薄层扫描法测定固经丸中芍药甙的含量
作者：杨丽华
单位：杨丽华(广东省高州市药品检验所，广东 高州 525200)
关键词：
中国中药杂志000222 固经丸是由黄柏、白芍、龟甲等6味中药组成的复方丸剂[1]，具有滋阴清热，固经止带的功效。芍药甙含量测定方法有高效液相色谱法[2]、薄层扫描法[3]，薄层层析-紫外分光光度法等。根据本方的具体情况采用薄层扫描法，该法操作简单，重现性好。
1 仪器与试药
CS-930薄层扫描仪(岛津)；定量毛细管(武汉市新华分析仪器厂)。芍药甙对照品(中国药品生物制品检定所)；硅胶G(青岛海洋化工厂)；所用溶剂、试剂均为分析纯；样品为市售品。
, http://www.100md.com
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备 取固经丸适量，研成细粉，精密称取1 g样品，置10 ml离心管中，精密加50%乙醇10 ml，冷浸1 h，超声振荡提取30 min，离心，取上清液作为供试品溶液。
2.2 阴性对照品溶液的制备 另取缺白芍的空白群药粗粉，按上述供试品溶液制备方法制备，即得。
2.3 对照品溶液的制备 取60 ℃真空干燥4 h芍药甙对照品适量，精密称取10.80 mg，置5 ml量瓶中，加50%乙醇溶解稀释至刻度，摇匀即得(2.16 mg.ml-1)。
2.4 薄层色谱条件及扫描条件 将供试品溶液、阴性对照品溶液及对照品溶液点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(5∶1)[4]为展开剂，展开12 cm，取出，晾干，喷5%香草醛-硫酸溶液，置105 ℃烘箱中烘至斑点清晰，立即取出用同样大小的玻璃板盖上，周边用胶布固定密封，结果供试品溶液有与芍药甙对照品溶液相同Rf值(Rf 0.43)的斑点，而阴性对照品溶液在相同位置上则未见此斑点。用反射法锯齿扫描，狭缝1.2 mm×1.2 mm，在300～700 nm波长扫描，测得芍药甙的最大吸收波长为575 nm，最小吸收波长为700 nm，故选择λs 575 nm，λR 700nm，SX 3。
, http://www.100md.com
2.5 线性关系考察 精密吸取对照品溶液2，4，6，8，10 μl分别点于同一块薄层板上，按上述条件展开，显色后封板，扫描测定峰面积积分值，以对照品的量(μg)为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=5901.3X+702,r=0.9995，线性范围4.32～21.6 μg。
2.6 稳定性试验 取对照品溶液依法点样，展开，显色封板后，对芍药甙斑点每15 min扫描1次，结果在1 h内稳定，RSD 0.4%(n=5)。
2.7 精密度试验 取同一供试品溶液在同一硅胶板上点5个相同量的点，依法展开后显色扫描测定，结果RSD 1.19%。
2.8 样品的测定 分别吸取对照品溶液4 μl，供试品溶液8 μl，交叉点样于同一薄层板上依法展开，显色封板，进行扫描，测定，3批样品中芍药甙含量分别为0.21%，0.24%，0.22%。
, http://www.100md.com
2.9 重现性试验 取同一批号样品5份按上述方法分别测定，求得芍药甙含量RSD 1.96%(n=5)。
2.10 回收率测定 精密称取5份已知含量的样品粉末适量，分别精密加入一定量的芍药甙对照品，按样品溶液制备方法提取，展开，测定，计算5次测定的平均回收率为97.7%，RSD 1.42%。
3 小结
3.1 在制备样品时，根据芍药甙类成分在水、乙醇中溶解度较大的性质，曾试用30%，50%，70%，90%乙醇提取，分离，测定其含量，结果以50%乙醇提取的含量最高，且层析分离干扰少。在提取方法上，分别用超声处理30 min，索氏提取3 h及冷浸24 h 3种方法测定含量，结果超声处理及索氏提取效果好，且测得含量相近，故选用简便的超声法进行。
3.2 显色时注意显色剂不要喷得过多，烘烤时间以4 min为宜，否则硅胶板底色变黑，显色取出后应即刻封板以免斑点褪色，影响结果。
, http://www.100md.com
参考文献：
[1]中国药典.一部.1995.526.
[2]钱亚南，刘信顺，张先芳.高效液相色谱法测定白芍总甙中芍药甙含量.中药材，1995，26(7)：349.
[3]张庆生，王宝琴.薄层扫描法测定白芍及复方白芍片中芍药甙的含量.中国中药杂志，1991，16(9)：542.
[4]章崇仪，曹解宇.白芍中芍药甙提取的溶剂比较.中成药，1994，16(11)：6.
收稿日期：1998-12-07, 百拇医药
单位：杨丽华(广东省高州市药品检验所，广东 高州 525200)
关键词：
中国中药杂志000222 固经丸是由黄柏、白芍、龟甲等6味中药组成的复方丸剂[1]，具有滋阴清热，固经止带的功效。芍药甙含量测定方法有高效液相色谱法[2]、薄层扫描法[3]，薄层层析-紫外分光光度法等。根据本方的具体情况采用薄层扫描法，该法操作简单，重现性好。
1 仪器与试药
CS-930薄层扫描仪(岛津)；定量毛细管(武汉市新华分析仪器厂)。芍药甙对照品(中国药品生物制品检定所)；硅胶G(青岛海洋化工厂)；所用溶剂、试剂均为分析纯；样品为市售品。
, http://www.100md.com
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备 取固经丸适量，研成细粉，精密称取1 g样品，置10 ml离心管中，精密加50%乙醇10 ml，冷浸1 h，超声振荡提取30 min，离心，取上清液作为供试品溶液。
2.2 阴性对照品溶液的制备 另取缺白芍的空白群药粗粉，按上述供试品溶液制备方法制备，即得。
2.3 对照品溶液的制备 取60 ℃真空干燥4 h芍药甙对照品适量，精密称取10.80 mg，置5 ml量瓶中，加50%乙醇溶解稀释至刻度，摇匀即得(2.16 mg.ml-1)。
2.4 薄层色谱条件及扫描条件 将供试品溶液、阴性对照品溶液及对照品溶液点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(5∶1)[4]为展开剂，展开12 cm，取出，晾干，喷5%香草醛-硫酸溶液，置105 ℃烘箱中烘至斑点清晰，立即取出用同样大小的玻璃板盖上，周边用胶布固定密封，结果供试品溶液有与芍药甙对照品溶液相同Rf值(Rf 0.43)的斑点，而阴性对照品溶液在相同位置上则未见此斑点。用反射法锯齿扫描，狭缝1.2 mm×1.2 mm，在300～700 nm波长扫描，测得芍药甙的最大吸收波长为575 nm，最小吸收波长为700 nm，故选择λs 575 nm，λR 700nm，SX 3。
, http://www.100md.com
2.5 线性关系考察 精密吸取对照品溶液2，4，6，8，10 μl分别点于同一块薄层板上，按上述条件展开，显色后封板，扫描测定峰面积积分值，以对照品的量(μg)为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=5901.3X+702,r=0.9995，线性范围4.32～21.6 μg。
2.6 稳定性试验 取对照品溶液依法点样，展开，显色封板后，对芍药甙斑点每15 min扫描1次，结果在1 h内稳定，RSD 0.4%(n=5)。
2.7 精密度试验 取同一供试品溶液在同一硅胶板上点5个相同量的点，依法展开后显色扫描测定，结果RSD 1.19%。
2.8 样品的测定 分别吸取对照品溶液4 μl，供试品溶液8 μl，交叉点样于同一薄层板上依法展开，显色封板，进行扫描，测定，3批样品中芍药甙含量分别为0.21%，0.24%，0.22%。
, http://www.100md.com
2.9 重现性试验 取同一批号样品5份按上述方法分别测定，求得芍药甙含量RSD 1.96%(n=5)。
2.10 回收率测定 精密称取5份已知含量的样品粉末适量，分别精密加入一定量的芍药甙对照品，按样品溶液制备方法提取，展开，测定，计算5次测定的平均回收率为97.7%，RSD 1.42%。
3 小结
3.1 在制备样品时，根据芍药甙类成分在水、乙醇中溶解度较大的性质，曾试用30%，50%，70%，90%乙醇提取，分离，测定其含量，结果以50%乙醇提取的含量最高，且层析分离干扰少。在提取方法上，分别用超声处理30 min，索氏提取3 h及冷浸24 h 3种方法测定含量，结果超声处理及索氏提取效果好，且测得含量相近，故选用简便的超声法进行。
3.2 显色时注意显色剂不要喷得过多，烘烤时间以4 min为宜，否则硅胶板底色变黑，显色取出后应即刻封板以免斑点褪色，影响结果。
, http://www.100md.com
参考文献：
[1]中国药典.一部.1995.526.
[2]钱亚南，刘信顺，张先芳.高效液相色谱法测定白芍总甙中芍药甙含量.中药材，1995，26(7)：349.
[3]张庆生，王宝琴.薄层扫描法测定白芍及复方白芍片中芍药甙的含量.中国中药杂志，1991，16(9)：542.
[4]章崇仪，曹解宇.白芍中芍药甙提取的溶剂比较.中成药，1994，16(11)：6.
收稿日期：1998-12-07, 百拇医药