安培检测—离子色谱法测定尿中碘离子
作者：乔静镕 吴亚西 崔九思
单位：乔静镕 中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所，北京 100050；吴亚西 崔九思 中国预防医学科学院环境卫生监测所，北京 100021
关键词：
安培检测 在防治碘缺乏病中，急需要简单、快速的尿碘测定方法。本文研究了用阴离子交换柱分离，稀硝酸作为淋洗液，以安培检测器测定尿中I-浓度的最佳离子色谱条件，采用标准加入法定量。应用于基体复杂的尿样中I-的测定，获得较好结果。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
DX—500型离子色谱仪，银工作电极安培检测器
, http://www.100md.com
1.2 标准加入法测定尿中I-浓度的操作步骤 为了克服尿样基体的干扰，本文采用标准加入法(内标法)测定尿中I-浓度。具体操作如下：
(1)标准曲线的制备 用KI标准应用液，配制20～150μg/L和200～1500μg/L两个浓度系列，每个系列至少做5个浓度点。按照本文所确定的离子色谱条件，每个浓度点的标准溶液分别准确进样100μl，得I-峰，测量峰面积和保留时间。以标准溶液浓度(μg/L)与相应的峰面积绘制标准曲线和求直线回归方程，用于尿样中I-大致含量的测定，保留时间用于I-峰定性。
(2)尿样中I-大致含量的测定 用加有0.45μm滤膜的1ml平头注射器吸取待测尿样，按照上述制备标准曲线的相同条件，准确进样100μl，得离子色谱图。用保留时间确定I-峰，测量I-峰面积(A1)，查标准曲线得尿样中I-的大致含量。
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(3)加标混合尿样的制备 用KI标准储备液，稀释成一个浓度较高的I-标准应用液。准确量取一定体积的标准应用液，放入管中，加尿样准确稀释至2.5ml，制备成加标混合尿样。为了减少因加标所造成尿样基体的变化，应控制加标体积小于尿样体积的1.0%(如2.5ml尿样中加标0.025ml)。加标的I-浓度(C0)按下式计算：
加标混合尿样中总I-浓度是原尿样中I-浓度(由步骤2测定所得)和加标的I-浓度之和。控制加标量使得加标混合尿样中含I-总浓度仍在两条标准曲线中任何一条的范围之内。所加标准应与尿样中I-含量相近。
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(4)加标混合尿样中I-浓度的测定：同步骤2的条件，准确进加标混合尿样100μl，得离子色谱图，用保留时间定I-峰，测其峰面积(A2)。
(5)尿样中I-浓度的计算
Cx=A1×C0/A2-A1
式中：A1—尿样中I-峰面积；
A2—加标混合尿样中I-峰面积；
C0—混合尿样中，加入标准I-浓度，μg/L；
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Cx—尿样中I-浓度，μg/L
2 结果与讨论
2.1 离子色谱条件的选择
2.1.1 分离柱的选择及再生 IonpacAS12A柱，具有较强的疏水性，航天部五所生产的15cm×10mmYSA45093A柱，应用于基体复杂的尿样中I-的分离，获得与进口的IonpacAS12A柱同样的效果。此柱如有无机物污染可用0.2mol/LNa2CO3淋洗。
2.1.2 淋洗液的选择及其浓度和流量的确定 文献中介绍的安培检测—离子色谱法快速测定牛奶和婴儿食品中I-的测定是用0.04mol/L HNO3作淋洗液[1]，实验证明此淋洗液，也适合尿中I-的测定。由于尿样中I-峰前面的杂质峰较大，改用0.032mol/L HNO3作淋洗液，能使I-峰分离得更好一些。
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淋洗液流量的变化对I-保留时间和分离以及系统压力有明显的影响，本实验选用2.5ml/min较为适宜。
2.1.3 安培检测器电压测定的影响 安培检测器电压在0.00～0.1V时，I-的峰面积随着电压的升高而增加，分离效果逐渐提高。但是电压超过0.15V时，I-的峰面积随着电压的升高而减少，分离效果逐渐下降。因此选用安培检测器的电压0.1V较为合适。如发现安培检测器的灵敏度下降，应及时擦洗电极，电极复原后再使用。
综上所述，用阴离子分离柱和安培检测-离子色谱法分析尿中I-的最佳色谱条件是：YSA4型5093A分离柱和前置柱，安培检测器，电压0.1V，淋洗液为0.032mol/L HNO3流速2.5ml/min。
2.2 样品的采集与保存
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用聚乙烯塑料瓶收取尿样，测比重(要求1.010～1.030)，放在4℃冰箱中可保存一周。不同时间尿样中I-测定结果表明，取中午饭后到睡前的尿更具有代表性。
2.3 方法的特性
最低检出限为10μg/L(按信噪比为3计算)。
线性范围：20～150μg/L和200～150μg/L两个标准浓度系列的线性回归方程分别为
=-14540+6863x (r=0.9996)和=-161587+4640x(r=0.9998)。
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五个浓度点重复测定4次，I-的峰面积的相对标准偏差<5%。
本法测定尿标样的测定值与标准值比较的相对误差<3%。15人份尿样，测定结果为116.0～1079μg/L。
‘九五’攻关课题经费资助
作者简介：乔静镕，女，副主任技师。
参考文献：
1 JekottJJ, Henshall A. Presented at the 1996 pittsburgh conference. Chicago: I Minois. 1996
收稿1998-11-15, http://www.100md.com
单位：乔静镕 中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所，北京 100050；吴亚西 崔九思 中国预防医学科学院环境卫生监测所，北京 100021
关键词：
安培检测 在防治碘缺乏病中，急需要简单、快速的尿碘测定方法。本文研究了用阴离子交换柱分离，稀硝酸作为淋洗液，以安培检测器测定尿中I-浓度的最佳离子色谱条件，采用标准加入法定量。应用于基体复杂的尿样中I-的测定，获得较好结果。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
DX—500型离子色谱仪，银工作电极安培检测器
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1.2 标准加入法测定尿中I-浓度的操作步骤 为了克服尿样基体的干扰，本文采用标准加入法(内标法)测定尿中I-浓度。具体操作如下：
(1)标准曲线的制备 用KI标准应用液，配制20～150μg/L和200～1500μg/L两个浓度系列，每个系列至少做5个浓度点。按照本文所确定的离子色谱条件，每个浓度点的标准溶液分别准确进样100μl，得I-峰，测量峰面积和保留时间。以标准溶液浓度(μg/L)与相应的峰面积绘制标准曲线和求直线回归方程，用于尿样中I-大致含量的测定，保留时间用于I-峰定性。
(2)尿样中I-大致含量的测定 用加有0.45μm滤膜的1ml平头注射器吸取待测尿样，按照上述制备标准曲线的相同条件，准确进样100μl，得离子色谱图。用保留时间确定I-峰，测量I-峰面积(A1)，查标准曲线得尿样中I-的大致含量。
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(3)加标混合尿样的制备 用KI标准储备液，稀释成一个浓度较高的I-标准应用液。准确量取一定体积的标准应用液，放入管中，加尿样准确稀释至2.5ml，制备成加标混合尿样。为了减少因加标所造成尿样基体的变化，应控制加标体积小于尿样体积的1.0%(如2.5ml尿样中加标0.025ml)。加标的I-浓度(C0)按下式计算：
加标混合尿样中总I-浓度是原尿样中I-浓度(由步骤2测定所得)和加标的I-浓度之和。控制加标量使得加标混合尿样中含I-总浓度仍在两条标准曲线中任何一条的范围之内。所加标准应与尿样中I-含量相近。
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(4)加标混合尿样中I-浓度的测定：同步骤2的条件，准确进加标混合尿样100μl，得离子色谱图，用保留时间定I-峰，测其峰面积(A2)。
(5)尿样中I-浓度的计算
Cx=A1×C0/A2-A1
式中：A1—尿样中I-峰面积；
A2—加标混合尿样中I-峰面积；
C0—混合尿样中，加入标准I-浓度，μg/L；
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Cx—尿样中I-浓度，μg/L
2 结果与讨论
2.1 离子色谱条件的选择
2.1.1 分离柱的选择及再生 IonpacAS12A柱，具有较强的疏水性，航天部五所生产的15cm×10mmYSA45093A柱，应用于基体复杂的尿样中I-的分离，获得与进口的IonpacAS12A柱同样的效果。此柱如有无机物污染可用0.2mol/LNa2CO3淋洗。
2.1.2 淋洗液的选择及其浓度和流量的确定 文献中介绍的安培检测—离子色谱法快速测定牛奶和婴儿食品中I-的测定是用0.04mol/L HNO3作淋洗液[1]，实验证明此淋洗液，也适合尿中I-的测定。由于尿样中I-峰前面的杂质峰较大，改用0.032mol/L HNO3作淋洗液，能使I-峰分离得更好一些。
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淋洗液流量的变化对I-保留时间和分离以及系统压力有明显的影响，本实验选用2.5ml/min较为适宜。
2.1.3 安培检测器电压测定的影响 安培检测器电压在0.00～0.1V时，I-的峰面积随着电压的升高而增加，分离效果逐渐提高。但是电压超过0.15V时，I-的峰面积随着电压的升高而减少，分离效果逐渐下降。因此选用安培检测器的电压0.1V较为合适。如发现安培检测器的灵敏度下降，应及时擦洗电极，电极复原后再使用。
综上所述，用阴离子分离柱和安培检测-离子色谱法分析尿中I-的最佳色谱条件是：YSA4型5093A分离柱和前置柱，安培检测器，电压0.1V，淋洗液为0.032mol/L HNO3流速2.5ml/min。
2.2 样品的采集与保存
, http://www.100md.com
用聚乙烯塑料瓶收取尿样，测比重(要求1.010～1.030)，放在4℃冰箱中可保存一周。不同时间尿样中I-测定结果表明，取中午饭后到睡前的尿更具有代表性。
2.3 方法的特性
最低检出限为10μg/L(按信噪比为3计算)。
线性范围：20～150μg/L和200～150μg/L两个标准浓度系列的线性回归方程分别为
=-14540+6863x (r=0.9996)和=-161587+4640x(r=0.9998)。, http://www.100md.com
五个浓度点重复测定4次，I-的峰面积的相对标准偏差<5%。
本法测定尿标样的测定值与标准值比较的相对误差<3%。15人份尿样，测定结果为116.0～1079μg/L。
‘九五’攻关课题经费资助
作者简介：乔静镕，女，副主任技师。
参考文献：
1 JekottJJ, Henshall A. Presented at the 1996 pittsburgh conference. Chicago: I Minois. 1996
收稿1998-11-15, http://www.100md.com