HPLC法测定复方甲苯咪唑片中甲苯咪唑和左旋咪唑的含量
作者：夏晴 相应征 戴兴凌 陈明水
单位：夏晴 相应征 戴兴凌 陈明水(解放军323医院药械科 西安 71 0054)
关键词：甲苯咪唑；左旋咪唑；高效液相色谱法
西北药学杂志000101摘要 采用C8不锈钢柱，以甲醇-0.5%醋酸铵作流动相(pH＝5.0)， 检测波长220nm，多潘立酮作为内标物，峰面积比定量。结果：该方法回收率甲苯咪唑98.8 0%(RSD＝1.24%)，盐酸左旋咪唑99.37%(RSD＝0.77%)。
Determination of mebendazole and levamisole in compound mebendazole tab lets by HPLC
Xia Qing, Xiang Yingzheng, Dai Xingling and Chen Mingshui
, 百拇医药
(De partment of Pharmacy, PLA 323 Hospital, Xi'an, 710054)
ABSTRACT To develop a RP-HPLC method for assay of compound m ebendazole tablets with a reverse phase C18(5μm) column(220mm×2.1mm). The mixture of methanol and 0.5% ammonium acetate solution (pH＝5.0) was used as the mobile phase. The detector set at 220nm. Domperidone was used as internal standard substance and peak area ratio was the basis of counting the ingredient contents. The recovery of mebendazole and levamisole were 98.80% and 99.37% r espectively.
, 百拇医药
KEY WORDS compound mebendazole tablets;mebendazole; levamisol e; HPLC
复方甲苯咪唑片是根据甲苯咪唑和左旋咪唑对虫体不同的作用机理和 特点配伍制成的复方制剂〔1〕。中国药典1995版该药项下含量测定中，采用分光光 度法测定甲苯咪唑，非水滴定法测定盐酸左旋咪唑。本文建立HPLC测定其含量，现报道如下 。
1 仪器与试药
1.1 仪器 P1000高效液相色谱仪，UV1000紫外检测器及 SP4600积分仪(美国TSP公司)。UV-2100型紫外分光光度计(日本岛津)。
1.2 试药 甲苯咪唑、盐酸左旋咪唑对照品(中国药品生 物制品检定所，含量分别为99.20%和98.80%)；甲醇(色谱纯)；复方甲苯咪唑片(陕西省汉 江制药厂)。
, 百拇医药
2 方法
2.1 色谱条件 SPHERI-5RP-C8色谱柱(220mm×2.1 mm，5μm)，流动相：甲醇-0.5%醋酸铵(53∶47)，用甲酸调pH为5.0；检测波长：220nm ，流速：0.4ml/min。
2.2 试液的配制 取多潘立酮约35mg，精密称定，置100 ml量瓶中，用60%甲醇溶解并稀释至刻度作内标溶液。
分别取干燥至恒重的甲苯咪唑对照品约50mg和盐酸左旋咪唑对照品约12.5mg，精密称定， 分别置于100ml量瓶中，各加入甲酸2ml溶解，加60%甲醇稀释至刻度，摇匀；分别精密量取5 ml，置25ml量瓶中，加内标溶液5ml，用60%甲醇稀释至刻度，即得对照品溶液。
取复方甲苯咪唑20片，研细，取适量(约相当于甲苯咪唑50mg和盐酸左旋咪唑12.5mg)，精 密称定，置100ml量瓶中，加甲酸2ml振摇溶解或超声2min，加60%甲醇稀释至刻度，摇匀， 过滤；精密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加内标溶液5ml，加60%甲醇稀释至刻度，即得 供试品溶液。
, http://www.100md.com
2.3 线性范围 分取对照品溶液适量配制成一系列浓度 的混合液，在2.1条件下测定，得到峰面积比A(与内标峰面积相比)与浓度C(μg/ml)的线 性方程分别为A甲＝0.049+0.016C，r＝0.9998；A左＝-0.001+0.014C， r＝0.9992。线性范围甲苯咪唑为33.32～166.60μg/ml，盐酸左旋咪唑为8.51～42. 57μg/ml。
2.4 含量测定 精密吸取对照品溶液和供试品溶液各3μ l，进样，分别记录峰面积值。内标法计算出供试品溶液含量(见图1、表1)。甲苯咪唑和盐 酸左旋咪唑的平均回收率分别为98.80%(RSD＝1.24%)，99.37%(RSD＝0.77%)。
图1 复方甲苯咪唑片HPLC色谱图
a-盐酸左旋咪唑 b-多潘立酮(内标) c-甲苯咪唑
, 百拇医药
表1 复方甲苯咪唑片含量测定结果(%，n＝5，
±s) 批 号
甲苯咪唑
盐酸左旋咪唑
HPLC法
药典法
HPLC法
药典法
9702016
98.33
97.89
96.90
, 百拇医药
96.34
9703026-1
96.29
95.75
95.18
93.93
9704043-2
97.50
97.97
97.66
94.28
9705054-2
, 百拇医药 97.40
99.28
96.13
97.25
9706065-1
96.48
98.17
99.32
95.16
3 讨论
①甲苯咪唑和盐酸左旋咪唑均为含氨基的碱性化合物，为了使2种组分得到很好的分离，作 者通过调试不同溶剂系统、不同比例、不同酸度的流动相，最终选用甲醇-0.5%醋酸铵溶 液(53∶47，pH 5.0)作流动相。
②考察了极性相近的几个化合物在本色谱条件下的保留行为，多潘立酮峰形尖锐，保留时间 适中，且与甲苯咪唑和盐酸左旋咪唑能够分离，故选作内标物。
参考文献
1 金同珍总编.中国药物大辞典.下册.北京：中 国医药科技出版社，1991：382～383
2 中国药典1995年版.二部.1995：483～484
(收稿：1999-10-10), 百拇医药
单位：夏晴 相应征 戴兴凌 陈明水(解放军323医院药械科 西安 71 0054)
关键词：甲苯咪唑；左旋咪唑；高效液相色谱法
西北药学杂志000101摘要 采用C8不锈钢柱，以甲醇-0.5%醋酸铵作流动相(pH＝5.0)， 检测波长220nm，多潘立酮作为内标物，峰面积比定量。结果：该方法回收率甲苯咪唑98.8 0%(RSD＝1.24%)，盐酸左旋咪唑99.37%(RSD＝0.77%)。
Determination of mebendazole and levamisole in compound mebendazole tab lets by HPLC
Xia Qing, Xiang Yingzheng, Dai Xingling and Chen Mingshui
, 百拇医药
(De partment of Pharmacy, PLA 323 Hospital, Xi'an, 710054)
ABSTRACT To develop a RP-HPLC method for assay of compound m ebendazole tablets with a reverse phase C18(5μm) column(220mm×2.1mm). The mixture of methanol and 0.5% ammonium acetate solution (pH＝5.0) was used as the mobile phase. The detector set at 220nm. Domperidone was used as internal standard substance and peak area ratio was the basis of counting the ingredient contents. The recovery of mebendazole and levamisole were 98.80% and 99.37% r espectively.
, 百拇医药
KEY WORDS compound mebendazole tablets;mebendazole; levamisol e; HPLC
复方甲苯咪唑片是根据甲苯咪唑和左旋咪唑对虫体不同的作用机理和 特点配伍制成的复方制剂〔1〕。中国药典1995版该药项下含量测定中，采用分光光 度法测定甲苯咪唑，非水滴定法测定盐酸左旋咪唑。本文建立HPLC测定其含量，现报道如下 。
1 仪器与试药
1.1 仪器 P1000高效液相色谱仪，UV1000紫外检测器及 SP4600积分仪(美国TSP公司)。UV-2100型紫外分光光度计(日本岛津)。
1.2 试药 甲苯咪唑、盐酸左旋咪唑对照品(中国药品生 物制品检定所，含量分别为99.20%和98.80%)；甲醇(色谱纯)；复方甲苯咪唑片(陕西省汉 江制药厂)。
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2 方法
2.1 色谱条件 SPHERI-5RP-C8色谱柱(220mm×2.1 mm，5μm)，流动相：甲醇-0.5%醋酸铵(53∶47)，用甲酸调pH为5.0；检测波长：220nm ，流速：0.4ml/min。
2.2 试液的配制 取多潘立酮约35mg，精密称定，置100 ml量瓶中，用60%甲醇溶解并稀释至刻度作内标溶液。
分别取干燥至恒重的甲苯咪唑对照品约50mg和盐酸左旋咪唑对照品约12.5mg，精密称定， 分别置于100ml量瓶中，各加入甲酸2ml溶解，加60%甲醇稀释至刻度，摇匀；分别精密量取5 ml，置25ml量瓶中，加内标溶液5ml，用60%甲醇稀释至刻度，即得对照品溶液。
取复方甲苯咪唑20片，研细，取适量(约相当于甲苯咪唑50mg和盐酸左旋咪唑12.5mg)，精 密称定，置100ml量瓶中，加甲酸2ml振摇溶解或超声2min，加60%甲醇稀释至刻度，摇匀， 过滤；精密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加内标溶液5ml，加60%甲醇稀释至刻度，即得 供试品溶液。
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2.3 线性范围 分取对照品溶液适量配制成一系列浓度 的混合液，在2.1条件下测定，得到峰面积比A(与内标峰面积相比)与浓度C(μg/ml)的线 性方程分别为A甲＝0.049+0.016C，r＝0.9998；A左＝-0.001+0.014C， r＝0.9992。线性范围甲苯咪唑为33.32～166.60μg/ml，盐酸左旋咪唑为8.51～42. 57μg/ml。
2.4 含量测定 精密吸取对照品溶液和供试品溶液各3μ l，进样，分别记录峰面积值。内标法计算出供试品溶液含量(见图1、表1)。甲苯咪唑和盐 酸左旋咪唑的平均回收率分别为98.80%(RSD＝1.24%)，99.37%(RSD＝0.77%)。
图1 复方甲苯咪唑片HPLC色谱图
a-盐酸左旋咪唑 b-多潘立酮(内标) c-甲苯咪唑
, 百拇医药
表1 复方甲苯咪唑片含量测定结果(%，n＝5，
±s) 批 号甲苯咪唑
盐酸左旋咪唑
HPLC法
药典法
HPLC法
药典法
9702016
98.33
97.89
96.90
, 百拇医药
96.34
9703026-1
96.29
95.75
95.18
93.93
9704043-2
97.50
97.97
97.66
94.28
9705054-2
, 百拇医药 97.40
99.28
96.13
97.25
9706065-1
96.48
98.17
99.32
95.16
3 讨论
①甲苯咪唑和盐酸左旋咪唑均为含氨基的碱性化合物，为了使2种组分得到很好的分离，作 者通过调试不同溶剂系统、不同比例、不同酸度的流动相，最终选用甲醇-0.5%醋酸铵溶 液(53∶47，pH 5.0)作流动相。
②考察了极性相近的几个化合物在本色谱条件下的保留行为，多潘立酮峰形尖锐，保留时间 适中，且与甲苯咪唑和盐酸左旋咪唑能够分离，故选作内标物。
参考文献
1 金同珍总编.中国药物大辞典.下册.北京：中 国医药科技出版社，1991：382～383
2 中国药典1995年版.二部.1995：483～484
(收稿：1999-10-10), 百拇医药