花粉症患者血清可溶性细胞间粘附分子-1检测
作者：王莲芸 张克军 乔中东 王春花 王长生
单位：030001 太原 山西医科大学第一医院耳鼻咽喉科(王莲芸，张克军，王春花，王长生)；山西医科大学分子生物学实验室(乔中东)
关键词：
中华耳鼻烟喉科杂志990426 花粉症是一种常见的季节性变态反应性疾病。我们在过去的研究中发现当空气中飘散蒿草花粉时，花粉症患者蒿草花粉浸液皮肤试验呈阳性反应，其鼻粘膜上皮细胞中表达的细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)呈阳性[1]，那么花粉症患者血清中的可溶性ICAM-1 (sICAM-1)是否也高于正常人？对此我们做了进一步的研究。
1.研究对象：花粉症患者20例，男11例,女9例，年龄15～45岁。发病期为7～10月份，发病时均无哮喘。对照组为健康正常人20例，男10例, 女10例，年龄15～45岁。
, 百拇医药
2.标本采集：实验组和对照组都采用常规空腹静脉取血5～10 ml，室温(20～25℃)下静置60 min；1000 xg离心10 min，将血清移至另一试管中，再次离心，然后将血清移至Eppendorf管中，-70℃冰箱保存备用。
3.研究方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)：①按1∶20浓度稀释待测血清；②在免疫板的微孔中分别加入100 μl anti-ICAM-1-HRP；③再分别加入100 μl标准品、样品稀释液、质控参数液；④盖板后室温下孵育1.5 h；⑤用缓冲液洗板6 遍；⑥分别加底物(四甲基联苯胺)100 μl盖板后，室温下再孵化30 min;⑦加100μl终止液；⑧在酶标仪(Bio-Rad)测定波长450 nm时的吸光值，620 nm作为校正值；⑨制作标准曲线；⑩根据标准曲线将每一测试样品的OD值换算出sICAM-1的含量(ng/ml)。其试剂由英国R＆D Systems 提供。
4.统计学分析: 采用SPSS 6.0软件包对原始实验数据进行正态性检验、方差齐性检验和组间t 检验。
, 百拇医药
结果：在20例实验对象的血清中均被检测到蒿草花粉的特异性IgE抗体，确诊为蒿草花粉过敏所致花粉症。这20例花粉症患者和20例正常人收集血清后，经ELISA法检测发现：各组的sICAM-1原始数据为正态分布，2组的方差齐，t检验结果显示：患者组的sICAM-1水平为(388.48±62.71) ng/ml显著高于正常对照组的(213.42±65.39) ng/ml, P<0.0001(t =-8.64)。说明花粉症患者sICAM-1的表达增加。
讨论：对20例花粉症患者的血清可溶性粘附分子水平分析表明，花粉症患者组的sICAM-1显著高于对照组(P<0.0001)。说明ICAM-1的表达增加与花粉症有着密切的关系。现代医学研究认为变应原与附着在肥大细胞表面特异的IgE结合，发生抗原抗体反应，引起肥大细胞脱颗粒，释放大量的组织胺、慢反应物质等血管活性物质，致局部血管扩张，血流减慢，白细胞沿血管内壁滚动，并且引起细胞粘附分子的表达[2]。
, 百拇医药 细胞粘附分子是一群由多种细胞表达的介导细胞间粘附作用的糖蛋白。它们还相互传递信息，调节细胞功能，与许多疾病的发病密切相关[3]。ICAM-1属于免疫球蛋白超家族中的一个重要成员[4]。许多研究证实：ICAM-1可以诱导嗜酸性粒细胞与血管内皮细胞粘附，而ICAM-1的单克隆抗体可以减少气道炎症中的嗜酸性粒细胞浸润和气道高反应；在气道发生变态反应炎症的4～24小时内，气道上皮组织中的ICAM-1浓度增高。许多作者认为，血清中可溶性粘附分子如sICAM-1可作为变态反应炎症发生的标记物[5]。由此提示，进一步研究抑制ICAM-1的表达对变态反应疾病的治疗有着极其重要的临床意义。
本课题为山西省回国留学人员基金资助项目
参考文献
1 王莲芸,范玮,尹镭,等.飘散蒿属花粉对鼻粘膜上皮细胞间粘附分子表达的影响.中华耳鼻咽喉科杂志,1997,32:174-175.
, 百拇医药
2 Canonica GW,Ciprandi G,Buscaglia S,et al. Adhesion molecules of allergic inflammation: recent insights into their function roles.Allergy,1994,49:135- 141.
3 Bochner BS. Cellular adhesion and itts antagonism. J Allergy Clin Immunol, 1997,100:581-585.
4 Bevilacqua MP.Endothelial-leukocyte adhesion molecules. Annu Rec Immunol, 1993,11:767-804.
5 王莲芸,乔中东.粘附分子在变态反应炎症中的作用.见：鹿道温,主编.鼻炎与哮喘中西医最新诊疗学.北京：中国中医药出版社,1996.405-435.
(收稿：1998-08-26 修回：1999-02-12), http://www.100md.com
单位：030001 太原 山西医科大学第一医院耳鼻咽喉科(王莲芸，张克军，王春花，王长生)；山西医科大学分子生物学实验室(乔中东)
关键词：
中华耳鼻烟喉科杂志990426 花粉症是一种常见的季节性变态反应性疾病。我们在过去的研究中发现当空气中飘散蒿草花粉时，花粉症患者蒿草花粉浸液皮肤试验呈阳性反应，其鼻粘膜上皮细胞中表达的细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)呈阳性[1]，那么花粉症患者血清中的可溶性ICAM-1 (sICAM-1)是否也高于正常人？对此我们做了进一步的研究。
1.研究对象：花粉症患者20例，男11例,女9例，年龄15～45岁。发病期为7～10月份，发病时均无哮喘。对照组为健康正常人20例，男10例, 女10例，年龄15～45岁。
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2.标本采集：实验组和对照组都采用常规空腹静脉取血5～10 ml，室温(20～25℃)下静置60 min；1000 xg离心10 min，将血清移至另一试管中，再次离心，然后将血清移至Eppendorf管中，-70℃冰箱保存备用。
3.研究方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)：①按1∶20浓度稀释待测血清；②在免疫板的微孔中分别加入100 μl anti-ICAM-1-HRP；③再分别加入100 μl标准品、样品稀释液、质控参数液；④盖板后室温下孵育1.5 h；⑤用缓冲液洗板6 遍；⑥分别加底物(四甲基联苯胺)100 μl盖板后，室温下再孵化30 min;⑦加100μl终止液；⑧在酶标仪(Bio-Rad)测定波长450 nm时的吸光值，620 nm作为校正值；⑨制作标准曲线；⑩根据标准曲线将每一测试样品的OD值换算出sICAM-1的含量(ng/ml)。其试剂由英国R＆D Systems 提供。
4.统计学分析: 采用SPSS 6.0软件包对原始实验数据进行正态性检验、方差齐性检验和组间t 检验。
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结果：在20例实验对象的血清中均被检测到蒿草花粉的特异性IgE抗体，确诊为蒿草花粉过敏所致花粉症。这20例花粉症患者和20例正常人收集血清后，经ELISA法检测发现：各组的sICAM-1原始数据为正态分布，2组的方差齐，t检验结果显示：患者组的sICAM-1水平为(388.48±62.71) ng/ml显著高于正常对照组的(213.42±65.39) ng/ml, P<0.0001(t =-8.64)。说明花粉症患者sICAM-1的表达增加。
讨论：对20例花粉症患者的血清可溶性粘附分子水平分析表明，花粉症患者组的sICAM-1显著高于对照组(P<0.0001)。说明ICAM-1的表达增加与花粉症有着密切的关系。现代医学研究认为变应原与附着在肥大细胞表面特异的IgE结合，发生抗原抗体反应，引起肥大细胞脱颗粒，释放大量的组织胺、慢反应物质等血管活性物质，致局部血管扩张，血流减慢，白细胞沿血管内壁滚动，并且引起细胞粘附分子的表达[2]。
, 百拇医药 细胞粘附分子是一群由多种细胞表达的介导细胞间粘附作用的糖蛋白。它们还相互传递信息，调节细胞功能，与许多疾病的发病密切相关[3]。ICAM-1属于免疫球蛋白超家族中的一个重要成员[4]。许多研究证实：ICAM-1可以诱导嗜酸性粒细胞与血管内皮细胞粘附，而ICAM-1的单克隆抗体可以减少气道炎症中的嗜酸性粒细胞浸润和气道高反应；在气道发生变态反应炎症的4～24小时内，气道上皮组织中的ICAM-1浓度增高。许多作者认为，血清中可溶性粘附分子如sICAM-1可作为变态反应炎症发生的标记物[5]。由此提示，进一步研究抑制ICAM-1的表达对变态反应疾病的治疗有着极其重要的临床意义。
本课题为山西省回国留学人员基金资助项目
参考文献
1 王莲芸,范玮,尹镭,等.飘散蒿属花粉对鼻粘膜上皮细胞间粘附分子表达的影响.中华耳鼻咽喉科杂志,1997,32:174-175.
, 百拇医药
2 Canonica GW,Ciprandi G,Buscaglia S,et al. Adhesion molecules of allergic inflammation: recent insights into their function roles.Allergy,1994,49:135- 141.
3 Bochner BS. Cellular adhesion and itts antagonism. J Allergy Clin Immunol, 1997,100:581-585.
4 Bevilacqua MP.Endothelial-leukocyte adhesion molecules. Annu Rec Immunol, 1993,11:767-804.
5 王莲芸,乔中东.粘附分子在变态反应炎症中的作用.见：鹿道温,主编.鼻炎与哮喘中西医最新诊疗学.北京：中国中医药出版社,1996.405-435.
(收稿：1998-08-26 修回：1999-02-12), http://www.100md.com
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