别嘌呤醇对急性坏死性胰腺炎并发肺损伤大鼠血液、肺组织中氧自由基代谢的影响
作者：谷俊朝 秦兆寅 王宇
单位：谷俊朝(首都医科大学附属北京友谊医院普外科 邮政编码100050)；秦兆寅(西安医科大学附二院普外科)；王宇(首都医科大学附属北京友谊医院普外科 邮政编码100050)
关键词：
北京医学000525 氧自由基(OFR)广泛参与许多疾病的发病机制，如组织缺血再灌注损伤、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。肺微血管的损伤和通透性增高是ARDS发生的基础。各种原因诱发的ARDS都以早期出现不同程度的肺水肿为特征。我们的实验己证实急性坏死性胰腺炎(ANP)并发肺损伤时大鼠肺组织中丙二醛(MDA)水平升高，推测OFR参与其发病机制。本实验拟通过动物模型了解别嘌呤醇对肺组织内OFR代谢的影响，并观察它对ANP并发肺损伤的保护作用。
材料与方法
, http://www.100md.com
SD大鼠48只，雌、雄不拘，体重250～300g。
ANP并发肺损伤模型的制备方法：术前禁食12小时。1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(0.3ml/100g)，上腹部正中切口入腹，在胰腺被膜下多位点注射5%牛磺胆酸钠0.1ml/100g。
将大鼠随机分为两组：实验组(ANP组，n＝16)；ANP用别嘌呤醇治疗组(n＝32)，本组再随机分为两组，一组用于观察存活情况，另一组分批剖腹采集标本。
别嘌呤醇治疗方法：制备ANP并发肺损伤模型的同时，以颈静脉插管注射2%别嘌呤醇(2mg/100g/h)。
两组于术后4小时、8小时取血，分离血浆，采用TBA微量法测定血浆及肺组织MDA水平。同步取肺称其湿重，计算肺系数(肺湿重/体重×100)及肺干/湿重比值。剩余部分肺和胰腺做病理标本，行光镜和电镜检查。观察各组大鼠的生存情况及死亡率。数据处理采用t检验、χ2检验。
, 百拇医药
结 果
1.MDA水平的变化：治疗组大鼠术后4小时、8小时血浆、肺组织中MDA水平、肺系数和肺湿重/干重比值均明显低于实验组(附表)，两组相比有显著性差异(P均<0.001)。
2.存活时间和死亡率：治疗组大鼠平均存活时间为19.8±2.3小时，实验组为16.5±1.8小时，两组比较有显著性差异(P<0.001)。治疗组大鼠24小时内死亡率为62.5%，实验组为93.7%，前者明显低于后者，具有显著性差异(P<0.001)。
3.病理改变：胰腺：实验组胰腺小叶内、小叶外可见片状坏死、水肿，大量炎细胞浸润；治疗组胰腺呈轻度水肿状态，可见点状出血、坏死，炎细胞浸润明显减少。肺脏：实验组大鼠肺泡和肺间质水肿，局灶性充血性肺不张，肺间质中性粒细胞浸润；治疗组大鼠肺间质、肺泡轻度水肿，少量中性粒细胞浸润，肺充血性肺不张有所减轻。
, 百拇医药
讨 论
肺水肿是ANP时常见的肺部并发症。胰腺炎时肺微血管通透性增加与释放人血的蛋白酶激活和白细胞释放OFR有关。有研究表明OFR抑制剂具有不同程度改善肺水肿的作用。Malik等认为多种因素在胰腺炎部分肺损伤发生中起作用，各自或相互作用引发一系列反应，是导致肺微血管通透性增高等损伤的关键，也为抑制胰腺的分泌、阻断连续反应而防治损伤提供了依据。
附表 两组大鼠MDA、肺系数和肺湿重/干重比值变化比较(
±s) 组别
例数
MDA(nmol/ml)
肺系数
肺湿重/干重
, 百拇医药
血浆
肺组织
4h
8h
4h
8h
4h
8h
4h
8h
实验组
16
4.5±0.2
, 百拇医药 5.1±0.9
0.29±0.04
0.30±0.02
0.60±0.04
0.78±0.05
5.6±0.7
6.8±1.5
治疗组
16
2.7±0.8
3.1±0.6
0.16±0.07
, 百拇医药
0.17±0.05
0.50±0.03
0.51±0.02
4.8±0.9
5.9±0.9
本实验结果显示，对大鼠ANP并发肺损伤进行早期别嘌呤醇治疗，能够显著地降低ANP大鼠血、肺组织中MDA水平；治疗组大鼠胰腺、肺病理改变较实验组明显减轻，肺系数和肺湿重/干重比值也明显下降；治疗组大鼠死亡率降低，存活时间延长。
以上结果表明ANP时氧自由基大量生成，应用抗氧化剂可使氧自由基的生成阻断，脂质过氧化反应受到抑制，产生的过氧化脂减少，说明了抗氧化剂与过氧化脂的生成有明显的关系。早期应用抗氧化剂进行治疗，对防止胰腺细胞的进一步损伤、减轻胰腺炎症程度、缩短病程、预防肺损伤有一定的意义，但抗氧化剂并不能阻断胰腺炎的基本病理改变，故ANP时应用抗氧化剂治疗对防治多器官损伤的作用，尚需进一步证实。
据实验结果得出以下结论：①别嘌呤醇具有减轻大鼠ANP致肺水肿的作用；②别嘌呤醇可能具有直接保护胰腺实质细胞膜的作用；③ANP大鼠血、肺组织中氧化及抗氧化变化的特殊性提示，临床应用抗氧化剂治疗作为一个辅助措施，对ANP并发肺损伤应具有一定的防治作用；④证实了别嘌呤醇具有抗氧化作用；⑤证实了氧自由基参与ANP并发肺损伤发病机制；⑥对ANP进行抗氧化治疗是否必要，提供了一定的理论依据。
收稿：1998-09-18
修回：1999-09-26, http://www.100md.com
单位：谷俊朝(首都医科大学附属北京友谊医院普外科 邮政编码100050)；秦兆寅(西安医科大学附二院普外科)；王宇(首都医科大学附属北京友谊医院普外科 邮政编码100050)
关键词：
北京医学000525 氧自由基(OFR)广泛参与许多疾病的发病机制，如组织缺血再灌注损伤、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。肺微血管的损伤和通透性增高是ARDS发生的基础。各种原因诱发的ARDS都以早期出现不同程度的肺水肿为特征。我们的实验己证实急性坏死性胰腺炎(ANP)并发肺损伤时大鼠肺组织中丙二醛(MDA)水平升高，推测OFR参与其发病机制。本实验拟通过动物模型了解别嘌呤醇对肺组织内OFR代谢的影响，并观察它对ANP并发肺损伤的保护作用。
材料与方法
, http://www.100md.com
SD大鼠48只，雌、雄不拘，体重250～300g。
ANP并发肺损伤模型的制备方法：术前禁食12小时。1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(0.3ml/100g)，上腹部正中切口入腹，在胰腺被膜下多位点注射5%牛磺胆酸钠0.1ml/100g。
将大鼠随机分为两组：实验组(ANP组，n＝16)；ANP用别嘌呤醇治疗组(n＝32)，本组再随机分为两组，一组用于观察存活情况，另一组分批剖腹采集标本。
别嘌呤醇治疗方法：制备ANP并发肺损伤模型的同时，以颈静脉插管注射2%别嘌呤醇(2mg/100g/h)。
两组于术后4小时、8小时取血，分离血浆，采用TBA微量法测定血浆及肺组织MDA水平。同步取肺称其湿重，计算肺系数(肺湿重/体重×100)及肺干/湿重比值。剩余部分肺和胰腺做病理标本，行光镜和电镜检查。观察各组大鼠的生存情况及死亡率。数据处理采用t检验、χ2检验。
, 百拇医药
结 果
1.MDA水平的变化：治疗组大鼠术后4小时、8小时血浆、肺组织中MDA水平、肺系数和肺湿重/干重比值均明显低于实验组(附表)，两组相比有显著性差异(P均<0.001)。
2.存活时间和死亡率：治疗组大鼠平均存活时间为19.8±2.3小时，实验组为16.5±1.8小时，两组比较有显著性差异(P<0.001)。治疗组大鼠24小时内死亡率为62.5%，实验组为93.7%，前者明显低于后者，具有显著性差异(P<0.001)。
3.病理改变：胰腺：实验组胰腺小叶内、小叶外可见片状坏死、水肿，大量炎细胞浸润；治疗组胰腺呈轻度水肿状态，可见点状出血、坏死，炎细胞浸润明显减少。肺脏：实验组大鼠肺泡和肺间质水肿，局灶性充血性肺不张，肺间质中性粒细胞浸润；治疗组大鼠肺间质、肺泡轻度水肿，少量中性粒细胞浸润，肺充血性肺不张有所减轻。
, 百拇医药
讨 论
肺水肿是ANP时常见的肺部并发症。胰腺炎时肺微血管通透性增加与释放人血的蛋白酶激活和白细胞释放OFR有关。有研究表明OFR抑制剂具有不同程度改善肺水肿的作用。Malik等认为多种因素在胰腺炎部分肺损伤发生中起作用，各自或相互作用引发一系列反应，是导致肺微血管通透性增高等损伤的关键，也为抑制胰腺的分泌、阻断连续反应而防治损伤提供了依据。
附表 两组大鼠MDA、肺系数和肺湿重/干重比值变化比较(
±s) 组别例数
MDA(nmol/ml)
肺系数
肺湿重/干重
, 百拇医药
血浆
肺组织
4h
8h
4h
8h
4h
8h
4h
8h
实验组
16
4.5±0.2
, 百拇医药 5.1±0.9
0.29±0.04
0.30±0.02
0.60±0.04
0.78±0.05
5.6±0.7
6.8±1.5
治疗组
16
2.7±0.8
3.1±0.6
0.16±0.07
, 百拇医药
0.17±0.05
0.50±0.03
0.51±0.02
4.8±0.9
5.9±0.9
本实验结果显示，对大鼠ANP并发肺损伤进行早期别嘌呤醇治疗，能够显著地降低ANP大鼠血、肺组织中MDA水平；治疗组大鼠胰腺、肺病理改变较实验组明显减轻，肺系数和肺湿重/干重比值也明显下降；治疗组大鼠死亡率降低，存活时间延长。
以上结果表明ANP时氧自由基大量生成，应用抗氧化剂可使氧自由基的生成阻断，脂质过氧化反应受到抑制，产生的过氧化脂减少，说明了抗氧化剂与过氧化脂的生成有明显的关系。早期应用抗氧化剂进行治疗，对防止胰腺细胞的进一步损伤、减轻胰腺炎症程度、缩短病程、预防肺损伤有一定的意义，但抗氧化剂并不能阻断胰腺炎的基本病理改变，故ANP时应用抗氧化剂治疗对防治多器官损伤的作用，尚需进一步证实。
据实验结果得出以下结论：①别嘌呤醇具有减轻大鼠ANP致肺水肿的作用；②别嘌呤醇可能具有直接保护胰腺实质细胞膜的作用；③ANP大鼠血、肺组织中氧化及抗氧化变化的特殊性提示，临床应用抗氧化剂治疗作为一个辅助措施，对ANP并发肺损伤应具有一定的防治作用；④证实了别嘌呤醇具有抗氧化作用；⑤证实了氧自由基参与ANP并发肺损伤发病机制；⑥对ANP进行抗氧化治疗是否必要，提供了一定的理论依据。
收稿：1998-09-18
修回：1999-09-26, http://www.100md.com