“精血归”对初老雌兔阴道组织超氧化物歧化酶的影响
作者：朱旭华 武权生 唐怡 张庆文
单位：朱旭华 武权生 唐怡 张庆文(成都中医药大学 临床医学院，四川 成都 610075)
关键词：填补精血法；初老雌兔；阴道组织；超氧化物歧化酶
成都中医药大学学报990120 摘 要：为探讨中医填补精血法改善阴道衰老状况的作用机制，观察了纯中药复方制剂“精血归”对初老雌兔阴道组织超氧化物歧化酶(SOD)的影响。结果表明：①“精血归”能显著提高初老雌兔阴道组织SOD的活力(P<0.01)，用药后与青年雌兔比较无明显差异(P>0.05)，其作用优于西药尼尔雌醇；②“精血归”与尼尔雌醇均有提高初老雌兔血清E2的趋势，但与空白对照组比较无统计学意义(P>0.05)；③阴道组织SOD活力与血清E2间无明显相关关系。提示以填补精血为主的中药复方制剂“精血归”能提高初老雌兔SOD的活力，从而改善其阴道的衰老状况。
, 百拇医药
中图分类号：R243.71 文献标识码:B 文章编号:1004-0668(1999)01-0042-02
围绝经期妇女，由于卵巢功能衰退，雌激素水平降低，阴道组织逐渐萎缩，从而使阴道防御疾病及正常性生活的能力下降，导致阴道干涩、性交疼痛及老年性阴道炎迁延不愈等表现[1，2]。现代医学多采用雌激素替代疗法(HRT)以缓解泌尿生殖器官的退行性改变，但HRT的剂量、效力、给药途径及如何减轻其副作用仍在进一步研究中[3，4]。中医学对防治老年性阴道炎有一定研究[5，6]，但对如何改善阴道衰老状况却很少涉足。为此，我们初步观察了初老雌兔阴道组织的衰老变化状况及运用纯中药复方制剂“精血归”对其的改善作用，以期为临床提供应用于一定的科学依据。现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
, 百拇医药
1.1.1 动物 日本大耳白雌兔36只，其中2～2.5年龄、因繁殖能力下降而被淘汰的初老雌兔28只，体重4.5kg±0.5kg；3～6月龄的正常青年雌兔8只，体重2.0kg±0.5kg。以上动物均由华西医科大学实验动物中心提供，均为一级动物。
1.1.2 药物 (1)“精血归”煎剂，由成都中医药大学制剂教研室制备，每mL含生药2g。(2)尼尔雌醇，上海华联制药有限公司生产，批号970501，用蒸馏水配成0.4mg/12.6mL的混悬液备用。
1.1.3 试剂 (1)SOD测定试剂盒，南京建成生物工程研究所提供。(2)E2放免分析试剂盒，北京北方生物技术研究所提供。
1.2 方法
1.2.1 分组方法 将28只初老雌兔随机分为空白对照组(简称空白组)，“精血归”大、小剂量治疗组(简称大、小剂量组)，阳性药尼尔雌醇对照组(简称阳性药组)，共4组，每组7只，并设青年空白对照组(简称青年组)。
, 百拇医药
1.2.2 给药方法
(1)大剂量组每天每只定时灌胃“精血归”煎剂25.20g/kg(相当于临床日用量的20倍)，连续给药20天。
(2)小剂量组灌胃方法及时间同大剂量组，其剂量为12.6g/kg(相当于临床日用量的10倍)。
(3)阳性药组每半月每只灌胃尼尔雌醇混悬液0.4mg/kg(相当于临床日用量的20倍)1次，其余时间灌胃相同容积的蒸馏水，连续灌胃20天。
(4)空白组及青年组每天每只灌胃12.6mL/kg的蒸馏水，连续灌胃20天。
1.2.3 检测方法
(1)末次给药24h后，每只动物均股动脉取血约10mL，立即分离血清，用放免分析法测定E2血清含量。
, 百拇医药
(2)取血后处死动物，剖腹取上1/3阴道组织，剥离周围结缔组织，用4℃的冰盐水冲洗以除去血液，滤纸拭干，电子分析天平称重后，用眼科小手术剪快速剪碎，按1∶10(W∶V)加入冰盐水，制备成10%的阴道组织匀浆，按文献[7]的方法测定SOD活性。
2 实验结果
2.1 对阴道组织SOD活性的影响
结果见表1。
表1 各组阴道组织SOD活性比较(Nu/mL,
±s) 组 别
n
SOD活性
青 年 组
, 百拇医药
8
198.16±14.26**△
空 白 组
7
130.82±11.45△
大剂量组
7
14.66±10.27**△
小剂量组
7
197.96±11.98**△
, 百拇医药
阳性药组
7
169.20±14.94*△
与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01；与阳性药组比较，△P<0.05。
2.2 对血清E2含量的影响
结果见表2。
表2 各组血清E2含量的影响(pg/mL,±s) 组 别
n
血清E2含量
, 百拇医药
青 年 组
8
111.25±36.45
空 白 组
7
50.04±23.79**
大剂量组
7
57.82±15.67**
小剂量组
7
60.19±21.89**
, 百拇医药
阳性药组
7
64.82±27.92**
与青年组比较，**P<0.01。
2.3 各组阴道组织SOD活性与血清E2含量间的相关分析
结果见表3。
表3 各组阴道组织SOD活性与血清E2含量间的相关分析 组 别
n
t
P
青 年 组
, 百拇医药
8
0.6285
空白组
7
0.6940
大剂量组
7
0.3457
小剂量组
7
0.7812
>0.05
阳性药组
, http://www.100md.com
7
0.5287
总和
36
1.0601
3 讨论
3.1 中医理论认为，围绝经期妇女由于肾气渐衰，天癸将绝，冲任二脉亏虚，精血不足，可导致阴器失于濡养而衰萎。如何缓解妇女这一衰老过程，使阴道继续维持其防御疾病及正常性生活的能力，提高围绝经期妇女生活质量是妇科临床面临的新问题。“精血归”是以《傅青主女科》之“养精种玉汤”加减而成，主要由熟地、当归、丹参等组成，具有填补精血、濡润阴器之功效，临床上用于治疗围绝经期妇女阴道干涩、性交疼痛及老年性阴道炎等有明显疗效。目前认为，超氧化自由基是损害机体、促进衰老是的主要物质之一；而SOD是机体内清除自由基的重要抗氧化酶，具有延缓衰老的作用。有资料表明，肾虚、衰老、自由基之间有一定内在联系[8～10]，补肾药有不同程度的清除自由基的作用。因而，测定SOD活性可间接反映机体的衰老程度。本实验发现，以填补精血为主要功效的中药复方“精血归”能增加初老雌免阴道组织SOD活性的确切作用，说明其具有良好的改善初老雌兔阴道衰老的作用。
, 百拇医药
3.2 本实验结果还表明，初老雌兔血清E2的含量较青年雌兔明显降低，经“精血归”治疗后，其血清E2虽有上升趋势，但无统计学意义，且血清E2含量与阴道组织SOD活性间无明显相关关系，说明“精血归”改善阴道衰老状况的机制与调节血清E2的含量无直接关系，它是否通过提高雌激素水平实现其功能的机制尚需进一步探讨。
基金项目：四川省教委科研基金资助项目
作者简介：朱旭华，女，1972年6月生；中医妇科学专业在读硕士研究生；研究方向：围绝经期妇女性生理改善研究。
参考文献
[1]Mattson LA，callberg G . A Clinical Evalunation of Treatment with Estrol Cream Versus Sup-pository in Postmeno Pausal Women. Acta Obstetrics Gynecolgy. Second. 1983.62，397
, 百拇医药
[2]周爱军，韩立敏.雌三醇阴道检剂治疗老年性阴道炎的疗效分析.上海医科大学学报.1995，20(1)：55
[3]Harlap S. The Benifits and Risks of Hormone Replacement Therapy:an Epidemiological Overicw. Am I Ob Gynecol,1992.166
[4]程国均，刘建立，张全等.绝经后妇女口服尼尔雌醇的前瞻性研究.中华妇产科杂志.1995，28(9)：534
[5]龚玲，赵华，胡杰.妇安栓治疗老年性阴道炎123例.北京中医杂志.1994，(4)：53
[6]杨琪，张爱华.带净治疗老年性阴道炎100例的临床疗效观察与实验研究.山西中医.1995，11(2)；12
[7]季健平，吴再彬，刘岐山等.超氧化物歧化酶超微量快速测定法.南京铁道医学院学报.1991，10(1)：49
[8]张文彭.老年肾虚证血浆过氧化脂质、高密度脂蛋白胆固醇及其压组分子水平变化.中医杂志.1989，30(2)：43
[9][陈晏珍.肾虚与超氧歧化酶关系初探.中医杂志.1989，30(4)：42
[10]许士凯主编.抗衰老药物学.北京：中国医药科技出版社，1994.623
(收稿日期:1998-07-12), 百拇医药
单位：朱旭华 武权生 唐怡 张庆文(成都中医药大学 临床医学院，四川 成都 610075)
关键词：填补精血法；初老雌兔；阴道组织；超氧化物歧化酶
成都中医药大学学报990120 摘 要：为探讨中医填补精血法改善阴道衰老状况的作用机制，观察了纯中药复方制剂“精血归”对初老雌兔阴道组织超氧化物歧化酶(SOD)的影响。结果表明：①“精血归”能显著提高初老雌兔阴道组织SOD的活力(P<0.01)，用药后与青年雌兔比较无明显差异(P>0.05)，其作用优于西药尼尔雌醇；②“精血归”与尼尔雌醇均有提高初老雌兔血清E2的趋势，但与空白对照组比较无统计学意义(P>0.05)；③阴道组织SOD活力与血清E2间无明显相关关系。提示以填补精血为主的中药复方制剂“精血归”能提高初老雌兔SOD的活力，从而改善其阴道的衰老状况。
, 百拇医药
中图分类号：R243.71 文献标识码:B 文章编号:1004-0668(1999)01-0042-02
围绝经期妇女，由于卵巢功能衰退，雌激素水平降低，阴道组织逐渐萎缩，从而使阴道防御疾病及正常性生活的能力下降，导致阴道干涩、性交疼痛及老年性阴道炎迁延不愈等表现[1，2]。现代医学多采用雌激素替代疗法(HRT)以缓解泌尿生殖器官的退行性改变，但HRT的剂量、效力、给药途径及如何减轻其副作用仍在进一步研究中[3，4]。中医学对防治老年性阴道炎有一定研究[5，6]，但对如何改善阴道衰老状况却很少涉足。为此，我们初步观察了初老雌兔阴道组织的衰老变化状况及运用纯中药复方制剂“精血归”对其的改善作用，以期为临床提供应用于一定的科学依据。现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
, 百拇医药
1.1.1 动物 日本大耳白雌兔36只，其中2～2.5年龄、因繁殖能力下降而被淘汰的初老雌兔28只，体重4.5kg±0.5kg；3～6月龄的正常青年雌兔8只，体重2.0kg±0.5kg。以上动物均由华西医科大学实验动物中心提供，均为一级动物。
1.1.2 药物 (1)“精血归”煎剂，由成都中医药大学制剂教研室制备，每mL含生药2g。(2)尼尔雌醇，上海华联制药有限公司生产，批号970501，用蒸馏水配成0.4mg/12.6mL的混悬液备用。
1.1.3 试剂 (1)SOD测定试剂盒，南京建成生物工程研究所提供。(2)E2放免分析试剂盒，北京北方生物技术研究所提供。
1.2 方法
1.2.1 分组方法 将28只初老雌兔随机分为空白对照组(简称空白组)，“精血归”大、小剂量治疗组(简称大、小剂量组)，阳性药尼尔雌醇对照组(简称阳性药组)，共4组，每组7只，并设青年空白对照组(简称青年组)。
, 百拇医药
1.2.2 给药方法
(1)大剂量组每天每只定时灌胃“精血归”煎剂25.20g/kg(相当于临床日用量的20倍)，连续给药20天。
(2)小剂量组灌胃方法及时间同大剂量组，其剂量为12.6g/kg(相当于临床日用量的10倍)。
(3)阳性药组每半月每只灌胃尼尔雌醇混悬液0.4mg/kg(相当于临床日用量的20倍)1次，其余时间灌胃相同容积的蒸馏水，连续灌胃20天。
(4)空白组及青年组每天每只灌胃12.6mL/kg的蒸馏水，连续灌胃20天。
1.2.3 检测方法
(1)末次给药24h后，每只动物均股动脉取血约10mL，立即分离血清，用放免分析法测定E2血清含量。
, 百拇医药
(2)取血后处死动物，剖腹取上1/3阴道组织，剥离周围结缔组织，用4℃的冰盐水冲洗以除去血液，滤纸拭干，电子分析天平称重后，用眼科小手术剪快速剪碎，按1∶10(W∶V)加入冰盐水，制备成10%的阴道组织匀浆，按文献[7]的方法测定SOD活性。
2 实验结果
2.1 对阴道组织SOD活性的影响
结果见表1。
表1 各组阴道组织SOD活性比较(Nu/mL,
±s) 组 别n
SOD活性
青 年 组
, 百拇医药
8
198.16±14.26**△
空 白 组
7
130.82±11.45△
大剂量组
7
14.66±10.27**△
小剂量组
7
197.96±11.98**△
, 百拇医药
阳性药组
7
169.20±14.94*△
与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01；与阳性药组比较，△P<0.05。
2.2 对血清E2含量的影响
结果见表2。
表2 各组血清E2含量的影响(pg/mL,
±s) 组 别n
血清E2含量
, 百拇医药
青 年 组
8
111.25±36.45
空 白 组
7
50.04±23.79**
大剂量组
7
57.82±15.67**
小剂量组
7
60.19±21.89**
, 百拇医药
阳性药组
7
64.82±27.92**
与青年组比较，**P<0.01。
2.3 各组阴道组织SOD活性与血清E2含量间的相关分析
结果见表3。
表3 各组阴道组织SOD活性与血清E2含量间的相关分析 组 别
n
t
P
青 年 组
, 百拇医药
8
0.6285
空白组
7
0.6940
大剂量组
7
0.3457
小剂量组
7
0.7812
>0.05
阳性药组
, http://www.100md.com
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0.5287
总和
36
1.0601
3 讨论
3.1 中医理论认为，围绝经期妇女由于肾气渐衰，天癸将绝，冲任二脉亏虚，精血不足，可导致阴器失于濡养而衰萎。如何缓解妇女这一衰老过程，使阴道继续维持其防御疾病及正常性生活的能力，提高围绝经期妇女生活质量是妇科临床面临的新问题。“精血归”是以《傅青主女科》之“养精种玉汤”加减而成，主要由熟地、当归、丹参等组成，具有填补精血、濡润阴器之功效，临床上用于治疗围绝经期妇女阴道干涩、性交疼痛及老年性阴道炎等有明显疗效。目前认为，超氧化自由基是损害机体、促进衰老是的主要物质之一；而SOD是机体内清除自由基的重要抗氧化酶，具有延缓衰老的作用。有资料表明，肾虚、衰老、自由基之间有一定内在联系[8～10]，补肾药有不同程度的清除自由基的作用。因而，测定SOD活性可间接反映机体的衰老程度。本实验发现，以填补精血为主要功效的中药复方“精血归”能增加初老雌免阴道组织SOD活性的确切作用，说明其具有良好的改善初老雌兔阴道衰老的作用。
, 百拇医药
3.2 本实验结果还表明，初老雌兔血清E2的含量较青年雌兔明显降低，经“精血归”治疗后，其血清E2虽有上升趋势，但无统计学意义，且血清E2含量与阴道组织SOD活性间无明显相关关系，说明“精血归”改善阴道衰老状况的机制与调节血清E2的含量无直接关系，它是否通过提高雌激素水平实现其功能的机制尚需进一步探讨。
基金项目：四川省教委科研基金资助项目
作者简介：朱旭华，女，1972年6月生；中医妇科学专业在读硕士研究生；研究方向：围绝经期妇女性生理改善研究。
参考文献
[1]Mattson LA，callberg G . A Clinical Evalunation of Treatment with Estrol Cream Versus Sup-pository in Postmeno Pausal Women. Acta Obstetrics Gynecolgy. Second. 1983.62，397
, 百拇医药
[2]周爱军，韩立敏.雌三醇阴道检剂治疗老年性阴道炎的疗效分析.上海医科大学学报.1995，20(1)：55
[3]Harlap S. The Benifits and Risks of Hormone Replacement Therapy:an Epidemiological Overicw. Am I Ob Gynecol,1992.166
[4]程国均，刘建立，张全等.绝经后妇女口服尼尔雌醇的前瞻性研究.中华妇产科杂志.1995，28(9)：534
[5]龚玲，赵华，胡杰.妇安栓治疗老年性阴道炎123例.北京中医杂志.1994，(4)：53
[6]杨琪，张爱华.带净治疗老年性阴道炎100例的临床疗效观察与实验研究.山西中医.1995，11(2)；12
[7]季健平，吴再彬，刘岐山等.超氧化物歧化酶超微量快速测定法.南京铁道医学院学报.1991，10(1)：49
[8]张文彭.老年肾虚证血浆过氧化脂质、高密度脂蛋白胆固醇及其压组分子水平变化.中医杂志.1989，30(2)：43
[9][陈晏珍.肾虚与超氧歧化酶关系初探.中医杂志.1989，30(4)：42
[10]许士凯主编.抗衰老药物学.北京：中国医药科技出版社，1994.623
(收稿日期:1998-07-12), 百拇医药