肠必清肠溶颗粒剂的质量控制*
作者：田莉 陈象青 刘圣 黄守正
单位：黄守正(安徽中医学院99级毕业生，合肥市 230001)；田莉 陈象青 刘圣(安徽省立医院，合肥市 230001)
关键词：肠必清肠溶颗粒剂；番泻苷；橙皮苷；质量控制
中国药房000106
摘 要：目的：建立肠必清肠溶颗粒剂的质量控制方法。方法：参照《中国药典》类似制剂的质量要求，对本品的质量进行了全面检测，并用薄层色谱法对本品的番泻苷A和橙皮苷进行定性鉴别，用比色法对总番泻苷进行含量测定。结果：本品的粒度、水分、释放度等均符合规定。薄层定性方法斑点清晰，分离完全，易于区别。含量测定方法精密度<1.6%，平均回收率为97.40%(RSD=1.06%，n=5)。结论：本文所建立的定性及定量方法准确、可靠，重现性好，可作为该制剂的质量控制方法。
, http://www.100md.com
中图分类号：R9442+7 文献标识码：B
文章编号：1001-0408(2000)01-0011-02
Quality Control of Chang Bi Qing Enteric-coated Granules
TIAN Li,CHEN Xiangqing,LIU Sheng，CHEN Liming
(Anhui Provincial Hospital,Hefei 230001)
HUANG Shouzheng
ABSTRACT：OBJECTIVE：To establish the quality control method for Chang Bi Qing enteric-coated granules.METHODS:The preparation was monitored according to the quality requirements of similar preparations in the Chinese pharmacopoeia.Its ingredients,sennoside A and hesperidin,were identified by TLC.The total sennosides in the preparation was quantitatively detected by colorimetry.RESULTS：The granularity,water content and release rate met the requirements.The spots were clear and separated completely in the TLC methods.The average recovery of the determining method was 97.40% with a RSD of 1.06% and its repeatability was good(standard derivations<1.6%).CONCLUSION：The quality standard of the preparation was provided.The methods of identification and determination were accurate and reproducible.It can be used for quality control of the preparation.
, 百拇医药
KEY WORDS：Chang Bi Qing enteric-coated granule;sennoside;hesperidin;quality control.▲
肠必清肠溶颗粒剂(CBQ)是以番泻叶为主药，以青皮、木香等为辅佐药的新型中药制剂。其主要制备工艺为中药材经适宜的溶媒提取后，再浓缩、喷雾干燥，可得粒径为80目～120目、含水量小于5%的黄褐色粉末，其总番泻苷提取率可达93.2%，干粉得率为21.05%[1]。粉末再以微晶纤维素作赋形剂，乙醇为润滑剂，PVP为粘合剂制成丸芯[2]，最后将丸芯用聚丙烯酸树脂Ⅱ号和Ⅲ号包衣，即得。本品具有通便和清肠之功效。为保证药品的内在质量，本文初步探讨了该制剂的质量控制方法。
1 仪器与试剂
HP8453紫外-可见分光光度计(美国惠普公司，Pentium CPU);RC-3B药物溶出仪(天津大学无线电厂)；TG328A型分析天平(上海天平仪器厂)；XK96-A型快速混合器(江苏姜堰市新康仪器厂)。
, http://www.100md.com
潘泻叶、青皮、木香等药材经过安徽省药品检验所全项检验，均符合《中国药典》(一部)1995年版各药材项目下规定；三氯甲烷、碳酸氢钠、乙醚等试剂均为分析纯；番泻苷A对照品(日本和光纯药)；肠必清肠溶颗粒剂为本室自制。
2 性状
本品为灰褐色圆形颗粒；除去薄膜衣后为黄褐色圆形颗粒。味微苦。
3 鉴别
3.1 番泻叶：取CBQ约4g，研磨成粉，加70%四氢呋喃水溶液40ml，浸润20分钟，超声提取30分钟，振荡20分钟，离心；取上清液，加13gNaCl，超声30分钟，振荡20分钟，离心，静置2小时；水层用1mol/L盐酸调pH至1.5，加四氢呋喃15ml，超声15分钟，振荡10分钟，静置2小时，分取四氢呋喃10ml，作为供试品溶液。另取番泻苷A对照品用磷酸盐缓冲液(pH6.8)配制成1.19mg/ml，作为对照品溶液。按《中国药典》(一部)1995年版附录VIB薄层色谱法(下同)，吸取上述供试品溶液8μl，对照品溶液5μl，阴性对照溶液8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶正丙醇∶水∶冰醋酸(40∶40∶30∶1)为展开剂，展开，取出晾干。置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色荧光斑点。喷以20%硝酸溶液，在120℃加热10分钟，冷却，再喷以5%氢氧化钾的50%乙醇溶液。在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显暗红色斑点[3](番泻苷A的Rf=0.67)，见图1。
, 百拇医药
1-阴性对照；2-番泻苷A；3-CBQ
图1 番泻叶的薄层色谱图
3.2 青皮：取CBQ约2g，研磨成粉，加甲醇20ml，加热回流20分钟，过滤，取滤液10ml，浓缩至2ml，作供试品溶液。取橙皮苷对照品，用甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法，吸取上述供试品溶液2μl，对照品溶液2μl，阴性对照溶液8μl，分别点于用0.5%氢氧化钠制备的同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水(100∶17∶13)为展开剂，喷以三氯化铝试液。置紫外灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显亮黄色荧光斑点(橙皮苷的Rf=0.48)，见图2。
1-阴性对照；2-橙皮苷；3-CBQ
图2 青皮的薄层色谱图
, 百拇医药
4 检查
4.1 粒径：取本品5袋，称定重量，置药筛内过筛，结果全部颗粒通过20目筛，而不过40目筛，其粒径在0.5mm～1.0mm之内。共测定5个批号(990429、990504、990507、990518、990530)的样品，均符合《中国药典》(一部)1995年版中浓缩微丸的有关规定。
4.2 水分：取本品2g，按《中国药典》(一部)1995年版附录IXH第1法(烘干法)测定水分。共测定5个批号(990429、990504、990507、990518、990530)的样品，含水量均小于5%(4.06%～4.81%)，均符合《中国药典》(一部)1995年版中浓缩微丸的有关规定。
4.3 释放度：参照西药肠溶片的规定，采用《中国药典》(二部)1995年版释放度测定第2法(浆法，75rpm)，进行该制剂的释放度测定，共测定5个批号(990429、990504、990507、990518、990530)样品。结果表明，按标示量为18mg/g计算，本品的释放度符合《中国药典》(二 部)1995年版有关释放度的要求。(本品在0.1mol/L 盐酸中2小时释放百分率为1.74%～9.43%，在pH6.8磷酸盐缓冲液中45分钟的释放百分率为90.53%～103.6%)。
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5 含量测定
本制剂的主药番泻叶的主要有效成分为总番泻苷，其含 量测定方法主要按照《中国药典》(一部)1995年版番泻叶项下含量测定方法，并在提取方面加以改进。
5.1 样品的测定：取样品3g，研细，精密称取适量(约相当于总番泻苷3mg)，加水30.0ml，旋涡混合2分钟，离心；取上清液20.0ml，加2mol/L盐酸0.1ml，摇匀，用三氯甲烷提取3次，每次15ml，水层加入0.1g碳酸氢钠，振摇3分钟，离心；取上清液10.0ml，加入10.5%三氯化铁20ml，沸水浴回流20分钟，加盐酸1.0ml，继续加热20分钟，冷却，用乙醚提取3次，每次25ml，醚液用水清洗2次，每次15ml，醚液过滤并定容至100.0ml，摇匀；取醚液10ml，水浴挥发至干，加0.5%醋酸镁甲醇溶液10.0ml，混匀，以甲醇为空白，在515nm处测定吸收度，按番泻苷B的吸收系数为(E1%1cm)240计算，即得总番泻苷含量。
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5.2 精密度实验：取3个批号的样品，按5.1项下的方法测定，每批样品测定5次，结果见表1。
表1 精密度实验结果
批号
测得值
平均值
RSD%
981231
19.73
19.31
18.94
19.40±0.32
1.65
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19.36
19.66
990329
18.25
18.68
18.78
18.39±0.32
1.74
18.13
18.09
990429
20.41
20.77
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19.86
20.32±0.33
1.62
20.26
20.33
5.3 回收率试验：取已知含量的样品细粉0.1g，精密称定，加入3.1项下番泻苷A对照品溶液1.0ml，加水29.0ml，旋涡混合2分钟，余下操作同5.1，结果见表2。
表2 加样回收率实验结果
样品含量(mg)
加入量(mg)
测得量(mg)
, 百拇医药
回收率(%)
平均回收率(%)
1.83
1.19
2.91
96.35
1.76
1.19
2.81
95.25
1.45
1.19
2.53
, 百拇医药
95.83
97.40
1.78
1.19
3.01
101.34
RSD=2.54%
1.64
1.19
2.78
98.23
5.4 阴性对照试验：按肠必清处方比例，取青皮、木香适量投料，以同样的工艺制备空白肠溶颗粒，研细，取约0.15g， 精密称定，加水30.0ml，余下操作同4.1项。结果表明，处方的其它成分对总番泻苷的含量测定没有干扰。
, 百拇医药
5.5 含量限度的确定：依法测定14个批号的样品，结果见表3。测定结果，本制剂的含量限度以不低于18mg/g为宜。
表3 14批样品含量测定结果
批号
总番泻苷含量(mg/g)
批号
总番泻苷含量(mg/g)
981012
18.39
940420
23.16
981019
, 百拇医药
17.91
990425
22.71
981103
18.74
990429
20.32
981116
18.84
990504
21.28
981231
19.40
, 百拇医药
990507
21.08
990407
22.66
990518
20.65
990413
23.62
990530
23.04
6 讨论
6.1 本品番泻叶薄层定性方法，曾采用《中国药典》(一部)1995年版番泻叶项下的方法，但分离效果较差，斑点不清晰。经摸索，本文方法效果较好，可以作为质量控制方法。
, 百拇医药
6.2 含量测定方法的提取条件中，旋涡混合2分钟与水浴回流15分钟效果相同，可能是由于该制剂为番泻叶提取物，番泻苷更易提取，从而可以简化操作步骤。
6.3 本文含量测定方法操作比较繁锁，但因所需试剂及设备易得，在目前国内尚无番泻苷标准品的情况下，仍可作为一种质量控制的方法。
6.4 本品做总番泻苷含量回收率实验也可用已知含量的番泻叶细粉，只是番泻叶细粉应先用水浴回流15分钟，再加入已知含量的制剂粉末，否则回收率会偏低。
6.5 比色法测定总番泻苷含量的灵敏度较差，在进行释放度试验时所需样品量较大(20ml)，对研究本品的溶出曲线有一定的困难。目前正在摸索高效液相色谱测定本品中番泻苷A含量的方法，一旦方法成熟，即可用于本品的释放度研究。
6.6 《中国药典》尚未收载此种剂型，其质量标准只能参照类似剂型制定，粒度、水分、检查项目参照《中国药典》(一部)1995年版丸剂项下浓缩微丸的规定；释放度则参照《中国药典》(二部)1995年版有关规定。该剂型质量标准的具体条例还需进一步摸索。■
参考文献：
[1]陈象清，陈礼明，田 莉，等.肠必清制剂提取及喷雾干燥工艺[J].中国药房，1998，9(6)：248
[2]刘 圣，陈象清，田 莉，等.快速搅拌制备肠必清微丸的工艺研究[J].中国药房，1999，10(5)：205
[3]日本药局方[S].1991：965
收稿日期：1999-09-27
修回日期：1999-11-07, 百拇医药
单位：黄守正(安徽中医学院99级毕业生，合肥市 230001)；田莉 陈象青 刘圣(安徽省立医院，合肥市 230001)
关键词：肠必清肠溶颗粒剂；番泻苷；橙皮苷；质量控制
中国药房000106
摘 要：目的：建立肠必清肠溶颗粒剂的质量控制方法。方法：参照《中国药典》类似制剂的质量要求，对本品的质量进行了全面检测，并用薄层色谱法对本品的番泻苷A和橙皮苷进行定性鉴别，用比色法对总番泻苷进行含量测定。结果：本品的粒度、水分、释放度等均符合规定。薄层定性方法斑点清晰，分离完全，易于区别。含量测定方法精密度<1.6%，平均回收率为97.40%(RSD=1.06%，n=5)。结论：本文所建立的定性及定量方法准确、可靠，重现性好，可作为该制剂的质量控制方法。
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中图分类号：R9442+7 文献标识码：B
文章编号：1001-0408(2000)01-0011-02
Quality Control of Chang Bi Qing Enteric-coated Granules
TIAN Li,CHEN Xiangqing,LIU Sheng，CHEN Liming
(Anhui Provincial Hospital,Hefei 230001)
HUANG Shouzheng
ABSTRACT：OBJECTIVE：To establish the quality control method for Chang Bi Qing enteric-coated granules.METHODS:The preparation was monitored according to the quality requirements of similar preparations in the Chinese pharmacopoeia.Its ingredients,sennoside A and hesperidin,were identified by TLC.The total sennosides in the preparation was quantitatively detected by colorimetry.RESULTS：The granularity,water content and release rate met the requirements.The spots were clear and separated completely in the TLC methods.The average recovery of the determining method was 97.40% with a RSD of 1.06% and its repeatability was good(standard derivations<1.6%).CONCLUSION：The quality standard of the preparation was provided.The methods of identification and determination were accurate and reproducible.It can be used for quality control of the preparation.
, 百拇医药
KEY WORDS：Chang Bi Qing enteric-coated granule;sennoside;hesperidin;quality control.▲
肠必清肠溶颗粒剂(CBQ)是以番泻叶为主药，以青皮、木香等为辅佐药的新型中药制剂。其主要制备工艺为中药材经适宜的溶媒提取后，再浓缩、喷雾干燥，可得粒径为80目～120目、含水量小于5%的黄褐色粉末，其总番泻苷提取率可达93.2%，干粉得率为21.05%[1]。粉末再以微晶纤维素作赋形剂，乙醇为润滑剂，PVP为粘合剂制成丸芯[2]，最后将丸芯用聚丙烯酸树脂Ⅱ号和Ⅲ号包衣，即得。本品具有通便和清肠之功效。为保证药品的内在质量，本文初步探讨了该制剂的质量控制方法。
1 仪器与试剂
HP8453紫外-可见分光光度计(美国惠普公司，Pentium CPU);RC-3B药物溶出仪(天津大学无线电厂)；TG328A型分析天平(上海天平仪器厂)；XK96-A型快速混合器(江苏姜堰市新康仪器厂)。
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潘泻叶、青皮、木香等药材经过安徽省药品检验所全项检验，均符合《中国药典》(一部)1995年版各药材项目下规定；三氯甲烷、碳酸氢钠、乙醚等试剂均为分析纯；番泻苷A对照品(日本和光纯药)；肠必清肠溶颗粒剂为本室自制。
2 性状
本品为灰褐色圆形颗粒；除去薄膜衣后为黄褐色圆形颗粒。味微苦。
3 鉴别
3.1 番泻叶：取CBQ约4g，研磨成粉，加70%四氢呋喃水溶液40ml，浸润20分钟，超声提取30分钟，振荡20分钟，离心；取上清液，加13gNaCl，超声30分钟，振荡20分钟，离心，静置2小时；水层用1mol/L盐酸调pH至1.5，加四氢呋喃15ml，超声15分钟，振荡10分钟，静置2小时，分取四氢呋喃10ml，作为供试品溶液。另取番泻苷A对照品用磷酸盐缓冲液(pH6.8)配制成1.19mg/ml，作为对照品溶液。按《中国药典》(一部)1995年版附录VIB薄层色谱法(下同)，吸取上述供试品溶液8μl，对照品溶液5μl，阴性对照溶液8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶正丙醇∶水∶冰醋酸(40∶40∶30∶1)为展开剂，展开，取出晾干。置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色荧光斑点。喷以20%硝酸溶液，在120℃加热10分钟，冷却，再喷以5%氢氧化钾的50%乙醇溶液。在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显暗红色斑点[3](番泻苷A的Rf=0.67)，见图1。
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1-阴性对照；2-番泻苷A；3-CBQ
图1 番泻叶的薄层色谱图
3.2 青皮：取CBQ约2g，研磨成粉，加甲醇20ml，加热回流20分钟，过滤，取滤液10ml，浓缩至2ml，作供试品溶液。取橙皮苷对照品，用甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法，吸取上述供试品溶液2μl，对照品溶液2μl，阴性对照溶液8μl，分别点于用0.5%氢氧化钠制备的同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水(100∶17∶13)为展开剂，喷以三氯化铝试液。置紫外灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显亮黄色荧光斑点(橙皮苷的Rf=0.48)，见图2。
1-阴性对照；2-橙皮苷；3-CBQ
图2 青皮的薄层色谱图
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4 检查
4.1 粒径：取本品5袋，称定重量，置药筛内过筛，结果全部颗粒通过20目筛，而不过40目筛，其粒径在0.5mm～1.0mm之内。共测定5个批号(990429、990504、990507、990518、990530)的样品，均符合《中国药典》(一部)1995年版中浓缩微丸的有关规定。
4.2 水分：取本品2g，按《中国药典》(一部)1995年版附录IXH第1法(烘干法)测定水分。共测定5个批号(990429、990504、990507、990518、990530)的样品，含水量均小于5%(4.06%～4.81%)，均符合《中国药典》(一部)1995年版中浓缩微丸的有关规定。
4.3 释放度：参照西药肠溶片的规定，采用《中国药典》(二部)1995年版释放度测定第2法(浆法，75rpm)，进行该制剂的释放度测定，共测定5个批号(990429、990504、990507、990518、990530)样品。结果表明，按标示量为18mg/g计算，本品的释放度符合《中国药典》(二 部)1995年版有关释放度的要求。(本品在0.1mol/L 盐酸中2小时释放百分率为1.74%～9.43%，在pH6.8磷酸盐缓冲液中45分钟的释放百分率为90.53%～103.6%)。
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5 含量测定
本制剂的主药番泻叶的主要有效成分为总番泻苷，其含 量测定方法主要按照《中国药典》(一部)1995年版番泻叶项下含量测定方法，并在提取方面加以改进。
5.1 样品的测定：取样品3g，研细，精密称取适量(约相当于总番泻苷3mg)，加水30.0ml，旋涡混合2分钟，离心；取上清液20.0ml，加2mol/L盐酸0.1ml，摇匀，用三氯甲烷提取3次，每次15ml，水层加入0.1g碳酸氢钠，振摇3分钟，离心；取上清液10.0ml，加入10.5%三氯化铁20ml，沸水浴回流20分钟，加盐酸1.0ml，继续加热20分钟，冷却，用乙醚提取3次，每次25ml，醚液用水清洗2次，每次15ml，醚液过滤并定容至100.0ml，摇匀；取醚液10ml，水浴挥发至干，加0.5%醋酸镁甲醇溶液10.0ml，混匀，以甲醇为空白，在515nm处测定吸收度，按番泻苷B的吸收系数为(E1%1cm)240计算，即得总番泻苷含量。
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5.2 精密度实验：取3个批号的样品，按5.1项下的方法测定，每批样品测定5次，结果见表1。
表1 精密度实验结果
批号
测得值
平均值
RSD%
981231
19.73
19.31
18.94
19.40±0.32
1.65
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19.36
19.66
990329
18.25
18.68
18.78
18.39±0.32
1.74
18.13
18.09
990429
20.41
20.77
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19.86
20.32±0.33
1.62
20.26
20.33
5.3 回收率试验：取已知含量的样品细粉0.1g，精密称定，加入3.1项下番泻苷A对照品溶液1.0ml，加水29.0ml，旋涡混合2分钟，余下操作同5.1，结果见表2。
表2 加样回收率实验结果
样品含量(mg)
加入量(mg)
测得量(mg)
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回收率(%)
平均回收率(%)
1.83
1.19
2.91
96.35
1.76
1.19
2.81
95.25
1.45
1.19
2.53
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95.83
97.40
1.78
1.19
3.01
101.34
RSD=2.54%
1.64
1.19
2.78
98.23
5.4 阴性对照试验：按肠必清处方比例，取青皮、木香适量投料，以同样的工艺制备空白肠溶颗粒，研细，取约0.15g， 精密称定，加水30.0ml，余下操作同4.1项。结果表明，处方的其它成分对总番泻苷的含量测定没有干扰。
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5.5 含量限度的确定：依法测定14个批号的样品，结果见表3。测定结果，本制剂的含量限度以不低于18mg/g为宜。
表3 14批样品含量测定结果
批号
总番泻苷含量(mg/g)
批号
总番泻苷含量(mg/g)
981012
18.39
940420
23.16
981019
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17.91
990425
22.71
981103
18.74
990429
20.32
981116
18.84
990504
21.28
981231
19.40
, 百拇医药
990507
21.08
990407
22.66
990518
20.65
990413
23.62
990530
23.04
6 讨论
6.1 本品番泻叶薄层定性方法，曾采用《中国药典》(一部)1995年版番泻叶项下的方法，但分离效果较差，斑点不清晰。经摸索，本文方法效果较好，可以作为质量控制方法。
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6.2 含量测定方法的提取条件中，旋涡混合2分钟与水浴回流15分钟效果相同，可能是由于该制剂为番泻叶提取物，番泻苷更易提取，从而可以简化操作步骤。
6.3 本文含量测定方法操作比较繁锁，但因所需试剂及设备易得，在目前国内尚无番泻苷标准品的情况下，仍可作为一种质量控制的方法。
6.4 本品做总番泻苷含量回收率实验也可用已知含量的番泻叶细粉，只是番泻叶细粉应先用水浴回流15分钟，再加入已知含量的制剂粉末，否则回收率会偏低。
6.5 比色法测定总番泻苷含量的灵敏度较差，在进行释放度试验时所需样品量较大(20ml)，对研究本品的溶出曲线有一定的困难。目前正在摸索高效液相色谱测定本品中番泻苷A含量的方法，一旦方法成熟，即可用于本品的释放度研究。
6.6 《中国药典》尚未收载此种剂型，其质量标准只能参照类似剂型制定，粒度、水分、检查项目参照《中国药典》(一部)1995年版丸剂项下浓缩微丸的规定；释放度则参照《中国药典》(二部)1995年版有关规定。该剂型质量标准的具体条例还需进一步摸索。■
参考文献：
[1]陈象清，陈礼明，田 莉，等.肠必清制剂提取及喷雾干燥工艺[J].中国药房，1998，9(6)：248
[2]刘 圣，陈象清，田 莉，等.快速搅拌制备肠必清微丸的工艺研究[J].中国药房，1999，10(5)：205
[3]日本药局方[S].1991：965
收稿日期：1999-09-27
修回日期：1999-11-07, 百拇医药