HPLC法测定乳块消片中原儿茶醛含量
作者：邵宪平 杨广德
单位：邵宪平 杨广德(陕西省药材公司 西安 710032)
关键词：高效液相色谱法；乳块消片；原儿茶醛
西北药学杂志000209 摘要 采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合的硅胶为固定相，甲醇 -0.05mol/L磷酸氢二钠缓冲液(20∶80)为流动相，检测波长230nm，测定乳块消片中原儿 茶醛含量；平均回收率(n＝6)99.0%，RSD＝1.37%。
乳块消片为中国药典1995年版收载的中成药，由橘叶、丹参、皂角刺 、王不留行、川楝子和地龙制成，用于肝气郁结、气滞血瘀、乳腺增生、乳房胀痛等〔 1，2〕。中国药典1995年版未规定含量测定。本文采用HPLC法对方中丹参所含原儿茶醛 进行了测定。
1 仪器与试药
, 百拇医药
1.1 仪器 Waters组合式高效液相色谱仪(包括510泵和4 86型紫外检测器，美国)；XWTD-204记录仪(上海大华记录仪厂)。
1.2 试药 原儿茶醛对照品(中国药品生物制品检定所) ；乳块消片(豫西制药厂)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶5μm，4 .6mm×150mm；流动相；甲醇-0.05mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液(用磷酸调pH 3.0)＝20∶8 0；检测波长：230nm；柱温：室温；流量：1.0ml/min；AUFS：0.1；量程：10mv；低速： 4mm/min。此条件下原儿茶醛与其他组分均能达到基线分离(见图1)，不含丹参的阴性样品无干扰。
图1 乳块消片HPLC图(a-原儿茶醛)
, 百拇医药
2.2 供试品溶液的制备 根据原儿茶醛易溶于醇的性质 ，选用甲醇为溶媒，超声处理。结果(见表1)表明超声处理40min可提取完全。为了保证提取 的可靠性，样品超声处理60min。
表1 超声提取时间比较表 时间(min)
10
20
40
60
80
原儿茶醛峰高(cm)
1.4
1.8
1.9
, http://www.100md.com
1.9
1.9
2.3 对照品溶液的制备 精密称取原儿茶醛适量，用甲 醇溶解，配成0.05mg/ml对照品溶液。
2.4 线性关系考察 精密吸取对照品溶液1，2，4，8，1 0μl，按上述色谱条件测定峰高，以峰高对原儿茶醛量绘制标准曲线，得回归方程：Y＝0.0022+0.0423X，r＝0.9999。
结果表明原儿茶醛在0.05μg～0.5μg范围内具有良好线性关系。重复测定5次，原儿茶醛峰高RSD<1.02%。
2.5 回收率试验 采用加样回收法。取已知含量的乳块消片粉，分别添加适量原儿茶醛对照品，按上述色谱条件进行测定，回收率为99.0%，RSD＝1.37%(n＝6)。
, http://www.100md.com 2.6 样品测定 取本品研粉，取约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液10ml，超声处理60min，放冷，滤过，取续滤液作为供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各5μl，依上述色谱条件测定，计算每g样品中含有原儿茶醛的含量，结果见表2。
表2 乳块消片中原儿茶醛含量测定结果(n＝3) 批 号
样品含量(mg/g)
RSD%
990110
0.528
1.40
990411
0.581
, 百拇医药
1.01
990807
0.592
1.31
3 讨论
以原儿茶醛甲醇溶液紫外扫描表明，原儿茶醛在230nm处有最大吸收。本实验选用230nm为测定波长，可以排除干扰，且灵敏度可达到定量要求。
西安医科大学药学院
参考文献
〔1〕中国药典1995年版.一部.1995：528
〔2〕李立振，丁振根，谭毓治，等.复方丹参片吸收度 考察及其对红细胞膜流动性的影响.中成药，1992，14(5)：8
(收稿：1999-09-18), http://www.100md.com
单位：邵宪平 杨广德(陕西省药材公司 西安 710032)
关键词：高效液相色谱法；乳块消片；原儿茶醛
西北药学杂志000209 摘要 采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合的硅胶为固定相，甲醇 -0.05mol/L磷酸氢二钠缓冲液(20∶80)为流动相，检测波长230nm，测定乳块消片中原儿 茶醛含量；平均回收率(n＝6)99.0%，RSD＝1.37%。
乳块消片为中国药典1995年版收载的中成药，由橘叶、丹参、皂角刺 、王不留行、川楝子和地龙制成，用于肝气郁结、气滞血瘀、乳腺增生、乳房胀痛等〔 1，2〕。中国药典1995年版未规定含量测定。本文采用HPLC法对方中丹参所含原儿茶醛 进行了测定。
1 仪器与试药
, 百拇医药
1.1 仪器 Waters组合式高效液相色谱仪(包括510泵和4 86型紫外检测器，美国)；XWTD-204记录仪(上海大华记录仪厂)。
1.2 试药 原儿茶醛对照品(中国药品生物制品检定所) ；乳块消片(豫西制药厂)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶5μm，4 .6mm×150mm；流动相；甲醇-0.05mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液(用磷酸调pH 3.0)＝20∶8 0；检测波长：230nm；柱温：室温；流量：1.0ml/min；AUFS：0.1；量程：10mv；低速： 4mm/min。此条件下原儿茶醛与其他组分均能达到基线分离(见图1)，不含丹参的阴性样品无干扰。
图1 乳块消片HPLC图(a-原儿茶醛)
, 百拇医药
2.2 供试品溶液的制备 根据原儿茶醛易溶于醇的性质 ，选用甲醇为溶媒，超声处理。结果(见表1)表明超声处理40min可提取完全。为了保证提取 的可靠性，样品超声处理60min。
表1 超声提取时间比较表 时间(min)
10
20
40
60
80
原儿茶醛峰高(cm)
1.4
1.8
1.9
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1.9
1.9
2.3 对照品溶液的制备 精密称取原儿茶醛适量，用甲 醇溶解，配成0.05mg/ml对照品溶液。
2.4 线性关系考察 精密吸取对照品溶液1，2，4，8，1 0μl，按上述色谱条件测定峰高，以峰高对原儿茶醛量绘制标准曲线，得回归方程：Y＝0.0022+0.0423X，r＝0.9999。
结果表明原儿茶醛在0.05μg～0.5μg范围内具有良好线性关系。重复测定5次，原儿茶醛峰高RSD<1.02%。
2.5 回收率试验 采用加样回收法。取已知含量的乳块消片粉，分别添加适量原儿茶醛对照品，按上述色谱条件进行测定，回收率为99.0%，RSD＝1.37%(n＝6)。
, http://www.100md.com 2.6 样品测定 取本品研粉，取约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液10ml，超声处理60min，放冷，滤过，取续滤液作为供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各5μl，依上述色谱条件测定，计算每g样品中含有原儿茶醛的含量，结果见表2。
表2 乳块消片中原儿茶醛含量测定结果(n＝3) 批 号
样品含量(mg/g)
RSD%
990110
0.528
1.40
990411
0.581
, 百拇医药
1.01
990807
0.592
1.31
3 讨论
以原儿茶醛甲醇溶液紫外扫描表明，原儿茶醛在230nm处有最大吸收。本实验选用230nm为测定波长，可以排除干扰，且灵敏度可达到定量要求。
西安医科大学药学院
参考文献
〔1〕中国药典1995年版.一部.1995：528
〔2〕李立振，丁振根，谭毓治，等.复方丹参片吸收度 考察及其对红细胞膜流动性的影响.中成药，1992，14(5)：8
(收稿：1999-09-18), http://www.100md.com