白血病患者血T淋巴细胞亚群和sIL-2R水平的变化
作者：张克琴 何浩明
单位：张克琴(江苏省连云港市第一人民医院 血液科)；何浩明(江苏省连云港市第一人民医院 临床免疫研究室，222002)
关键词：白血病；T-淋巴细胞/生理学；白细胞介素-2受体
蚌埠医学院学报000248〔摘要〕 目的：探讨白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)的变化。方法：分别应用单克隆抗体技术和酶联吸附试验检测31例白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和sIL-2R水平，并以35名正常人作对照。结果：白血病患者外周血CD3+、CD4+细胞数低于正常人，CD8+细胞数高于正常人(P<0.01)，CD4+/CD8+比值下降(P<0.01)。血清sIL-2R活性明显高于正常人(P<0.01)。结论：测定白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和sIL-2R水平对了解患者的免疫状态具有一定的临床价值。
, http://www.100md.com
〔中国图书资料分类法分类号〕 R 733.7；R 331.144 〔文献标识码〕 A
〔文章编号〕 1000-2200(2000)02-0142-02
Changes of serum sIL-2R and T-lymphocyte subgroup in leukemia
ZHANG Ke-qin,HE Hao-ming
(Department of Hapmatology,Lianyungang First People's Hospital,Jiangsu 222002,China)
〔Abstract〕 Objective:To study the changes of serum sIL-2R and T-lymphocyte subgroup in patients with leukemia.Methods:Serum levels of sIL-2R and T-lymphocyte subgroup in 31 leukemia patients and 35 healthy persons as control were determined by Elisa and monoclone of antibody technique.Results:The T-lymphocytes of subgroup CD3+,CD4+ and CD4+/CD8+ in periferal blood were lower than those in normal controls(P<0.01). CD8+ and sIL-2R were higher than those in normal controls(P<0.01).Conclusions:The results shows that the detection of T-lymphocyte subgroup and sIL-2R has important value in understanding the immune state of leukemia patients.
, 百拇医药
〔Key words〕 leukemia;T-lymphocytes/physiology;interleukin-2 receptor
有关白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平的变化，国内报道不多，为了进一步了解白血病患者的免疫状态，于1997～1999年，笔者对该病患者进行外周血T淋巴细胞亚群和sIL-2R水平的测定，并对两者的变化关系进行探讨。
1 资料与方法
1.1 一般资料 (1)白血病组31例：男20例，女11例；年龄8～13岁。均为我院血液科住院患者，全部病例均经临床明确诊断。其中急性粒细胞性白血病12例，急性淋巴细胞性白血病8例，慢性粒细胞性白血病11例。(2)对照组35例：男20例，女15例;年龄9～12岁。均为我院儿童保健科体检合格者，无心、肝、肺、肾等重要脏器疾患，肝肾功能试验正常。
, http://www.100md.com
1.2 方法 (1)外周血T淋巴细胞亚群的检测：按文献〔1〕进行。主要过程是：肝素化静脉血3 ml，常规分离单个核细胞，调正细胞浓度为5×106/ml，并以台酚蓝染色检测细胞成活率>95%以上。取上述悬液100 μl,置3支试管中，分别加入单克隆抗体试剂(单抗试剂购于卫生部武汉生物制品研究所)各100 μl(按其效价进行稀释)，4℃反应45～60 min，用含10%小牛血清的Hanks液离心洗涤3次，再加入酶标兔抗鼠IgG各100 μl，4℃反应1.5 h，网上洗涤，各加底物100 μl，室温反应15 min，制片，在显微镜下计数(每个样本计数200个细胞)着蓝色的细胞为阳性细胞，不着色的为阴性细胞，根据计数结果求出阳性细胞百分率。(2)sIL-2R检测：采用双抗体夹心法检测。试剂盒由白求恩医科大学免疫室供给。空腹采血后，立即分离血清-20℃保存，1周内测定完毕。操作按药盒说明书进行。
1.3 统计学方法 采用t′检验。
, 百拇医药
2 结果
白血病患者外周血CD3+、CD4+细胞数低于正常人，CD8+细胞数高于正常人，CD4+/CD8+比值低于正常人(P<0.01)，而sIL-2R水平显著高于正常人(P<0.01)(见表1)。
表1 白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和血清sIL-2R检测结果(
±s) 组别
n
CD3+
(%)
CD4+
, 百拇医药
(%)
CD8+
(%)
CD4+/CD8+
sIL-2R
(u/ml)
正常人
35
70.9±9.2
46.2±11.3
30.6±6.8
1.53±0.34
, http://www.100md.com
220.6±121.5
患者组
31
60.8±3.9
38.6±?3.1
37.8±4.6
1.03±0.16
460.5±190.2
t′
5.92
3.82
5.09
, http://www.100md.com
7.78
6.02
P
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
对18例缓解期白血病患者进行上述项目检测，结果表明，外周血CD3+、CD4+细胞数虽有所上升，达(63.2±3.1)%、(40.2±3.3)%，但仍低于正常人(t′=4.48和t′=2.91,P<0.01)；CD8+细胞数有所下降，为(35.5±3.3)%，仍高于正常人(t′=3.53，P<0.01)；CD4+/CD8+比值为(1.14±0.21)%，仍较正常人低(t′=5.14，P<0.01)；sIL-2R水平为(371.2±105.2)%，仍较正常人高(t′=4.68，P<0.01)，以上结果表明：白血病患者在缓解期仍未能达到正常人水平。
, http://www.100md.com
3 讨论
T细胞是机体免疫系统中主要调节及效应细胞，可通过抗原识别、处理、递呈引起多种细胞因子同多种细胞之间的网络联系，构成维持免疫功能生理状态的平衡〔2〕。若细胞数不足或亚群的失调可导致广泛的免疫系统功能紊乱，使机体免疫力下降。本文检测结果表明，白血病患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+细胞数下降，其CD4+/CD8+比值也呈下降状态(P<0.01)，而CD8+细胞数呈上升趋势，这与文献的T淋巴细胞亚群，特别是在CD4+/CD8+比值的改变相符〔3〕。
sIL-2R来源于细胞膜上的p55蛋白，sIL-2R是IL-2介导免疫反应的调节拮抗蛋白，血清中sIL-2R水平作为循环中单个核细胞活性化的一个敏感的定量指标，也反映某一疾病的免疫细胞活性状态〔4〕。其表达和调控在IL/IL-2R系统的功能发挥中具有重要的意义。本文检测结果表明，白血病患者血清sIL-2R水平明显升高，确切的机制尚待进一步探讨。笔者初步认为，可能是这类患者由于缺乏抵抗力，引起T细胞、B细胞活化，导致细胞膜上的IL-2R裂解释放之故。
, http://www.100md.com
本文还对18例缓解期白血病患者进行外周血T淋巴细胞亚群和血清sIL-2R水平检测，结果表明，患者各项检测指标虽有所下降或上升，但与正常人比较，差异仍有显著性(P<0.01)，说明对白血病的治疗仍是十分棘手的课题，尚需作进一步研究与探讨。
作者简介：张克琴(1954-)，女，江苏连云港人，副主任医师.
〔参考文献〕
〔1〕 吴裕炘，余春仙，江石湖，等.以OKT单克隆抗体研究胃癌及系统性红斑狼疮(SLE)患者的外周血T淋巴细胞亚群〔J〕.上海免疫学杂志，1985，5(3)∶156.
〔2〕 向近敏，赵利淦，林雨霖，等.IDDM患者T细胞亚群的实验观察〔J〕.免疫学杂志，1992，8(1)∶72.
〔3〕 目力川鹤平.抗リンヘ球フロfu抗体の临床应用〔J〕.日本临床，1983，42(春季增刊号)∶1 158.
〔4〕 富 宁，朱 迅.可溶性白细胞介素-2受体及其生物学意义〔J〕.国外医学.免疫学分册，1989，12(6)∶225.
收稿日期：1999-05-03, http://www.100md.com
单位：张克琴(江苏省连云港市第一人民医院 血液科)；何浩明(江苏省连云港市第一人民医院 临床免疫研究室，222002)
关键词：白血病；T-淋巴细胞/生理学；白细胞介素-2受体
蚌埠医学院学报000248〔摘要〕 目的：探讨白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)的变化。方法：分别应用单克隆抗体技术和酶联吸附试验检测31例白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和sIL-2R水平，并以35名正常人作对照。结果：白血病患者外周血CD3+、CD4+细胞数低于正常人，CD8+细胞数高于正常人(P<0.01)，CD4+/CD8+比值下降(P<0.01)。血清sIL-2R活性明显高于正常人(P<0.01)。结论：测定白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和sIL-2R水平对了解患者的免疫状态具有一定的临床价值。
, http://www.100md.com
〔中国图书资料分类法分类号〕 R 733.7；R 331.144 〔文献标识码〕 A
〔文章编号〕 1000-2200(2000)02-0142-02
Changes of serum sIL-2R and T-lymphocyte subgroup in leukemia
ZHANG Ke-qin,HE Hao-ming
(Department of Hapmatology,Lianyungang First People's Hospital,Jiangsu 222002,China)
〔Abstract〕 Objective:To study the changes of serum sIL-2R and T-lymphocyte subgroup in patients with leukemia.Methods:Serum levels of sIL-2R and T-lymphocyte subgroup in 31 leukemia patients and 35 healthy persons as control were determined by Elisa and monoclone of antibody technique.Results:The T-lymphocytes of subgroup CD3+,CD4+ and CD4+/CD8+ in periferal blood were lower than those in normal controls(P<0.01). CD8+ and sIL-2R were higher than those in normal controls(P<0.01).Conclusions:The results shows that the detection of T-lymphocyte subgroup and sIL-2R has important value in understanding the immune state of leukemia patients.
, 百拇医药
〔Key words〕 leukemia;T-lymphocytes/physiology;interleukin-2 receptor
有关白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平的变化，国内报道不多，为了进一步了解白血病患者的免疫状态，于1997～1999年，笔者对该病患者进行外周血T淋巴细胞亚群和sIL-2R水平的测定，并对两者的变化关系进行探讨。
1 资料与方法
1.1 一般资料 (1)白血病组31例：男20例，女11例；年龄8～13岁。均为我院血液科住院患者，全部病例均经临床明确诊断。其中急性粒细胞性白血病12例，急性淋巴细胞性白血病8例，慢性粒细胞性白血病11例。(2)对照组35例：男20例，女15例;年龄9～12岁。均为我院儿童保健科体检合格者，无心、肝、肺、肾等重要脏器疾患，肝肾功能试验正常。
, http://www.100md.com
1.2 方法 (1)外周血T淋巴细胞亚群的检测：按文献〔1〕进行。主要过程是：肝素化静脉血3 ml，常规分离单个核细胞，调正细胞浓度为5×106/ml，并以台酚蓝染色检测细胞成活率>95%以上。取上述悬液100 μl,置3支试管中，分别加入单克隆抗体试剂(单抗试剂购于卫生部武汉生物制品研究所)各100 μl(按其效价进行稀释)，4℃反应45～60 min，用含10%小牛血清的Hanks液离心洗涤3次，再加入酶标兔抗鼠IgG各100 μl，4℃反应1.5 h，网上洗涤，各加底物100 μl，室温反应15 min，制片，在显微镜下计数(每个样本计数200个细胞)着蓝色的细胞为阳性细胞，不着色的为阴性细胞，根据计数结果求出阳性细胞百分率。(2)sIL-2R检测：采用双抗体夹心法检测。试剂盒由白求恩医科大学免疫室供给。空腹采血后，立即分离血清-20℃保存，1周内测定完毕。操作按药盒说明书进行。
1.3 统计学方法 采用t′检验。
, 百拇医药
2 结果
白血病患者外周血CD3+、CD4+细胞数低于正常人，CD8+细胞数高于正常人，CD4+/CD8+比值低于正常人(P<0.01)，而sIL-2R水平显著高于正常人(P<0.01)(见表1)。
表1 白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和血清sIL-2R检测结果(
±s) 组别n
CD3+
(%)
CD4+
, 百拇医药
(%)
CD8+
(%)
CD4+/CD8+
sIL-2R
(u/ml)
正常人
35
70.9±9.2
46.2±11.3
30.6±6.8
1.53±0.34
, http://www.100md.com
220.6±121.5
患者组
31
60.8±3.9
38.6±?3.1
37.8±4.6
1.03±0.16
460.5±190.2
t′
5.92
3.82
5.09
, http://www.100md.com
7.78
6.02
P
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
对18例缓解期白血病患者进行上述项目检测，结果表明，外周血CD3+、CD4+细胞数虽有所上升，达(63.2±3.1)%、(40.2±3.3)%，但仍低于正常人(t′=4.48和t′=2.91,P<0.01)；CD8+细胞数有所下降，为(35.5±3.3)%，仍高于正常人(t′=3.53，P<0.01)；CD4+/CD8+比值为(1.14±0.21)%，仍较正常人低(t′=5.14，P<0.01)；sIL-2R水平为(371.2±105.2)%，仍较正常人高(t′=4.68，P<0.01)，以上结果表明：白血病患者在缓解期仍未能达到正常人水平。
, http://www.100md.com
3 讨论
T细胞是机体免疫系统中主要调节及效应细胞，可通过抗原识别、处理、递呈引起多种细胞因子同多种细胞之间的网络联系，构成维持免疫功能生理状态的平衡〔2〕。若细胞数不足或亚群的失调可导致广泛的免疫系统功能紊乱，使机体免疫力下降。本文检测结果表明，白血病患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+细胞数下降，其CD4+/CD8+比值也呈下降状态(P<0.01)，而CD8+细胞数呈上升趋势，这与文献的T淋巴细胞亚群，特别是在CD4+/CD8+比值的改变相符〔3〕。
sIL-2R来源于细胞膜上的p55蛋白，sIL-2R是IL-2介导免疫反应的调节拮抗蛋白，血清中sIL-2R水平作为循环中单个核细胞活性化的一个敏感的定量指标，也反映某一疾病的免疫细胞活性状态〔4〕。其表达和调控在IL/IL-2R系统的功能发挥中具有重要的意义。本文检测结果表明，白血病患者血清sIL-2R水平明显升高，确切的机制尚待进一步探讨。笔者初步认为，可能是这类患者由于缺乏抵抗力，引起T细胞、B细胞活化，导致细胞膜上的IL-2R裂解释放之故。
, http://www.100md.com
本文还对18例缓解期白血病患者进行外周血T淋巴细胞亚群和血清sIL-2R水平检测，结果表明，患者各项检测指标虽有所下降或上升，但与正常人比较，差异仍有显著性(P<0.01)，说明对白血病的治疗仍是十分棘手的课题，尚需作进一步研究与探讨。
作者简介：张克琴(1954-)，女，江苏连云港人，副主任医师.
〔参考文献〕
〔1〕 吴裕炘，余春仙，江石湖，等.以OKT单克隆抗体研究胃癌及系统性红斑狼疮(SLE)患者的外周血T淋巴细胞亚群〔J〕.上海免疫学杂志，1985，5(3)∶156.
〔2〕 向近敏，赵利淦，林雨霖，等.IDDM患者T细胞亚群的实验观察〔J〕.免疫学杂志，1992，8(1)∶72.
〔3〕 目力川鹤平.抗リンヘ球フロfu抗体の临床应用〔J〕.日本临床，1983，42(春季增刊号)∶1 158.
〔4〕 富 宁，朱 迅.可溶性白细胞介素-2受体及其生物学意义〔J〕.国外医学.免疫学分册，1989，12(6)∶225.
收稿日期：1999-05-03, http://www.100md.com