时对IC卸下机制障碍;③两项都升高,为红细胞免疫功能亢进与紊乱[1].
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    从实验结果看,一次性6 Gy X线全身照射后,照射对照组小鼠RBC-C3bR花环率 在12和20 d 时显著下降,至实验观察结束仍未恢复正常,说明红细胞免疫粘附能力显著下降,RBC-IC 花 环率在照后初期有所升高,尔后与正常对照组无显著差异,说明红细胞对IC卸下障碍;照射 中药组小鼠RBC- C3bR花环率仅在12 d时下降,其余各时点与正常对照组无显著差异 ,IC花环 率在照后初期也有一定升高,两组的情况与前述红细胞免疫功能缺陷划分的3类不完全相符 ,但仍属于红细胞免疫功能低下. 从郭峰等[2]报道的资料看,红细胞免疫辐射损 伤的自然 修复是一个漫长的过程,给予适当的药物辅助以促进恢复很有必要. 从两个照射组的比较可 见,照射中药组红细胞CR1活性受损伤程度轻,说明中药养阴抗毒散对6 Gy X线照射后小鼠 的红细胞,在一定时间内,能增加RBC-C3bR花环率,降低RBC-IC花环率.

    中药对于老年性红细胞免疫粘附功能下降及补体介导的免疫复合物溶解能力下降有 一定 的改善作用[3,4],这与中药中的多糖成分关系密切. 首先,多糖是细胞膜组分, 可以强化 正常细胞,抵御各种有害因子对细胞膜的损害;其次,红细胞膜上有多糖受体,多糖成分作 用于细胞膜,可使红细胞膜上的CR1活性增强;另外,多糖是一种低毒免疫促进剂,对多种 细胞因子有调节作用. 辐射对CR1的损伤一是通过辐射的能量传递直接破坏CR1的蛋白分子, 二是通过辐射使水分子离解产生大量自由基对CR1分子的间接破坏作用,还有一种可能,由 于CR1对体内的凝血酶、纤维蛋白酶、弹力酶等特别敏感,易受此类酶破坏[5],通 过前两种 作用,CR1和细胞膜分子的空间结构发生改变,使CR1被各种酶破坏的机会增多. 中药对于放 射损伤后红细胞免疫功能降低的作用,除前述外,对放射损伤的某些环节,如放射后自由基 产生的增加及其损害,可能有一定阻滞作用. 养阴抗毒散由西洋参、羚羊角粉、沙参、石斛 、紫草等10余味中药组成,系我院中医科主任史恒军副教授治疗肿瘤放疗副反应的验方. 从 中医角度辩证,射线为火热之邪,易使热毒瘀结、耗气伤阴,故该方从养阴解毒入手,辩证 用药,对于放疗过程中出现的恶心、食欲减退、乏力及白细胞数量下降等症状,均有显著疗 效. 该方既扶正又祛邪,可能一方面提高了红细胞对辐射的抗性,促进了辐射损伤的修复; 另一方面,阻滞了自由基的生成,减轻了自由基造成的损伤. 对其作用机制,有待进一步 实验研究探明.
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    作者简介:侯军峰(1969-),男(汉族),陕西省乾县人. 1993年北京中医药大 学毕 业. 现为第四军医大学唐都医院临床实验科硕士研究生(导师张盈华、郝晓柯). Tel.(029 )3549364

    参考文献:

    [1] 刘景田,张 洁. 红细胞免疫学[M] .西安:陕西科学技术出版社 ,1995:28-29.

    [2] 郭 峰,张俊洁,赵书平et al.五例急性放射患者红细胞数量基因表 达及活性随访试验研究[J]. 中华放射医学与防护杂志,1998;18(1):33-35.

    [3] 韩 梅,王文余,冯 艳et al.老年人红细胞免疫功能检测及黄芪对 其调节作用[J] .中国免疫学杂志,1991;7(2):124-125.

    [4] 张凤蕴,韩 梅,刘 钟et al.黄芪对老年人红细胞免疫功能及CMSC 的影响[J] .哈尔滨医科大学学报,1991;25(6):419-421.

    [5] Chevalier J,Kazatchkine MD.Distribution in clusters of complemen t receptor type one (CR1) on human erythrocytes[J]. J Immunol,1989;142(6 ):2031-2036.

    收稿日期:1999-07-12; 修回日期:1999-10-27, http://www.100md.com