神经生长因子受体在垂体腺瘤中的表达
作者：张作洪 朱炎昌 雷霆
单位：张作洪(同济医科大学附属同济医院神经外科，武汉 430030；现在湖北省荆州市第一人民医院神经外科 434000)；朱炎昌 雷霆(同济医科大学附属同济医院神经外科，武汉 430030)
关键词：垂体肿瘤；腺瘤；受体，神经生长因子；泌乳素；TrKA；gp75；免疫细胞化学
临床与实验病理学杂志000109 摘要 目的：探讨两种神经生长因子(NGF)受体(TrKA和gp75)在各类垂体腺瘤中的表达。方法：采用免疫细胞化学SABC法，检测了44例经病理证实的垂体腺瘤中两种NGF受体的表达情况。结果：TrKA在垂体PRL分泌腺瘤中的过度表达率69.2%，而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率为19.4%，两者比较差异有非常显著性(P<0.005)。gp75在垂体PRL分泌腺瘤中的过度表达率为46.2%，而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率为9.7%，两者比较差异有显著性(P<0.05)。结论：两种NGF受体主要在垂体PRL分泌腺瘤中表达，gp75的表达与否可能与PRL瘤的侵袭性和对多巴胺D2受体激动剂治疗的敏感性有关。
, http://www.100md.com
中图分类号 R736.4 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(2000)01-0028-03
The expression of nerve growth factor receptors in pituitary adenomas
Zhang Zuohong, Zhu Yanchang, Lei Ting
(Dept of Neurosurg, Tongji Hospital, Tongji Medical University, Wuhan 430030)
ABSTRACT Purpose To evaluate the expression of two nerve growth factor (NGF) receptors (TrKA and gp75) in each type of pituitary adenomas. Methods Forty-four cases of pathologically confirmed pituitary adenomas were examined for the two NGF receptors expression with immunocytochemical SABC method. Resultls Overexpression rate of TrKA was 69.2% in pituitary PRL-secreting adenomas and 19.4% in other types of pituitary adenomas. The difference was highly significant (P<0.005). Overexpression rate of gp75 was 46.2% in pituitary PRL-secreting adenomas and 9.7% in others. The difference was significant (P<0.05). Conclusion Two NGF receptors are expressed mainly in pituitary PRL-secreting adenomas, and gp75 expression might be associated with the tumoral aggression and the sensitivity to the treatment of dopamine D2 receptor agonists.
, 百拇医药
KEY WORDS pituitary neoplasms;adenoma; receptors,nerve growth factor;prolactin; TrKA; gp75; immunocytochemistry
近年来，许多学者在研究垂体肿瘤时更加注意精神神经内分泌免疫调节的研究〔1〕，神经生长因子(NGF)就是研究的重要内容之一。NGF是神经营养因子之一，是决定损伤后残存神经元生存的关键性因子。研究表明，NGF与神经、内分泌和免疫系统有广泛的功能联系〔2〕。
垂体泌乳素瘤(简称PRL瘤)是最常见的垂体肿瘤，约占垂体肿瘤的40%～60%〔3〕。国外有文献报道，PRL瘤表达NGF受体(NGFR)，NGF对PRL细胞的生长、发育和分化起着重要的作用〔2，4，5〕。作者收集本院1998年2～11月经病理证实的44例垂体腺瘤石蜡组织块，采用免疫细胞化学技术，检测了两种NGFR(TrKA和gp75)的表达。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 标本 标本取自本院1998年2月至11月经病理证实的44例垂体腺瘤的石蜡组织块。经免疫细胞化学分类，其中PRL瘤9例，分泌PRL的混合性腺瘤4例，其它类型的垂体腺瘤31例。4例分泌PRL的混合性腺瘤中，3例为PRL/生长激素(GH)混合性腺瘤，1例PRL/GH/促肾上腺皮质激素(ACTH)混合性腺瘤。
1.2 免疫细胞化学检测 采用链酶亲合素-生物素-过氧化物酶(SABC)法，即用性SABC试剂盒购自武汉博士德公司。兔抗人TrKA多克隆抗体1∶50(Calbiochem公司)，鼠抗人gp75单克隆抗体1∶20(Neomark公司)，阳性对照片由博士德公司提供，阴性对照不加一抗。
1.3 结果判定 以阳性细胞所占百分比将NGFR的表达分为四个等级：“-”0～25%，“+”25%～50%，“”50%～75%，“”75%～100%。规定以上为过度表达。
, 百拇医药
1.4 统计方法 比较垂体PRL分泌腺瘤和其它类型垂体腺瘤NGFR表达的差异，采用χ2检验。
2 结果
2.1 NGFR在垂体腺瘤细胞中阳性表达情况 TrKA阳性信号为细胞膜和细胞核棕黄色颗粒着色(图1)，而gp75阳性信号为细胞浆内棕黄色颗粒着色(图2)。
2.2 NGFR在不同类型垂体腺瘤细胞中的表达 44例垂体腺瘤NGFR的表达见表1。TrKA在垂体PRL分泌腺瘤中的过度表达率为69.2%，而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率19.4%，两者比较差异有非常显著性(P<0.005)。gp75在垂体PRL分泌腺瘤中的过度表达率为46.2%，而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率为9.7%，两者比较差异有显著性(P<0.05)。
表1 44例垂体腺瘤NGFR的表达 分组
, http://www.100md.com
TrKA*
gp75△
-
+
合计
-
+
合计
, http://www.100md.com
垂体PRL分泌腺瘤
2
2
4
5
13
4
3
6
0
13
其他类型垂体腺瘤
13
12
, 百拇医药
4
2
31
20
8
2
1
31
合 计
15
14
8
7
44
, 百拇医药
24
11
8
1
44
*χ2=10.14，P<0.005；△χ2=5.42，P<0.05
2.3 NGFR在13例垂体PRL分泌腺瘤中的表达 见表2。TrKA的过度表达率(9/13例，69.2%)比gp75的过度表达率(6/13例，46.2%)高。
表2 13例垂体PRL分泌腺瘤NGFR的表达 编号
性别
, 百拇医药
年龄(岁)
免疫细胞化学分类
NGFR
PRL
GH
ACTH
TrKA
gp75
1
女
20
+
-
, 百拇医药
-
-
2
女
25
+
-
-
3
男
54
, http://www.100md.com
+
-
-
+
4
女
21
+
-
-
5
, 百拇医药
女
27
+
-
-
+
+
6
男
48
+
-
-
, 百拇医药
7
女
32
+
-
-
-
-
8
男
16
+
+
, 百拇医药
-
9
女
35
+
+
+
-
-
10
男
34
, http://www.100md.com
+
-
-
11
男
34
+
+
-
12
, http://www.100md.com
女
38
+
+
-
+
+
13
男
14
+
-
-
, 百拇医药
-
3 讨论
NGF在功能上属于神经营养因子家族，除NGF外，该家族还包括脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养素(NT)-3和NT-4/5等。NGF通过其受体调节许多细胞的功能，包括细胞生存和细胞分化〔4〕。
目前已分离出两种NGFR：低亲合力NGFR(gp75)和高亲合力NGFR(TrKA)。gp75除与NGFR结合外，还能和NGF家族的所有成员BDNF、NT-3、NT-4/5结合，因它不是NGF的功能性受体，其功能也就比较复杂；而TrKA是原癌基因trk编码的酪氨酸激酶家族成员，它是NGF的功能性受体，NGF正是通过它起生物学效应的〔6〕。
国外有文献报道，人正常垂体前叶(AP)细胞及垂体腺瘤细胞表达NGFR，NGF对AP细胞的生长、发育和分化均起着重要的作用〔2，4，5，7～10〕但NGFR究竟在何种类型的AP细胞或何种类型的垂体腺瘤细胞表达，争论较多〔2，5，7，8，10〕。
, 百拇医药
本组44例垂体腺瘤中，两种NGFR在垂体PRL分泌腺瘤中的表达明显高于其它类型垂体腺瘤(P<0.05)，这一结果与Missale等的研究结果一致。而在13例垂体PRL分泌腺瘤中，TrKA阳性表达百分数及免疫染色强度明显多于、强于gp75。Missale等〔7，10〕认为，gp75在PRL瘤细胞中表达与否，与肿瘤的侵袭性和对多巴胺D2受体(DRD2)激动剂治疗的敏感性有关。本组4例gp75表达阴性的PRL分泌腺瘤中，1例口服溴隐亭半年，症状无缓解(例1)，1例为复发性垂体腺瘤，术后长期服用溴隐亭(例7)，其它2例未服用溴隐亭。
图1 TrKA阳性细胞，细胞膜和细胞核棕黄色颗粒着色。SABC×250
图2 gp75阳性细胞，细胞浆内棕黄色颗粒着色。SABC×250
, http://www.100md.com
有关两种NGFR的关系，目前主要有三种说法：(1)TrKA不需要gp75就能和NGF结合而发挥生物学效应；(2)NGF与TrKA的结合需要gp75的参与；(3)有gp75的情况下，TrKA与NGF的结合更好〔6〕。在正常的AP细胞中，PRL细胞和生长激素泌乳素(Somatomammotroph)细胞可分泌NGF，并同时表达NGF的两种受体，NGF是通过自分泌机制而发挥生物学效应的〔4，5，10〕。在不表达gp75的PRL瘤中，应用外源性NGF可诱导gp75的表达〔10〕。
NGF与NGFR结合后，可促进PRL细胞的分化，可使肿瘤细胞向成熟而低恶性的PRL样细胞(mammotroph-like cells)分化。同时，NGF还可增加PRL瘤细胞DRD2的表达，从而恢复其对DRD2激动剂治疗的敏感性〔5，7，9，10〕。
, 百拇医药 总之，我们的研究表明，人垂体PRL分泌腺瘤表达NGFR， NGF与NGFR结合后在垂体PRL分泌腺瘤中的作用有望为垂体PRL腺瘤的药物治疗开辟一个新的领域。
基金项目：教育部回国人员启动基金资助项目〔教外司留(1997)436号〕
作者简介：张作洪，男，30岁，硕士，主治医师
朱炎昌，男，62岁，教授，硕士生导师
参考文献
1，吴兴辰，邹 静综述.精神神经内分泌免疫调节的研究进展.国外医学神经病学神经外科学分册，1997；24：286
2，Patterson JC, Childs GV. Nerve growth factor and its receptor in the anterior pituitary. Endocrinology, 1994;135:1689
, 百拇医药
3，张建宁，杨树源，孙银水.垂体泌乳素瘤临床特征变化的研究.中华神经外科杂志，1997；13：73
4，Missale C, Boroni F, Sigala S et al. Nerve growth factor in the anterior pituitary: Localization in mammotroph cells and cose cretion with prolactin by a dopamine-regulated mechanism. Proc Natl Acad Sci USA, 1996;93:4240
5，Missale C, Boroni F, Frassine M et al. Nerve growth factor promotes the differentiation of pituitary mammotroph cells in vitro. Endocrinology, 1995;136:1205
, 百拇医药
6，尹方明综述.p75和TrKA：两种NGF受体系.国外医学神经病学神经外科学分册，1997；24：205
7，Missale C, Boroni F, Losa M et al. Nerve growth factor suppresses the transforming phenotype of human prolactinomas. Proc Natl Acad Sci USA, 1995;90:7961
8，Patterson JC, Childs GV. Nerve growth factor in the anterior pituitary: Regulation of secretion. Endocrinology, 1994;135:1697
9，Missale C, Boroni F, Sigala S et al. Nerve growth factor directs differentiation of the bipotential cell line GH3 into the mammotroph phenotype. Endocrinology, 1994;135:290
10，Missale C, Sigala S, Fiorentini C et al. Nerve growth factor suppresses the tumoral phenotype of human prolactinomas. Horm Res, 1997;47:240
收稿日期：1999-05-05, 百拇医药
单位：张作洪(同济医科大学附属同济医院神经外科，武汉 430030；现在湖北省荆州市第一人民医院神经外科 434000)；朱炎昌 雷霆(同济医科大学附属同济医院神经外科，武汉 430030)
关键词：垂体肿瘤；腺瘤；受体，神经生长因子；泌乳素；TrKA；gp75；免疫细胞化学
临床与实验病理学杂志000109 摘要 目的：探讨两种神经生长因子(NGF)受体(TrKA和gp75)在各类垂体腺瘤中的表达。方法：采用免疫细胞化学SABC法，检测了44例经病理证实的垂体腺瘤中两种NGF受体的表达情况。结果：TrKA在垂体PRL分泌腺瘤中的过度表达率69.2%，而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率为19.4%，两者比较差异有非常显著性(P<0.005)。gp75在垂体PRL分泌腺瘤中的过度表达率为46.2%，而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率为9.7%，两者比较差异有显著性(P<0.05)。结论：两种NGF受体主要在垂体PRL分泌腺瘤中表达，gp75的表达与否可能与PRL瘤的侵袭性和对多巴胺D2受体激动剂治疗的敏感性有关。
, http://www.100md.com
中图分类号 R736.4 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(2000)01-0028-03
The expression of nerve growth factor receptors in pituitary adenomas
Zhang Zuohong, Zhu Yanchang, Lei Ting
(Dept of Neurosurg, Tongji Hospital, Tongji Medical University, Wuhan 430030)
ABSTRACT Purpose To evaluate the expression of two nerve growth factor (NGF) receptors (TrKA and gp75) in each type of pituitary adenomas. Methods Forty-four cases of pathologically confirmed pituitary adenomas were examined for the two NGF receptors expression with immunocytochemical SABC method. Resultls Overexpression rate of TrKA was 69.2% in pituitary PRL-secreting adenomas and 19.4% in other types of pituitary adenomas. The difference was highly significant (P<0.005). Overexpression rate of gp75 was 46.2% in pituitary PRL-secreting adenomas and 9.7% in others. The difference was significant (P<0.05). Conclusion Two NGF receptors are expressed mainly in pituitary PRL-secreting adenomas, and gp75 expression might be associated with the tumoral aggression and the sensitivity to the treatment of dopamine D2 receptor agonists.
, 百拇医药
KEY WORDS pituitary neoplasms;adenoma; receptors,nerve growth factor;prolactin; TrKA; gp75; immunocytochemistry
近年来，许多学者在研究垂体肿瘤时更加注意精神神经内分泌免疫调节的研究〔1〕，神经生长因子(NGF)就是研究的重要内容之一。NGF是神经营养因子之一，是决定损伤后残存神经元生存的关键性因子。研究表明，NGF与神经、内分泌和免疫系统有广泛的功能联系〔2〕。
垂体泌乳素瘤(简称PRL瘤)是最常见的垂体肿瘤，约占垂体肿瘤的40%～60%〔3〕。国外有文献报道，PRL瘤表达NGF受体(NGFR)，NGF对PRL细胞的生长、发育和分化起着重要的作用〔2，4，5〕。作者收集本院1998年2～11月经病理证实的44例垂体腺瘤石蜡组织块，采用免疫细胞化学技术，检测了两种NGFR(TrKA和gp75)的表达。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 标本 标本取自本院1998年2月至11月经病理证实的44例垂体腺瘤的石蜡组织块。经免疫细胞化学分类，其中PRL瘤9例，分泌PRL的混合性腺瘤4例，其它类型的垂体腺瘤31例。4例分泌PRL的混合性腺瘤中，3例为PRL/生长激素(GH)混合性腺瘤，1例PRL/GH/促肾上腺皮质激素(ACTH)混合性腺瘤。
1.2 免疫细胞化学检测 采用链酶亲合素-生物素-过氧化物酶(SABC)法，即用性SABC试剂盒购自武汉博士德公司。兔抗人TrKA多克隆抗体1∶50(Calbiochem公司)，鼠抗人gp75单克隆抗体1∶20(Neomark公司)，阳性对照片由博士德公司提供，阴性对照不加一抗。
1.3 结果判定 以阳性细胞所占百分比将NGFR的表达分为四个等级：“-”0～25%，“+”25%～50%，“”50%～75%，“”75%～100%。规定以上为过度表达。
, 百拇医药
1.4 统计方法 比较垂体PRL分泌腺瘤和其它类型垂体腺瘤NGFR表达的差异，采用χ2检验。
2 结果
2.1 NGFR在垂体腺瘤细胞中阳性表达情况 TrKA阳性信号为细胞膜和细胞核棕黄色颗粒着色(图1)，而gp75阳性信号为细胞浆内棕黄色颗粒着色(图2)。
2.2 NGFR在不同类型垂体腺瘤细胞中的表达 44例垂体腺瘤NGFR的表达见表1。TrKA在垂体PRL分泌腺瘤中的过度表达率为69.2%，而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率19.4%，两者比较差异有非常显著性(P<0.005)。gp75在垂体PRL分泌腺瘤中的过度表达率为46.2%，而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率为9.7%，两者比较差异有显著性(P<0.05)。
表1 44例垂体腺瘤NGFR的表达 分组
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TrKA*
gp75△
-
+
合计
-
+
合计
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垂体PRL分泌腺瘤
2
2
4
5
13
4
3
6
0
13
其他类型垂体腺瘤
13
12
, 百拇医药
4
2
31
20
8
2
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合 计
15
14
8
7
44
, 百拇医药
24
11
8
1
44
*χ2=10.14，P<0.005；△χ2=5.42，P<0.05
2.3 NGFR在13例垂体PRL分泌腺瘤中的表达 见表2。TrKA的过度表达率(9/13例，69.2%)比gp75的过度表达率(6/13例，46.2%)高。
表2 13例垂体PRL分泌腺瘤NGFR的表达 编号
性别
, 百拇医药
年龄(岁)
免疫细胞化学分类
NGFR
PRL
GH
ACTH
TrKA
gp75
1
女
20
+
-
, 百拇医药
-
-
2
女
25
+
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3
男
54
, http://www.100md.com
+
-
-
+
4
女
21
+
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5
, 百拇医药
女
27
+
-
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+
+
6
男
48
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, 百拇医药
7
女
32
+
-
-
-
-
8
男
16
+
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-
9
女
35
+
+
+
-
-
10
男
34
, http://www.100md.com
+
-
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11
男
34
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+
-
12
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女
38
+
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-
+
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13
男
14
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3 讨论
NGF在功能上属于神经营养因子家族，除NGF外，该家族还包括脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养素(NT)-3和NT-4/5等。NGF通过其受体调节许多细胞的功能，包括细胞生存和细胞分化〔4〕。
目前已分离出两种NGFR：低亲合力NGFR(gp75)和高亲合力NGFR(TrKA)。gp75除与NGFR结合外，还能和NGF家族的所有成员BDNF、NT-3、NT-4/5结合，因它不是NGF的功能性受体，其功能也就比较复杂；而TrKA是原癌基因trk编码的酪氨酸激酶家族成员，它是NGF的功能性受体，NGF正是通过它起生物学效应的〔6〕。
国外有文献报道，人正常垂体前叶(AP)细胞及垂体腺瘤细胞表达NGFR，NGF对AP细胞的生长、发育和分化均起着重要的作用〔2，4，5，7～10〕但NGFR究竟在何种类型的AP细胞或何种类型的垂体腺瘤细胞表达，争论较多〔2，5，7，8，10〕。
, 百拇医药
本组44例垂体腺瘤中，两种NGFR在垂体PRL分泌腺瘤中的表达明显高于其它类型垂体腺瘤(P<0.05)，这一结果与Missale等的研究结果一致。而在13例垂体PRL分泌腺瘤中，TrKA阳性表达百分数及免疫染色强度明显多于、强于gp75。Missale等〔7，10〕认为，gp75在PRL瘤细胞中表达与否，与肿瘤的侵袭性和对多巴胺D2受体(DRD2)激动剂治疗的敏感性有关。本组4例gp75表达阴性的PRL分泌腺瘤中，1例口服溴隐亭半年，症状无缓解(例1)，1例为复发性垂体腺瘤，术后长期服用溴隐亭(例7)，其它2例未服用溴隐亭。
图1 TrKA阳性细胞，细胞膜和细胞核棕黄色颗粒着色。SABC×250
图2 gp75阳性细胞，细胞浆内棕黄色颗粒着色。SABC×250
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有关两种NGFR的关系，目前主要有三种说法：(1)TrKA不需要gp75就能和NGF结合而发挥生物学效应；(2)NGF与TrKA的结合需要gp75的参与；(3)有gp75的情况下，TrKA与NGF的结合更好〔6〕。在正常的AP细胞中，PRL细胞和生长激素泌乳素(Somatomammotroph)细胞可分泌NGF，并同时表达NGF的两种受体，NGF是通过自分泌机制而发挥生物学效应的〔4，5，10〕。在不表达gp75的PRL瘤中，应用外源性NGF可诱导gp75的表达〔10〕。
NGF与NGFR结合后，可促进PRL细胞的分化，可使肿瘤细胞向成熟而低恶性的PRL样细胞(mammotroph-like cells)分化。同时，NGF还可增加PRL瘤细胞DRD2的表达，从而恢复其对DRD2激动剂治疗的敏感性〔5，7，9，10〕。
, 百拇医药 总之，我们的研究表明，人垂体PRL分泌腺瘤表达NGFR， NGF与NGFR结合后在垂体PRL分泌腺瘤中的作用有望为垂体PRL腺瘤的药物治疗开辟一个新的领域。
基金项目：教育部回国人员启动基金资助项目〔教外司留(1997)436号〕
作者简介：张作洪，男，30岁，硕士，主治医师
朱炎昌，男，62岁，教授，硕士生导师
参考文献
1，吴兴辰，邹 静综述.精神神经内分泌免疫调节的研究进展.国外医学神经病学神经外科学分册，1997；24：286
2，Patterson JC, Childs GV. Nerve growth factor and its receptor in the anterior pituitary. Endocrinology, 1994;135:1689
, 百拇医药
3，张建宁，杨树源，孙银水.垂体泌乳素瘤临床特征变化的研究.中华神经外科杂志，1997；13：73
4，Missale C, Boroni F, Sigala S et al. Nerve growth factor in the anterior pituitary: Localization in mammotroph cells and cose cretion with prolactin by a dopamine-regulated mechanism. Proc Natl Acad Sci USA, 1996;93:4240
5，Missale C, Boroni F, Frassine M et al. Nerve growth factor promotes the differentiation of pituitary mammotroph cells in vitro. Endocrinology, 1995;136:1205
, 百拇医药
6，尹方明综述.p75和TrKA：两种NGF受体系.国外医学神经病学神经外科学分册，1997；24：205
7，Missale C, Boroni F, Losa M et al. Nerve growth factor suppresses the transforming phenotype of human prolactinomas. Proc Natl Acad Sci USA, 1995;90:7961
8，Patterson JC, Childs GV. Nerve growth factor in the anterior pituitary: Regulation of secretion. Endocrinology, 1994;135:1697
9，Missale C, Boroni F, Sigala S et al. Nerve growth factor directs differentiation of the bipotential cell line GH3 into the mammotroph phenotype. Endocrinology, 1994;135:290
10，Missale C, Sigala S, Fiorentini C et al. Nerve growth factor suppresses the tumoral phenotype of human prolactinomas. Horm Res, 1997;47:240
收稿日期：1999-05-05, 百拇医药
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