被动吸烟孕兔胎盘形态学改变与孕兔血及脐血中一氧化氮的关系
作者：马太芳 郭贤熙 李芳兰 祁文秀 徐军全 蔡文慧
单位：马太芳(山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200)；郭贤熙(山西省汾阳医院，山西 汾阳 032200)；李芳兰(山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200)；祁文秀(山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200)；徐军全(山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200)；蔡文慧(山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200)
关键词：胎儿生长迟缓；被动吸烟；疾病模型；动物；胎盘；一氧化氮
宁夏医学杂志000105 【摘要】 目的 探讨被动吸烟与血中一氧化氮的关系。方法 在采用被动吸烟建立孕兔胎儿生长迟缓动物模型的基础上，对孕兔胎盘组织进行计量分析，以了解其与孕兔血及脐血中一氧化氮(NO)水平的关系。结果 吸烟可使胎盘绒毛面积百分比及绒毛毛细血管百分比降低，而且孕兔脐血NO水平高于母血NO水平(P<0.05)而吸烟组母血及脐血中NO水平明显低于无被动吸烟组。结论 孕期吸烟可使胎盘组织形态学改变，导致母血及脐血中NO的水平降低。
, http://www.100md.com
【中图分类号】 R-332 【文献标识码】 A
The relation between placental morphologic changes and serum nitric oxid levels of rabbits
and umbilical blood in intrauterine growth retardation
MAI Tai-fang GUO Xian-xi LI Fang-lan et al
(Dept.of Histology and Embroylogy，Coll.of Fenyang，Shanxi Med.University，Fenyang 032200，China)
【Abstract】 Objectives To study the relation between placental morphologic changes and levels of rabbits and umbilical serum nitric oxide (NO) in intrauterine growth retardation (IUGR) resulted from exposure to cigarette smoking.Methods Morphometriological feature image anlysis were applied to study placental morphologic changes in cigarette smoking with IUGR，The concentration of serum NO were determine with Luo xiang-dong method.Results The placental villus area and the capillary area in villus were decreased significantly in cigarette smoking with IUGR than that of the control group，NO levels of umbilical cord were higher than that of rabbits serum in both groups(P<0.05)，the rabbits and umbilical NO concentration in cigarette smoking with IUGR decreased significantly when compared with that in the control group.Conclusions The obvious placental morphologic changes occurred in rabbits in cigarette smoking with IUGR caused noticeably lower NO levels in rabbits and umbilical serum.
, 百拇医药
【Key words】 Smoking，passive；Fetal growth retardation；Disease models，animal；Placenta，nitric oxide
有关胎儿生长迟缓(IUGR)病理改变的研究，近年有不少报道[1]。而一氧化氮(NO)是内皮衍生舒张因子，是维持正常妊娠的重要调节因子，为此我们通过研究被动吸烟所致胎儿宫内生长迟缓时孕兔胎盘的形态学改变，以探讨其与母血及脐血中NO水平的关系。
1 材料和方法
1.1 动物模型的建立：选纯种健康新西兰大白兔16只，体重为2.6～3.5kg(本校动物室提供，自由取食，饮水)。分为两组，实验组9只，从妊娠第二天开始被动吸烟；对照组7只，无被动吸烟组。实验组采用被动吸烟的方法建立IUGR孕兔模型[2]。
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1.2 方法
1.2.1 孕28天剖宫产取出胎兔，娩出胎盘后，垂直切取胎盘中间带组织0.3cm×0.5cm，置于10%甲醛固定，将所获标本制成组织切片5μm，HE染色，应用CMIAS—007型多功能真彩色病理图象分析系统(空军总医院生物医学工程研究所产品)对胎盘组织进行计量分析。每一胎盘组织切片计量分析5个图象，即切片组织的4个角和中部各一个图象，计算出其平均值。计量内容：(1)绒毛面积百分比(即绒毛面积占总面积比例)；(2)绒毛血管面积比(即绒毛内部毛细血管面积占绒毛面积的比例)。
1.2.2 两组孕兔剖宫产立即取孕兔耳静脉血1.5ml，脐血4ml，离心取血清置-20℃冰箱保存，测定方法采用罗向东[3]法间接测定一氧化氮(NO)含量。
1.3 数据处理：采用统计学t检验。
2 结果
, 百拇医药
2.1 胎兔的生长发育：各组动物胎兔的体重，IUGR发生率见表1。两组比较差异有显著性。其中IUGR的诊断，以对照组平均体重减2倍标准差作为诊断标准。
表1 各组胎兔体重及IUGR发生率(
±s) 组别
动物数
体重(g)
发生率(%)
实验组
60
24.5±4.4
48.33
, http://www.100md.com 对照组
58
35.6±5.1
3.45
P值
<0.05
<0.01
2.2 胎盘组织的计量分析结果：各组胎盘绒毛面积，绒毛毛细血管面积及绒毛面积百分比，绒毛毛细血管面积比，见表2。两组比较差异有显著性。
表2 各组绒毛面积百分比及绒毛毛细血管
面积百分比(±s) 组别
, http://www.100md.com
绒毛
面积(μm2) 面积(%)
绒毛毛细血管
面积(μm2) 面积(%)
实验组
72.189±13.631
56.8±10.7
4.681±2.329
23.0±11.5
对照组
80.857±11.361
, 百拇医药
63.9±7.8
8.018±1.569
39.2±7.5
P值
<0.05
<0.05
2.3 两组孕兔血及脐血中NO水平的测定：实验组母血及脐血中NO水平明显低于对照组(P<0.01)，且各组脐血NO水平均明显高于母血(P<0.05)。见表3。表3 两组孕兔血及脐血中NO水平比较(±s) 组别
孕兔血(μg/g)
脐血(μg/g)
, 百拇医药
实验组
1.37±0.50
1.65±0.57
对照组
3.37±1.08
3.88±1.28
P值
<0.01
<0.01
3 讨论
3.1 孕兔胎盘形态学改变：胎盘是联系母儿间的重要器官，是母体向胎儿供应氧气及营养的唯一通道。正常妊娠时随妊娠的进展，胎盘早期绒毛逐渐成熟形成晚期绒毛。绒毛直径缩小，数目增多，绒毛表面积增大，同时血管数目增多[4]。从而满足胎儿不断生长发育的需要。本研究结果显示，妊娠期被动吸烟所致孕兔IUGR胎盘绒毛面积百分比和绒毛内毛细血管面积百分比显著低于对照组，被动吸烟所致IUGR胎兔体重也显著低于对照组。说明被动吸烟所致IUGR进胎盘绒毛的发育受到了损害，使母儿间物质交换减少或发生障碍。影响胎儿发育，导致胎兔体重减轻，而被动吸烟所致IUGR孕兔胎盘绒毛毛细血管面积百分比减少，可能是烟草中的毒性物质抑制了毛细血管内皮细胞的发育，以致面积减少。
, 百拇医药
3.2 NO与胎儿发育的关系：NO是近几年来发现的一种新的细胞信使分子，许多动物和人体实验发现，妊娠期多种组织中一氧化氮合酶催化活性增加，NO代谢产物水平升高，调节妊娠期血流动力学改变，以适应妊娠需要，体内高水平NO可以减弱胎盘血管对内皮素Ⅰ，血检素A2的敏感性来降低血管张力[5]，并可以通过防止血小板粘附和聚集(尤其是滋养层来源的NO)，抑制绒毛间隙的血小板聚集，以维持胎儿——胎盘循环的低阻力，保证胎儿的营养和氧气供应，有利于胎儿的发育，据myutt等报道[6]，在滋养细胞及胎儿血管内皮细胞中，均有一氧化氮合酶的表达故妊娠期脐血NO升高先于并高于母血，这是对胎儿的一种生理性保护机理。本实验结果与文献报道相一致，同时还显示被动吸烟所致IUGR胎兔、母血及脐血一氧化氮水平明显低于对照组(P<0.01)，这可能是由于IUGR时胎盘滋养层细胞及绒毛血管内皮受损，使滋养层来源的NO合成减少。
母血及脐血中的低水平NO，无法保证胎儿——胎盘循环的低阻力，导致胎盘灌流量下降，胎儿缺血、缺氧，又进一步加重胎儿宫内发育迟缓。由此可见，被动吸烟所致IUGR胎盘形态学改变与母血及脐血中NO水平有密切关系。
, 百拇医药
责编：马兴忠
作者简介：马太芳，女，山西医科大学汾阳学院，组织胚胎学讲师，曾发表论文数篇。
4 参考文献
[1]Salafia CM,Minior VK,Pezzullo CP,et al.Intrauterine growth restriction in infants of less than thirty-two weeks'gestation:associated placental pathologic features[J].Am Jobstet Gynecol,1995,173:1049
[2]张秀泉，等.被动吸烟宫内生长是迟缓孕兔母胎血浆氨基酸的变化[J].中华妇产科杂志，1993，28：582
[3]罗向东.敏捷的一氧化氮测定法[J].中华创伤杂志，1994，8：185
, http://www.100md.com
[4]唐敏.胎盘病理学[M].北京：人民卫生出版社，1987：133～134
[5]Mgatt L.Current topic:lontrol of vaslular resistance in humun placetu[J].Placenta,1992,13:329～334
[6]Myatt L.Brocknan D,Pqllol J,et al.Immunohistochemical lolalizution of nitril oxide synthase in the human placenta[J].Placenta,1992,14:487～495
收稿：1999—06—10
修回：1999—09—13, 百拇医药
单位：马太芳(山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200)；郭贤熙(山西省汾阳医院，山西 汾阳 032200)；李芳兰(山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200)；祁文秀(山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200)；徐军全(山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200)；蔡文慧(山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200)
关键词：胎儿生长迟缓；被动吸烟；疾病模型；动物；胎盘；一氧化氮
宁夏医学杂志000105 【摘要】 目的 探讨被动吸烟与血中一氧化氮的关系。方法 在采用被动吸烟建立孕兔胎儿生长迟缓动物模型的基础上，对孕兔胎盘组织进行计量分析，以了解其与孕兔血及脐血中一氧化氮(NO)水平的关系。结果 吸烟可使胎盘绒毛面积百分比及绒毛毛细血管百分比降低，而且孕兔脐血NO水平高于母血NO水平(P<0.05)而吸烟组母血及脐血中NO水平明显低于无被动吸烟组。结论 孕期吸烟可使胎盘组织形态学改变，导致母血及脐血中NO的水平降低。
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【中图分类号】 R-332 【文献标识码】 A
The relation between placental morphologic changes and serum nitric oxid levels of rabbits
and umbilical blood in intrauterine growth retardation
MAI Tai-fang GUO Xian-xi LI Fang-lan et al
(Dept.of Histology and Embroylogy，Coll.of Fenyang，Shanxi Med.University，Fenyang 032200，China)
【Abstract】 Objectives To study the relation between placental morphologic changes and levels of rabbits and umbilical serum nitric oxide (NO) in intrauterine growth retardation (IUGR) resulted from exposure to cigarette smoking.Methods Morphometriological feature image anlysis were applied to study placental morphologic changes in cigarette smoking with IUGR，The concentration of serum NO were determine with Luo xiang-dong method.Results The placental villus area and the capillary area in villus were decreased significantly in cigarette smoking with IUGR than that of the control group，NO levels of umbilical cord were higher than that of rabbits serum in both groups(P<0.05)，the rabbits and umbilical NO concentration in cigarette smoking with IUGR decreased significantly when compared with that in the control group.Conclusions The obvious placental morphologic changes occurred in rabbits in cigarette smoking with IUGR caused noticeably lower NO levels in rabbits and umbilical serum.
, 百拇医药
【Key words】 Smoking，passive；Fetal growth retardation；Disease models，animal；Placenta，nitric oxide
有关胎儿生长迟缓(IUGR)病理改变的研究，近年有不少报道[1]。而一氧化氮(NO)是内皮衍生舒张因子，是维持正常妊娠的重要调节因子，为此我们通过研究被动吸烟所致胎儿宫内生长迟缓时孕兔胎盘的形态学改变，以探讨其与母血及脐血中NO水平的关系。
1 材料和方法
1.1 动物模型的建立：选纯种健康新西兰大白兔16只，体重为2.6～3.5kg(本校动物室提供，自由取食，饮水)。分为两组，实验组9只，从妊娠第二天开始被动吸烟；对照组7只，无被动吸烟组。实验组采用被动吸烟的方法建立IUGR孕兔模型[2]。
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1.2 方法
1.2.1 孕28天剖宫产取出胎兔，娩出胎盘后，垂直切取胎盘中间带组织0.3cm×0.5cm，置于10%甲醛固定，将所获标本制成组织切片5μm，HE染色，应用CMIAS—007型多功能真彩色病理图象分析系统(空军总医院生物医学工程研究所产品)对胎盘组织进行计量分析。每一胎盘组织切片计量分析5个图象，即切片组织的4个角和中部各一个图象，计算出其平均值。计量内容：(1)绒毛面积百分比(即绒毛面积占总面积比例)；(2)绒毛血管面积比(即绒毛内部毛细血管面积占绒毛面积的比例)。
1.2.2 两组孕兔剖宫产立即取孕兔耳静脉血1.5ml，脐血4ml，离心取血清置-20℃冰箱保存，测定方法采用罗向东[3]法间接测定一氧化氮(NO)含量。
1.3 数据处理：采用统计学t检验。
2 结果
, 百拇医药
2.1 胎兔的生长发育：各组动物胎兔的体重，IUGR发生率见表1。两组比较差异有显著性。其中IUGR的诊断，以对照组平均体重减2倍标准差作为诊断标准。
表1 各组胎兔体重及IUGR发生率(
±s) 组别动物数
体重(g)
发生率(%)
实验组
60
24.5±4.4
48.33
, http://www.100md.com 对照组
58
35.6±5.1
3.45
P值
<0.05
<0.01
2.2 胎盘组织的计量分析结果：各组胎盘绒毛面积，绒毛毛细血管面积及绒毛面积百分比，绒毛毛细血管面积比，见表2。两组比较差异有显著性。
表2 各组绒毛面积百分比及绒毛毛细血管
面积百分比(
±s) 组别, http://www.100md.com
绒毛
面积(μm2) 面积(%)
绒毛毛细血管
面积(μm2) 面积(%)
实验组
72.189±13.631
56.8±10.7
4.681±2.329
23.0±11.5
对照组
80.857±11.361
, 百拇医药
63.9±7.8
8.018±1.569
39.2±7.5
P值
<0.05
<0.05
2.3 两组孕兔血及脐血中NO水平的测定：实验组母血及脐血中NO水平明显低于对照组(P<0.01)，且各组脐血NO水平均明显高于母血(P<0.05)。见表3。表3 两组孕兔血及脐血中NO水平比较(
±s) 组别孕兔血(μg/g)
脐血(μg/g)
, 百拇医药
实验组
1.37±0.50
1.65±0.57
对照组
3.37±1.08
3.88±1.28
P值
<0.01
<0.01
3 讨论
3.1 孕兔胎盘形态学改变：胎盘是联系母儿间的重要器官，是母体向胎儿供应氧气及营养的唯一通道。正常妊娠时随妊娠的进展，胎盘早期绒毛逐渐成熟形成晚期绒毛。绒毛直径缩小，数目增多，绒毛表面积增大，同时血管数目增多[4]。从而满足胎儿不断生长发育的需要。本研究结果显示，妊娠期被动吸烟所致孕兔IUGR胎盘绒毛面积百分比和绒毛内毛细血管面积百分比显著低于对照组，被动吸烟所致IUGR胎兔体重也显著低于对照组。说明被动吸烟所致IUGR进胎盘绒毛的发育受到了损害，使母儿间物质交换减少或发生障碍。影响胎儿发育，导致胎兔体重减轻，而被动吸烟所致IUGR孕兔胎盘绒毛毛细血管面积百分比减少，可能是烟草中的毒性物质抑制了毛细血管内皮细胞的发育，以致面积减少。
, 百拇医药
3.2 NO与胎儿发育的关系：NO是近几年来发现的一种新的细胞信使分子，许多动物和人体实验发现，妊娠期多种组织中一氧化氮合酶催化活性增加，NO代谢产物水平升高，调节妊娠期血流动力学改变，以适应妊娠需要，体内高水平NO可以减弱胎盘血管对内皮素Ⅰ，血检素A2的敏感性来降低血管张力[5]，并可以通过防止血小板粘附和聚集(尤其是滋养层来源的NO)，抑制绒毛间隙的血小板聚集，以维持胎儿——胎盘循环的低阻力，保证胎儿的营养和氧气供应，有利于胎儿的发育，据myutt等报道[6]，在滋养细胞及胎儿血管内皮细胞中，均有一氧化氮合酶的表达故妊娠期脐血NO升高先于并高于母血，这是对胎儿的一种生理性保护机理。本实验结果与文献报道相一致，同时还显示被动吸烟所致IUGR胎兔、母血及脐血一氧化氮水平明显低于对照组(P<0.01)，这可能是由于IUGR时胎盘滋养层细胞及绒毛血管内皮受损，使滋养层来源的NO合成减少。
母血及脐血中的低水平NO，无法保证胎儿——胎盘循环的低阻力，导致胎盘灌流量下降，胎儿缺血、缺氧，又进一步加重胎儿宫内发育迟缓。由此可见，被动吸烟所致IUGR胎盘形态学改变与母血及脐血中NO水平有密切关系。
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责编：马兴忠
作者简介：马太芳，女，山西医科大学汾阳学院，组织胚胎学讲师，曾发表论文数篇。
4 参考文献
[1]Salafia CM,Minior VK,Pezzullo CP,et al.Intrauterine growth restriction in infants of less than thirty-two weeks'gestation:associated placental pathologic features[J].Am Jobstet Gynecol,1995,173:1049
[2]张秀泉，等.被动吸烟宫内生长是迟缓孕兔母胎血浆氨基酸的变化[J].中华妇产科杂志，1993，28：582
[3]罗向东.敏捷的一氧化氮测定法[J].中华创伤杂志，1994，8：185
, http://www.100md.com
[4]唐敏.胎盘病理学[M].北京：人民卫生出版社，1987：133～134
[5]Mgatt L.Current topic:lontrol of vaslular resistance in humun placetu[J].Placenta,1992,13:329～334
[6]Myatt L.Brocknan D,Pqllol J,et al.Immunohistochemical lolalizution of nitril oxide synthase in the human placenta[J].Placenta,1992,14:487～495
收稿：1999—06—10
修回：1999—09—13, 百拇医药