槟榔提取物对人口腔粘膜上皮角朊细胞分泌内皮素的影响
作者：凌天牖 冯云枝
单位：凌天牖(410011 长沙，湖南医科大学附属第二医院口腔科)；冯云枝(410011 长沙，湖南医科大学附属第二医院口腔科)
关键词：
中华口腔医学杂志000425 口腔粘膜下纤维化(oral submucous fibrosis, OSF)是一种慢性炎性疾病。大量研究结果表明，OSF的发生与咀嚼槟榔习惯密切相关，但咀嚼槟榔诱发OSF的机理仍不明确。我们采用角朊细胞(keratinocytes, KC)体外培养技术，比较OSF-KC与健康者-KC分泌内皮素(endothelin，ET)的差异，同时观察槟榔提取物(areca nut extract, ANE)对KC分泌ET的影响。旨在对KC及ET在OSF发生中的作用进行初步探讨，并为阐明咀嚼槟榔习惯与OSF的因果关系提供一些实验依据。
1.材料与方法：选择经临床及病理确诊为OSF的患者作为实验组，实验组口腔粘膜取自有病变的部位。另外，选择无烟酒、嚼槟榔及辣椒嗜好，年龄与实验组匹配的患者作对照组，对照组口腔粘膜取自无粘膜疾患的部位。对新鲜粘膜片采用二次消化法进行KC的培养和鉴定[1]。将KC以2×108细胞/L的密度接种于24孔培养板，待细胞达到70%～80%融合时，换用含不同浓度ANE的条件培养基，ANE的最终浓度为5 mg/L、50 mg/L、100 mg/L和150 mg/L。培养48 h后收集培养细胞上清液，-70℃保存。采用ET放免药盒，检测标本中的ET值。每组均设3个平行孔。
2.结果：OSF-KC 48 h的ET分泌量为(96.983±17.802) ng/L，高于健康者-KC分泌量(14.641±15.796) ng/L；ANE在5～150 mg/L范围内以浓度-效应依赖关系刺激KC分泌ET。
3.讨论：ET是一类由21个氨基酸组成的血管活性肽，有3种异构体。ET不仅具有血管收缩功能，而且具有丝裂原作用，它可以通过刺激成纤维细胞增殖，促进其合成胶原，抑制胶原降解以及使成纤维细胞向肌纤维母细胞转换等作用而引起组织纤维化，与纤维性疾病的发生密切相关[2]。
本研究首次报道OSF患者上皮KC分泌的ET水平明显高于健康人，而且在ANE刺激后，ET水平升高，表明KC及其分泌的ET在OSF发生中可能具有重要作用。由此推测槟榔及其有效成分可使KC微环境改变，导致其分泌一系列细胞因子，从而参与诱发OSF。本实验还提示我们可以采用多种方法，如应用内皮素转化酶抑制剂、内皮素受体拮抗剂和内皮素抗体等来拮抗和阻断ET的致病作用，为OSF的防治开辟新的途径。
参考文献
1，冯云枝，凌天牖.槟榔提取物抑制人类口腔粘膜角朊细胞生长的实验研究.华西口腔医学杂志，1999，17：233-235.
2，Levin ER. Endothelins. N Engl J Med, 1995, 333: 356-363.
(收稿日期：1998-11-19), http://www.100md.com
单位：凌天牖(410011 长沙，湖南医科大学附属第二医院口腔科)；冯云枝(410011 长沙，湖南医科大学附属第二医院口腔科)
关键词：
中华口腔医学杂志000425 口腔粘膜下纤维化(oral submucous fibrosis, OSF)是一种慢性炎性疾病。大量研究结果表明，OSF的发生与咀嚼槟榔习惯密切相关，但咀嚼槟榔诱发OSF的机理仍不明确。我们采用角朊细胞(keratinocytes, KC)体外培养技术，比较OSF-KC与健康者-KC分泌内皮素(endothelin，ET)的差异，同时观察槟榔提取物(areca nut extract, ANE)对KC分泌ET的影响。旨在对KC及ET在OSF发生中的作用进行初步探讨，并为阐明咀嚼槟榔习惯与OSF的因果关系提供一些实验依据。
1.材料与方法：选择经临床及病理确诊为OSF的患者作为实验组，实验组口腔粘膜取自有病变的部位。另外，选择无烟酒、嚼槟榔及辣椒嗜好，年龄与实验组匹配的患者作对照组，对照组口腔粘膜取自无粘膜疾患的部位。对新鲜粘膜片采用二次消化法进行KC的培养和鉴定[1]。将KC以2×108细胞/L的密度接种于24孔培养板，待细胞达到70%～80%融合时，换用含不同浓度ANE的条件培养基，ANE的最终浓度为5 mg/L、50 mg/L、100 mg/L和150 mg/L。培养48 h后收集培养细胞上清液，-70℃保存。采用ET放免药盒，检测标本中的ET值。每组均设3个平行孔。
2.结果：OSF-KC 48 h的ET分泌量为(96.983±17.802) ng/L，高于健康者-KC分泌量(14.641±15.796) ng/L；ANE在5～150 mg/L范围内以浓度-效应依赖关系刺激KC分泌ET。
3.讨论：ET是一类由21个氨基酸组成的血管活性肽，有3种异构体。ET不仅具有血管收缩功能，而且具有丝裂原作用，它可以通过刺激成纤维细胞增殖，促进其合成胶原，抑制胶原降解以及使成纤维细胞向肌纤维母细胞转换等作用而引起组织纤维化，与纤维性疾病的发生密切相关[2]。
本研究首次报道OSF患者上皮KC分泌的ET水平明显高于健康人，而且在ANE刺激后，ET水平升高，表明KC及其分泌的ET在OSF发生中可能具有重要作用。由此推测槟榔及其有效成分可使KC微环境改变，导致其分泌一系列细胞因子，从而参与诱发OSF。本实验还提示我们可以采用多种方法，如应用内皮素转化酶抑制剂、内皮素受体拮抗剂和内皮素抗体等来拮抗和阻断ET的致病作用，为OSF的防治开辟新的途径。
参考文献
1，冯云枝，凌天牖.槟榔提取物抑制人类口腔粘膜角朊细胞生长的实验研究.华西口腔医学杂志，1999，17：233-235.
2，Levin ER. Endothelins. N Engl J Med, 1995, 333: 356-363.
(收稿日期：1998-11-19), http://www.100md.com