HPLC法测定甲磺酸酚妥拉明分散片的含量
作者：
单位：福建省药品检验所 福州 350001
关键词：分散片；甲磺酸酚妥拉明；含量测定；HPLC
中国现代应用药学000619 摘要 目的：建立了采用高效液相色谱法测定了一种药物新剂型甲磺酸酚妥拉明分散片的含量的方法。方法：采用Kromasil C18色谱柱，流动相为醋酸溶液(取冰醋酸1.0ml加水至1000ml,用三乙胺调节pH值至3.8)-甲醇(10∶90),检测波长设定在278nm。结果：线性范围为进样量0.2～5.0μg,r=0.9998,平均回收率为99.5%,RSD=0.70%。结论：本方法快速、无干扰、精密度好、灵敏度高。
Determination of phentolamine mesylate in its dispersible tablets by high performance liquid chromatography
, 百拇医药
Weng Shuiwang(Weng SW),Sha Jida(Sha JD)
(Fujian Provincial Institute for Drug Control,Fuzhou 350001)
ABSTRACT OBJECTIVE：Dispersible phentolamine mesylate tablets are new drugs that can be dissolved and released rapidly.Their contents were determined by high performance liquid chromatography.METHODS:Samples were dissolved with hydrochloric acid solution(add 2% hydrochloric acid 1.0ml to 1000ml with water)-methyl alcohol(1∶1).The analytical column was packed with Kromasil C18 5μ 200mm×4.6mm.The mobile phase consisted of ethanoic acid solution(glacial acetic acid 1.0ml was added to 1000ml with water,and the pH was adjusted to 3.8 with triethylamine)-methanol(10∶90).The detection wavelength was set at 278nm.RESULTS:The caliblation curve was linear in the range from 0.2μg to 5.0μg,r=0.9998.The average recovery was 99.5%,with RSD of 0.70%.CONCLUSION:The method is simple,rapid,accurate and reproducible,and can be used for the drug control.
, 百拇医药
KEY WORDS dispersible tablets,phentolamine mesylate,contents determination,HPLC
分散片(Dispersible tablets)是药物制剂中一种要求在3min内快速崩解释放的新剂型。该剂型遇水可迅速崩解形成均匀的混悬液，能尽快起药效作用，适用需快速治疗作用的对象。甲磺酸酚妥拉明分散片就是最近开发的用于治疗阳萎的这一类新药。其原料及注射液中国药典采用重量法，该法繁琐费时。本文采用高效液相色谱法测定甲磺酸酚妥拉明分散片的含量，结果满意。
1 仪器与试药
Waters液相色谱仪(美国Waters公司):515泵、717自动进样器、486可变波长检测器、730数据处理机；甲醇(色谱纯)，其余试剂均为分析纯；甲磺酸酚妥拉明对照品(中国药品生物制品检定所)，甲磺酸酚妥拉明分散片(批号980908，980910和980912)及其辅料(福建厦门桂龙集团药物研究所)。
, 百拇医药
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件
高效液相色谱柱Kromasil C18 5μ 200mm×4.6mm(天津特纳科学仪器有限公司)；流动相为醋酸溶液(取冰醋酸1.0ml加水至1000ml,用三乙胺调节pH值至3.8)-甲醇(10∶90);流速1.0ml/min;检测波长278nm;检测灵敏度为0.1Aufs,进样量10μl。样品溶剂为盐酸溶液(取2%盐酸溶液1.0ml加水至1000ml)-甲醇(1∶1)。
2.2 检测波长的确定
取甲磺酸酚妥拉明对照品及其分散片细粉适量分别加盐酸-甲醇溶液制成约30μg/ml的溶液，照分光光度法，在250～350nm波长范围扫描绘制紫外吸收光谱图，结果在278nm波长处有最大吸收(见图1)。另取处方量的辅料，同法操作，辅料在该波长范围内无吸收。
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图1 甲磺酸酚妥拉明及其分散片紫外吸收光谱图
a-甲磺酸酚妥拉明；b-其分散片；c-辅料
2.3 分析方法的确定
精密称取甲磺酸酚妥拉明对照品及其分散片细粉适量分别用盐酸-甲醇溶液制成约0.1mg/ml的溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图(见图2)。
图2 甲磺酸酚妥拉明及其分散片HPLC色谱图
A-甲磺酸酚妥拉明；B-其分散片；C-辅料
2.4 线性关系
, 百拇医药
取甲磺酸酚妥拉明对照品加盐酸-甲醇溶液制成约0.1mg/ml的溶液。精密量取2,5,10,20,40和50μl分别注入液相色谱仪，按选定的方法进行测定。以峰面积(y)为纵坐标，进样量(x)为横坐标，进行线性回归，得回归方程y=6.92×105x+4.72×104,r=0.9998,n=6。结果表明进样量在0.2～5.0μg之间呈良好线性关系。
2.5 方法精密度试验
取甲磺酸酚妥拉明分散片配制成约0.1mg/ml溶液，按选定的方法进行测定，每次进样10μl,连续进样6次，结果显示该方法精密度良好，日内RSD为0.59%。用同样方法连续测定5d,以每天的含量平均值求得日间RSD为1.86%。
2.6 溶液的稳定性试验
取约0.1mg/ml甲磺酸酚妥拉明对照品溶液和样品溶液，于室温下分别放置1,2,4,8,12,24和48h,精密量取10μl注入液相色谱仪，依法测定。结果说明本品溶液在室温下放置48h稳定。
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2.7 干扰试验
取处方量的辅料按选定的方法进行测定，结果显示辅料在选定的条件下不出峰，对主药测定无干扰(见图2)。
2.8 回收率试验
精密称取甲磺酸酚妥拉明和处方量的辅料，加盐酸-甲醇溶液溶解并稀释，按选定的方法测定并计算，结果如下(见表1)。
表1 回收率测定结果 试样号
加入量
/mg.ml-1
测得量
/mg.ml-1
, http://www.100md.com
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
1
0.0528
0.0525
99.4
2
0.0881
0.0871
, http://www.100md.com
98.9
3
0.1038
0.1045
100.7
99.5
0.70
4
0.1246
0.1231
98.8
5
0.1508
, 百拇医药
0.1502
99.6
2.9 样品测定
取分散片20片，精密称定，研细，精密称取适量加盐酸-甲醇溶液溶解并稀释成含甲磺酸酚妥拉明约0.1mg/ml的溶液，滤过，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，另取甲磺酸酚妥拉明对照品，同法操作，按外标法以峰面积计算，结果见表2。表2 样品含量测定结果/n=3 批 号
含量/%
RSD/%
980908
97.0
0.31
, http://www.100md.com 980910
101.6
0.45
980912
96.3
0.56
3 讨 论
3.1 分散片作为一种需快速崩解释放的药物新剂型，所用辅料与一般片剂不同，经实验结果表明，甲磺酸酚妥拉明分散片所用辅料不影响其主药的含量测定。
3.2 本试验所选用的方法专属性强、准确可靠，可作为甲磺酸酚妥拉明分散片的含量测定方法，亦可作为该药的溶出度测定方法。
收稿日期：1999-06-10, http://www.100md.com
单位：福建省药品检验所 福州 350001
关键词：分散片；甲磺酸酚妥拉明；含量测定；HPLC
中国现代应用药学000619 摘要 目的：建立了采用高效液相色谱法测定了一种药物新剂型甲磺酸酚妥拉明分散片的含量的方法。方法：采用Kromasil C18色谱柱，流动相为醋酸溶液(取冰醋酸1.0ml加水至1000ml,用三乙胺调节pH值至3.8)-甲醇(10∶90),检测波长设定在278nm。结果：线性范围为进样量0.2～5.0μg,r=0.9998,平均回收率为99.5%,RSD=0.70%。结论：本方法快速、无干扰、精密度好、灵敏度高。
Determination of phentolamine mesylate in its dispersible tablets by high performance liquid chromatography
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Weng Shuiwang(Weng SW),Sha Jida(Sha JD)
(Fujian Provincial Institute for Drug Control,Fuzhou 350001)
ABSTRACT OBJECTIVE：Dispersible phentolamine mesylate tablets are new drugs that can be dissolved and released rapidly.Their contents were determined by high performance liquid chromatography.METHODS:Samples were dissolved with hydrochloric acid solution(add 2% hydrochloric acid 1.0ml to 1000ml with water)-methyl alcohol(1∶1).The analytical column was packed with Kromasil C18 5μ 200mm×4.6mm.The mobile phase consisted of ethanoic acid solution(glacial acetic acid 1.0ml was added to 1000ml with water,and the pH was adjusted to 3.8 with triethylamine)-methanol(10∶90).The detection wavelength was set at 278nm.RESULTS:The caliblation curve was linear in the range from 0.2μg to 5.0μg,r=0.9998.The average recovery was 99.5%,with RSD of 0.70%.CONCLUSION:The method is simple,rapid,accurate and reproducible,and can be used for the drug control.
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KEY WORDS dispersible tablets,phentolamine mesylate,contents determination,HPLC
分散片(Dispersible tablets)是药物制剂中一种要求在3min内快速崩解释放的新剂型。该剂型遇水可迅速崩解形成均匀的混悬液，能尽快起药效作用，适用需快速治疗作用的对象。甲磺酸酚妥拉明分散片就是最近开发的用于治疗阳萎的这一类新药。其原料及注射液中国药典采用重量法，该法繁琐费时。本文采用高效液相色谱法测定甲磺酸酚妥拉明分散片的含量，结果满意。
1 仪器与试药
Waters液相色谱仪(美国Waters公司):515泵、717自动进样器、486可变波长检测器、730数据处理机；甲醇(色谱纯)，其余试剂均为分析纯；甲磺酸酚妥拉明对照品(中国药品生物制品检定所)，甲磺酸酚妥拉明分散片(批号980908，980910和980912)及其辅料(福建厦门桂龙集团药物研究所)。
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2 实验方法与结果
2.1 色谱条件
高效液相色谱柱Kromasil C18 5μ 200mm×4.6mm(天津特纳科学仪器有限公司)；流动相为醋酸溶液(取冰醋酸1.0ml加水至1000ml,用三乙胺调节pH值至3.8)-甲醇(10∶90);流速1.0ml/min;检测波长278nm;检测灵敏度为0.1Aufs,进样量10μl。样品溶剂为盐酸溶液(取2%盐酸溶液1.0ml加水至1000ml)-甲醇(1∶1)。
2.2 检测波长的确定
取甲磺酸酚妥拉明对照品及其分散片细粉适量分别加盐酸-甲醇溶液制成约30μg/ml的溶液，照分光光度法，在250～350nm波长范围扫描绘制紫外吸收光谱图，结果在278nm波长处有最大吸收(见图1)。另取处方量的辅料，同法操作，辅料在该波长范围内无吸收。
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图1 甲磺酸酚妥拉明及其分散片紫外吸收光谱图
a-甲磺酸酚妥拉明；b-其分散片；c-辅料
2.3 分析方法的确定
精密称取甲磺酸酚妥拉明对照品及其分散片细粉适量分别用盐酸-甲醇溶液制成约0.1mg/ml的溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图(见图2)。
图2 甲磺酸酚妥拉明及其分散片HPLC色谱图
A-甲磺酸酚妥拉明；B-其分散片；C-辅料
2.4 线性关系
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取甲磺酸酚妥拉明对照品加盐酸-甲醇溶液制成约0.1mg/ml的溶液。精密量取2,5,10,20,40和50μl分别注入液相色谱仪，按选定的方法进行测定。以峰面积(y)为纵坐标，进样量(x)为横坐标，进行线性回归，得回归方程y=6.92×105x+4.72×104,r=0.9998,n=6。结果表明进样量在0.2～5.0μg之间呈良好线性关系。
2.5 方法精密度试验
取甲磺酸酚妥拉明分散片配制成约0.1mg/ml溶液，按选定的方法进行测定，每次进样10μl,连续进样6次，结果显示该方法精密度良好，日内RSD为0.59%。用同样方法连续测定5d,以每天的含量平均值求得日间RSD为1.86%。
2.6 溶液的稳定性试验
取约0.1mg/ml甲磺酸酚妥拉明对照品溶液和样品溶液，于室温下分别放置1,2,4,8,12,24和48h,精密量取10μl注入液相色谱仪，依法测定。结果说明本品溶液在室温下放置48h稳定。
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2.7 干扰试验
取处方量的辅料按选定的方法进行测定，结果显示辅料在选定的条件下不出峰，对主药测定无干扰(见图2)。
2.8 回收率试验
精密称取甲磺酸酚妥拉明和处方量的辅料，加盐酸-甲醇溶液溶解并稀释，按选定的方法测定并计算，结果如下(见表1)。
表1 回收率测定结果 试样号
加入量
/mg.ml-1
测得量
/mg.ml-1
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回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
1
0.0528
0.0525
99.4
2
0.0881
0.0871
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98.9
3
0.1038
0.1045
100.7
99.5
0.70
4
0.1246
0.1231
98.8
5
0.1508
, 百拇医药
0.1502
99.6
2.9 样品测定
取分散片20片，精密称定，研细，精密称取适量加盐酸-甲醇溶液溶解并稀释成含甲磺酸酚妥拉明约0.1mg/ml的溶液，滤过，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，另取甲磺酸酚妥拉明对照品，同法操作，按外标法以峰面积计算，结果见表2。表2 样品含量测定结果/n=3 批 号
含量/%
RSD/%
980908
97.0
0.31
, http://www.100md.com 980910
101.6
0.45
980912
96.3
0.56
3 讨 论
3.1 分散片作为一种需快速崩解释放的药物新剂型，所用辅料与一般片剂不同，经实验结果表明，甲磺酸酚妥拉明分散片所用辅料不影响其主药的含量测定。
3.2 本试验所选用的方法专属性强、准确可靠，可作为甲磺酸酚妥拉明分散片的含量测定方法，亦可作为该药的溶出度测定方法。
收稿日期：1999-06-10, http://www.100md.com