生物活性肽-Pm对6 Gy 60Co γ射线照射小鼠白细胞介素-6的影响
作者：董伟 王录焕 宋旭华 孟宪钧
单位：北京，解放军总医院实验外科研究室 100853
关键词：
中华放射医学与防护杂志000116 研究辐射损伤的治疗和预防不仅有益于辐射突发事件的防治，而且对医院肿瘤病人放、化疗过程中给机体带来的不利影响也有重要意义。目前辐射损伤防治的药物研究主要集中在化学药品、中药制剂、生物活性物质等方面[1，2]，它们均显示出不同程度的防治效果。本文作者观察生物活性肽-Pm (简称BAP-Pm) 对照射小鼠白细胞介素-6 (IL-6)的影响，意旨为提高临床放、化疗患者机体的免疫力寻找有效措施。
一、材料和方法
1.实验动物及分组：昆明种小鼠，由本院医学实验动物中心提供，体重18～22 g，雌雄各半，随机分为正常对照组，照射对照组，照射+BAP-Pm，每组9～10只，照射+BAP-Pm组动物经食管分别喂入0.1、0.2和0.3 ml BAP-Pm，每天1次，连续喂15 d，其余动物同时喂入等量蒸馏水。
, 百拇医药
2.照射条件：60Co γ射线全身1次6 Gy照射，吸收剂量率为1.703 Gy/min，在北京放射医学研究所钴源室照射。
3.药物BAP-Pm：取肌组织，剪碎、匀浆、离心，上清液经多级柱纯化即可。此物质相对分子质量4 000左右，凯氏定氮，含氮量10.33 mg/ml。
4.检测指标及方法： ① 血清及肝组织IL-6测定：照射后第4天，断头取血，3 000 r*min-1离心，收集血清。腹部中线切口摘取肝脏，立即制备10%肝匀浆，肝匀浆经5 000r*min-1离心20 min，收集上清液，取微量测蛋白，其余用于测IL-6，试剂盒由北京北方生物技术研究所提供。结果用ng/L和pg/mg蛋白表示。② 白细胞(WBC)和血红蛋白(Hb)测定：尾静脉取血20 μl，常规方法测定。③ 结果采用t检验方法进行统计学处理。
, 百拇医药 二、结果
动物在接受6 Gy照射后第4天，照射对照组血清和肝组织中IL-6均明显增加，照射前接受15次0.2和0.3 ml BAP-Pm的动物与照射对照组比较，血清及肝匀浆液中IL-6明显降低，接受0.1 ml BAP-Pm的动物与照射对照组差异无显著性。照射对照组动物外周血WBC、Hb在照射后第4天明显降低，WBC下降至正常的48%，Hb下降至正常的40%，BAP-Pm阻滞WBC的下降，在0.1、0.2和0.3 ml 3个剂量组均有显示，而阻滞Hb的下降仅在0.2、0.3 ml组显著，见表1。
三、讨论
据报道6 Gy 60Co γ射线一次全身照射可引起小鼠骨髓型急性放射病，其主要特征是严重感染、出血、机体免疫防御机能明显降低，常用以评价增强或抑制机体免疫药物。因此本研究把照射剂量选择在6 Gy。预试验显示，照射后第4天，小鼠外周血WBC计数明显降低，提示动物的免疫功能下降，所以把观测点放在照射后第4天。
, http://www.100md.com
大量研究结果表明，免疫系统和炎性细胞释放的细胞因子，在调控疾病的发生发展上起着十分重要的作用[3]，IL-6就是其中之一。现已发现，类风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、尿毒症等患者IL-6水平均有升高。本研究观察到小鼠经6 Gy照射，肝和血清IL-6水平明显升高，表明照射使体细胞受损。但是当我们照射前给小鼠口服15 d BAP-Pm时，观察到0.2、0.3 ml组动物肝组织和血清中IL-6的增加明显被阻滞，表明BAP-Pm有减轻组织损伤及对IL-6的产生有明显的调节作用，这种作用与用药剂量有关。与此同时还观察到BAP-Pm使受照射动物外周血WBC、Hb明显升高，表明BAP-Pm对受照射动物的造血功能也有保护作用。
表1 BAP-Pm对受照射小鼠IL-6、WBC、Hb的影响 组别
动物数
(只)
, http://www.100md.com 肝脏
(pg/mg)
血清
(ng/L)
WBC
(×109/L)
Hb
(g/L)
正常对照组
10
9.0±2.1
2.0±0.3
14.1±2.2
, http://www.100md.com
140.8±"8.8
照射对照组
9
12.6±2.2**
2.6±0.5**
6.7±1.2**
53.5±24.9**
照射+BAP-Pm组
0.1 ml
9
12.6±1.4
, 百拇医药
2.1±0.4
9.1±1.2＃
82.2±29.2
0.2 ml
10
9.8±1.9＃
1.9±0.4＃＃
13.5±2.8＃＃
85.6±13.6＃
0.3 ml
9
, 百拇医药
9.5±2.1＃
2.0±0.5＃
12.1±2.2＃＃
84.4±21.7＃
注：与正常组比较：**P<0.01；与照射对照组比较：＃P<0.05，＃＃P<0.01 综上所述，BAP-Pm抑制受照射动物肝组织，血清中IL-6过量分泌，提高外周血WBC计数和Hb含量。提示：BAP-Pm有增强机体免疫力，改善造血功能的作用，对放、化疗过程中引起的免疫功能降低有重要意义，具有一定应用前景。■
参考文献
[1]曹弃元，李永强，陈成钦，等.五种中药制剂体外抗放射作用的研究.中华放射医学与防护杂志，1994，14：44-45.
[2]贺福初，宫锋.细胞因子在放射医学及辐射防护中的应用.中华放射医学与防护杂志，1994，14：219-220.
[3]Henke A,Mohr C,Sprenger H,et al. Coxsackie virus B3-induced production of tumor necrosis factor-α,IL-1β,and IL-6 in human monocytes. J Immunol,1992,148:2270-2277.
收稿日期:1999-03-25, http://www.100md.com
单位：北京，解放军总医院实验外科研究室 100853
关键词：
中华放射医学与防护杂志000116 研究辐射损伤的治疗和预防不仅有益于辐射突发事件的防治，而且对医院肿瘤病人放、化疗过程中给机体带来的不利影响也有重要意义。目前辐射损伤防治的药物研究主要集中在化学药品、中药制剂、生物活性物质等方面[1，2]，它们均显示出不同程度的防治效果。本文作者观察生物活性肽-Pm (简称BAP-Pm) 对照射小鼠白细胞介素-6 (IL-6)的影响，意旨为提高临床放、化疗患者机体的免疫力寻找有效措施。
一、材料和方法
1.实验动物及分组：昆明种小鼠，由本院医学实验动物中心提供，体重18～22 g，雌雄各半，随机分为正常对照组，照射对照组，照射+BAP-Pm，每组9～10只，照射+BAP-Pm组动物经食管分别喂入0.1、0.2和0.3 ml BAP-Pm，每天1次，连续喂15 d，其余动物同时喂入等量蒸馏水。
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2.照射条件：60Co γ射线全身1次6 Gy照射，吸收剂量率为1.703 Gy/min，在北京放射医学研究所钴源室照射。
3.药物BAP-Pm：取肌组织，剪碎、匀浆、离心，上清液经多级柱纯化即可。此物质相对分子质量4 000左右，凯氏定氮，含氮量10.33 mg/ml。
4.检测指标及方法： ① 血清及肝组织IL-6测定：照射后第4天，断头取血，3 000 r*min-1离心，收集血清。腹部中线切口摘取肝脏，立即制备10%肝匀浆，肝匀浆经5 000r*min-1离心20 min，收集上清液，取微量测蛋白，其余用于测IL-6，试剂盒由北京北方生物技术研究所提供。结果用ng/L和pg/mg蛋白表示。② 白细胞(WBC)和血红蛋白(Hb)测定：尾静脉取血20 μl，常规方法测定。③ 结果采用t检验方法进行统计学处理。
, 百拇医药 二、结果
动物在接受6 Gy照射后第4天，照射对照组血清和肝组织中IL-6均明显增加，照射前接受15次0.2和0.3 ml BAP-Pm的动物与照射对照组比较，血清及肝匀浆液中IL-6明显降低，接受0.1 ml BAP-Pm的动物与照射对照组差异无显著性。照射对照组动物外周血WBC、Hb在照射后第4天明显降低，WBC下降至正常的48%，Hb下降至正常的40%，BAP-Pm阻滞WBC的下降，在0.1、0.2和0.3 ml 3个剂量组均有显示，而阻滞Hb的下降仅在0.2、0.3 ml组显著，见表1。
三、讨论
据报道6 Gy 60Co γ射线一次全身照射可引起小鼠骨髓型急性放射病，其主要特征是严重感染、出血、机体免疫防御机能明显降低，常用以评价增强或抑制机体免疫药物。因此本研究把照射剂量选择在6 Gy。预试验显示，照射后第4天，小鼠外周血WBC计数明显降低，提示动物的免疫功能下降，所以把观测点放在照射后第4天。
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大量研究结果表明，免疫系统和炎性细胞释放的细胞因子，在调控疾病的发生发展上起着十分重要的作用[3]，IL-6就是其中之一。现已发现，类风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、尿毒症等患者IL-6水平均有升高。本研究观察到小鼠经6 Gy照射，肝和血清IL-6水平明显升高，表明照射使体细胞受损。但是当我们照射前给小鼠口服15 d BAP-Pm时，观察到0.2、0.3 ml组动物肝组织和血清中IL-6的增加明显被阻滞，表明BAP-Pm有减轻组织损伤及对IL-6的产生有明显的调节作用，这种作用与用药剂量有关。与此同时还观察到BAP-Pm使受照射动物外周血WBC、Hb明显升高，表明BAP-Pm对受照射动物的造血功能也有保护作用。
表1 BAP-Pm对受照射小鼠IL-6、WBC、Hb的影响 组别
动物数
(只)
, http://www.100md.com 肝脏
(pg/mg)
血清
(ng/L)
WBC
(×109/L)
Hb
(g/L)
正常对照组
10
9.0±2.1
2.0±0.3
14.1±2.2
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140.8±"8.8
照射对照组
9
12.6±2.2**
2.6±0.5**
6.7±1.2**
53.5±24.9**
照射+BAP-Pm组
0.1 ml
9
12.6±1.4
, 百拇医药
2.1±0.4
9.1±1.2＃
82.2±29.2
0.2 ml
10
9.8±1.9＃
1.9±0.4＃＃
13.5±2.8＃＃
85.6±13.6＃
0.3 ml
9
, 百拇医药
9.5±2.1＃
2.0±0.5＃
12.1±2.2＃＃
84.4±21.7＃
注：与正常组比较：**P<0.01；与照射对照组比较：＃P<0.05，＃＃P<0.01 综上所述，BAP-Pm抑制受照射动物肝组织，血清中IL-6过量分泌，提高外周血WBC计数和Hb含量。提示：BAP-Pm有增强机体免疫力，改善造血功能的作用，对放、化疗过程中引起的免疫功能降低有重要意义，具有一定应用前景。■
参考文献
[1]曹弃元，李永强，陈成钦，等.五种中药制剂体外抗放射作用的研究.中华放射医学与防护杂志，1994，14：44-45.
[2]贺福初，宫锋.细胞因子在放射医学及辐射防护中的应用.中华放射医学与防护杂志，1994，14：219-220.
[3]Henke A,Mohr C,Sprenger H,et al. Coxsackie virus B3-induced production of tumor necrosis factor-α,IL-1β,and IL-6 in human monocytes. J Immunol,1992,148:2270-2277.
收稿日期:1999-03-25, http://www.100md.com